肾小管间质纤维化大鼠肾脏转化生长因子-β1和纤溶酶原激活物抑制剂-1的定量分析

目的 观察肾小管间质纤维化(TIF)大鼠转化生长因子-β1(TGF-β1)、纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)mRNA及其蛋白的定量表达,探讨TGF-β1、PAI-1在TIF中的作用及二者之间的相互影响机制.方法 SD大鼠60只,随机分为假手术(SOR)组和单侧输尿管梗阻手术(UUO)组.输尿管结扎后剪断制备UUO模型.分别于手术后第7、14、21天,每组各处死10只大鼠,留取手术侧.肾脏标本,采用病理、实时定量PCR、Western blotting等方法动态观察二组大鼠第7、14、21天梗阻侧肾脏组织学变化和TGF-β、PAI-1在梗阻侧肾脏中的表达情况.采用SPSS 10.0软件进行统计学分析.结果 1.HE、Masson染色结果:SOR组术后第7、14、21天.肾脏未见纤维化改变.UUO组术后第7天肾小管上皮细胞宅泡变性,肾间质炎性反应细胞浸润,术后第14天肾脏纤维化程度加重,术后第21天呈重度纤维化.2.术后第7天开始UUO组TGF-β1 mRNA和蛋白表达量显著高于SOR组(P<0.05,0.01);术后第14天开始UUO组PAI-1 mRNA和蛋白表达量显著高于SOR组(P<0.05,0.01).3.相关性分析:肾小管间质损害与TGF-β1、PAI-1蛋白表达量均呈显著正相关(r=0.975 P<0.01;r=0.801 P<0.05);肾脏TGF-β1表达量与PAI-1呈显著正相关(r=0.937 P<0.01).结论 TGF-β1、PAI-1足肾间质纤维化形成促进因素之一.TGF-β1诱导PAI-1过度表达,PAI-1是TGF-β1的下游靶基因之一,PAI-1也可影响TGF-β1的表达,二者共同促进肾脏纤维化形成.     

双环醇对单侧输尿管梗阻大鼠肾小管上皮细胞转分化的影响

目的 探讨双环醇对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾小管上皮细胞转分化的作用.方法 采用UUO 致肾间质纤维化大鼠模型.将81只大鼠随机均分为假手术组、模型组和治疗组.从制模后当天起,给予治疗组200 mg·kg-1·d-1双环醇灌胃.给予假手术组和模型组等量9 g·L-1盐水灌胃处理.术后第7、14、21天各随机处死大鼠9只,留取其肾组织标本备用.用苏木精-伊红(HE)、Masson 染色光镜下观察其肾间质的病理学改变、评定其小管间质损伤及肾间质纤维化的程度;用免疫组织化学方法检测其肾组织内转化生长因子-β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达水平;用反转录-PCR方法检测其肾组织TGF-β1 mRNA的表达水平.结果 随着输尿管梗阻时间延长,模型组肾间质可见有较多炎性细胞浸润,弥散性肾小管空泡变性,部分小管灶状扩张、萎缩、坏死,甚至间质纤维化;治疗组肾小管间质损伤及肾间质纤维化改变程度在各时间点均较模型组减轻(Pa<0.05).与假手术组比较,模型组大鼠肾间质纤维组织相对面积显著扩大(P<0.05),肾组织内TGF-β1、α-SMA及TGF-β1 mRNA的表达均显著上调(Pa<0.01).双环醇干预后,上述上调指标均被显著抑制(Pa<0.01).结论 双环醇可能通过抑制UUO大鼠肾小管上皮细胞转分化而减轻肾间质纤维化.     

