葫芦素E通过抑制MAPKs/NF-κB通路减轻哮喘小鼠气道炎症

目的:探讨葫芦素E对哮喘小鼠气道炎症及MAPKs和NF-κB信号通路的影响。方法:将40只健康小鼠随机分成对照组、模型组、葫芦素E低剂量组、葫芦素E高剂量组和地塞米松组。用卵清蛋白致敏法制备哮喘模型,观察各组支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎症细胞分类计数、肺组织炎症细胞浸润以及BALF中白细胞介素4(IL-4)、IL-5、IL-13及干扰素γ(IFN-γ)含量的变化;测定肺组织中磷酸化JNK(p-JNK)、磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)、磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)和磷酸化NF-κB p65(p-p65)的含量。结果:与正常组比,模型组BALF中炎症细胞数量明显增加,并且MAPKs和NF-κB信号通路相关蛋白活性显著增强。我们发现高剂量葫芦素E可减轻哮喘小鼠气道炎症反应,并明显抑制MAPKs和NF-κB信号通路相关蛋白活性。病理组织学结果显示,模型组小鼠肺组织内有杯状细胞及支气管黏膜上皮细胞增生,肺泡内有炎症细胞浸润,管腔狭窄;各剂量葫芦素E处理组病理改变均较模型组显著减轻。结论:葫芦素E可以减轻哮喘小鼠气道炎症反应,其机制可能与抑制MAPKs和NF-κB信号...     

红景天苷通过Nrf-2/HO-1信号通路促进脊髓损伤大鼠神经修复

目的:研究红景天苷(Sal)对大鼠脊髓损伤(SCI)的修复作用及分子机制.方法:36只成年雄性SD大鼠分为3组:分别是假手术组(Sham)、脊髓损伤组(SCI)和红景天苷治疗组(SCI+Sal),利用撞击法制备大鼠SCI模型,SCI+Sal组大鼠通过腹腔注射红景天苷治疗7 d,利用BBB评分检测各组大鼠的脊髓功能,利用...     

柚皮素通过调控AMPK/Nrf2/HO-1信号通路减轻糖尿病小鼠心肌损伤

目的:探讨柚皮素(naringenin,NAR)对糖尿病小鼠心肌的保护作用及对腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine monophosphate-activated protein kinase,AMPK)/核因子E2相关因子2(nuclear factor-E2-related factor 2,Nrf2)/血红素加氧酶1(heme oxygenase 1,HO-1)信号通路的影响。方法:将50只C57BL/6小鼠随机分为正常组(N组)和模型组。模型组采用连续腹腔注射链脲佐菌素的方法建立1型糖尿病小鼠模型,成模后将其分为糖尿病组(D组)、低剂量NAR干预组(D+L-NAR组)、中等剂量NAR干预组(D+M-NAR组)和高剂量NAR干预组(D+H-NAR组),对干预组小鼠分别给予低、中、高剂量NAR灌胃,N组和D组给予与D+M-NAR组等体积的生理盐水灌胃。6周后处死小鼠,观察NAR对小鼠体重及血糖的影响;HE和Masson染色观察心脏形态学改变,测量心肌胶原容积分数(collagen volume fraction,CVF);免疫组化观察心脏组织中白细胞介素6(interleukin...     

