维生素D3对实验性自身免疫性甲状腺炎Th1/Th2细胞平衡和MCP-1/CCR2信号的影响

目的:探讨维生素D3对实验性自身免疫性甲状腺炎大鼠炎症、辅助性T细胞1/辅助性T细胞2(helper T cell 1/helper T cell 2,Th1/Th2)及单核细胞趋化蛋白1/细胞表面趋化因子受体2(monocyte chemoattractant protein-1/cell surface chemokine receptor 2,MCP-1/CCR2)信号的影响.方法:将Lewis大鼠按随机数字表法分为对照组(n=10)、模型组(n=15)和治疗组(n=15),采用免疫猪甲状腺球蛋白(porcine thyroglobulin,pTG)诱导建立实验性自身免疫性甲状腺炎(experimental autoimmune thyroiditis,EAT)大鼠模型,治疗组按照每只5 mg/kg的剂量腹腔注射1,25-二羟维生素D3[1,25-(OH)2D3],隔天1次,共用4周,其余2组均给予等体积生理盐水.采用苏木素-伊红(hematoxylin-eosin stain,HE)染色观察大鼠甲状腺组织形态学变化;酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbentassay,ELISA)检测血清中促甲状腺激素(thyroid stimulating hormone,TSH)、自身抗体抗甲状腺球蛋白抗体(anti-thyroglobulin antibody,TGAb)、甲状腺过氧化物酶抗体(anti-thyroid peroxidase antibody,TPOAb)及细胞因子干扰素-γ(interferon,IFN-γy)、白细胞介素-12(interleukin-12,IL-12)、白细胞介素-4 (interleukin-4,IL-4)、白细胞介素-10 (inter-leukin-10,IL-10),逐步线性回归分析TSH与自身抗体、细胞因子的关系;免疫组织化学检测甲状腺组织中的NF-κB p65;Western blot检测甲状腺组织中MCP-1/CCR2信号轴.结果:模型组甲状腺滤泡结构破坏、炎性细胞浸润,治疗组甲状腺病理变化明显改善并趋向于对照组.治疗组TSH、TGAb、TPOAb水平与模型组相比均明显降低(t=4.000、2.603、5.279,P=0.000、0.015、0.000),但仍明显高于对照组(t=2.400、2.216、7.392,P=0.025、0.037、0.000).与模型组相比,治疗组IL-4、IL-10水平明显升高(t=3.522、2.432,P=0.001、0.022),IFN-γ、IL-12水平及IFN-γ/IL-4、IL-12/IL-10比值明显降低(t=2.940、4.700、5.416、8.178,P=0.007、0.000、0.000、0.000),均趋向于对照组水平.逐步回归分析结果显示,TSH与TGAb、TPOAb、IFN-γ、IL-12均呈正相关,与IL-4和IL-10呈负相关(r=0.872、0.868、0.731、0.706、-0.557、-0.236,均P＜0.001),其中TGAb、TPOAb和IL-12对TSH的影响最明显.与模型组比较,治疗组大鼠甲状腺组织中的NF-κB p65、MCP-1及CCR2水平均下降,差异具有统计学意义(t=2.432、2.267、5.143,P=0.000、0.031、0.000).结论:维生素D3可能是通过抑制NF-κB通路以下调Th1型细胞因子、上调Th2型细胞因子进而降低Th1/Th2比值,还可能是通过抑制MCP-1/CCR2信号轴,最终减轻EAT大鼠甲状腺炎,改善甲状腺功能,抑制甲状腺抗体生成,保护甲状腺.     