转化生长因子-β1/Smad3信号通路在肾间质纤维化大鼠肾脏组织中的表达和作用

目的 通过检测单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾脏组织转化生长因子-β1(TGF-β1)和Smad3的表达,探讨TGF-β1/Smad3信号通路在肾间质纤维化(RIF)中的作用.方法 雄性6周龄Wistar大鼠48只随机分为假手术组和UUO组,每组24只.UUO组大鼠麻醉后,背侧切口行左侧输尿管结扎术,假手术组大鼠在同样条件下仅探及肾包膜.分别于造模第7、14、21、28天每组各处死6只大鼠,取其左侧肾脏.HE染色和Masson染色行肾脏病理学检查,并计算RIF指数,应用Western blot法和实时荧光定量-PCR检测肾脏组织Smad3蛋白及其mRNA表达;免疫组织化学法检测肾脏组织TGF-β1、Ⅳ型胶原蛋白(Col-Ⅳ)和纤维连接蛋白(FN)的蛋白表达.结果 1.与假手术组大鼠比较,UUO组大鼠各时间点:(1)病理学检查显示,肾小管上皮细胞萎缩,胶原纤维化形成,弥散性单核细胞、淋巴细胞浸润,RIF指数显著增高(P<0.01),梗阻时间越长,RIF指数越高;(2)肾脏组织Smad3蛋白及其mRNA表达均增高(Pa<0.05),梗阻时间越长,表达水平越高;(3)肾脏组织TGF-β1、Col-Ⅳ和FN的蛋白表达均增高(Pa<0.05),梗阻时间越长,表达水平越高.2.相关性分析:(1)UUO组大鼠肾脏组织Smad3、TGF-β1蛋白表达与RIF指数均呈显著正相关(r=0.520、0.727,Pa< 0.01);(2)Col-Ⅳ和FN的蛋白表达与RIF指数均呈显著正相关(r= 0.794、0.786,Pa<0.01);(3) Smad3的蛋白表达与TGF-β1、Col-Ⅳ和FN的蛋白表达均呈显著正相关(r= 0.592、0.672、0.508,Pa<0.01).结论 UUO所致RIF大鼠肾脏组织TGF-β1及Smad3表达均显著升高,梗阻时间越长,表达水平越高,RIF程度越重.TGF-β1/Smad3信号通路可能参与了RIF的发生发展.     

PAX2在单侧输尿管梗阻大鼠肾小管间质纤维化中的作用

目的 通过检测PAX2和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾脏组织中的表达,探讨PAX2在肾小管间质纤维化中的作用机制.方法 雄性6周龄Wistar大鼠48只随机分为模型组和对照组,每组各24只.模型组在无菌条件下于左侧背部肋下切口行左侧输尿管结扎术,对照组只探及肾包膜,不结扎输尿管.于造模第7、14、21、28天各处死大鼠6只,取其左侧肾脏组织行HE和Masson染色检测肾脏病理改变,计算肾小管间质纤维化指数.采用实时荧光定量PCR检测其肾组织PAX2 mRNA表达,免疫组织化学方法 检测其肾脏组织PAX2及α-SMA蛋白表达.结果 1.病理结果 显示:对照组各时间点肾小管及间质均无明显变化.随着梗阻时间的延长,模型组大鼠肾小管间质纤维化指数逐渐增高(Pa<0.01).2.对照组大鼠肾组织仅有少量PAX2 mRNA表达,而模型组第7天表达增高,随着梗阻时间的延长,PAX2 mRNA表达逐渐增高,于第28天达最高,与对照组各时间点比较,PAX2 mRNA表达有显著性差异(Pa<0.01).3.模型组大鼠肾小管上皮细胞PAX2的蛋白表达及肾间质α-SMA的蛋白表达于第7天均增高,随梗阻时间的延长,PAX2蛋白表达及α-SMA表达逐渐增高,于第28天最高,与对照组各个时间点比较有显著性差异(Pa<0.01).4.模型组大鼠肾小管上皮细胞PAX2蛋白表达与肾间质α-SMA表达呈显著正相关(r=0.880 P<0.05),PAX2蛋白及α-SMA的表达均与肾小管间质纤维化指数均呈显著正相关(r=0.886,0.918 Pa<0.05).结论 PAX2可能参与UUO大鼠模型肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化,使间质中肌成纤维细胞的数量增多,引起细胞外基质积聚增加,导致了肾小管间质纤维化的发生发展.     

