P53和c—erbB—2基因在胃癌及其癌旁病变中的表达

目的 为了研究胃癌发生发展的机理。方法 采用免疫组化方法研究了８８例胃癌及其癌旁肠上皮化生，异型增生中Ｐ５３和ｃ－ｅｒｂＢ－２基因蛋白的表达。结果 ８８例胃癌中ｐ５３和ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白阳性率分别为５２．３％和２０．５％，Ｐ５３在高分化腺癌和低分化腺癌的阳性率（分别为６１．８％和５７．９％）明显高于粘液癌（１８．８％，Ｐ〈０．０１）；癌旁肠上皮化生和异型增生中Ｐ５３全部为阴性，ｅ－ｅｒｂＢ－２在     

胃粘膜癌变过程中bcl-2、p53和Rb基因的表达

目的 研究胃粘膜癌变过程中ｂｃ１－２、ｐ＾５３和Ｒｂ的基因的表达及意义。方法 采用免疫组化方法对５０例胃癌,１８例癌旁肠化生,７例癌旁轻中度异型增生及９例重度异型增生组织中ｂｃ１－２、ｐ＾５３和Ｒｂ基因表达情况进行检测和比较。结果 正常胃粘膜上皮增殖带干细胞区ｂｃ１－２蛋白呈弱阳性表达,异性增生病变中,ｂｃｌ－２蛋白表达率和表达强度明显大于肠化生病变和正常胃粘膜上皮（Ｐ〈０．０５）,胃癌组织中表达     

胃癌p53表达及DNA倍体研究

本文应用ＬＳＡＢ法对７５例胃癌及癌旁组织进行了ｐ５３表达的研究，并分析了ｐ５３表达与胃癌ＤＮＡ倍体的关系。结果：７５例胃癌中ｐ５３表达阳性率为４１．３％。４例癌旁重度异型增生中有２例表达阳性，ｐ５３在早期胃癌中阳性率（６０．０％）高于进展期胃癌（３８．５％）；肠型胃癌中阳性率（５２．６％）明显高于弥漫型胃癌（２９．７％）（Ｐ＜０．０５）；异倍体胃癌ｐ５３阳性率（５１．１％）明显高于二倍体胃癌（２６．７％）（ｐ＜０．０５）。经统计分析，未见ｐ５３表达与胃癌的恶性程度指标之间有明显关系。结果说明，ｐ５３表达与胃粘膜癌变的早期阶段关系密切，主要与肠型胃癌和异倍体胃癌发生有关。     

人体胃癌及癌前病变p53和PCNA的免疫组化研究

采用免疫组化方法观察胃癌６０例，不典型增生４２例，肠化生２０例，浅表性胃炎１０例，正常胃粘膜１０例的ｐ５３和ＰＣＮＡ在胃粘膜不同病变中的表达和分布情况。结果表明，ｐ５３蛋白在浅表性胃炎和肠化生组织中无阳性表达，在不典型增生和胃癌中阳性率分别为１９％和６５％。ＰＣＮＡ在浅表性胃炎、肠化生、不典型增生及胃癌中的表达逐渐增强。ｐ５３阳性者增殖活性高。提示ｐ５３和ＰＣＮＡ的免疫组化染色在胃癌的诊断和治疗中具有一定应用价值。     

人体胃癌及癌前病变p53和PCNA的免疫组化研究

采用免疫组化方法观察胃癌６０例，不典型增生４２例，肠化生２０例，浅表性胃炎１０例，正常胃粘膜１０例的ｐ５３和ＰＣＮＡ在胃粘膜不同病变中的表达和分布情况。结果表明，ｐ５３蛋白在浅表性胃炎和肠化生组织中无阳性表达，在不典型增生和胃癌中阳性率分别为１９％和６５％。ＰＣＮＡ在浅表性胃炎、肠化生、不典型增生及胃癌中的表达逐渐增加。ｐ５３阳性者增殖活性高。提示ｐ５３和ＰＣＮＡ的免疫组化染色在胃癌的诊断和治疗中     