基于AMPK/eNOS/NF-κB信号通路观察丁苯酞对脑梗死大鼠的保护作用

目的基于腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/内皮型一氧化氮合酶(eNOS)/核转录因子κB(NF-κB(AMPK/eNOS/NF-κB信号通路)探讨丁苯酞(NBP)对脑梗死大鼠的保护机制。方法将80只12～15周龄的SPF级Wistar雄性大鼠随机分为4组(n=20):假手术组(sham组)、模型组、丁苯酞组(NBP组)和阳性对照药物尼莫地平组(NMDP组),采用线栓法构建大鼠永久性中动脉栓塞模型,造模手术结束3h后,NBP组、NMDP组分别腹腔注射20 mg/kg NBP和NMDP,注射计量10 mL,每日定点注射1次,sham和模型组腹腔给予等量生理盐水,连续给药14 d。第14天给药后,对大鼠进行神经功能缺损程度(NDS)评分,依次采用激光散斑成像、TTC染色、尼氏染色、ELISA法,免疫荧光法检测各组大鼠大脑皮层血流变化、脑梗死体积、脑组织内神经元的损伤、脑组织中IL-1β、IL-6和TNF-α表达水平、NF-κB的核移位,Western blot检测p-AMPK、p-eNOS和NF-κB蛋白的表达水平。结果与sham组相比,模型组大鼠神经功能损伤评分明显升高,大脑皮层血流灌注量明显减少,脑梗死体积明显增大,神经细胞凋亡率,IL-1β、IL-6和TNF-α表达水平,NF-κB入核的免疫荧光强度,p-AMPK、p-eNOS、NF-κB蛋白表达水平均升高,差异有统计学意义(P0.05);与模型组相比,NBP组、NMDP组神经功能损伤评分明显下降,大脑皮层血流灌注量明显增加,脑梗死体积明显减小,神经细胞凋亡率,IL-1β、IL-6和TNF-α表达水平,NF-κB入核的免疫荧光强度,NF-κB蛋白表达水平均降低,p-AMPK、p-eNOS表达水平均升高,差异有统计学意义(P0.05);NBP组和NMDP组相比,各指标相比组间差异无统计学意义(P0.05)。结论丁苯酞对脑梗死大鼠的保护作用,与AMPK/eNOS/NF-κB信号通路有关,其机制可能是AMPK/eNOS被激活,抑制NF-κB的活化,从而减轻炎症反应,发挥对脑梗死后的脑组织的保护作用。     

川芎嗪抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路减轻子宫内膜异位症大鼠炎症反应北大核心CSCD

目的探讨川芎嗪抑制Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核因子κB(NF-κB)信号通路减轻子宫内膜异位症(EMs)大鼠炎症反应的作用。方法自体子宫移植法构建EMs大鼠模型,随机分为EMs组、川芎嗪(低、中、高)剂量组、阳性药物组,每组各12只;进行假手术的12只大鼠作为假手术组。游标卡尺测定异位病灶体积,HE染色检测异位内膜组织病理学改变,ELISA检测血清性激素及炎症因子水平,qRT-PCR、Western blot、免疫荧光染色分别检测异位内膜组织中炎症因子mRNA表达、TLR4/MyD88/NF-κB信号通路相关蛋白表达及NF-κB p65入核情况。结果与假手术组比较,EMs组大鼠异位内膜组织出现明显病理损伤,血清雌二醇(E2)、孕激素(P)含量、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素(IL)-1β、IL-6水平及异位内膜组织中TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA、总蛋白TLR4、MyD88、p-NF-κB p65和核蛋白NF-κB p65表达水平升高,血清促卵泡激素(FSH)、促黄体生成素(LH)含量降低(P<0.05),同时NF-κB p65蛋白大量入核;与EMs组比较,川芎嗪(低、中、高)剂量组和阳性药物组可缓解EMs模型大鼠的上述改变并降低异位病灶体积,且川芎嗪高剂量组和阳性药物组对EMs大鼠的作用效果较好且相近。结论川芎嗪可能通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路激活减轻EMs大鼠炎症反应。     

阿司匹林通过抑制NF-κB信号途经减轻缺血再灌注肾损伤

目的 探究阿司匹林对大鼠缺血再灌注肾损伤的保护作用及机制.方法 30只SD大鼠随机分成假手术(Sham)组、模型(IRI)组及阿司匹林(ASP)组,每组10只.血生化检测各组大鼠肾脏滤过能力;HE染色观察肾脏形态学变化;比色法检测氧化应激水平;Western Blot检测炎性因子、损伤标志物以及NF-κB信号通路相关蛋...     

