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1.
用辣根过氧化物酶标记McAbF(ab')_2、McAbLV48A、McAb3D_8和McAbA_(35),分别对27例EHF患者尿液中融合细胞(FC)进行免疫酶染色。结果McAbF(ab')_2检出率为27/27(100%);McAbLV48A为19/27(70.37%);McAb3D_8为20/27(74.07%);McAbA_(35)为2/27(7.41%)。人胚肾细胞感染EHF病毒后,在偏酸性(pH6.0)条件下可以产生特异性细胞融合现象,并经电镜证实了细胞之间膜的融合。此结果表明EHF病毒可以导致人肾细胞融合,EHF患者尿液中FC的形成可能与EHF病毒膜蛋白在宿主细胞膜上的表达有关。 相似文献
2.
EHF病毒抗原经已知抗核蛋白(NP)的McAbA35及抗膜蛋白的McAbA3G1亲和层析进行分离纯化,再经高压液相色谱(HPLC)进一步纯化,获得了高纯度的EHF病毒结构蛋白:NP、MP。书NP、MP分别滴于PVDF膜,与早期患者血清进行免疫酶斑点试验,检测患者血清中相应结构蛋白的抗体,并结合临床资料进行临床转归分析;同时与HI、RPHI检测结果相比较。28例EHF患者血清,斑点试验检测仅MP抗体阳性4例,HI检出3例;RPHI检测仅NP抗体阳性15例,有5例斑点试验同时检出MP抗体,说明斑点试验对MP抗体的检测敏感性高(抗体滴度亦高)。联系MP、NP抗体的出现与病情转归的关系发现,MP抗体先出现的患者病情普遍转重,NP抗体先出现的患者,病情转轻或趋于稳定,MP、NP抗体同时出现的患者,其转归介于上述二者之间,且HI、RPHI和斑点试验检测结果其差别无统计意义。提示斑点试验用于EHF患者血清中结构蛋白抗体的检测更敏感,有可能作为患者病情转归的预测指标,值得进一步推广应用。 相似文献
3.
用辣根过氧化物酶标记McAbF(ab′)2,McAbLV48A,McAb3D38和McAbA35,分别对27例EHF患者尿液中融合细胞(FC)进行免疫酶染色,结果McAbF(ab′)2检出率为27/27(100%);McAbLV48A为19/27(70.37%),McAb3D8为20/27(74.07%);McAbA35为2/27(7.41%),人胚肾细胞感染EHF病毒后,在偏酸性(pH6.0)条 相似文献
4.
目的建立能稳定分泌抗丙型肝炎病毒(HCV)NS5重组蛋白单克隆抗体(McAb),并对其生物学活性进行实验室鉴定。方法用重组HCVNS5区蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,经有限稀释克隆3次后制备分泌McAb的杂交瘤细胞株,并用酶免疫(EIA)法对其分泌抗体进行初步鉴定。结果融合后的阳性克隆中筛选出6株能稳定分泌McAb的杂交瘤细胞株,命名为2C8,2D2,1D6,2G2,1F5和1F10。这6株McAb与NS5重组抗原均有良好的反应性,杂交瘤培养上清的EIA抗体滴度为1∶400~1∶1600,其中1株诱生的同系小鼠腹水滴度为1∶80000。这6株McAb均为IgG1亚型。结论该McAb的制备,可为HCV感染者血清和肝组织中抗原检测方法的建立和生物工程药物的研制创造条件。 相似文献
5.