夏枯草干预实验性自身免疫甲状腺炎Th1/Th2失衡的研究

目的 观察夏枯草水提取液(PVAE)对实验性自身免疫甲状腺炎(EAT)大鼠炎症及Th1/Th2细胞的干预效果。 方法 提取PVAE。Lewis大鼠分5组:正常对照(C)组、EAT模型对照(M)组、PVAE预防性治疗(P)组、PVAE低剂量治疗(TL)组和PVAE高剂量治疗(TH)组。试验后取大鼠甲状腺行组织病理学检查,检测大鼠血清促甲状腺激素(TSH),抗甲状腺抗体(TgAb和TPOAb),辅助性T细胞(Th)细胞因子(IFN-γ、IL-4、IL-12和IL-10)水平。 结果 ①各EAT组血浆TSH、TgAb和TPOAb水平均较C组升高,P组TPOAb低于M组(P=0.037)。②EAT大鼠Th1类及Th2类表达上调,PVAE干预Th1类上调较M组低,而Th2类较M组高,Th1/Th2比值低于M组。其中IL-12表达和IL-12/IL-10,P组与M组差异有统计学意义(P<0.05)。TL组IL-12水平也低于M组(P=0.018);IL-4水平TH组高于M组(P=0.012);TH组IFN-γ/IL-4低于M组(P=0.018)。③TPOAb、IL-10和TgAb依次对TSH有显著性影响(R2=0.868,F=191.389,P<0.001)。 结论 PVAE干预可能通过下调EAT大鼠TPOAb、减轻Th1类上调及下调Th1/Th2比值来减轻自身免疫甲状腺炎。      

健脾消瘿方对桥本甲状腺炎模型小鼠Th1、Th17的影响

目的：探讨健脾消瘿方是否通过调控辅助性T细胞（Th）比例改善桥本甲状腺炎（HT）。方法：将40只雌性CBA/J小鼠随机分为5组：正常对照组、模型对照组及健脾消瘿方低、中、高剂量组,每组8只。除正常对照组外,其他小鼠采用皮下注射猪甲状腺球蛋白联合高碘水喂养诱导HT模型。造模结束后,正常对照组与模型对照组小鼠每天给予0.5 mL饮用水灌胃,健脾消瘿方低、中、高剂量组小鼠每天给予健脾消瘿方颗粒剂水溶液（剂量分别为8.632 g/kg、17.264 g/kg、34.528 g/kg）灌胃,连续6周。干预结束后,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测小鼠血清甲状腺过氧化物酶抗体（TPOAb）、甲状腺球蛋白抗体（TGAb）、游离三碘甲状腺原氨酸（FT3）、游离甲状腺素（FT4）、促甲状腺素（TSH）水平;采用流式细胞术检测小鼠外周血Th1、Th2、Th17、调节性T细胞（Treg）比例;采用实时荧光定量PCR检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、γ干扰素（IFN-γ）、白介素-17(IL-17)、T-bet、RORγ-t基因表达;采用Western blot法检测脾脏组织T-bet、RORγ-t蛋白...     

舒芬太尼对直肠癌根治术患者Th1/Th2平衡的影响

目的 探讨舒芬太尼对直肠癌根治术患者辅助T细胞1/辅助T细胞2(Th1/Th2)平衡的影响.方法 选择择期直肠癌根治术病例40例随机分为舒芬太尼组(SF组)和芬太尼组(F组),每组20例.麻醉诱导和麻醉维持设定舒芬太尼和芬太尼血浆靶浓度分别为0.5 ng/mL和5 ng/mL(二者为等效镇痛剂量).在麻醉诱导前(T0)、手术后6 h(T1)、12 h(T2)、24 h(T3)、72 h(T4)抽取患者外周静脉血,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测Th1类细胞因子y干扰素(IFN-y)、白细胞介素2(IL-2)、Th2类细胞因子白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素10(IL-10).结果 SF组细胞因子水平T1、T2、T3与T0相比差异有统计学意义(P＜0.05),IFN-γ、IL-2水平均降低;IL-4、IL-10水平均升高,T4与T0差异无统计学意义(P＞0.05);F组T1、T2、T3、T4与T0相比差异有统计学意义,IFN-γ、IL-2水平降低,IL-4、IL-10水平升高;SF组与F组比较:T0时点差异无统计学意义(P＞0.05),T1、T2、T3、T4时点细胞因子水平差异有统计学意义(P＜0.05),F组IFN-γ、IL-2水平降低更显著,IL-4、IL-10水平升高更显著.结论 对直肠癌根治术患者,舒芬太尼对Th1/Th2平衡的影响相对较小,是目前比较理想的麻醉镇痛药物.     