COX-2蛋白在胃粘膜癌前病变与胃癌中表达的意义

目的探讨环氧合酶2(COX2)蛋白在胃粘膜肠上皮化生、非典型增生及胃癌中的表达情况。方法选择幽门螺杆菌(Hp)感染的具有不同病变胃粘膜的胃癌手术切除标本,根据病理结果分组为肠上皮化生、不典型增生、肠型胃癌(各51例)和弥漫型胃癌32例。用免疫组化方法测定各组中COX2蛋白表达情况。比较COX2蛋白在上述各组中的表达强度并与正常粘膜对照。结果正常粘膜和弥漫型胃癌COX2蛋白表达均为阴性。肠上皮化生、非典型增生、肠型胃癌COX2蛋白阳性率分别为58.82%(30/51)、64.71%(33/51)、84.31%(43/51),表达强度组间均有显著性差异(P<0.05)。结论COX2在Hp感染的肠型胃癌发展的早期阶段即开始表达,且在肠型胃癌的发生发展过程中表达水平逐渐增高。     

免疫组化与粘液组化套染技术的应用

建立免疫组化与粘液组化套染技术，同步显示细胞核抗原与粘液成份，研究胃粘膜肠上皮化生与胃癌的关系。结果显示ＰＣＮＡ和Ｐ５３阳性均定位于细胞核内，杯状细胞胞浆中硫酸化粘液物质呈蓝色。４６例胃腺癌癌旁组织中，２７例含硫酸化粘液肠化生上皮细胞的ＰＣＮＡ阳性率（６６．７％）显著高于无硫酸化粘液的肠化生细胞（３１．６％）。２１例Ｐ５３阳性的胃癌中癌旁组织含硫酸化粘液肠化生的伴随着率高于Ｐ５３阴性胃癌。实验结果     

c—met原癌基因表达与胃粘膜病变的关系

研究ｃ－ｍｅｔ基因蛋白过量表达的意义及与胃粘膜病变演进的关系。方法对１５７例胃镜活检组织应用抗ｃ－ｍｅｔ基因蛋白单克隆抗体（Ｓ－１９），以免疫组织化学法检测不同胃粘膜病变的ｃ－ｍｅｔ基因蛋白的表达。结果ｃ－ｍｅｔ基因蛋白的过量表达在浅表性胃炎为３／３０例（１０％），萎缩性胃炎为４／３３例（１２．１％），肠上皮化生为１０／３１例（３２．３％），异型增生为１０／３０例（３３．３％），胃癌为１０／３０例（３３．３％）。ｃ－ｍｅｔ基因阳性表达率在肠化生（５４．８％）、异型增生（５６．７％）、胃癌（５３．３％）明显高于两种单纯的慢性胃炎病变（Ｐ＜０．０５）。ｃ－ｍｅｔ基因阳性表达部位明显见于胃腺上皮腔面膜上。在慢性胃炎粘膜，ｃ－ｍｅｔ阳性表达细胞主要集中于腺颈部。在３例正常胃粘膜中，有２例在其腺颈部也见弱阳性染色。结论ｃ－ｍｅｔ基因蛋白过量表达与胃粘膜的高度增殖状态有关。ｃ－ｍｅｔ基因蛋白持续的过量表达可能是与胃粘膜细胞癌变相关的一种基因异常改变。     

