人参皂苷Ro 促进THP-1 细胞向DC 分化的作用

目的:探讨人参皂苷Ro 联合细胞因子(GM-CSF 与IL-4)促进人单核白血病细胞(THP-1)向树突状细胞(DC)分化的作用。方法:筛选细胞因子诱导白血病源DC 敏感细胞株;采用细胞因子联合人参皂苷Ro 诱导筛选的敏感细胞株THP-1 向DC 分化。培养体系中分别加入小(5 μmol/ L)、中(10 μmol/ L)、大(20 μmol/ L)剂量人参皂苷Ro,流式细胞术检测白血病来源DC 表面标志CD1a、MHCⅠ、共刺激分子CD86 表达;逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测白血病来源DCMHCⅠ、CD86 mRNA 转录水平;酶联免疫吸附法(ELISA)检测培养上清TNF-α、IL-6 蛋白水平。结果:THP-1 是细胞因子诱导DC 分化的敏感白血病细胞株,与单纯细胞因子诱导比较,细胞因子联合人参皂苷Ro 作用后,白血病来源DC 表面标志CD1a、MHCⅠ、共刺激分子CD86 比例显著升高(P<0.05),CD1a、CD86 及MHCⅠ转录水平显著升高(P<0.05),培养上清TNF-α、IL-6 蛋白水平显著升高(P<0.05)。结论:人参皂苷Ro 能明显促进细胞因子诱导THP-1 细胞向DC 分化。     

芍药苷通过介导THP-1源巨噬细胞极化抑制支气管上皮细胞炎症反应

为探讨芍药苷(paeoniflorin, PF)对人支气管上皮细胞(BEAS-2B)的影响及其机制,利用佛波酯诱导THP-1细胞分化为巨噬细胞,CCK-8法检测PF对THP-1巨噬细胞的毒性,1μg/mL的LPS培养THP-1巨噬细胞以诱导炎症,分别用1、10和30μmol/L的PF处理24、48和72 h, CCK-8法检测细胞活力,筛选PF的最佳作用浓度和时间。在Transwell上室中接种BEAS-2B细胞,下室接种THP-1巨噬细胞,将THP-1巨噬细胞分成4组：对照组、LPS组、PF组、LPS+PF组。CCK-8法检测BEAS-2B细胞的存活率,FACS检测BEAS-2B细胞的凋亡率,ELISA检测炎性因子IFN-γ、IL-4、IL-17C、IL-10的水平,Western blotting检测CD63、CD9、凋亡转接基因2互作蛋白X(apoptosis-linked gene 2-interacting protein X, Alix)表达水平,FACS检测THP-1巨噬细胞中M1、M2型细胞标志物CD80和CD206的表达。结果显示,PF的最佳作用浓度和时间分别为10μ...     

佛波酯诱导THP-1分化为M0型巨噬细胞的条件优化

目的优化诱导THP-1细胞分化为M0型巨噬细胞所需的佛波酯(PMA)浓度和刺激时间。为研究生物活性材料对巨噬细胞表型和功能的调控作用奠定实验基础。方法分析不同PMA浓度与刺激时间下THP-1细胞的形态、贴壁程度、 M0型巨噬细胞表面标志物以及巨噬细胞M1和M2表型相关基因的表达。结果在25～100 ng/mL PMA浓度范围和24～72 h刺激时间范围内,当PMA浓度为75 ng/mL,刺激时间为72 h时,既能有效诱导THP-1细胞分化为M0型巨噬细胞,又能对THP-1细胞中M1型巨噬细胞标志基因IL-6、 IL-1β、 CD86和M2型巨噬细胞标志基因IL-10、 CD163、 CD206产生相对较低的上调作用。结论优化的诱导THP-1细胞分化为M0型巨噬细胞所需的PMA浓度和刺激时间为75 ng/mL和72 h。     

