TNFR-Fc减轻LPS所致小鼠ALI炎症反应损伤

目的: 评价肿瘤坏死因子受体-Fc融合蛋白(TNFR-Fc)能否有效下调炎症反应而减轻急性肺损伤(ALI)小鼠的肺组织破坏。方法: 小鼠随机分为脂多糖(LPS)组、TNFR-Fc+LPS组和对照组。气管内滴入LPS复制ALI小鼠模型,TNFR-Fc组在滴入LPS前24 h腹膜腔注射TNFR-Fc (0.4 mg/kg),在滴入LPS后2 h收集标本,检测肺湿/干重、肺泡蛋白含量与肺组织病理评分;ELISA法检测血清TNF-α浓度及检测肺泡灌洗液与血清IL-1β、IL-6、IL-10与IFN-γ浓度。结果: TNFR-Fc显著降低血清TNF-α浓度(P＜0.05),轻度降低肺湿/干重比例,显著降低BALF蛋白浓度(P＜0.05),显著降低ALI评分数值(P＜0.05)。TNFR-Fc显著降低致炎症细胞因子IL-6在BALF(P＜0.05)与血清(P＜0.05)中的浓度,轻度提高BALF中IL-10浓度(P＞0.05),但其差异不显著,亦能显著提高血清IL-10浓度(P＜0.05)。IL-1β与IFN-γ水平处理前后变化不显著。结论: TNFR-Fc中和ALI中过度表达的TNF-α,下调以IL-6为代表的炎症反应,减轻ALI的肺组织破坏。     

葛根素减轻LPS诱导的小鼠肾脏炎性反应

目的 探讨葛根素(PUE)是否减轻脂多糖(LPS)诱导的小鼠炎性反应。方法 选择30名健康体检者为对照(control)组,45例严重感染(SI)非肾损伤患者作为N-SI组,30例严重感染致肾损伤患者作SI组,收集患者外周血样本。将50只小鼠随机分为对照(Ctrl)组,LPS组,LPS+PUE(10、25、50 mg/kg·d, ip)组,PUE在给予LPS后1 h应用,24 h后处死小鼠,采集血液。ELISA检测血清Scr、BUN、IL-6和IL-33水平。结果 与对照组和N-SI组相比,SI组患者血清中BUN、Scr、IL-6和IL-33水平显著升高(P<0.05)。小鼠LPS组与对照组相比,血清中肾功能指标BUN和Scr均显著增高(P<0.05);与LPS组相比,PUE可显著降低BUN、Scr、MDA、IL-33和IL-6的表达水平,并使SOD的活性升高(P<0.05)。结论 PUE可减轻LPS诱导的小鼠炎性反应。     

熊果酸减轻LPS诱导的THP-1细胞损伤

目的探讨熊果酸减轻脂多糖诱导的THP-1细胞损伤的作用及其机制。方法以脂多糖诱导的THP-1炎性细胞为模型,MTT法检测不同浓度的熊果酸(0.1、1、5、10、20、40和80μmol/L)对细胞增殖的影响,RT-PCR法检测TLR4、MCP-1和IL-6 mRNA的表达,ELISA法检测MCP-1和IL-6表达,Western blot法检测P65、磷酸化P65蛋白表达,荧光素酶报告系统检测核转录因子κB(NF-κB)活性。结果与对照组比较,LPS作用组能显著增高MCP-1、TLR4、IL-6 mRNA和MCP-1、IL-6、P65、磷酸化P65蛋白的表达并上调NF-κB活性(P0.05);与LPS单独作用组比较,熊果酸(1和5μmol/L)干预组能够显著降低MCP-1、TLR4、IL-6mRNA和MCP-1、IL-6表达水平并下调NF-κB活性(P0.05)。结论熊果酸可能是通过下调NF-κB活化减轻脂多糖诱导的THP-1细胞的损伤。     

酸枣仁黄酮减轻全氟辛烷磺酸诱导小鼠肝脏氧化损伤

目的 通过全氟辛烷磺酸(PFOS)诱导小鼠肝脏氧化损伤模型来研究酸枣仁黄酮(ZSSF)对其的保护作用.方法 将小鼠随机分为空白组、造模组、维生素C组和ZSSF高、中、低剂量组,每组10只.灌胃给药同时用PFOS(10 mg/kg)造模,连续给药30 d.末次给药6 h后,取小鼠眼球血,取肝脏加入9倍体积的0.9％ 氯化...     