D-松醇调节Notch1/Hes1信号通路对银屑病皮损大鼠Th1/Th2平衡的影响

目的:探索D-松醇对银屑病皮损大鼠Th1/Th2平衡影响的机制研究。方法:构建咪喹莫特(IMQ)大鼠模型，随机分为对照组、IMQ组、D-松醇低剂量组、D-松醇中剂量组、D-松醇高剂量组和阳性对照组，每组10只。造模成功后大鼠给与D-松醇低、中、高剂量组(50mg/kg、100mg/kg、150mg/kg)和阳性对照组(1mg/kg,甲氨蝶呤)灌胃治疗，对照组和IMQ组给予相同剂量的生理盐水，每天一次，连续7d。在给药第8天对各组大鼠银屑病皮损症状和指数(MPASI)评价；HE染色观察银屑病皮损病理变化；ELISA检测血清中干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-4(IL-4)、白介素-10(IL-10)水平；以流式细胞术检测辅助性T细胞1(Th1)/辅助性T细胞2(Th2)比值；Western blot检测T盒子转录因子(T-bet)、GATA结合蛋白3(GATA-3)、缺刻基因1(Notch1)、发状分裂相关增强子1(Hes1)蛋白表达。结果:与对照组比较，IMQ组大鼠皮肤出现银屑病样病变如红斑、过度角质化、炎性细胞浸润等，IFN-γ、TNF-α、Th1细胞...     

Th1/Th2细胞因子对心脏移植大鼠NPC输注诱导免疫耐受的作用

目的探讨大鼠血清中Th1/Th2细胞因子表达与供肝非实质细胞(NPC)输注诱导心脏移植免疫耐受的关系。方法建立大鼠心脏移植模型,将40只大鼠随机分成排斥反应组、免疫耐受组,每组20只。观察移植心脏存活时间,并检测受者血清中Th1/Th2细胞因子白细胞介素2(IL-2)、干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素10(IL-10)的表达水平。结果免疫耐受组供心存活时间为(30.83±2.55)d,排斥反应组为(8.15±2.08)d,差异有显著性(t=24.46,P<0.01)。术后7、14 d排斥反应组血清Th1细胞因子IL-2、IFN-γ水平均高于免疫耐受组,Th2细胞因子IL-4、IL-10表达水平均低于免疫耐受组,术后7 d血清IL-6表达水平显著高于免疫耐受组(t=4.50~16.20,P<0.01)。结论免疫耐受的形成与Th1/Th2细胞因子相互作用有关。     

黄连阿胶汤对失眠大鼠血清Th1/Th2平衡的影响

目的观察黄连阿胶汤对失眠模型大鼠Th1/Th2平衡的影响。方法将36只SD大鼠随机分为3组,PCPA法复制失眠大鼠模型,ELISA法检测大鼠血清IFN-γ、IL-1β、IL-4、IL-10及IFN-γ/IL-4的水平。结果模型组大鼠IFN-γ、IL-1β的水平明显下降（P〈0.01）,IL-4、IL-10的表达则明显升高（P〈0.01）,IFN-γ/IL-4比值降低（P〈0.01）;黄连阿胶汤组IFN-γ、IL-1β的表达有不同程度的升高（P〈0.05,P〈0.01）,IL-4、IL-10的表达降低（P〈0.05）,IFN-γ/IL-4比值升高（P〈0.01）。结论黄连阿胶汤能提高失眠大鼠Th1细胞因子的表达,降低Th2细胞因子的表达,促进Th1/Th2平衡向Th1方向偏移,是其治疗失眠的可能机制之一。     

儿童斑秃Th1/Th2型细胞因子关系的临床研究

目的:探讨Th1/Th2细胞因子平衡失调在斑秃发病中的作用,以及Th1型细胞功能与斑秃发病的关系.方法:对45例斑秃患儿按其严重程度分为局限性斑秃(Localizef aiopecia areata patients,LAA)活动期组35例,全秃(Alopecia totalis patients,AT)及普秃(Alopecia universalis patients,AU)为一组10例,并以25例健康儿童为正常对照组作为研究对象.用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测在卡介苗多糖核酸(BCG-PSN)治疗前后3个月血清中IFN-γ、IL-12及IL-4、IL-10水平.结果:①斑秃患儿存在Th1/Th2细胞因子平衡紊乱,表现为血清中IFN-γ均明显高于正常组儿童,且AT/AU组明显高于LAA组;IL-12水平在LAA组与正常组儿童无显著差别,但AT/AU组明显高于正常对照组;而IL-4、IL-10水平在LAA组及AT/AU组与正常对照组相比均无显著性差异.②BCG-PSN治疗后可使斑秃患儿血清中IFN-γ水平较治疗前明显下降,同时IL-12水平在LAA组较治疗前也明显下降,但AT/AU组治疗前后无显著差别.而IL-4、IL-10水平治疗前后均无显著性差异.③血清中IFN-γ与IL-12水平成显著正相关.结论:①斑秃的发病与Th1/Th2细胞因子平衡失调有关,表现为Th1型细胞反应亢进,其中可能主要与IFN-γ、IL-12水平有关.②血清IFN-γ、IL-12水平高低可以作为提示斑秃病情严重性的指标.     