过表达miR-16下调IL-4诱导分化的THP-1细胞IL-10和Arg1的表达

目的探讨慢病毒介导的miR-16对THP-1巨噬细胞表达白细胞介素10(IL-10)和精氨酸酶1(Arg1)的影响。方法利用重组人IL-4(rh IL-4)将THP-1细胞诱导分化为M2型巨噬细胞,利用ELISA检测诱导前后细胞IL-10的分泌,实时荧光定量PCR检测THP-1巨噬细胞诱导前后miR-16的表达;通过慢病毒感染获得miR-16过表达细胞;ELISA检测miR-16过表达细胞和对照细胞IL-10的分泌;流式细胞术检测miR-16过表达细胞和对照细胞IL-10的表达;Western blot法检测miR-16过表达细胞和对照细胞Arg1的表达。结果 THP-1细胞经IL-4诱导后,培养上清中IL-10的分泌逐渐增加,并在第6天达峰值。IL-4将THP-1细胞诱导为M2型巨噬细胞后,miR-16表达下调;慢病毒感染M2型巨噬细胞经嘌呤霉素筛选后GFP表达率提高至97.7%;ELISA检测M2型巨噬细胞miR-16过表达组上清液中IL-10的分泌量为(72.15±0.16)pg/m L,较对照组(103.47±0.14)pg/m L低。流式细胞术检测显示miR-16过表达细胞IL-10的平均荧光强度(Gm)为3.47,胞内IL-10的表达水平较对照组(Gm=12.40)低。过表达miR-16后,M2型巨噬细胞中Arg1表达降低。结论慢病毒介导的miR-16能够抑制IL-4诱导分化的THP-1巨噬细胞中IL-10和Arg1的表达。     

分化诱导剂PMA对THP-1源性巨噬细胞膜表面受体MD-2表达的影响

目的探索豆蔻酸-佛波醇-乙酸酯(phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)对诱导分化后THP-1细胞膜表面受体髓样分化蛋白-2(MD-2)表达和分布的影响及其与炎症因子TNF-α、IL-6分泌的关系。方法采用PMA梯度剂量(0、1、5、10、50、100 ng/ml)诱导THP-1细胞48 h后观察贴壁细胞形态并计算贴壁率;实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测贴壁细胞膜表面受体MD-2、CD14 mRNA相对表达量,ELISA检测细胞培养上清中分泌性MD-2(sMD-2)、TNF-α和IL-6的分泌水平;进一步通过Western blot检测贴壁细胞的MD-2蛋白表达、激光扫描共聚焦显微镜观察MD-2在贴壁细胞的分布和定位。结果梯度PMA剂量(1~100 ng/ml)48 h成功诱导悬浮THP-1细胞贴壁;激光扫描共聚焦显微镜观察显示PMA诱导后MD-2主要表达于胞膜和胞浆,诱导质量浓度增加对MD-2的表达和分布均无显著影响;RT-qPCR检测THP-1细胞经PMA梯度剂量(1~100 ng/ml)诱导后MD-2和CD14 mRNA相对表达量较诱导前均显著升高(P<0.01),诱导剂量组之间无显著差异(P>0.05);ELISA检测THP-1细胞经PMA梯度剂量(1~100 ng/ml)诱导后,细胞培养上清中的TNF-α、IL-6分泌水平依次显著增加(P<0.01),sMD-2仅诱导前后有明显统计学差异(P<0.01);Western blot检测显示梯度剂量PMA诱导后细胞内MD-2蛋白表达较诱导前显著增加,诱导剂量组之间无显著差异。结论 1~100 ng/ml PMA均可将THP-1细胞诱导分化为成熟巨噬细胞,增加诱导质量浓度可显著提高炎症因子TNF-α、IL-6的分泌水平,但对其膜表面受体MD-2表达和分布无明显影响。     

