HPLC法测定何首乌中二苯乙烯苷的含量

目的:建立采用HPLC测定何首乌中二苯乙烯苷的含量。方法:色谱柱:014DiamonsilTM(钻石)C18色谱柱(4.6×250mm,5μm);流动相:乙腈—水(25:75);流速:1.0ml/min;检测波长:320nm;柱温:25℃。结果:2,3,5,4‘-四羟基二苯乙烯-2-o-β-D-葡萄糖苷的平均回收率为90%RSD为1.07%。结论:该方法简便、准确,可用于测定何首乌中二苯乙烯苷的含量。     

何首乌炮制前后二苯乙烯苷含量的测定

目的：测定何首乌不同炮制品及生品中二苯乙烯苷的含量。方法：采用HPLC法进行测定,以乙腈-水（25：75）为流动相,检测波长为320nm。结果：二苯乙烯苷在3.44-17.2μg范围内呈线性相关,平均回收率为100.17%,RSD为2.2%。结论：本法简便、灵敏、专属性强,为何首乌及其不同炮制品的质量评价提供了有效的方法。     

HPLC法测定广西不同产地何首乌中二苯乙烯苷的含量

目的:考察广西不同产地何首乌中二苯乙烯苷的含量。方法:采用HPLC法测定,色谱柱为symmetryC18柱(4.6×150mm,5μm),流动相为乙腈-水(25∶75),流速为1.0ml/min,检测波长为320nm。结果:不同产地的何首乌药材中二苯乙烯苷的含量差别很大,最高的为6.06%,最低的为0.04%。结论:平乐、恭城、宾阳、桂林等地所产何首乌中二苯乙烯苷的含量较高。     

何首乌中二苯乙烯苷提取物的制备工艺及含量测定

何首乌为蓼科植物何首乌Polygonum multiflo-rumThunb.的干燥块根,具有补肝肾、益精血、乌须发、强筋骨的功效。现代药理研究表明何首乌具有抗衰老、降低胆固醇、提高免疫功能、防治动脉粥样硬化及保肝等活性[1]。二苯乙烯苷是何首乌中重要的活性成分,具有抗氧化清除自由基,降低胆固醇,保肝,减轻脑缺血所致的脑组织损伤等多重功能[2-4]。国际市场对二苯乙烯苷需求较大。目前,何首乌中二苯乙烯苷的制备工艺有文献报道用乙醇提取,....     

何首乌二苯乙烯苷的提取工艺研究

目的:优选何首乌中二苯乙烯苷的提取工艺。方法:利用紫外分光光度法测定何首乌中二苯乙烯苷,运用正交试验设计,以二苯乙烯苷得率为考察指标,筛选最佳提取工艺。结果:何首乌中二苯乙烯苷的最佳提取工艺参数为:温度70℃,提取时间为80min,料液比1:7,乙醇浓度40%。     

何首乌二苯乙烯苷含量差异性研究

目的:为筛选二苯乙烯苷含量差异显著的何首乌样本,为通过mRNA水平筛选与二苯乙烯苷合成相关酶基因,研究二苯乙烯苷合成途径打下基础。方法:HPLC,流动相为乙腈∶水(25∶75);柱温:27℃;流速:1.0mL·min-1;进样量:10μL;紫外检测波长:320 nm;进样时间:10 min。结果:线性回归方程:y=41.233x+1.6644,R2=1。结论:对水浴和室温冷浸两种萃取方法的比较发现水浴40 min和冷浸12 h效果无明显差异;冷浸12 h和冷浸30 h无显著差异;不同产地何首乌块根二苯乙烯苷含量差异显著(6.4%⁰.0011%),同一产地何首乌含量差异亦存在明显差异(6.4%0.0011%),同一产地何首乌含量差异亦存在明显差异(6.4%¹.5%);同株何首乌不同组织二苯乙烯苷含量存在较大差异,依次是:根>茎>叶;新叶>老叶;老藤>新藤。     

不同地区制何首乌中二苯乙烯苷含量测定及稳定性考察

目的：测定不同地区制何首乌中2，3，5，4‘-四羟基二苯乙烯-2-0-β-D-葡萄糖苷（简称二苯乙烯苷）含量，同时考察其稳定性。方法：采用高效液相色谱法测定二苯乙烯苷含量。稳定性实验采用高温试验及^60Co-γ射线辐射试验。结果：制何首乌中二苯乙烯苷含量为0.127%-4.150%。温度及湿度影响二苯乙烯苷稳定性，干燥条件下^60Co-γ射线辐射稳定。     