山奈酚通过调控AMPK / Nrf2 / HO-1 信号通路缓解ox-LDL 介导的内皮细胞损伤

目的:探讨山奈酚(Kaempferol)对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的影响及其分子机制。方法:将HUVECs 随机分为6 组:对照(control)组、ox-LDL 组、Kaempferol+ox-LDL 组、Kaempferol+ox-LDL+Compound C 组、Kaempferol+ox-LDL+si-Nrf2 组和Kaempferol+ox-LDL+si-HO-1 组。MTT 方法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡和ROS 水平,Western blot 检测蛋白表达水平。结果:与对照组相比,ox-LDL 处理组的细胞活力下降;凋亡率增加,Cleaved-caspase-3 蛋白水平上调而Bcl-2 下调;TNF-α、IL-1β、IL-6、血管细胞黏附分子(VCAM1)、细胞间黏附分子(ICAM1)和选择素E(E-selectin)的表达升高;活性氧簇(ROS)水平提高而超氧化物歧化酶(SOD)水平下降;p-AMPK、Nrf2 和HO-1 的蛋白水平也减少。与ox-LDL 组相比,山奈酚处理能够缓解以上细胞活力、凋亡及氧化应激等方面的损伤反应,上调p-AMPK、Nrf2 和HO-1 的蛋白水平。Compound C、si-Nrf2 和si-HO-1 处理能够抑制AMPK/ Nrf2/ HO-1 信号通路,提高ROS 的生成,抑制山奈酚对ox-LDL 诱导HUVECs 损伤的拮抗作用。结论:山奈酚能够缓解ox-LDL 诱导的内皮损伤,这与山奈酚促进AMPK/ Nrf2/HO-1信号通路的激活有关。     

小豆蔻素调节Nrf2/HO-1/NF-κB信号通路对妊娠糖尿病大鼠氧化应激损伤的影响

目的 探究小豆蔻素（CAR）调节核因子e2相关因子2/血红素加氧酶-1/核因子-κB(Nrf2/HO-1/NF-κB信号通路对妊娠糖尿病（GDM）大鼠氧化应激损伤的影响。方法 实验分为对照组（Control组）、妊娠糖尿病模型组（GDM组）、低剂量CAR组（L-CAR组）、高剂量CAR组（H-CAR组），高剂量CAR+Nrf2抑制剂Brusatol组（H-CAR+BR组），每组12只。采用血糖仪测定大鼠空腹血糖（FBG）；胰岛素放射免疫分析试剂盒检测大鼠胰岛素（FINS）水平；试剂盒检测血清天门冬氨酸转氨酶（AST）、丙氨酸转氨酶（ALT）、碱性磷酸酶（ALP）以及总抗氧化能力（T-AOC）；试剂盒测定肝脏组织谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、过氧化氢酶（CAT）水平；ELISA法测定血清炎性因子-肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-6)水平；H-E染色法检测肝脏组织病理变化；western blot法检测大鼠肝脏组织Nrf2、HO-1、NF-κB p65、p-...     

丹酚酸B对APP/PS1小鼠学习记忆及氧化应激的作用及可能机制

目的 探讨丹酚酸B对APP/PS1转基因小鼠学习记忆能力、氧化应激水平及Nrf-2/HO-l信号通路的影响.方法 将7月龄的APP/PS1小鼠随机分为模型组、丹酚酸B低剂量组(30mg/kg)及丹酚酸B高剂量组(60 mg/kg),并取同龄C57BL/6小鼠作为对照组,每组10只,连续灌胃给药8周.Morris水迷宫观...     

富氢水对感染性休克大鼠肠损伤及对NF-κB/Nrf-2表达的影响

目的探讨富氢水减轻感染性休克大鼠小肠损伤的作用机制。方法 SPF级SD大鼠40只,随机分为假手术组、感染性休克组、富氢水组及地塞米松组。于感染性休克发生后6 h处死大鼠,记录各组大鼠心率、平均动脉压;观察小肠病理损伤结果;酶联免疫吸附剂测定法(ELISA)检测肠组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和二胺氧化酶(DAO)水平变化;检测大鼠肠组织中白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平变化;应用Western blot检测大鼠肠组织中NF-κB和Nrf-2蛋白表达变化。结果富氢水及地塞米松能够平稳心率及升高血压,减轻感染性休克大鼠肠黏膜损伤,降低MDA水平并增加SOD及DAO活性,降低IL-1β、IL-6及TNF-α水平,抑制肠组织中NF-κB并促进Nrf-2蛋白表达。结论富氢水改善感染性休克大鼠肠损伤可能与调控NF-κB/Nrf-2表达相关。     