CD36/Src/ERK通路参与单核细胞向巨噬细胞的分化

目的:探讨脂肪酸转位酶(fatty acid translocase,FAT/CD36)在单核细胞向巨噬细胞分化中的作用。方法:采用不同浓度(0、100和200μg/L)佛波酯(phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)诱导人源单核细胞THP-1向巨噬细胞分化;用CD36小片段干扰RNA(CD36 small interfering RNA,siCD36)干扰THP-1细胞CD36的表达;又用CD36 cDNA的重组慢病毒转染THP-1细胞,构建CD36过表达细胞系。显微镜下观察细胞形态;结晶紫染色法检测细胞黏附能力;流式细胞术和Western blot检测细胞分化过程中CD36的蛋白表达,real-time PCR检测CD36、CD11b和CD80的mRNA水平。Western blot检测THP-1细胞向巨噬细胞分化过程中细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)和Src酪氨酸激酶的表达。结果:THP-1细胞向巨噬细胞分化的过程中,CD36表达增加(P<0. 01)。与正常细胞相比,s...     

Dectin-1介导香菇多糖诱导人单核细胞系THP-1细胞产生IL-12的研究

目的探讨香菇多糖能否依赖Dectin-1介导而诱导人单核细胞系THP-1细胞产生IL-12。方法香菇多糖作用THP-1细胞后,实时荧光定量RT-PCR检测Dectin-1、IL-12p35和IL-12p40的mRNA表达水平;ELISA法检测THP-1细胞分泌IL-12的含量;以Dectin-1抑制剂昆布多糖预处理THP-1细胞,比较香菇多糖诱导产生IL-12的变化。结果香菇多糖可上调THP-1细胞表达Dectin-1的mRNA水平;能上调THP-1细胞IL-12p35和IL-12p40的mRNA表达和IL-12分泌;昆布多糖可明显抑制香菇多糖诱导THP-1细胞分泌IL-12。结论 Dectin-1能介导香菇多糖诱导人单核细胞系THP-1细胞产生IL-12。     

高糖对THP-1细胞及平滑肌细胞肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体4表达的影响

目的：探讨高糖对单核/巨噬细胞系THP-1细胞及人主动脉平滑肌细胞肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体4(TRAIL-R4)表达的影响。方法：用PMA孵育THP-1细胞，诱导其分化成为巨噬细胞。流式细胞仪检测成功诱导的巨噬细胞粘附分子CD11b及CD11c。采用不同糖浓度干预THP-1细胞，用Western blotting技术检测TRAIL-R4的表达。用25 mmol/L 高糖培养液在不同时点孵育人主动脉平滑肌细胞，观察TRAIL-R4蛋白表达的变化。用PKC激动剂干预THP-1细胞后，用Western blotting技术检测TRAIL-R4的表达。结果：佛波酯(PMA)孵育THP-1细胞48 h可诱导其分化成为巨噬细胞。20 mmol/L 高糖明显上调人THP-1细胞TRAIL-R4的表达。高糖对人主动脉平滑肌细胞TRAIL-R4表达上调的影响随着刺激时间的增加而增加。PKC激活后THP-1细胞TRAIL-R4的表达明显上调。结论：高糖上调TRAIL-R4蛋白表达，TRAIL-R4通过抑制巨噬细胞及平滑肌细胞的凋亡促进动脉粥样硬化。     

吲哚胺加双氧酶的表达调控THP-1巨噬细胞的极化

目的研究吲哚胺加双氧酶(IDO)对巨噬细胞表型转化的影响。方法以10 ng/mL佛波酯诱导THP-1人单核细胞,建立分化的巨噬细胞模型,分别以100 U/mL IFN-γ和100 ng/mL巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)刺激分化的THP-1细胞,获得M1型和M2型巨噬细胞,利用实时定量PCR(qRT-PCR)、流式细胞术和Western blot法检测巨噬细胞HLA-DR、CC型趋化因子受体7(CCR7)、IL-12p35、IL-10、CXCR4和IDO的表达变化。采用细胞转染实验对分化的THP-1细胞进行IDO的过表达和针对IDO基因的siRNA干扰实验,检测其IL-12p35、CCR7、IL-10和CXCR4的表达变化。结果 IFN-γ可诱导THP-1细胞向M1型发生转化并上调IDO的表达。而在巨噬细胞内过表达IDO促进THP-1向M2型极化,沉默细胞内的IDO基因则导致THP-1细胞极化为M1型。结论 IDO表达可调控巨噬细胞极化。     