α-平滑肌肌动蛋白在大鼠肾小管间质纤维化中的表达及意义

目的探讨α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）在大鼠肾小管间质纤维化过程中的表达及意义。方法雄性3月龄SD大鼠60只,随机分为对照组和模型组各30只,以腺嘌呤灌胃法建立大鼠肾小管间质纤维化模型,对照组以等体积20g/L淀粉溶液灌胃,分别于实验第7、12、17周时随机处死10只大鼠,进行血Cr、BUN、24h尿蛋白定量和尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）检测,光镜下观察肾组织病理变化及免疫组织化学法检测肾脏转化生长因子-β1（TGF-β1）、α-SMA表达情况。结果与对照组比较,模型组各时相点大鼠尿蛋白、尿NAG、血Cr、BUN均升高（Pa〈0.01）;7周时模型组即有肾小管间质损害,随病程进展,肾小管间质损害逐渐加重;肾脏α-SMA表达明显增多。结论α-SMA表达增多促进肾小管间质纤维化发生。     

Prohibitin在单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化中的表达和作用

目的探讨Prohibitin(PHB)在单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾脏组织中的表达和作用。方法48只雄性6周龄Wistar大鼠随机分为假手术组和模型组,每组24只,模型组大鼠麻醉后,背侧切口行左侧输尿管结扎术,假手术组只探及肾包膜,造模后分别于第7、14、21、28天各处死6只大鼠,行肾脏病理检查并计算肾间质纤维化指数,采用实时荧光定量PCR和免疫组织化学方法检测肾脏组织中PHB与转化生长因子-β1(TGF-β1)mRNA和蛋白表达。结果与假手术组相比,模型组各时间点肾间质纤维化指数显著增高(P<0.01),梗阻时间越长纤维化指数越高;模型组各时间点PHB的mRNA和蛋白表达显著减少(P<0.01),梗阻时间越长,表达量越低;模型组各时间点TGF-β1的mRNA和蛋白的表达显著增高(P<0.01),梗阻时间越长,表达量越高。模型组PHB的蛋白表达与间质纤维化指数呈显著负相关(r=-0.825),TGF-β1的蛋白表达与间质纤维化指数呈显著正相关(r=0.995),PHB蛋白表达与TGF-β1蛋白表达呈显著负相关(r=-0.786)。结论UUO大鼠肾脏组织PHB表达显著降低,可能参与肾间质纤维化的发生发展。     

喹那普利对单侧输尿管结扎大鼠肾纤维化拮抗作用的研究

目的 研究喹那普利对梗阻性肾病肾间质纤维化的影响及其机制。方法 30只SD大鼠随机分为3组：假手术组（n＝6）、单侧输尿管结扎(UUO)组（n＝12）和喹那普利组（n＝12）。喹那普利组在UUO术前1 d予喹那普利10 mg·kg-1·d-1 灌胃,假手术组及UUO组予同等体积生理盐水灌胃。各组大鼠分别于术后14和28 d取梗阻侧肾组织。采用Masson染色及免疫组化方法观测各组大鼠的肾间质容量、肾组织α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）及转化生长因子-β1（TGF-β1）蛋白水平的变化。以原位杂交法检测各组大鼠肾组织TGF-β1 mRNA表达的变化。结果 与假手术组比较,UUO组大鼠肾小管明显萎缩塌陷或极度扩张,伴肾间质增生,输尿管梗阻后4周时上述病理改变尤为明显,肾间质容量明显升高(P<0.001)。免疫组化染色检测结果显示,UUO组α-SMA及TGF-β1蛋白水平均明显高于假手术组,且随梗阻时间的延长呈进行性升高(P<0.001)。原位杂交结果表明,UUO组TGF-β1 mRNA在肾小管间质中的表达显著高于假手术组(P<0.001)。喹那普利组肾间质容量、肾小管间质中TGF-β1 mRNA表达、TGF-β1蛋白和α-SMA水平均显著低于UUO组(P<0.05或<0.01)。结论 喹那普利可明显抑制肾组织分泌TGF-β1,可能的机制之一是减少其下游效应细胞-肌纤维母细胞的活化,从而减缓UUO大鼠肾纤维化进程。     

转化生长因子-β与肾脏固有细胞表型转分化

转化生长因子-β(TGF-β)是诱导肾脏固有细胞向肌纤维母细胞(MFb)转分化的重要效应分子.MFb通过大量表达α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和细胞外基质(ECM)而参与肾小管间质纤维化(TIF)及肾小球硬化(GS).适时阻断这些进程有望成为治疗增殖性肾脏疾病的新靶点.     