柚皮素通过抑制NF-κB-iNOS/COX-2通路减轻小鼠糖尿病肝损伤

目的：探讨核因子(NF-κB)-诱导型一氧化氮合酶(i NOS)/环加氧酶2(COX-2)信号通路在柚皮素治疗减轻小鼠糖尿病肝损伤中的作用。方法：将昆明小鼠分为正常对照组、糖尿病肝损伤模型组、低剂量(25 mg·kg^-1·d^-1，灌胃)柚皮素治疗组及高剂量(75 mg·kg^-1·d^-1，灌胃)柚皮素治疗组，每组10只。长期高能量饮食联合多次小剂量链脲菌素(STZ;40 mg·kg^-1·d^-1×5 d，腹腔注射)建立小鼠糖尿病肝损伤模型。HE染色观察肝脏形态学变化；生化试剂盒检测小鼠血脂及肝功能改变；每周监测空腹血糖(FBG)水平；q RT-PCR检测肝脏NF-κB、iNOS和COX-2的mRNA表达；Western blot法检测肝脏NF-κB、iNOS和COX-2蛋白表达。结果：给予STZ 7 d，小鼠FBG水平持续高于11.1 mmol/L,4周后肝脏病理变化及肝功能检测提示出现肝损伤。再过4周(即实验结束时)，模型组小鼠肝细胞内可见脂肪变性，还伴有炎...     

朝医麻黄定喘汤对OVA诱导的过敏性哮喘豚鼠模型HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路的影响

目的：探讨朝医麻黄定喘汤对过敏性哮喘豚鼠气道炎症的影响,并探讨其作用机制是否与HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路有关。方法：选取50只雄性豚鼠随机分为正常对照组、模型组、低剂量（5 g/kg）麻黄定喘汤组、高剂量（20 g/kg）麻黄定喘汤组和地塞米松（0.5 mg/kg）组,每组各10只。除正常对照组外,其余4组均采用卵清蛋白（OVA）腹腔注射致敏和OVA气溶胶雾化激发制备哮喘豚鼠模型。最后一次雾化后观察豚鼠行为学改变;末次激发24 h后处死豚鼠,采集支气管肺泡灌洗液（BALF）,通过Diff-Quik染色进行炎症细胞计数;取肺组织标本,HE、PAS和Masson染色观察肺组织病理学变化;ELISA法检测BALF中IL-4、IL-5和IL-13含量;流式细胞术测定小鼠肺组织中IL-4和IFN-γ水平;Western blot检测肺组织中HMGB1、TLR4、MyD88和NF-κB蛋白表达;免疫组织化学及免疫荧光检测豚鼠肺组织中HMGB1表达。结果：麻黄定喘汤能有效减轻OVA诱导的哮喘豚鼠气道炎症,抑制杯状细胞增生和胶原纤维沉积,减少BALF中IL-4、IL-5和IL-13含量,...     

氯喹通过抑制NF-κB和MAPK信号通路减轻脂多糖诱导的BV2小胶质细胞炎症反应

目的:探究氯喹(CQ)对脂多糖(LPS)刺激的BV2小胶质细胞活化的抑制作用及可能机制。方法:将小鼠BV2小胶质细胞分为对照组、LPS组和LPS+CQ组。LPS+CQ组预先给予CQ(10μmol/L)处理30 min再给予LPS刺激,在LPS组和LPS+CQ组中给予LPS(500μg/L)刺激后,各组细胞分别培养30 min、6 h和24 h。倒置显微镜下观察BV2细胞的形态学改变;RT-qPCR和ELISA法检测白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的mRNA和蛋白表达水平来评估BV2细胞的活化情况;用免疫荧光染色检测NF-κB蛋白核转移情况;用Western blot检测核因子κB抑制蛋白α(IκB-α)蛋白的表达情况及c-Jun氨基末端激酶(JNK)和p38蛋白的磷酸化水平。结果:LPS刺激后,BV2细胞形态由圆形或椭圆形向多极或纺锤样转变,而预先给予CQ能抑制BV2细胞的形态转变。LPS刺激后,BV2细胞中TNF-α和IL-6的mRNA水平和培养上清液中的蛋白水平明显增加,但预先给予CQ则明显抑制TNF-α和IL-6的mRNA和蛋白表达,可见CQ能减轻LPS诱导...     