单核细胞巨噬细胞对伤寒沙门氏菌应答的特性

目的探讨人类单核细胞巨噬细胞对伤寒沙门氏菌应答的特性。方法采用体外培养的THP-1细胞和PMA诱导分化的THP-1细胞，测定其内在化和杀伤伤寒沙门氏菌的活性，以及以伤寒沙门氏菌诱导的上述两种细胞产生TNFα和IL-12的情况。结果PMA诱导的THP-1细胞可分化成巨噬细胞；THP-1细胞和PMA诱导分化的THP-1细胞的内在化，杀伤伤寒沙门氏菌的能力及其产生细胞因子的能力显箸不同。结论人类巨噬细胞可能是机体抗御伤寒沙门氏菌感染的重要细胞。     

结直肠癌细胞来源的外泌体miR-34a对M2型巨噬细胞极化的影响北大核心CSCD

目的:探究结直肠癌来源的外泌体对巨噬细胞极化的影响及其作用机制。方法:建立THP-1来源的M2型巨噬细胞体外诱导分化模型,利用流式细胞染色实验检测细胞分化效率;通过与结直肠癌细胞共培养、结直肠癌细胞外泌体干预M2型巨噬细胞分化,利用实时荧光定量PCR实验检测ARG1、IL-10和NLRP3 mRNA的表达水平。结果:体外诱导分化的M2型THP-1巨噬细胞CD163阳性细胞比例显著升高;与对照组相比,与结直肠癌细胞HCT8和HCT116共培养的M2型巨噬细胞ARG1、IL-10表达水平显著升高,NLRP3表达水平下降。与转染阴性对照microRNA(miR-NC)组相比,转染miR-34a inhibitor的HCT8和HCT116共培养或外泌体刺激下,M2型巨噬细胞ARG1、IL-10表达水平下降,NLRP3表达水平升高;与miR-NC组相比,转染miR-34a inhibitor的THP-1细胞ARG1、IL-10表达水平显著下降,NLRP3表达水平显著升高。结论:结直肠癌细胞来源的外泌体miR-34a可以抑制巨噬细胞NLRP3的表达,促进巨噬细胞M2型极化。     

STAT3抑制剂Stattic激活ERK通路诱导THP-1细胞IL-8的产生及细胞凋亡

目的观察信号转导子与转录激活子3(STAT3)抑制剂Stattic对THP-1细胞产生白细胞介素8(IL-8)和细胞凋亡的影响,并探讨其机制。方法采用(0、 1、 5、 10、 15、 20)μmol/L Stattic处理THP-1细胞0、 1、 3、 6、 12、 24h,实时荧光定量PCR检测细胞IL-8、 IL-6、 IL-1β、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的mRNA水平, ELISA检测细胞培养上清液IL-8蛋白水平,流式细胞术检测THP-1细胞的凋亡, Western blot法检测细胞STAT3、细胞外信号调节激酶(ERK)的蛋白磷酸化水平;采用(0、 1、 5、 10)μmol/L的ERK通路选择性抑制剂U0126预处理THP-1细胞,反转录PCR检测U0126对Stattic诱导THP-1细胞表达IL-8 mRNA水平的影响。结果 (10～20)μmol/LStattic显著上调IL-8在THP-1细胞中的mRNA和蛋白表达,仅(15、 20)μmol/LStattic能诱导THP-1细胞凋亡; Stattic处理THP-1细胞1、 3、 6、 12、 24 h,均显著上调IL-8的mRNA水平,以3 h时最为明显,在6 h以后呈时间依赖性上调IL-8的蛋白水平并诱导THP-1细胞凋亡;Stattic呈浓度和时间依赖性抑制STAT3磷酸化,时间依赖性地诱导ERK磷酸化,在(1、 5、 10、 15、 20)μmol/L时均显著诱导ERK磷酸化。另外, U0126显著抑制Stattic诱导的IL-8 mRNA表达。结论 STAT3抑制剂Stattic通过激活ERK信号通路诱导THP-1细胞凋亡和IL-8产生。     