高压炮制对何首乌中二苯乙烯苷和卵磷脂的影响

目的考察高压炮制方法对二苯乙烯苷和卵磷脂的影响,优选何首乌炮制工艺。方法用不同辅料润制何首乌,然后采用高压方法进行炮制,炮制时间为4、6、8、10 h;分别采用钼蓝比色法和HPLC法测定炮制品中卵磷脂和二苯乙烯苷。结果随着各种炮制方法时间的延长,卵磷脂和二苯乙烯苷量均有所降低,并且高压豆制品>高压酒制品>高压酒豆制品>高压清蒸品,以豆制为佳。结论以卵磷脂与二苯乙烯苷为考察指标,建议可采用高压豆制4 h方法炮制何首乌。     

贵州不同产地野生及栽培何首乌中二苯乙烯苷含量比较

何首乌为蓼科植物何首乌Polygonummulti florumThunb.的干燥块根。主要含有卵磷脂、蒽醌衍生物、二苯乙烯苷等有效成分。具益精髓、长筋力、壮气驻颜、黑发延年之功[1] ,为常用中药。由于用量较大,使野生资源越加缺乏,因此要加快何首乌人工栽培品的研究,使之在品质上与野生品相当,早日替代野生品,这对保护资源和带领药农致富有着重要意义。1　材料与试药所有药材经贵阳中医学院生药教研室魏升华讲师鉴定为P .multiflorum的干燥     

HPLC测定不同生长年限及采收期何首乌中二苯乙烯苷和蒽醌类成分的含量

目的:建立HPLC同时测定何首乌中二苯乙烯苷和蒽醌类成分含量的方法,比较不同生长年限及采收期何首乌的成分动态变化。方法:采用HPLC同时测定一至四年生及7—12月采收的何首乌中的二苯乙烯苷和蒽醌类成分含量。色谱柱为C18,流动相为甲醇-0.1%磷酸水梯度洗脱,检测波长320,254 nm,流速1.0 mL.min-1。结果:在一定范围内二苯乙烯苷、大黄素、大黄素甲醚进样量与峰面积积分值线性关系良好,具有良好的精密度、重复性、稳定性和良好的加样回收率。结论:样品测定结果表明该方法灵敏,准确,重复性好。何首乌中的二苯乙烯苷和蒽醌类成分在一至二年生长期间迅速积累,至三年生时达到峰值;同年生何首乌中成分含量在11月时相对高于其他月份。     

何首乌的提取工艺研究

目的研究不同提取工艺对何首乌浸膏中二苯乙烯苷和总糖的影响,优选制备何首乌浸膏的提取工艺。方法以蒸制何首乌为原料,何首乌中二苯乙烯苷和总糖的提取量为指标,采用旋转响应表面实验设计对何首乌浸膏制备过程中的水提取工艺进行研究。结果最佳的提取工艺为何首乌饮片与水比例1∶10.5,每次加热提取1.5h,提取3次,此条件下何首乌中二苯乙烯苷提取量达2.70%,总糖提取量达6.23%。结论该方法适用于何首乌的提取。     

清蒸与黑豆汁蒸何首乌中有效成分的比较

目的为制定何首乌合理的炮制工艺提供依据。方法采用HPLC和分光光度计对清蒸和黑豆汁蒸何首乌中有效成分进行比较分析。结果清蒸和黑豆汁蒸何首乌中蒽醌和二苯乙烯苷无显著性差别。结论为简化炮制工艺用清蒸代替黑豆汁蒸是可行的。     

中药何首乌总基因组DNA的提取

目的为获得高质量的何首乌总基因组DNA。方法采用CTAB法提取,对其提取方法进行改进。结果用改进的方法提取的样品DNA的OD260/OD280值在1.630~1.955之间,琼脂糖凝胶上主带清晰、降解较少,能完全被限制性内切酶EcoRⅠ和M seⅠ完全酶切,得到合适的AFLP指纹样式。结论改良的CTAB法提示提取何首乌DNA的理想方法,适合AFLP-PCR反应和其他分子生物学应用。     