PKC/Raf-1/NF-κB信号通路在低氧诱导大鼠单核细胞表达TNF-α中的作用

目的：研究PKC/Raf-1/NF-κB信号通路在低氧诱导大鼠外周血单核细胞（PBMCs）肿瘤坏死因子α（TNF-α）表达中的作用，探讨低氧与全身炎症反应综合征(SIRS)的关系，为进一步研究老年多器官功能障碍综合征(MODSE)的肺启动机制奠定基础。方法:采用明胶法分离大鼠外周血单核细胞，分为chelerythrine+低氧组、forskolin+低氧组和单纯低氧组。Chelerythrine+低氧组和forskolin+低氧组细胞在低氧前分别予10 μmol/L chelerythrine和50 μmol/L forskolin预处理。然后各组均于低氧条件下（3 % O2, 5 % CO2, 92 % N2）培养0、1、3、6、9、12、24 h后，收集细胞及培养液上清，分别采用PKC、Raf活性检测试剂盒、电泳迁移分析法（EMSA）、逆转录PCR（RT-PCR）和酶联免疫吸附试验（ELISA）检测PKC、Raf-1、NF-κB活性及TNF-α表达量。结果:低氧1-9 h，PKC、Raf-1活性、NF-κB结合活性及TNF-α表达量显著高于正常对照组（P<0.01）。低氧后1-24 h，PKC、Raf-1活性、NF-κB结合活性与TNF-α mRNA和蛋白表达水平间呈显著正相关（P<0.01，P<0.05）。10 μmol/L chelerythrine可显著抑制低氧诱导的PKC、Raf-1、NF-κB活性升高和TNF-α表达。50 μmol/L forskolin可显著抑制低氧诱导的Raf-1、NF-κB活性升高及TNF-α表达。结论:低氧可显著增强大鼠外周血单核细胞的PKC、Raf-1活性及NF-κB结合活性,并可诱导其产生大量的促炎症因子TNF-α，这些变化可能与急性呼吸窘迫综合征（ARDS）时血浆中大量促炎症因子持续存在密切相关。     

苦荞黄酮提取物通过抑制NF-κB信号通路减轻蛛网膜下腔出血模型大鼠神经炎症和氧化应激

目的：探索苦荞黄酮提取物减轻蛛网膜下腔出血（SAH）模型大鼠神经炎症和氧化应激的作用机制。方法：将60只大鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫地平组、苦荞黄酮提取物低、中、高剂量组，每组10只。Longa分级评估神经功能缺损；干湿重法测定脑含水量；伊文思蓝染料外渗实验检测大脑血脑屏障通透性；ELISA检测血清TNF-α、IL-6、IL-1β水平和脑组织中上述炎症因子及超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）水平；Western blot检测大鼠脑皮质中细胞外调节蛋白激酶/核转录因子κB(ERK/NF-κB)信号通路蛋白表达。结果：与模型组相比，尼莫地平组和苦荞黄酮提取物中、高剂量组大鼠神经功能缺损评分、脑含水量、伊文思蓝渗出量、血清及脑组织TNF-α、IL-6和IL-1β水平、脑组织MDA水平及MMP-9、p-ERK/ERK和p-NF-κB P65/NF-κB P65蛋白量明显下降，脑组织中SOD和GSH-Px水平明显上升（P<0.05）。结论：苦荞黄酮提取物通过抑制ERK/NF-κB信号通路蛋白表达，减缓大鼠神经炎症和氧化应激反应，发挥对SAH...     