胃癌及癌前病变中表皮生长因子受体的表达及意义

目的 1．探讨表皮生长因子受体（Epidermal growth factor receptor EGFR)在胃癌前病变中的变化特点及意义。2．探讨EGFR的表达与胃癌临床病理特征的关系和意义。方法 应用免疫组织化学ABC法（avidinbiotin Peroxidase complex),对10例正常胃粘膜,45例慢性胃炎伴肠化,26例胃癌癌旁肠化,48例异型增生,76例胃癌及39例淋巴结转移癌进行EGFR蛋白表达的研究。结果 EGFR在正常胃粘膜中均为阴性,胃粘膜肠化生及异型增生中表达明显高于正常胃粘膜（P＜0．01）;EGFR在胃癌癌旁肠化中表达明显高于慢性胃炎伴肠化（P＜0．05）;结肠型肠化中EGFR表达较小肠型高,差异具有显著性意义（P＜0．05）;胃粘膜异型增生时,有较高EGFR表达,而一旦胃粘膜癌变后,表达率却有所下降。胃癌组织中阳性率为56．6％;进展期胃癌的阳性率明显高于早期胃癌（P＜0．05）;EGFR表达阳性者多为分化较差的弥漫型胃癌,阴性者多为分化较好的肠型胃癌;伴淋巴结转移者阳性率为74．4％,无淋巴结转移者37．8％（P＜0．05）;胃癌侵犯越深,其EGFR受体表达的阳性率越高。结论 胃粘膜肠上皮化生中EGFR表达与胃癌的关系密切,是胃癌发展过程中的早期事件。胃粘膜异型增生中EGFR动态变化特点,有利于对异型增生的诊断,追踪观察及其与胃癌关系的研究。EGFR的表达与胃癌的低分化性,高浸润性及淋巴结转移呈正相关。肿瘤组织中EGFR的表达可作为临床制定手术方式及预测病人预后的一个参考指标。     

幽门螺杆菌感染与胃癌及癌前病变的关系

目的：进一步了解胃粘膜幽门螺杆菌（ＨＰ）感染与癌前病变及胃癌发生的关系。方法：采用快速尿素酶法及免疫组化方法，检测１０５例不同程度胃粘膜病变活检组织中ＨＰ感染，ｐ２１、ｐ５３蛋白的表达。结果：（１）慢性萎缩性伴肠上皮化生性胃炎、不典型增生、胃癌ＨＰ感染率均显著高于慢性浅表性胃炎（Ｐ＜０．０１）。（２）ＨＰ阳性组ｐ２１阳性率（４９．１％）明显高于ＨＰ阴性组（１４．６％）（Ｐ＜０．０１），且ｐ２１蛋白表达率随着病变程度加重而升高。（３）检测ｐ５３突变体，ＨＰ阳性组慢性萎缩性伴肠上皮化生性胃炎、不典型增生及胃癌亦均显著高于慢性浅表性胃炎（Ｐ＜０．０１），且ＨＰ阳性组ｐ５３蛋白表达率（４２．６％）明显高于阴性组。结论：ＨＰ感染在癌前病变及胃癌病变过程中有重要的生物学意义。     

大鼠脑损伤时神经细胞c-fos 、c-jun和c-myc基因表达变化

目的观察大鼠脑损伤后不同时间皮质神经细胞早期快反应基因c-fos 、c-jun和c-myc表达变化.方法应用Northern杂交、原位杂交和免疫组织化学方法检测皮质神经细胞中c-fos、c-jun和c-myc的表达.结果脑损伤后15 min,伤侧皮质神经细胞出现上述3种基因mRNA的表达,随时间的延长,表达逐渐增加,于伤后3 h达高峰并持续至伤后24 h,伤后72 h恢复至对照水平.c-fos和c-jun蛋白表达亦于伤后15 min出现,c-myc蛋白表达于伤后30 min出现,并均于伤后3 h达高峰,持续至伤后6 h,伤后24 h表达消失.结论脑损伤后上述3种基因表达特点与其它脑损害不同,可能与损伤机制和继发性神经细胞损害有关.     