水飞蓟素对单侧输尿管梗阻大鼠肾小管间质纤维化的干预作用

目的通过单侧输尿管梗阻（UUO）诱导肾小管间质纤维化（TIF）大鼠模型，探讨水飞蓟素对Ⅲ型胶原蛋白（Col111）和转化生长因子-β1（TGF—β1）在小管间质中表达变化的影响。方法SD大鼠72只随机分为假手术组、模型组、水飞蓟素治疗组（治疗组），各24只。模型组和治疗组采用左侧输尿管结扎术造成UUO，假手术组游离左侧输尿管而不结扎作为对照。治疗组术前24h开始予水飞蓟素灌胃[30mg／（kg&#183;d），1次／d]。模型组与假手组同一时间予等量9g／L盐水灌胃。各组分别于实验第7、14、21天各处死动物8只，光镜下评价各组大鼠TIF病理积分，免疫组织化学法检测各组肾组织中TGF-β1和ColⅢ表达。结果1．治疗组第7、14、21天肾小管间质病理改变均明显轻于模型组（Pa〈0．05），但重于假手术组（Pa〈0．01）；2．免疫组织化学显示治疗组肾脏TGF-β1和ColⅢ表达均明显低于模型组，却高于假手术组（Pa〈0．01）。3．模型组大鼠在14、21d时TGF-β1和ColⅢ的表达量与小管间质损伤积分呈正相关（r=0．781，0．762 Pa〈0．01）。结论水飞蓟素可能通过抑制TGF-β1过度表达，使肾间质ColⅢ沉积减少而起到保护肾脏的作用。     

波生坦对单侧输尿管梗阻大鼠的肾脏保护作用

目的探讨波生坦对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾脏病理改变的影响。方法雄性Wistar大鼠.随机分为假手术组(S)、手术组(UUO)和波生坦组(Bos),各12只。制备UUO大鼠模型。Bos组给予波生坦100mg/(kg·d)灌胃.术后4个时间点观察血常规、肾脏大体和组织病理。免疫组织化学测定肾组织转化生长因子-β1(TGF-β1)表达.放射免疫法测定血浆、梗阻侧肾脏残尿内皮素-1(ET—1)浓度。结果梗阻侧肾脏大体观为体积增大,肾盂扩张,肾皮质变薄。TGF-β1阳性细胞数表达增多,组织病理改变,显示间质纤维化。结论波生坦能减轻UUO大鼠肾间质纤维化程度,其可能通过ET和TGF-β1机制起作用。     

肾积水大鼠模型肾脏CD40、血管内皮生长因子和转化生长因子-β表达的意义

目的探讨肾小管间质CD3 T淋巴细胞浸润,及肾小管上皮细胞CD40、血管内皮生长因子(VEGF)和转化生长因子-β(TGF-β)在梗阻性肾积水大鼠肾小管损伤和肾间质纤维化发病机制中的作用及其关系。方法22只健康雄性Wistar-Imamichi(WI)大鼠和5只纯合子WI种群先天性肾积水(CHN)大鼠饲养于塑料笼中,至4周龄通过手术完全或部分阻断其输尿管制备单侧输尿管梗阻(UUO)模型。6周龄时处死全部大鼠,取其肾组织进行常规病理和免疫组织化学分析,观察肾组织基本病理变化、肾间质纤维化、小管间质CD3 T淋巴细胞浸润及肾小管上皮细胞CD40、VEGF和TGF-β表达,并与正常对照组大鼠进行比较。结果与正常对照组比较:CHN、完全单侧输尿管梗阻(CUUO)和部分单侧输尿管梗阻(PUUO)组多数积水肾肾盂肾盏明显扩张,扩张的肾盂肾盏上方的肾实质变薄,肾小管上皮细胞萎缩,肾小球数量减少。肾间质增宽,伴细胞浸润和纤维化。各实验组积水肾间质区CD3 T淋巴细胞均较对照组显著增多(Pa<0.05),其中CUUO组和PUUO组肾间质CD3 T淋巴细胞较CHN组显著增多(Pa<0.05),而CUUO组与PUUO组间比较无显著性差异(P>0.05)。与正常对照组比较,CUUO组、PUUO组和CHN组积水肾肾小管CD40、TGF-β表达均显著增强(Pa<0.05);PUUO组积水肾肾小管CD40表达与CHN组比较显著增强(P<0.05);CUUO组肾小管CD40阳性表达率介于PUUO组和CHN组之间,与两组比较均无显著性差异(Pa>0.05)。肾小管TGF-β表达在3组间均无显著性差异(P>0.05)。3组VEGF肾小管阳性表达率均低于对照组,其中PUUO组和CHN组肾小管表达率显著降低(Pa<0.05),CUUO组肾小管表达率与对照组比较无显著性差异。相关性分析发现,各组大鼠小管间质CD3 T淋巴细胞数与肾小管CD40表达率呈正相关(P<0.05),与肾小管VEGF表达呈负相关(P<0.05)。肾小管上皮细胞TGF-β表达与其他3个细胞因子间均无相关性(P>0.05)。结论肾间质CD3 T淋巴细胞浸润、肾小管CD40和TGF-β表达显著增加,VEGF表达显著减弱,可能是肾脏慢性炎性反应和肾间质纤维化发生、发展的重要影响因素。     