目的:用抗-HEV ORF2单克隆抗体和抗-HEV ORF2单链可变区抗体研究急性戊型肝炎的免疫病理学,探讨二者在临床病理诊断中的应用价值。方法:(1)以杂交瘤技术制备的抗-HEV单克隆抗体(McAb,monoclonal antibody)作为第一抗体,用免疫组化LSAB法检测急性戊型肝炎患者肝组织中的HEV抗原。(2)用抗-HEV ORF2单链可变区抗体以间接酶标法检测肝组织内的HEV抗原。结果:用抗-HEV单克隆抗体从14例急性戊型肝炎肝标本中检出9例HEV抗原阳性者(64.28%),其中8例阳性标本用抗-HEV ORF2单链可变区抗体检测HEVAg均为阳性。HEV抗原在肝细胞浆表达以胞浆弥漫型为主,尚可见膜型表达。HEV抗原阳性细胞集中分布有病变明显区,伴淋巴细胞浸润,病变较轻区也可见随机散在分布,部分 相似文献
6.
目的:为研制抗丙型肝炎病毒(HCV)NS3抗原单克隆抗体,用于检测丙肝患者血清中的HCVNS3抗原。方法:用基因工程表达的HCV非结构区NS3蛋白与鼠血清白蛋白交联后,免疫BALB/c小鼠,用杂交瘤技术获得能分泌单克隆抗体(McAb)的细胞株。结果:获得有实用价值的两株McAb。两株McAb与免疫抗原有较强的抗原-抗体反应,与HCVNS4、NS5及核心区C33肽、CP9、CP10抗原无反应性,在竞争ELISA中,对HCV-IgG阳性血清有较好的抑制作用。结论:用基因工程表达的HCV非结构区NS3蛋白,能够制备出有实用价值的单克隆抗体。 相似文献
7.
卵巢癌抗独特型单链抗体诱导特异性体液免疫应答的动物实验研究 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:用卵巢癌抗独特型单链抗体6B11scFv代替肿瘤抗原免疫动物,观察是否诱导动物产生特异性体液免疫反应。方法:将6B11scFv交联钥孔虫戚虫血蓝素,辅以弗氏佐剂反复免疫BALB/c小鼠,制备抗血清。采用间接法ELISA,竞争抑制ELISA及免疫流式细胞法分析抗血清特性。结果:经ELISA检测显示,由6B11scFv刺激产生的抗抗独特型单链抗体(Ab3)能与6B11scFv和卵巢癌组织抗原OC1669特异性结合。竞争抑制ELISA表明,Ab3能有效抑制卵巢癌单抗COC1669(Ab1)与OC1669的特异性结合。免疫流式分析结果可见,Ab3能与表达卵巢癌抗原的人卵巢癌细胞系OV1细胞表面结合而不能与无卵巢癌抗原表达的人宫颈癌细胞系HeLa细胞表面结合。从以上结果可以证明Ab3与Ab1的抗原结合特性相同。结论:6B11scFv能代替卵巢癌抗原诱导动物产生特异性体液免疫反应,具有模拟抗原的作用,为6B11scFv作为卵巢癌抗独特型单链抗体疫苗的实际应用提供依据 相似文献
8.
抗丙型肝炎病毒核心抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及初… 总被引:3,自引:3,他引:0
用丙型肝炎病毒(HCV)核心区合成肽作抗原免疫BALB/c小鼠,取其脾细节与骨髓瘤细胞SP^2/0进行融合。经有限稀释法克隆3代后获得一株抗HCV核心抗原CP10的单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞株3E7,并对其分泌抗体进行初步鉴定。杂交瘤细胞培养上清的抗体滴度为1:320,诱生同系小鼠腹水的滴度为1:12800,该McAb能与CP10特异性结合,杂交瘤细胞染色体数目为106条。分泌的抗体为IgG 相似文献
9.