细胞亲环素A促单核细胞THP-1钙离子的运动及细胞黏附能力

目的观察细胞亲环素A(CypA)对单核细胞THP-1细胞胞内钙离子运动及细胞与细胞外基质黏附能力的影响。方法乙酸肉豆蔻佛波酯(PMA)诱导分化THP-1细胞,通过激光共聚焦及结晶紫染色法检测CypA刺激THP-1细胞后细胞内游离钙离子浓度的变化及细胞与细胞外基质黏附能力的变化,同时使用CsA、CD147分子拮抗剂AP-9作用细胞,观察CD147分子是否参与了CypA这一调节作用。结果CypA显著促进分化前及分化后的THP-1细胞胞内游离钙离子的运动,同时增强了细胞与细胞外基质的黏附能力(P<0.05),CsA、CD147分子拮抗剂AP-9则可以阻断CypA对细胞钙离子及黏附能力的调节作用。结论CypA通过CD147分子促进细胞钙离子的运动及细胞黏附能力,提示在类风湿关节炎(RA)中CypA可以增强单核/巨噬细胞与滑膜及软骨面的结合及侵袭能力,促进了关节炎的发生发展。     

肿瘤相关巨噬细胞对宫颈癌SiHa细胞迁移和侵袭的影响

目的:探究THP-1来源的肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)对宫颈癌SiHa细胞迁移和侵袭的影响及其相关分子机制。方法:佛波脂(PMA)和IL-4将THP-1细胞诱导为TAMs,流式细胞仪检测其表面CD204和CD206分子的表达;将TAMs与SiHa细胞共培养,采用划痕实验、Transwell实验检测TAMs对SiHa细胞迁移和侵袭能力的影响;免疫印迹法检测共培养后SiHa细胞上皮间质转化相关蛋白的变化,RT-PCR检测转录因子Snail/Slug mRNA表达水平。结果:PMA作用于THP-1细胞24 h,IL-4继续作用72 h后,细胞表面CD204和CD206分子表达明显增加,TAMs诱导成功;与未共培养组相比,共培养组SiHa细胞迁移和侵袭能力显著增强(P<0.001);共培养组SiHa细胞E-cadherin蛋白表达水平显著降低,N-cadherin、Vimentin蛋白、Snail/Slug mRNA表达水平显著升高(P<0.05)。结论:TAMs可能通过上调转录因子Snail的表达促进SiHa细胞上皮间质转化进程,从而促进其侵袭和转移。     

棕榈酸通过上调脂肪酸转位酶诱导THP-1细胞的炎症反应

目的:探讨脂肪酸转位酶(fatty acid translocase,FAT/CD36)在棕榈酸诱导的人源单核巨噬细胞THP-1炎症反应中的作用。方法:给予不同浓度棕榈酸(0 mmol/L、0.1 mmol/L和0.2 mmol/L)处理THP-1细胞24h。Transwell迁移实验检测细胞迁移能力;real-time PCR检测CD36、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)及单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的m RNA表达水平;ELISA和Western blot法检测靶蛋白的蛋白含量。利用RNA干扰技术构建低表达CD36(si CD36)的THP-1细胞模型,观察抑制CD36表达对细胞迁移、炎症及趋化因子表达的影响。结果:棕榈酸促进了THP-1细胞CD36的m RNA和蛋白表达,且增强了THP-1细胞炎症/趋化因子的m RNA和蛋白表达,差异有统计学意义(P0.05)。棕榈酸处理组THP-1细胞的迁移能力明显强于对照组。与阴性对照组细胞相比,si CD36组炎症因子的m RNA和蛋白表达明显降低(P0.05),THP-1细胞迁移水平也明显降低(P0.05)。结论:棕榈酸通过上调THP-1巨噬细胞中CD36表达,促进了巨噬细胞的迁移,促使细胞产生大量炎症/趋化因子,导致巨噬细胞炎症反应。     