丹酚酸B减轻LPS诱导的小鼠急性肺损伤

目的 研究丹酚酸B(SAB)能否减轻脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤.方法 将48只小鼠随机分为对照组、模型组(气管滴注LPS)、SAB低/中/高剂量干预组、莱菔硫烷阳性对照组,检测肺湿/干重比(W/D)值;检测肺泡灌洗液(BALF)中蛋白浓度;HE染色法评价肺组织病理损伤;ELISA检测BALF中TNF-α、IL-1...     

APPL1减轻LPS诱导的心肌细胞损伤的实验研究

目的:探讨APPL1对脂多糖(LPS)诱导的心肌细胞损伤的影响。方法:用LPS处理心肌细胞,RT-qPCR和Western blot检测细胞中APPL1的表达变化。用过表达APPL1重组慢病毒载体转染心肌细胞,经LPS处理后,RT-qPCR和Western blot检测过表达效果。MTT测定心肌细胞活力,流式细胞术测定心肌细胞凋亡变化,Western blot测定心肌细胞中活化的caspase-3蛋白水平,用硫代巴比妥酸法检测心肌细胞中丙二醛(MDA)含量,用2,4-二硝基苯肼显色法检测心肌细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)水平,用黄嘌呤氧化酶法检测心肌细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性,5,5’-二硫代双(2-硝基苯甲酸)比色法测定心肌细胞中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,DCFH-DA法检测心肌细胞中活性氧(ROS)水平。结果:与对照心肌细胞比较,LPS处理后心肌细胞中APPL1的mRNA和蛋白水平均显著降低(P0.05)。与单纯LPS处理的心肌细胞比较,过表达APPL1重组慢病毒载体可以显著提高LPS条件下心肌细胞中APPL1 mRNA和蛋白水平(P0.05)。LPS处理后的心肌细胞活力降低,细胞凋亡率和细胞中活化的caspase-3蛋白水平升高,细胞中MDA水平升高,培养液中LDH水平也升高,细胞SOD活性、GSH-Px活性降低,ROS水平升高,(P0.05)。过表达APPL1后的心肌细胞经LPS诱导后,细胞活力升高,细胞凋亡率及细胞中活化的Caspase-3蛋白水平降低,MDA水平降低,培养液中LDH水平降低,细胞中SOD活性、GSH-Px活性升高,ROS水平降低,(P0.05)。结论:过表达APPL1能够降低LPS诱导的心肌细胞氧化损伤,减少细胞凋亡,具有减轻LPS诱导的心肌细胞损伤的作用。     

芍药苷减轻小鼠LPS性急性肺损伤的作用机制研究

目的: 观察芍药苷(Pae)对LPS诱导的小鼠急性肺损伤的影响及其作用机制。方法: 雄性 BALB/c小鼠随机分为对照组、脂多糖组(LPS)、芍药苷防治组(Pae+LPS)和芍药苷对照组(Pae),予以双蒸水或Pae(20 mg/kg)灌胃,1次/d,连续3 d,于实验第3 d灌胃后1 h,腹腔注射生理盐水或LPS (20 mg/kg)。观察各组小鼠肺组织形态学改变并进行肺损伤评分;用Western blotting检测肺组织髓过氧化物酶(MPO)、胞浆型磷脂酶A₂(cPLA₂)及磷酸化cPLA₂的含量。结果: 小鼠腹腔注射LPS后12 h,肺组织损伤明显,肺泡间隔增厚,大量炎症细胞浸润,可见明显肺出血及肺水肿;肺组织MPO含量、磷酸化cPLA₂水平显著升高。芍药苷防治组与LPS组相比,肺组织损伤明显减轻,炎症细胞浸润减少,肺出血、肺水肿显著减轻;肺MPO含量、磷酸化cPLA₂水平明显降低。芍药苷对照组与正常对照组相比,小鼠肺组织结构,MPO含量及磷酸化cPLA₂水平未见明显差别。结论: 芍药苷通过抑制肺组织中性粒细胞浸润、降低MPO含量和cPLA₂活性,减轻小鼠内毒素性肺损伤。     