乙型肝炎病毒在成人膜性肾病中的致病作用 总被引:15,自引:0,他引:15
为了进一步了解乙型肝炎病毒(HBV)在成人膜性肾病(MN)发病中的作用。作者应用免疫组化方法对67例MN,患者肾组织中的HBV抗原进行了检测。年龄小于30岁者26例,30~50岁者32例,大于50岁者9例。肾组织中HBV抗原检出率分别是73.1%(19/26),75%(24/32)和33.3%(3/9)。50岁以上MN患者肾组织中HBV抗原检出率显著低于50岁以下年龄组(P<0.05)。MN患者肾组织中以HBsAg检出串最高,67.2%(45/67),HBcAg检出率22.4%(15/67),HBeAg仅1例阳性;HBV抗原总阳性率68.7%(46/67)。以30例系膜增殖性肾炎(MsPGN)为对照,HBsAg检出率10%(3/30),HBcAg、HBeAg均为阴性。HBV抗原总阳性率10%(3/30)。MN组肾组织内HBV抗原检出率显著高于MsPGN组(P<0.01)。本研究结果显示,HBV抗原及其相应抗体形成的免疫复合物在膜性肾病,特别是中青年患者的发病机理中起着极其重要的作用,其中HBsAg可能是最主要的致病抗原。 相似文献
10.
用rIFNα2b和rIFNγ作为抗原建立了检测血清中相应抗体的间接ELISA法。在188名健康体检者中检出的1例抗rIFNα2b阳性,2例rIFNγ阳性,类风湿性关节炎患者、全身性红斑狼疮患者、全身性红斑狼疮患者、混合性结缔组织病患者以及肿瘤患者的这二种IFN抗体水平(A,x±s)明显高于对照者(P<005)。抗体检出率为29%~63% 相似文献
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流行性出血热病毒单克隆抗体在临床早期诊断中应用的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
用IFAT检测77例临床诊断为EHF病人的外周血白细胞中的病毒抗原。阳性率为50.6%。2—5病日的早期病人阳性率为64.3%(27/42)。并发现,病日越早,病情越重,阳性率越高。试验中应用了抗EHF病毒McAb4B_9、4E_7、3H_4株。抗原阳性者对3种McAb的反应表现为5种类型。不同McAb对抗原的检出率不同,混合使用McAb可提高阳性检出率。在EHF病毒抗原阳性早期患者中,急性期血清特异性IgM抗体阳性率为96.3%。若联合检测EHF病毒抗原和急性期血清IgM抗体,可提高早期诊断的阳性率和准确性。 相似文献
12.
从EHF患者血清中分离到8株EHF病毒,在E 6细胞中传代适应过程中,发现有5株EHF病毒分别在第4~10代出现规律的细胞病变(CPE),对其中两个CPE株(HFN-04和-19)进行了一系列特异性鉴定试验。实验结果表明:(1)病毒的CPE发展与病毒增殖动态完全一致;(2)CPE株的主要生物学和理化性状均符合EHF病毒;(3)用CPE株病毒感染细胞抗原片检测EHF患者双份血清,其恢复期血清抗体均呈4倍以上增高反应;(4)病毒的CPE可被患者血清及EHF、KHF免疫血清所中和,不能被正常兔血清和Reo病毒1—3型多价血清所中和;(5)CPE株病毒感染的E_6细胞几乎能完全吸收EHF患者血清及EHF、KHF抗血清中的特异性抗体;(6)CPE株病毒感染鼠脑悬液与EHF病毒A9株McAb25-1致敏血球呈阳性血凝反应。据此,首次证实了EHF病毒至少有部分毒株能引起E_6细胞规律性CPE。EHF病毒CPE株的发现为EHF的诊断和防治工作提供了有利条件。 相似文献
13.
采用McAb ELISA捕捉法检测流行性出血热(EHF)患者血清特异性IgM抗体,检测EHF病人血清351份,总阳性率为94.58%,而正常人血清和非EHF病人血清146份全部阴性。第2病日血清中即可检出EHF-IgM抗体,第4、6病日阳性率分别为87.50%和96.43%,第8病日26份血清全部阳性。对1例典型EHF病人血清IgM抗体动态观察,发现病后1周抗体滴度最高,病后1个月明显下降,病后3个月转阴。 相似文献
14.