德宏州不同民族人群地中海贫血基因调查及分析

目的了解德宏州傣族、景颇族、阿昌族、德昂族、傈僳族、汉族人群携带地中海贫血基因现状,为防治提供科学依据。方法采用PCR和反向点杂交技术鉴定β-地贫基因;以跨跃断裂点PCR(GAP-PCR)技术和凝胶电泳鉴定α-地贫基因,并进行统计分析。结果检测血样本3 018份,检出地中海贫血基因939份,阳性率31.11%,其中α地中海贫血基因阳性率18.36%,β地中海贫血基因阳性率12.76%。不同民族的阳性率比较差异均有统计学意义。结论德宏州属地中海贫血高发区,临床工作中要做好鉴别诊断和治疗。     

C-erbB-2、Nm23和MDR1基因在原发性乳腺癌中的表达及与转移和预后的相关性

目的：探讨C-erbB-2、Nm23和MDR1在原发性乳腺癌中的表达及其与转移和预后的关系。方法：采用免疫组化法（S-P法）检测49例乳腺癌患者手术切除组织中C-erbB-2、Nm23和MDR1的表达,并分析3种基因之间的相关性及其与转移的关系。结果：49例乳腺癌患者中C-erbB-2、MDR1高表达和Nm23低表达的患者转移发生率高（P<0.05）。MDR1的表达与C-erbB-2的表达有相关性（r_s＝1.00,P<0.05）,Nm23与C-erbB-2的表达无相关性(r_s＝0.80,P>0.05),MDR1的表达与Nm23的表达无相关性_s＝0.80,P＞0.05）。C-erbB-2、MDR1同时阳性的患者及C-erbB-2阳性、Nm23阴性的患者转移发生的几率较高,预后较差。结论：C-erbB-2、Nm23和MDR1与乳腺癌转移有关,多个指标联合检测用来估计患者预后指导意义更佳。     

Expression of c-fos and c-jun proteins in the marginal division of the rat striatum during learning and memory training

Background A new brain region, the marginal division (MrD) , was discovered at the caudal margin of the neostriatum. The MrD was shown to be involved in learning and memory in the rat. The aim of this study was to investigate the expression of the immediate-early genes c-fos and c-jun in the MrD of the striatum during learning and memory processes in the rat, immunocytochemical and Western blot methods were used to examine Y-maze trained rats.Methods The rats were divided into three groups, namely the training, pseudotraining, and control groups. After Y-maze training, the expression of the immediate-early genes c-fos and c-jun in the MrD of the rats was investigated using immunocytochemical and Western blot methods.Results After one hour of Y-maze training, the expression of c-jun and c-fos proteins was significantly enhanced in the MrD; the c-jun protein, in particular, was more intensely expressed in this region than in other parts of the striatum. The expression of these two proteins in the training group was significantly higher than in the pseudotraining and control groups. In addition, positive expression was also found in the hippocampus,cingulum cortex, thalamus, and in other areas. Western blot disclosed two immunoreactive bands for the anti-c-fos antibody (47kD and 54kD) and two immunoreactive bands for the anti-c-jun antibody (39kD and 54kD). Conclusions These results indicate that the immediate-early genes c-fos and c-jun participate in signal transduction during the learning and memory processes associated with Y-maze training in rats.     

改进的PCR模板制备及DNA回收方法

直接用煮沸的细菌裂解液中的ＤＮＡ作ＰＣＲ模板，扩增效果与用酚／氯仿抽提纯化的质粒ＤＮＡ作模板的结果一致，缩短了实验时间。利用简单材料回收酶切片段，省去了有机溶剂反复抽提和沉淀的步骤，回收率达到９０％，效果很好。     