硫化氢在单侧输尿管梗阻大鼠肾小管间质纤维化中的水平变化及其干预影响

目的：本研究通过构建单侧输尿管梗阻（UUO）诱导肾小管间质纤维化（TIF）大鼠模型,观察硫化氢（H2S）在血浆中的水平变化及两种关键合成酶胱硫醚β-合酶（CBS）、胱硫醚γ-裂解酶（CSE）在梗阻肾中的表达,并探讨H2S在TIF中的作用。方法：构建UUO致TIF大鼠模型,96只Sprague Dawley大鼠随机分为假手术组、模型组、NaHS低剂量治疗组（低剂量组）和NaHS高剂量治疗组（高剂量组）,每组24只。治疗组分别于术后立即腹腔注射NaHS 1.4 μmol/kg和7 μmol/kg,每日两次;假手术组和模型组同时腹腔注射等量生理盐水。各组分别于术后7 d、14 d及21 d随机处死8只大鼠,采用去蛋白法测定血浆H2S含量;梗阻肾组织行苏木精-伊红及Masson染色,观察肾脏病理学变化;免疫组化方法检测梗阻肾组织CBS、CSE蛋白表达;RT-PCR法检测梗阻肾组织CBS mRNA、CSE mRNA的表达。结果：UUO大鼠肾小管间质损伤程度与血浆H2S浓度呈负相关（r=-0.891,P0.05）。结论：H2S 参与UUO致肾小管间质纤维化的发展过程,而且CBS/H2S体系和CSE/H2S体系在TIF中发挥关键作用。外源性补充NaHS可以延缓TIF的进展。     

丹参酮ⅡA对大鼠肾间质纤维化的抑制作用

目的 探讨丹参酮ⅡA对大鼠肾间质纤维化的作用及可能机制.方法 雄性SD大鼠30只随机分为假手术组、模型组和丹参酮ⅡA组.假手术组仅找到输尿管,不行结扎术.模型组结扎大鼠左侧输尿管建立肾间质纤维化动物模型.丹参酮ⅡA组术前24 h经腹腔注射丹参酮ⅡA,剂量为1.5 mg/(kg*d),手术操作同模型组.术后第10天取梗阻侧肾组织行HE、Masson染色,观察其肾间质病理改变.免疫组织化学法检测其肾组织转化生长因子-β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及Ⅰ型胶原的蛋白表达与定位.反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测3者mRNA水平.结果 输尿管结扎术后第10天梗阻侧出现明显的肾间质纤维化,肾组织TGF-β1、α-SMA和Ⅰ型胶原的蛋白及mRNA表达均显著增加(Pa<0.01).经丹参酮ⅡA治疗后,肾间质纤维化程度减轻,肾组织TGF-β1、α-SMA及Ⅰ型胶原表达均下调(Pa<0.05).结论 丹参酮ⅡA对大鼠肾间质纤维化有明显的抑制作用,其机制可能与下调TGF-β1表达,抑制成纤维细胞增殖和表型转化,减少胶原沉积有关.     