乙型肝炎病毒及其核心抗原对巨噬细胞极化的影响

目的:探讨乙型肝炎病毒(HBV)和乙型肝炎核心抗原(HBcAg)对巨噬细胞M1/M2极化的影响。方法:体外培养人白血病单核细胞系THP-1,用佛波酯将其诱导为人巨噬细胞,然后分别与HepG2/HepG2.2.15细胞和HBcAg共培养。通过流式细胞术观察共培养后THP-1巨噬细胞极化相关分子的变化;收集细胞培养上清,用ELISA检测巨噬细胞中促炎和抗炎细胞因子的分泌水平;应用RT-qPCR检测共培养后巨噬细胞极化相关分子和细胞因子的表达水平。结果:与HepG2细胞对照组相比,分泌HBV的HepG2.2.15细胞与THP-1巨噬细胞共培养能够上调其CD86和CCR7表达水平,同时促进IL-6、TNF-α和IL-10的分泌。而与HBcAg共培养后,THP-1巨噬细胞上CD163、CD206以及CD86表达水平升高,同时促进TGF-β、IL-10和TNF-α的分泌。结论:①HBV主要促进THP-1巨噬细胞向促炎的M1方向极化;②HBcAg主要促进THP-1巨噬细胞向抑炎的M2方向极化但同时也影响THP-1巨噬细胞向M1方向的极化。     

γ干扰素上调人胎盘间充质干细胞PD-L1表达并增强其诱导脐血和外周血T细胞向IL-10~+T细胞的分化

目的比较人胎盘间充质干细胞(h PMSC)对脐血和外周血IL-10~+T细胞分化的调节作用,并探讨γ干扰素(IFN-γ)在其中的作用机制。方法应用酶消化法分离、培养h PMSC;反转录PCR和流式细胞术分别检测程序性死亡蛋白配体1(PD-L1)在h PMSC的表达;Ficoll密度梯度离心法分离脐血和健康成人外周血单个核细胞,并用红细胞花环法纯化T细胞;用植物血凝素(PHA)活化T细胞并与h PMSC进行共培养,流式细胞术分别检测在阻断型PD-L1 m Ab和IFN-γ预刺激的条件下h PMSC对脐血和外周血T细胞向CD4~+IL-10~+T细胞、CD8~+IL-10~+T细胞分化的诱导作用。结果 h PMSC可诱导脐血和外周血T细胞向CD4~+IL-10~+T细胞、CD8~+IL-10~+T细胞分化,且对外周血T细胞向IL-10~+T细胞分化的诱导能力明显高于对脐血T细胞向该细胞分化的诱导能力;IFN-γ预处理h PMSC后,h PMSC促进脐血和外周血T细胞向IL-10~+T细胞分化能力明显增强;h PMSC高表达PD-L1,IFN-γ可明显上调其在h PMSC上的表达;阻断PD-L1在h PMSC上表达后,脐血、外周血中CD4~+IL-10~+T细胞、CD8~+IL-10~+T细胞比例均明显降低。结论 h PMSC诱导外周血T细胞向IL-10~+T细胞分化的能力明显高于其诱导脐血T细胞向该细胞分化的能力。IFN-γ可通过上调PD-L1在h PMSC上的表达,增强h PMSC对脐血和外周血T细胞向IL-10~+T细胞分化的诱导能力。     