结肠癌脾虚证p53, Bcl-2和Bax的表达

目的: 探讨结肠癌脾虚证与p53, Bcl-2, Bax蛋白表达的相关性,揭示病与证之间的内在联系及证的物质基础.方法: 选择进展期低分化结肠腺癌61例,辨证分为脾虚组与非脾虚组,对其主要症状进行半定量积分,并设正常对照组20例.采用免疫组化S-P法检测病理组织中p53, Bcl-2, Bax蛋的表达.结果: 脾虚组患者p53, Bcl-2蛋白的阳性表达率及表达水平显著高于非脾虚组(P<0.05),Bax蛋白阳性表达脾虚组低于非脾虚组,但组间比较差异无显著性(P>0.05),脾虚患者症状积分与p53, Bcl-2蛋白表达水平呈正相关(P<0.01),与Bax蛋白表达水平无相关性(P>0.05);非脾虚患者症状积分与p53, Bcl-2, Bax蛋白表达水平均无显著相关性(P>0.05).结论: 结肠癌中医证型与p53, Bcl-2蛋白的差异表达有关,p53, Bcl-2蛋白是结肠癌脾虚证的相关基因.     

p53和C-Ha-ras基因在胃癌发生中的作用

目的　探讨 p5 3和C Ha ras基因突变在胃癌发生中的作用。 方法　用PCR SSCP和直接测序检测胃癌组织中C Ha ras(12、13密码子 )和 p5 3(外显子 7)基因的突变。 结果　胃癌组织中C Ha ras和 p5 3基因突变发生率显著高于浅表性胃炎和正常胃黏膜组织 ,基因的联合突变在部分胃癌组织中表达。结论　基因联合突变可能是胃癌发生的机制之一。     

PTEN基因诱导人脑胶质瘤SHG-44细胞凋亡及bcl-2表达下调

目的 探讨PTEN基因对人脑胶质瘤SHG－44细胞凋亡及凋亡相关基因bcl-2表达的影响，阐明PTEN基因抑制肿瘤细胞增殖的机制。方法PTEN基因体外转染SHG－44细胞，筛选阳性细胞克隆，以原位杂、免疫组化方法检测PTEN基因的表达情况；采用透射电镜、流式细胞仪和核DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞的凋亡情况；以免疫荧光法检测bcl-2基因的表达。结果 PTEN基因转染的SHG－44细胞有PTEN蛋白的表达。透射电镜下可见转染PTEN基因后细胞核染色质浓缩边集、胞质浓缩、核破裂及凋亡小体形成等典型的凋亡表现；流式细胞仪显示细胞周期从G1期到S期发生抑制，并且在G1期峰前出现一明显的凋亡峰（15．9％）；细胞核DNA琼脂糖凝胶电泳呈现凋亡细胞特有的梯状条带；bcl-2的表达也显著下调。结论 PTEN基因可诱导SHG－44细胞凋亡，并下调bcl-2蛋白的表达，这可能是PTEN基因抑制肿瘤细胞增殖的分子机制之一。     

星形细胞瘤PTEN、p27的表达及相关性研究

目的检测PTEN和p27在星形细胞瘤中的表达,探讨二者表达的意义。方法采用免疫组化S-P法检测星形细胞瘤PTEN和p27的表达,应用SPSS10.0统计软件进行数据处理。结果PTEN、p27在星形细胞瘤表达阳性率均随病理分级升高而降低(P<0.05);PTEN表达水平与p27表达水平正相关(P<0.05)。结论PTEN及p27表达下调与星形细胞瘤的发生发展有关。PTEN可能通过正调节p27的表达发挥其抑癌作用。     

胃癌组织ras和P53基因突变的检测

（１）目的 研究胃癌组织中Ｐ５３基因和ｒａｓ基因的突变情况,（２）方法 采用ＰＣＲ ＲＦＬＰ技术,分析４１例胃癌标本中Ｐ５３基因和ｒａｓ基因的突变。（３）结果 本组４１例中,１２例（２９．３％）发生Ｐ５３基因突变,１６例（３９．１％）发生ｒａｓ基因突变,１全负时发生Ｐ５３基因和ｒａｓ基因的突变。（４）结论 Ｐ５３和ｒａｓ基因突变与胃癌的发生密切相关,在胃癌的发生中可能起重要作用。