何首乌及其炮制品中二苯乙烯甙含量测定

应用一阶导数光谱法测定何首乌及其炮制品中二苯乙烯甙的含量。实验结果表明:本法操作简便,重现性好,结果稳定,可用为何首乌炮制质量标准之一。     

炮制对何首乌主要化学成分含量的影响

目的:对何首乌中主要化学成分大黄素、大黄素甲醚、大黄素-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、大黄素甲醚-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷以及2,3,5,4′-四羟基反式二苯乙烯-2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的含量在炮制过程中不同时间的动态变化进行研究,并分析探讨它们的变化规律。方法:采用反相高效液相色谱法,对炮制前后何首乌中5种主要成分进行含量测定。结果:所测5种成分的含量均明显降低。结论:炮制使何首乌中主要化学成分的含量均明显降低,提示临床上应用制首乌是否必要值得探讨。     

正交设计在何首乌组织培养中的应用

用正交设计法考察了４种激素对何首乌嫩茎,叶诱导愈伤组织产生的影响。方差分析结果显示：２,４－Ｄ、ＩＢＡ作用极显著,６－ＢＡ作用显著,ＮＡＡ作用不显著,它们作用大小依次为：２,４－Ｄ〉ＩＢＡ〉６－ＢＡ〉ＮＡＡ,诱导何首乌愈伤组织产生的最佳激素配比为：ＭＳ＋２,４－Ｄ１ｍｇ／Ｌ＋６－ＢＡ１＋ＩＢＡ０．５。     

不同产地何首乌的ITS序列研究

目的研究不同产地何首乌的ITS片段遗传差异性,分析该片段在何首乌道地性的DNA分子鉴别和野生资源品种的鉴定及种质资源研究中的意义。方法从来自不同原产地的何首乌中提取总DNA,以核基因组ITS通用引物为引物进行扩增,扩增产物经纯化后,用PCR产物直接测序法进行测序。结果各样品rDNA的ITS及5.8S rDNA完全序列,18S和26S rDNA部分序列,共约648bp,其中ITS1长度为195bp,5.8S长度为164bp,ITS2长度为189bp。序列间共有17个变异位点。结论ITS序列可对何首乌的道地性做出鉴别,对野生资源品种的鉴定具有较好的分辨性。     

不同产地何首乌药材质量及差异研究

目的:分析何首乌20个产地3种功效组分(二苯乙烯苷类、游离蒽醌类、结合蒽醌类)6种活性成分的含量与产地地理、气候因子的相关性,以期得到各类功效成分形成的关键影响因素,同时为研究何首乌在截疟解毒、润肠通便、补益肝肾3种功能活性上的潜在优势提供参考。方法:采用高效液相色谱法(HPLC)一测多评法对大黄素、大黄素甲醚、大黄素-8-O-β-D葡萄糖苷、大黄素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷、顺式二苯乙烯苷、反式二苯乙烯苷进行含量测定,利用SPSS进行方差分析、简单相关分析和典型相关分析。结果:不同产地何首乌各成分含量差异有统计学意义(P<0.05),蒽醌类和二苯乙烯苷类含量最高分别在四川冕宁和湖北武当山;综合环境因子分析,经度与游离蒽醌成分密切相关,低温有利于结合蒽醌成分积累,温度与海拔对二苯乙烯苷成分含量影响较大。结论:结合不同成分的药理活性初步推断,低温、低湿的四川冕宁及其相似环境所产的何首乌,具有截疟解毒、润肠通便的潜在优势;高海拔、大温差的湖北武当山及其相似环境所产的何首乌,具有补益肝肾的潜在优势,该研究结果对何首乌精准药材生产具有一定的指导意义。     

超临界CO2萃取去除何首乌中的有害元素

目的:采用超临界CO2配合萃取技术脱除何首乌中有害元素Cu、Pb、As。方法:以二乙基二硫代氨基甲酸钠(NaDDC)作配合剂,乙醇为改性剂,考察了配合萃取方式、时间、压力、温度、配合剂用量等因素对何首乌中有害元素萃取的影响。结果:建立了有害元素脱除工艺为:萃取压力28MPa,萃取温度60℃,m(药材)∶m(NaDDC)=5∶1,m(药材)∶m(乙醇)=1∶1,静态萃取1 h,动态萃取2 h。在此条件下,何首乌中Cu、Pb、As的脱除率均达60%以上,而生理活性成分2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量保持不变。结论:本研究成果为寻找中药材中有害元素一种非破坏性的脱除方法提供了参考。