支原体肺炎伴喘息儿童肺功能、FeNO水平及Th1/Th2免疫平衡状态的变化

目的 分析支原体肺炎伴喘息儿童肺功能、呼出气一氧化氮(FeNO)水平以及Th1细胞/辅助性Th2细胞(Th1/Th2)免疫平衡状态变化。方法 选取2018年11月至2019年11月期间上海市普陀区人民医院支原体肺炎患儿60例作为观察组,并根据患儿的临床症状分为喘息组32例和非喘息组28例,选择同期于上海市普陀区人民医院体检健康的儿童30例作为对照组,比较三组儿童第一秒最大呼气容积(FEV1%)、FEV1与用力肺活量比值(FEV1/FVC)、呼气峰值流速(PEF%)、FeNO、IFN-γ、IL-4、IFN-γ/IL-4的指标水平,并采用Pearson相关分析法分析FeNO、Th1细胞因子干扰素-γ(IFN-γ)、Th2细胞因子白细胞介素-4 (IL-4)、IFN-γ/IL-4水平与FEV1、FEV1/FVC、PEF的相关性。结果 喘息组患儿FEV1、FEV1/FVC、PEF水平明显低于非喘息组和对照组,非喘息组患儿FEV1、FEV1/FVC、PEF水平明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);喘息组患儿FeNO、IFN-γ、IL-4水平明显高于非喘息组和对照组,非喘息组患...     

急性化脓性扁桃体炎证候层次与Th1/Th2漂移相关性研究

目的研究急性化脓性扁桃体炎患者不同证候层次外周血Th1/Th2漂移变化。方法通过流式细胞检测技术,对急性化脓性扁桃体炎患者卫分证、气分证、营分证和正常人外周血Th1/Th2细胞进行检测,采用ELISA法测定血清细胞因子IL-4和IFN-γ水平,并比较IFN-γ/IL-4比值。结果与正常对照组比较,急性化脓性扁桃体炎卫分证组Th1、IFN-γ、Th1/Th2、IFN-γ/IL-4比值显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);气分证组Th1、Th2、IFN-γ、IL-4明显升高,差异有统计学意义(P<0.05~0.01);营分证组Th1、Th2、IFN-γ、IL-4继续明显升高,Th1/Th2比值却明显降低,差异有统计学意义(P<0.05~0.01)。与卫分证组比较,气分证组Th1、Th2、IFN-γ、IL-4显著升高,Th1/Th2、IFN-γ/IL-4比值明显降低,差异有统计学意义(P<0.05~0.01);营分证组Th2、IL-4继续明显升高,Th1/Th2、IFN-γ/IL-4比值明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。与气分证组比较,营分证组Th1、IFN-γ水平、Th1/Th2、IFN-γ/IL-4比值显著降低,Th2、IL-4显著升高,差异有统计学意义(P<0.05~0.01)。结论急性化脓性扁桃体炎卫分证、气分证、营分证证候层次变化与Th1/Th2漂移存在相关性。     