竹节参皂苷IVa通过抗炎和抗氧化减轻脂多糖诱导的大鼠急性肺损伤

目的：探讨竹节参皂苷IVa(saponin from Panax japonicus IVa, SPJ IVa)对大鼠急性肺损伤的影响,并对其可能的保护机制进行初步的探索。方法：将60只SD大鼠随机均分为4组,每组15只：对照组、模型组、低剂量SPJ IVa组和高剂量SPJ IVa组。以脂多糖（LPS,2 mg/kg）气管内滴注法建立大鼠急性肺损伤模型,低、高剂量SPJ IVa组大鼠在造模后30 min分别腹腔注射15和45 mg/kg SPJ IVa。造模后24 h,收集血清、支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid, BALF）和肺组织。HE染色法评估肺组织病理形态学变化;称重法测定肺组织湿重/干重值;ELISA法检测血清和BALF中白细胞介素1β(interleukin-1β, IL-1β)、IL-6和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)水平;试剂盒法检测丙二醛（malondialdehyde, MDA）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase, SOD）和谷胱甘肽（glutathion...     

人脑胶质母细胞瘤中Nrf-2和HO-1的表达及意义

目的探讨核因子相关因子2(nuclear factor erythroid2-related factor2,Nrf-2)和血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)在胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)中的表达及意义。方法采用免疫组化SP法检测49例GBM及23例瘤旁正常组织中Nrf-2和HO-1蛋白的表达,并复习相关文献。结果 Nrf-2和HO-1蛋白在GBM组中的阳性率(分别为85.7%和89.8%)明显增加,与瘤旁正常对照组(34.8%和26.1%)相比,差异有统计学意义(P<0.001),且Nrf-2和HO-1蛋白的表达呈正相关(rs=0.440,P<0.05)。而患者性别、年龄、胶质瘤复发、手术切除范围、肿瘤大小、术后放化疗情况与Nrf-2、HO-1蛋白的表达均无相关性(P>0.05)。结论 Nrf-2和HO-1蛋白可能与GBM的形成有一定关系,有望作为反映GBM的诊断及治疗的生物学新指标,成为GBM的治疗和研究的新靶点。     

RIP1介导的坏死性凋亡通过NF-κB通路调节肾小管上皮细胞炎症反应

目的:探讨受体相互作用蛋白1(RIP1)介导的坏死性凋亡对肾小管上皮细胞炎症的影响及其机制。方法:体外培养人肾小管上皮HK-2细胞,应用肿瘤坏死因子α(TNF-α)联合Z-VAD-FMK刺激24 h。乳酸脱氢酶(LDH)细胞毒性实验检测细胞坏死百分比,Western blot检测观察RIP1、IKK-α和NF-κB p65的表达,Western blot和ELISA测定白细胞介素1β(IL-1β)和单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的水平,real-time PCR检测NF-κB p65的mRNA表达水平。进一步应用RIP1抑制剂necrostatin-1(Nec-1)和NF-κB特异性抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸铵(PDTC)进行干预,检测上述指标。结果:与对照组比较,TNF-α联合Z-VAD-FMK刺激组(T/Z组)的HK-2细胞中cleaved RIP1蛋白水平明显升高,IKK-α和NF-κB p65的蛋白水平明显增高,LDH释放明显增多(P<0. 01)。Western blot和ELISA检测炎症相关指标IL-1β和MCP-1的水平均有明显升高,real-time PCR检...     

黄芪甲苷Ⅳ通过激活Nrf-2/HO-1信号通路抑制氧化应激介导的人SY5Y细胞凋亡

目的 探讨黄芪甲苷Ⅳ(AST4)对H₂O₂诱导的人SY5Y细胞氧化应激损伤以及细胞凋亡的保护作用及机制。方法体外培养SY5Y细胞,用H₂O₂诱导建立氧化应激模型,分为PBS组、 H₂O₂模型组和ASTⅣ组。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞活力,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测细胞凋亡。取各组细胞的上清液,比色法测定丙二醛(MAD)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽(GSH)的含量。免疫荧光细胞化学染色法检测裂解型胱天蛋白酶3(c-caspase-3)和核因子E2相关因子(Nrf-2)的表达和分布。Western blot法检测细胞凋亡蛋白B淋巴细胞瘤因子2(Bcl2)、 Bcl2相关X蛋白(BAX)和c-caspase,以及氧化应激信号通路Nrf-2在胞质内和细胞核内的表达及下游蛋白血红素加氧酶1(HO-1)的蛋白水平。结果 AST4对处于氧化应激损伤状态下的SY5Y细胞具有保护作用,能够减少MAD含量,增加GSH和SOD的含量。AST4增...