白藜芦醇减轻脂多糖诱导的小鼠心脏损伤

目的 研究白藜芦醇(RES)可否减轻脂多糖(LPS)诱导的小鼠心脏损伤。方法 将小鼠随机分为对照组、LPS组(腹腔注射LPS 7.5 mg/kg)、RES低(20 mg/kg)和高剂量(60 mg/kg)干预组。超声检测心功能;心脏组织切片HE及TUNEL染色观察小鼠心脏组织结构及细胞凋亡;Western blot检测凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的表达;微板法检测血清中CK-MB和LDH水平;ELISA法检测血清中促炎细胞因子IL-1β、IL-6及TNF-α水平;用试剂盒检测心脏组织匀浆中SOD活力和MDA含量。结果 与对照组相比,LPS组小鼠心功能下降(P<0.05);组织结构改变(P<0.05);CK-MB、LDH、IL-1β、IL-6及TNF-α释放增加(P<0.05);SOD活性下降、MDA含量增加(P<0.05);同时心肌凋亡细胞数量增多及Bax与Bcl-2比值升高(P<0.05),RES干预可明显逆转这些改变(P<0.05),且呈剂量依赖性。结论 RES可通过抗炎、抗氧化及抗凋亡作用减轻LPS诱导的心脏损伤。     

蝮蛇毒血小板抑制因子减轻LPS诱导的内皮细胞损伤

目的:探讨蝮蛇毒血小板抑制因子(AHV-PI)对体外脂多糖(LPS)诱导的人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)损伤的影响及其作用机制。方法:体外培养HUVECs,运用LPS(1 mg/L)诱导HUVECs炎症损伤模型,实验分为空白对照组、LPS组、AHV-PI组和AHV-PI+LPS组。MTT比色法检测HUVECs的活力,倒置显微镜观察HUVECs的形态变化,筛选出AHV-PI最适浓度为5 mg/L。流式细胞术检测细胞凋亡;免疫组化法观察胞内组织型纤溶酶原激活物(T-PA)以及纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)表达情况;ELISA法检测HUVECs上清液中细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和组织因子(TF)含量;免疫荧光染色检测胞核内NF-κB亚基p65激活转位情况。结果:LPS组细胞明显梭形化,长宽比增大,呈成纤维细胞状,胞浆出现颗粒样物质。AHV-PI浓度低于5 mg/L时对HUVECs的活性和形态没有明显影响,但可减轻LPS引起的HUVECs的活力抑制和形态改变。与对照组比较,LPS组上清液中TF和ICAM-1含量升高,胞内T-PA和PAI-1表达减少;与LPS组相比,AHV-PI+LPS组上清液中TF和ICAM-1的含量显著降低,细胞内T-PA和PAI-1表达增多,细胞核内NF-κB p65表达减少。结论:AHV-PI能减轻HUVECs损伤,其保护机制与抑制细胞因子分泌及NF-κB活化有关。     

黄芩苷减轻小鼠结肠炎损伤的机制研究

目的 探讨黄芩苷对结肠炎损伤小鼠模型的影响和可能机制。方法 30只小鼠随机分为对照组（control）、模型组（DSS）和黄芩苷治疗组（DSS+baicalin）,记录小鼠体重和行为学变化,HE染色观察结肠组织形态学变化,q-PCR方法检测小鼠结肠组织中TNF-α、IL-1β和IL-6 mRNA的水平,q-PCR实验检测小鼠结肠组织中Fascin mRNA的水平,Western blot和免疫组化实验检测小鼠结肠组织中Fascin蛋白的表达。结果 黄芩苷能降低模型组小鼠疾病活动指数,增加小鼠体重,有效缓解DSS造成的结肠组织形态损伤。黄芩苷能降低模型组小鼠结肠组织TNF-α、IL-1β和IL-6的mRNA水平,降低Fascin蛋白与mRNA的表达水平。结论 黄芩苷通过下调Fascin蛋白和炎性因子表达减轻DSS诱导的小鼠结肠炎损伤。     

金丝桃苷抑制肺炎支原体肺炎模型小鼠的损伤

目的:探讨金丝桃苷对肺炎支原体肺炎(MPP)小鼠的保护作用及其调控机制。方法:选取BALB/c小鼠40只,随机分为对照组、模型组、金丝桃苷低剂量(12.5 mg/kg)组和金丝桃苷高剂量(50 mg/kg)组。以肺炎支原体国际标准株(MPFH)滴鼻造模,第2天开始治疗,治疗3 d后进行后续实验。HE染色检测肺组织病理改变;全自动生化分析仪检测血清中C-反应蛋白(CRP)、丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)和心肌型肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平,检测肺组织中活性氧簇(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽(GSH)水平;ELISA和Western blot方法分别检测血清和肺组织中白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、IL-18和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;RT-q PCR和Western blot方法检测NLRP3、ASC和caspase-1的mRNA和蛋白表达。结果:与对照组相比,模型组小鼠的肺组织中出现炎症反应、肺泡间质增宽等病理变化;CRP、ALT、AST、LDH和CK-MB水平显著上调(P0.05);ROS水平显著上升,而SOD和GSH水平显著下降(P0.05);IL-1β、IL-6、IL-18和TNF-α水平显著上调(P0.05);NLRP3、ASC和caspase-1的蛋白表达也显著升高(P0.05)。与模型组相比,金丝桃苷组中的上述症状明显减轻,且高剂量比低剂量组的缓解效果更明显。结论:金丝桃苷能够抑制MPP小鼠的损伤,这可能与其抑制氧化应激和NLRP3炎性体的激活有关。     