外源性硫化氢对单侧输尿管梗阻大鼠肾小管间质纤维化的影响

目的观察单侧输尿管梗阻（UUO）诱导肾小管间质纤维化（TIF）大鼠模型α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、Ⅲ型胶原（Col-Ⅲ）表达的变化,以及外源性补充硫化氢（H2S）供体硫氢化钠（NaHS）的干预效果。方法96只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、NaHS高剂量组、低剂量组。UUO诱导建立SD大鼠TIF动物模型。高、低剂量组分别于术后立即腹腔注射NaHS 1.4μmol/kg和7.0μmol/kg,2次/d。假手术组和模型组腹腔注射等量生理盐水。各组分别于UUO术后第7、14及21天随机处死8只,采用去蛋白法测定血浆H2S含量;HE及Masson染色观察肾脏病理学变化并评估TIF指数;免疫组化方法检测肾组织α-SMA、Col-Ⅲ表达。结果模型组大鼠梗阻侧肾脏受损,TIF指数升高,经NaHS干预后高、低剂量组的TIF指数均下降,除高、低剂量组的差异无统计学意义外,其余各组间的差异均有统计学意义（P<0.01）;外源性补充NaHS可下调肾组织α-SMA、Col-Ⅲ表达,差异有统计学意义（P<0.05),但低、高剂量组差异无统计学意义（P>0.05）。结论 UUO诱导TIF与内源性H2S水平降低相关,外源性补充NaHS部分通过下调肾组织α-SMA、Col-Ⅲ表达,延缓TIF进展;但外源性补充H2S在抗TIF中不存在剂量依赖性。     

百令胶囊对肾小管间质纤维化大鼠肾小管上皮-间质转分化的干预作用

目的探讨百令胶囊对小管间质纤维化大鼠小管上皮-间质转分化的干预作用。方法利用腺嘌呤诱导建立肾小管间质纤维化大鼠模型,实验SD大鼠随机分为模型组、干预组、对照组各30只,分别于实验第7周、12周、17周收获动物各10只,进行功能学和肾脏组织病理学检测和观察。利用免疫组织化学对骨形态发生蛋白-7(BMP-7)、转化生长因子-β1(TGF-β1)和α-平滑肌肌动蛋白(-αSMA)在肾小管间质纤维化大鼠中的表达变化进行动态观察及百令胶囊的干预影响。结果实验第7周模型组大鼠即表现出大量蛋白尿、小管损伤、间质的轻度纤维化和炎症细胞浸润(P<0.01);随病程进展,上述病变呈进行性加重(P<0.01)。百令胶囊干预组动物在实验第7周、12周功能学组织学的改善同实验组相比有明显差异(P<0.01),17周后二者无显著差异。免疫组织化学显示百令胶囊12周前能显著上调BMP-7的表达和降低-αSMA和TGF-β1在肾脏小管间质中的表达(P<0.01),12周后这种变化无差异。结论百令胶囊在发病早期通过有效干预上皮-间质转分化达到改善肾脏纤维化的作用,随着肾小管间质纤维化程度的加重,百令胶囊逐渐失去其阻断作用。     

肾小管间质纤维化大鼠基质金属蛋白酶-9/金属蛋白酶组织抑制因子-1的表达

目的 观察肾小管间质纤维化（TIF）大鼠基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）的表达，探讨MMP-9、TIMP-1在11F中的作用。方法 选用SD大鼠48只。随机分为假手术组和模型组，制备单侧输尿管梗阻（UUO）模型。采用病理及免疫组织化学等方法动态观察组大鼠d7、d14、d21梗阻侧肾脏的组织学变化和MMP-9、TIMP-1在梗阻肾小管间质中表达情况。结果 各时间点假手术组TIMP-1表达量低于模型组（Pa〈0．01），MMP-9／TIMP-1表达量比值均高于模型组（P。〈0．01）。各时间点肾小管间质损害与TIMP-1表达量呈正相关（r=0．901P〈0．01），与MMP-9／TIMP-1比值呈负相关（r=-0．937 P〈0．01）。结论 TIMP-1可能是肾间质纤维化形成促进因素之一，并参与纤维化形成的全过程。MMP-9／TIMP-1失衡参与TIF的发生机制。     