地屈孕酮对先兆流产患者Th1/Th2型细胞因子平衡的影响

目的探讨孕激素地屈孕酮对先兆流产患者Th1/Th2型细胞因子平衡的影响,分析以免疫调节治疗先兆流产的机制。方法采用酶联免疫吸附方法检测42例正常妊娠妇女和60例先兆流产妇女使用地屈孕酮治疗前后的血清中Th1型细胞因子（IL-2和TNF-α）及Th2型细胞因子（IL-4和IL-10）的表达水平。结果先兆流产组治疗后血清中IL-2和TNF-α的表达水平与治疗前相比明显降低（P值均〈0.05）,与正常妊娠组相比差异无统计学意义（P值均〉0.05）;而先兆流产组血清中IL-4和IL-10的表达水平在治疗前后差异无统计学意义（P值均〉0.05）,治疗后略有上升,达到和正常妊娠组相当的水平（P值均〉0.05）。结论孕激素治疗先兆流产的机制可能在于促进Th2型细胞因子的分泌,纠正Th1/Th2型细胞因子的病理偏移,使其向着正常妊娠时的平衡移动,即由Th1向Th2的移动。     

T-bet重组腺病毒调节哮喘小鼠辅助性T细胞1型/2型免疫平衡

目的研究静脉注射T-bet重组腺病毒(AdT-bet)对小鼠哮喘模型过敏性气道炎症及辅助性T细胞1型/2型(Th1/Th2)免疫失衡的影响。方法随机将36只C57BL/6小鼠分为AdT-bet治疗(A)组、模型对照(B)组、正常对照(C)组。以卵蛋白、氢氧化铝免疫建立哮喘模型,A组激发前尾静脉注射1×10~8 pfu/100μL的AdT-bet,各组激发后进行肺泡灌洗分析细胞组分,分离肺T淋巴细胞测定细胞因子分泌水平,以流式细胞仪检测CD3~ 、CD4~ T细胞比例及表达γ-干扰素(IFN-γ)和白细胞介素(IL)-4、IL-5的比例,比较各组肺组织学改变。结果A组与B组相比:①明显抑制抗原激发后气道内嗜酸性粒细胞的浸润(0.004±0.003比0.221±0.067,P<0.01);②明显抑制肺T淋巴细胞产生IL-4[(22±12)pg/mL比(170±28)pg/mL]、IL-5[(16±13)pg/mL比(330±30)pg/mL],增加了IFN-γ[(2100±360)pg/mL比(60±50)pg/mL]的产生,差异均有统计学意义(P值均<0.01);③肺T淋巴细胞CD4~ IFN-γ%及IFN-γ~ /IL-4~ 明显升高(P值均<0.01),而CD4~ IL-4~ %明显下降(P<0.01);④明显抑制哮喘鼠气道内及肺泡内的过敏性炎症反应。结论激发前静脉应用AdT-bet对哮喘小鼠过敏性气道炎症有明显的防治作用,其机制可能与表达的T-bet上调Th1/Th2比值,从而调整了免疫平衡有关。     

Th1/Th2细胞因子在丙型肝炎慢性化中的作用

目的探讨Th1/Th2细胞因子在丙型肝炎慢性化中的作用。方法用ELISA法检测15例慢性丙型肝炎(简称慢丙肝)、10例丙肝后肝硬化(简称肝硬化)、6例丙肝相关性肝癌患者和18例健康人群血清IL-10、IL-12、干扰素γ(IFN-γ)水平,放射免疫分析法检测IL-4水平,另外检测血清谷丙转氨酶(ALT)以及总胆红素(TBIL)水平。结果各组患者IL-4、IL-10水平明显高于正常对照组,IL-12、IFN-γ水平明显低于对照组;3组患者间比较,IL-4水平没有明显差别,IL-10水平随着病情的发展逐渐升高(肝癌组>肝硬化组>慢丙肝组),IL-12、IFN-γ水平在肝癌组明显低于慢丙肝组和肝硬化组。结论Th1/Th2失衡可以引起丙型肝炎慢性化,并与肝细胞性肝癌的发生密切相关。     

高糖状态下冠心病患者外周血中辅助性T细胞亚群失衡促进血管内皮细胞损伤

目的 观察冠心病(coronary heart disease,CHD)患者不同血糖状态下外周血中1型辅助性T细胞(type 1 T helper cells,Th1)/2型辅助性T细胞(type 2 T helper cells,Th2)的变化,探讨辅助性T细胞在不同血糖状态下的变化对人脐静脉内皮细胞损伤的作用.方法...     