芍药苷通过抑制NLRP3炎症小体活化减轻病毒性心肌炎小鼠心肌损伤

目的:探讨芍药苷(PF)对柯萨奇B3病毒(CVB3)诱导的病毒性心肌炎(VMC)小鼠心肌损伤的影响及其可能的作用机制。方法:将60只雄性BALB/c小鼠随机分为空白对照组(blank)、VMC模型组(VMC)、PF低剂量组(PF-L,10 mg/kg)、PF高剂量组(PF-H,40 mg/kg)和高剂量PF联合NLRP3激动剂组(PF-H+MSU,40 mg/kg PF+5 mg/kg MSU),每组12只,采用腹腔注射CVB3病毒溶液建立VMC小鼠模型,次日腹腔注射给药,1次/d,连续7 d。HE染色观察各组小鼠心肌损伤病理变化;TUNEL染色观察心肌组织细胞凋亡;ELISA检测血清中心肌损伤标志物心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌红蛋白(Mb)以及心肌组织中IL-1β、IL-18和TNF-α含量;Western blot检测心肌组织中Cleaved caspase-3、NLRP3、ASC和caspase-1蛋白表达水平。结果:与blank组比较,VMC组小鼠心肌损伤严重,心肌组织细胞凋亡显著增加(P<0.05),血清中cTnⅠ、CK-MB、Mb含量和心肌组织中IL-1β、IL-18、TNF-α含量均显著上升(P<0.05),同时心肌组织中Cleaved caspase-3、NLRP3、ASC和caspase-1蛋白表达显著增加(P<0.05);与VMC组比较,PF-H组小鼠心肌损伤有所改善,心肌组织细胞凋亡水平降低(P<0.05),血清中cTnⅠ、CK-MB、Mb含量和心肌组织中IL-1β、IL-18、TNF-α含量均显著下降(P<0.05),同时心肌组织中Cleaved caspase-3、NLRP3、ASC和caspase-1蛋白表达水平显著降低(P<0.05);而PF-L组与VMC组比较,相关指标差异均无统计学意义(P>0.05);然而,联合NLRP3激动剂MSU干预可显著抑制高剂量PF对VMC模型小鼠的改善作用。结论:PF能有效改善VMC模型小鼠的心肌损伤,其作用机制可能与NLRP3炎症小体通路的活性抑制有关。     

小窝蛋白1脚手架区多肽减轻LPS诱导的小鼠急性肺损伤

目的:探究人工合成的小窝蛋白1(caveolin-1,Cav-1)脚手架区多肽cavtratin对血红素加氧酶1(heme oxygenase-1,HO-1)活性及脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠急性肺损伤的作用。方法:成年雄性BALB/c小鼠随机分为6组,每组8~10只,实验分为对照(control)组、触足肽内化序列(Antennapedia internalization sequence,AP)组、LPS组、LPS+血晶素(hemin)组、LPS+hemin+cavtratin组和LPS+hemin+cavtratin+锌原卟啉(zinc protoporphyrin IX,Zn PP)组。小鼠气管滴注LPS 24 h后,苏木素-伊红染色观察肺组织病理形态变化;检测肺组织湿/干重比、肺泡灌洗液中细胞数和血清中乳酸脱氢酶活性。免疫荧光观察HO-1和Cav-1的结合情况并检测HO-1活性;实时荧光定量PCR检测炎症因子(IL-1β、IL-6、TNF-α、MCP-1和i NOS)的mRNA水平。结果:组织免疫荧光以及HO-1活性检测发现,与LPS组比较,LPS+hemin+cavtratin组HO-1与细胞膜Cav-1的结合减少,HO-1的活性增高(P0.05);与LPS组比较,LPS+hemin+cavtratin组肺组织受损程度明显减轻,肺湿/干重比、肺泡灌洗液细胞数和血清中乳酸脱氢酶活性显著降低(P0.05);与LPS组比较,LPS+hemin+cavtratin组炎症因子的mRNA表达降低(P0.05);HO-1活性抑制剂Zn PP可以消除cavtratin的保护作用。结论:Cavtratin可以通过减少HO-1与细胞膜Cav-1的结合使得HO-1活性增加,进而减轻LPS诱导的小鼠急性肺损伤。     