本文用IFAT、ELISA、HI平行检测了出血热患者血清161份的出血热病毒抗体,阳性57.9~95.1%;ELISA、HI和IFAT分别于2、4病日出现阳性;ELISA、IFAT分别于60、90病日阴转,HI94病日仍阳性;HI的阳性率(95.1%)高于IFAT(IgM57.9%、IgG88.4%)及ELISA(IgM75.6%、IgG65.9%),其发热期阳性率亦高于其他两法;ELISA-IgM、IgG的阳性率及ELISA-IgM、HI抗体的滴度随病情加重而增加。因此,ELISA(主要是ELISA-IgM)和HI具有高度特异性、敏感度,阳性出现早,HI在三法中灵敏度最高。 相似文献
15.
Indirect fluorescent antibody test (IFAT) was employed to detectviral antigens in the peripheral blood lymphocytes from 77 patients withclinically diagnosed epidemic hemorrhagic fever (EHF). The positive ratewas 50.7%, and it was 64.3% (27/42) for early cases (2nd to 5th day ofdisease). It was found that the earlier and the more severe the cases were,the higher the positive rate was. Three McAbs, 4B9, 4E7 and 3H4 havebeen introduced to IFAT. Five reaction patterns of the three McAbs withviral antigen positive cases were observed. The McAbs showed theirdifferences in respect of positive rate. Combination of McAbs could raisethe positive rate. In the cases of early phase with positive EHFV antigensin the leucocytes, the positive rate of specific IgM in acute phase sera was96.3%. The positive rate and accuracy of EHF early diagnosis could beraised by combined application of detection of the viral antigens andspecific serum IgM in the acute phase. 相似文献
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用间接法ELISA检测流行性出血热IgG抗体。54份EHF病人血清全部阳性,32份正常人、19份发热病人和18份误诊为EHF病人的血清全部阴性,与IFA检测结果相同。检测EHF病人系列血清,发病3d就可检出抗EHF IgG,抗体滴度随病程升高,表明间接法ELISA可用于EHF临床诊断。将间接法ELISA与IFA、RPHI和HI平行检测30份EHF病人血清,抗体几何平均滴度(GMT)分别为1:43 211、1:413、1:253和1:143,有高度相关性,且ELISA比RPHI和HI更能检测出早期抗体。检测疫区人群血清4134份,间接法ELISA检出490份阳性,而IFA仅检出470份。结果表明间接法ELISA有较好的敏感度和特异度,尤其适用于血清流行病学研究。 相似文献
17.
Yao Zhi-qiang姚志强 Yang Wei-song杨为松 Zhang Wen-bin张文彬and Bai Xue-fan自雪帆Laboratory of EHF Second Affiliated Hospital Fourth Military Medical College Xi''an 《中华医学杂志(英文版)》1989,102(2):116-119
The duration of viremia in patients with epidemic hemorrhagic fever (EHF) was studied using immunofluorescence technique and cell culture assays. The duration of virus in plasma of EHF patients was about 1 week, which was concomitant with the febrile phase of the disease. Comparatively, the separation rate of viruses in peripheral blood mononuclear cells (PBMC) was greater (1.8 times) than in plasma, while the detected peak of EHF (in 4-7 days after onset of the disease) was found to be 2 or 3 days less than that of plasma, thus the detectable viremia was prolonged until the 8th to 11th day of the disease. High titre EHF antibody of IgG, TgM was unable to neutralize the virus in human blood. The results revealed that a blood-cell-associated prolonged viremia is one of the characteristics of EHF infection. 相似文献
18.
本文报告用间接免疫荧光法检测特异性IgG抗体对流行性出血热的诊断意义。53例不同病期的出血热患者的血清,其间接荧光抗体的阳性率为49/53(占92.45%)。有77.36%的患者血清,检出IgG抗体的时间是在发病后的1~2周。血清中IgG的滴度与疾病的严重性无密切相关。另25例非EHF患者,其血清特异性IgG抗体均为阴性。可见检测特异性IgG抗体对EHF的诊断颇为有用。 相似文献