气道嗜酸性粒细胞呈递抗原对Th1/Th2细胞分化的影响

目的 探讨嗜酸粒细胞(EOS)呈递抗原在体内和体外对Th1／Th2细胞分化的影响。方法 以鸡卵清蛋白抗原致敏和雾化吸入刺激BALB／c小鼠以诱发EOS在气道聚集后将其分离纯化。将曾在气道接触抗原的EOS和致敏CD4^ T细胞在体外共同培养,在部分实验中加入抗CD80或／和CD86单克隆抗体;同时,将EOS注入致敏小鼠气道,部分小鼠还接受抗CD80或／和CD86单克隆抗体静脉注射,然后在预定的时间收集气管旁淋巴结细胞进行培养。应用ELISA方法测定培养上清液中白细胞介素-4(IL-4)、IL-5、IL-13以及γ-干扰素(IFN-γ)的含量。结果 在和EOS体外共同培养的条件下,CD4^ 细胞产生较大量的IL-4、IL-5、IL-13等Th2类细胞因子,而产生的Th1类细胞因子IFN-γ的量相当低。抗CD80或／和抗CD86单抗可以明显地抑制Th2类细胞因子的产生。在体内实验中,接受EOS气管注入的小鼠引流淋巴结细胞主要被激发产生IL-4、IL-5和IL-13。在体外较短时间的培养过程中加入外原性OVA抗原后所产生的Th2类细胞因子的量更高。和体外实验结果相类似,抗CD80或／和抗CD86单抗同样可以明显地抑制EOS在体内的抗原呈递过程。结论 EOS无论在体内还是体外均能摄取和处理抗原,然后激发Th2反应.提示EOS不仅作为终末效应细胞,还可以通过强化Th2细胞的活性在变应性炎症的发生发展过程中具有放大作用。     

地塞米松体外下调Eomes表达抑制1型辅助性T细胞功能

本文使用地塞米松处理健康人外周血单个核细胞(PBMCs)72 h后,探究其对CD4⁺T细胞及其亚群的频数、增殖、凋亡比例;功能性细胞因子及关键转录因子表达的影响。结果显示,地塞米松组CD4⁺T、2型辅助性T细胞(Th2)、Th17细胞比例增加(P<0.01,P<0.05,P<0.01),Th1细胞比例降低(P<0.01)。Th1细胞上γ-干扰素(IFN-γ)、颗粒酶B(GzmB)、脱中胚蛋白(Eomes)比例、Eomes与T盒转录因子(T-bet)比值均降低(均P<0.01),晚期凋亡细胞比例增加(P<0.05)。提示地塞米松体外处理PBMCs促进Th1细胞凋亡,改变辅助性T细胞亚群的分布,并通过抑制Th1细胞转录因子Eomes的表达进而抑制其功能。     

人Tfh细胞体外诱导分化条件的研究

为深入研究滤泡辅助性T细胞(Tfh)的分化调控机制,比较并建立了人Tfh细胞体外诱导分化的模型:分别采用外周血淋巴细胞直接分离以及磁珠分选后的细胞诱导分化,比较不同来源Naïve T细胞的分化结果,同时探究了TCR刺激信号anti-hCD3e的固相包被与可溶性刺激对分化效率的影响,并考察极化因子IL-12不同浓度诱导Tfh细胞分化效果,利用流式细胞术检测Tfh分化效率(CD4⁺CXCR5⁺ICOS⁺PD-1⁺),结合ELISA法检测Tfh标志细胞因子IL-21的表达水平,最终确定了5 μg/mL anti-hCD3e抗体预包被4 ℃过夜,磁珠分选后的T细胞在IL-12终浓度为1 ng/mL时与其他极化因子诱导分化6 d后,分化水平可达20.4%,初步建立了人Tfh细胞体外诱导分化最佳条件,为探讨人Tfh细胞分化机制及相关的靶向Tfh的分子药效、毒性与细胞水平的代谢实验提供了有效的检测平台。     