青蒿素减轻LPS诱导的肠上皮细胞屏障功能损伤的实验研究

目的:探究青蒿素对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的大鼠肠上皮IEC-6细胞屏障功能损伤的影响。方法:体外培养IEC-6细胞,随机分为5组:对照组、LPS(100 mg/L)组和LPS+青蒿素(30、50和100μmol/L)组,MTT法检测各组细胞毒性变化,ELISA检测各组细胞分泌炎性因子TNF-α、IL-1β和IL-6水平的变化,电阻仪检测肠上皮细胞跨上皮电阻(TER),酶标仪检测单层细胞对辣根过氧化物酶(HRP)的通透性,RT-qPCR和Western blot检测各组细胞紧密连接蛋白(ZO-1、claudin-1和occludin)以及TLR4/My D88/NF-κB mRNA和蛋白表达的变化。结果:LPS与青蒿素在本实验浓度范围对IEC-6细胞均无毒性。与对照组相比,LPS处理下,细胞分泌TNF-α、IL-1β和IL-6水平以及TLR4/My D88/NF-κB的mRNA和蛋白表达明显增加,ZO-1、claudin-1和occludin的mRNA和蛋白表达降低。而青蒿素干预下,细胞分泌TNF-α、IL-1β和IL-6水平以及TLR4/My D88/NF-κB mRNA和蛋白表达明显降低,ZO-1、claudin-1和occludin的mRNA和蛋白表达升高(P0.05),均呈现浓度依赖性。结论:青蒿素可能通过抑制TLR4/My D88/NF-κB通路减轻LPS诱导的肠上皮细胞屏障功能损伤。     

姜黄素减轻小鼠深部组织压力性损伤

目的评价姜黄素(Cur)对缺血-再灌注所致小鼠深部组织压力性损伤(DTPI)创面愈合的影响。方法将小鼠随机分为对照组(Con)、模型组(Mod)、姜黄素4和8 mg/kg干预组(Cur 4,Cur 8),每组10只。磁铁压迫法构建深部组织损伤模型,每隔48 h于创面注射姜黄素,拍照观察伤口愈合情况。HE染色观察伤口愈合病理改变,realtime PCR检测肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)、血管内皮生长因子(VEGF-α)、转化生长因子-β(TGF-β)的mRNA表达;Western blot检测VEGF-α、TGF-β、Stat3、p-Stat3蛋白的表达。结果与对照组相比,模型组伤口逐渐恶化,病理学改变明显。与模型组相比,Cur 8组伤口愈合明显加快(P<0.05);Cur 8组炎性细胞浸润减少,新生血管密度增多。Cur 8组TNF-α、IL-6的mRNA表达量均低于模型组,IL-10、VEGF-α和TGF-β表达量均高于模型组(P<0.05);Cur 8组VEGF-α、TGF-β、p-Stat3蛋白表达水平均高于模型组(P<0.05)。结论姜黄素可减轻小鼠缺血-再灌注所致的DTPI,其机制可能与抑制炎性反应及促进血管再生有关。     

马奶减轻硫酸葡聚糖钠诱导的小鼠溃疡性结肠炎炎症

目的 探讨马奶对硫酸葡聚糖钠(DSS)诱导溃疡性结肠炎(UC)小鼠的免疫调节作用。方法 昆明小鼠随机分为空白组(灌胃生理盐水0.8 mL/d)和DSS造模组,造模后分为模型组(生理盐水0.8 mL/d)、柳氮磺吡啶(SASP)处理组[430 mg/(kg·d)]和马奶组(0.8 mL/d),每组16只。灌胃给药10 d后,HE染色观察小鼠结肠炎症情况,进行疾病活动指数(DAI)和结肠黏膜损伤指数(CMDI)评分;ELISA测定小鼠结肠组织中白细胞介素1β(IL-1β)、 IL-6、 IL-10含量;流式细胞术检测外周血CD4⁺和CD8⁺ T淋巴细胞百分比。结果 与空白组相比,模型组小鼠各项指标均反映DSS对成功诱导UC的发生起促进作用;与模型组相比,马奶组能够减轻UC小鼠结肠的缩短,抑制结肠组织炎症和溃疡形成,降低DAI和CMDI指数,显著降低小鼠结肠组织中的IL-1β和IL-6含量,增加IL-10水平,降低CD4⁺/CD8⁺ T细胞比值。结论 马奶通过调节机体免疫抑制DSS诱导UC小鼠的炎症反应。