miR-33表达与炎症反应的关系

目的 探讨miR-33表达与炎症反应的相关性。方法 细胞培养箱中培养人单核细胞（THP-1）48~72 h后传代,传至3代,加入100 ng/ml佛波醇（PMA）诱导24 h分化成为巨噬细胞。采用实时荧光定量PCR技术检测不同浓度LPS（0、1、10、100 ng/ml）以及10 ng/ml LPS不同刺激时间（0、24、36、48 h）THP-1巨噬细胞miR-33表达;另采用ELISA法检测THP-1巨噬细胞中TNF-α、IL-6和MCP-1表达量,分析miR-33表达与炎症反应的相关性。结果 随着LPS浓度（0、1、10、100 ng/ml）增加,miR-33表达、TNF-α、IL-6和MCP-1水平逐渐增加,不同浓度组miR-33表达、TNF-α、IL-6和MCP-水平比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。随着LPS刺激时间（0、24、36 h）延长,miR-33表达逐渐上调、TNF-α、IL-6和MCP-1水平逐渐增加,36 h达到高峰,48 h逐渐下降到正常,不同时间点miR-33表达、TNF-α、IL-6和MCP-1水平比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。Pearson相关性分析显示,miR-33表达与TNF-α、IL-6和MCP-1呈正相关（P＜0.05）。结论 THP-1细胞中miR-33表达与其炎症反应具有一定正相关性。     

脂多糖对白细胞介素27的调节作用及其与环氧化酶2及前列腺素E2之间的相关性研究

目的 探讨脂多糖(LPS)在THP-1细胞对白细胞介素27(IL-27)的调节作用,阐明IL-27与环氧化酶2(COX-2)及前列腺素E2(PGE2)之间的关系.方法 采用不同浓度的LPS和IL-27刺激THP-1细胞,并在不同时间采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清中IL-27和PGE2的含量,同时采用反转录PCR和Western blot检测COX-2的mRNA和蛋白表达的变化.结果 LPS在THP-1细胞能够诱导IL-27的产生,并呈时间和剂量依赖关系;IL-27能够在mRNA和蛋白水平诱导COX-2的表达,同时诱导PGE2的产生,其诱导作用呈时间和剂量依赖效应.结论 LPS能够在细胞水平刺激IL-27的分泌,同时IL-27能够诱导COX-2的表达和PGE2的产生.     

IL-1β促进nave T细胞向Th22细胞分化及在非小细胞肺癌中表达的相关性研究

目的:研究白细胞介素1β(IL-1β)促进nave T细胞向Th22细胞转化的机制及其在非小细胞肺癌患者外周血中表达的相关性和临床意义。方法:采用CD4~+nave T细胞磁珠分选试剂盒分离健康人外周血单个核细胞中的CD4~+nave T细胞,加入转化生长因子β和IL-2促进其分化增殖,分化过程中加入IL-1β诱导其向Th22细胞的分化,流式细胞术检测CD4~+IL-22~+T细胞的比例,ELISA检测IL-22的表达。选择我院确诊为非小细胞肺癌的患者60人,其中Ⅰ期18人,Ⅱ期20人,Ⅲ期13人,IV期9人,同时选择健康人25例,用流式细胞术检测外周血中Th22(CD4~+IL-22~+)细胞的比例,ELISA检测血清中IL-1β和IL-22的水平。结果:IL-1β可以诱导na6ve T细胞向Th22细胞转化并促进IL-22的分泌(P0.05)。非小细胞肺癌患者外周血中Th22细胞比例及IL-22和IL-1β的水平均高于健康人且与临床分期相关(P0.05)。结论:IL-1β可以诱导Th22细胞的分化和IL-22的表达,三者的水平和非小细胞肺癌的进展相关,可能参与免疫抑制并促进非小细胞肺癌的发生。