乙型病毒性肝炎患者外周血T辅助细胞1，2型细胞因子含量的测定及临床意义

目的：探讨Th1,Th2细胞因子在乙型肝炎发病中的作用。方法：采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测10例急性乙肝患者,35例慢性乙肝患者及12例正常对照者外周血单个核细胞（PBMC）在植物凝血素（PHA）和脂多糖（LPS）刺激下,产生白细胞介素－10（IL－10）,γ-干扰素（IFN－γ）及白细胞介素－12（IL－12）的水平。结果：（1）所有患者在PBMC培养上清液中,3种细胞因子的水平均显著高于正常对照（P均＜0．05）,与慢性乙肝组相比,急性乙肝组IL－10较低（P＜0．01）,而IFN－γ,IL－12较高（P＜0．05）,慢性乙肝轻,中,重度3组间呈现重度＞中度＞轻度,但是差异无显著性（P均＞0．05）,（2）IL－12,IFN－γ水平与血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）及总胆红素（TBIL）呈正相关（r=0.6,0.7,p均＜0．01,r=0.6,0.6,P均＜0．05）;而与病毒含量呈负相关（r=-0.75,-0.73,P均＜0．05）,IL－10与ALT,TBIL无相关性（r=0.03,0.05,P均＞0．05）,（3）Th2/Th1比值,与正常相比,慢性患者较高,急性患者较低,差异均有显著性（P＜9．0．05）;急性患者明显低于慢性患者（P＜0．05）,慢性轻度组高于慢性中,重度组（P＜0．05）,而后二组间无明显差别（P＞0．1）。结论。Th2细胞因子与HBV感染的慢性化有关,当Th1型细胞因子占优势时,则倾向于发生急性自限性乙型肝炎,Th1细胞因子与肝组织的炎症活动相关。并且有利于病毒清除。     

孟鲁司特对支气管哮喘大鼠辅助性T细胞17/调节性T细胞平衡的影响及意义

目的观察哮喘大鼠辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡的变化,探讨孟鲁司特对Th17/Treg平衡的干预效应及意义。方法 40只健康雄性Sprauge-Dawley大鼠随机分为对照组、哮喘组、孟鲁司特组及地塞米松组,每组10只。哮喘组、孟鲁司特组及地塞米松组大鼠于第1天腹腔注射鸡卵清蛋白(OVA)和Al(OH)3混合液致敏,第8天重复致敏1次,自第15天开始给予OVA生理盐水溶液雾化激发,每日1次,每次30 min,持续8周,建立哮喘大鼠模型;孟鲁司特组及地塞米松组大鼠在每次激发前分别给予孟鲁司特钠灌胃、地塞米松腹腔注射;对照组大鼠腹腔注射及雾化吸入均使用Al(OH)3生理盐水混悬液替代。8周后收集支气管肺泡灌洗液(BALF)进行细胞分类计数;流式细胞术检测血液中Th17及Treg占CD4+细胞比例;酶联免疫吸附试验检测血浆中白细胞介素(IL)-17及IL-10水平;苏木精-伊红染色评价肺组织病理学改变并计算呼吸道形态学参数。结果与对照组比较,哮喘组、孟鲁司特组、地塞米松组大鼠的BALF细胞总数、中性粒细胞(PMN)总数及比例、嗜酸性粒细胞(EOS)比例、淋巴细胞(Ly)比例及血Th17占CD4+淋巴细胞比例、IL-17水平、呼吸道总管壁厚度、平滑肌厚度均明显增高(P<0.01),BALF中单核细胞(M)比例、血Treg占CD4+淋巴细胞比率及IL-10水平均明显降低(P<0.01)。与哮喘组比较,孟鲁司特组及地塞米松组大鼠的BALF细胞总数、PMN总数及比例、EOS比例、Ly比例及血Th17占CD4+淋巴细胞比例、IL-17水平、呼吸道总管壁厚度、平滑肌厚度均明显降低(P<0.01),BALF中M比例、血Treg占CD4+淋巴细胞比率及IL-10水平均明显增高(P<0.01)。孟鲁司特组与地塞米松组大鼠血Th17及Treg占CD4+淋巴细胞比例、IL-17及IL-10水平、BALF细胞总数及分类计数、呼吸道形态学参数比较差异均无统计学意义(P>0.05)。Th17比例、IL-17水平与PMN总数、呼吸道平滑肌厚度呈正相关(P<0.01);Treg比例、IL-10水平与PMN总数、呼吸道平滑肌厚度呈负相关(P<0.01)。结论哮喘大鼠存在Th17/Treg失衡,孟鲁司特对该平衡起良性调节作用,并可能藉此进一步减轻呼吸道炎症、抑制呼吸道重塑。