黄芩苷对单侧输尿管梗阻肾间质纤维化大鼠模型的治疗作用及机制研究

目的 探讨不同剂量黄芩苷在不同时间对单侧输尿管梗阻(UUO)肾间质纤维化模型大鼠的治疗作用及机制.方法 将64 只Sprague Dawley 大鼠随机分为假手术组、模型组、黄芩苷小剂量治疗组(小剂量组)和黄芩苷大剂量治疗组(大剂量组),每组再随机分为7 d 组和14 d 组,每组8 只.采用左侧输尿管结扎的方法制作大鼠UUO 模型.苏木精-伊红染色观察各组肾脏病理改变;ELISA 法检测各组血清TGF-β1、Notch1 和Jagged1 的含量;免疫组化法检测各组TGF-β1 和Notch1 的表达.Pearson 法对各检测指标间行相关分析.结果 苏木精-伊红染色结果显示7 d 和14 d 模型组肾间质炎性细胞浸润、水肿,肾小管扩张、结构紊乱,肾小管上皮细胞变性、坏死,肾小球结构基本正常;大、小剂量组病变程度均较模型组减轻.7 d 和14 d 模型组大鼠血清TGF-β1 含量及肾组织TGF-β1 阳性细胞数均较假手术组明显增高(PPP>0.05);但模型组肾组织Notch1 阳性细胞数较假手术组增加,而大、小剂量组均较同时间点模型组下降(PP>0.05).大鼠血清TGF-β1 与Notch1 含量变化呈正相关(r=0.650,Pr=0.727,Pr=0.743,P结论 黄芩苷治疗可减轻UUO 大鼠肾间质纤维化,其机制可能与通过抑制Notch1 信号通路从而抑制TGF-β1 的表达有关.     

维A酸对新生大鼠高体积分数氧性肺纤维化的干预作用

目的 探讨维A酸(RA)对新生大鼠高体积分数氧(高氧)性肺组织纤维化的影响,观察转化生长因子-β1(TGF-β1)及平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在高氧肺纤维化中的作用.方法 将出生12 h内SD大鼠随机分为空气对照组(Ⅰ组),空气加RA组(Ⅱ组),高氧组(Ⅲ组),高氧加BA组(Ⅳ组),每组各20只.Ⅲ、Ⅳ组持续暴露于850mL/L氧气中,余2组暴露于空气中.Ⅱ、Ⅳ组腹腔注射RA(溶于亚麻油)500μg/(kg·d),Ⅰ、Ⅲ组腹腔注射等量亚麻油.暴露后14 d,用HE染色法观察各组肺组织病理改变及放射状肺泡计数(RAC),应用Masson三色染色、纤维化评分判断各组肺纤维化程度.免疫组织化学染色法检测各组肺组织TGF-β1、α-SMA表达.应用SPSS 13.0软件进行统计学分析.结果 光镜观察Ⅰ、Ⅱ组大鼠14 d时肺泡无纤维化表现;Ⅲ组肺组织纤维增生;Ⅳ组病理改变明显减轻,未见成纤维细胞及胶原沉积.高氧14 d时,Ⅲ组大鼠肺组织肺纤维化评分、TGF-β1及α-SMA蛋白表达水平明显升高,与Ⅰ、Ⅱ及Ⅳ组比较均有显著性差异(Pa＜0.05),RAC值明显低于各组(Pa＜0.05).Ⅳ组病理改变减轻,肺纤维化评分、TGF-β1及α-SMA表达水平Ⅳ组与Ⅰ、Ⅱ组比较均无显著性差异(Pa＞0.05).结论 TGF-β1、α-SMA在高氧性肺纤维化中可能起重要作用.RA早期干预高氧性肺纤维化可明显减轻肺纤维化的发生.     

FTY720对单侧输尿管梗阻大鼠肾小管周围毛细血管的保护作用

目的 观察单侧输尿管梗阻大鼠模型中肾小管周围毛细血管(PTC)病变情况及FTY720对其干预作用.方法 采用单侧输尿管结扎术建立肾间质纤维化模型,将45只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和FTY720治疗组.FTY720治疗组术前3d予0.2g·L-1FTY7200.5 mg·kg-1 ·d-1灌胃,假手术组和模型组予等量9 g·L-1盐水.每组分别于术后7、14、21 d各处死5只大鼠,处死前收集血清和24h尿液,观察肾功能和24h尿蛋白变化.取梗阻侧肾行组织学检查,观察肾间质纤维化程度和炎性细胞浸润情况.免疫组织化学方法检测其肾组织CD141、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅲ型胶原(COLⅢ)的表达水平.结果 与假手术组比较,模型组大鼠肾功能下降、肾间质纤维化明显,肾间质大量炎性细胞浸润,α-SMA、COLⅢ表达明显增加,肾间质微血管病变严重,术后7、14、21 d PTC密度分别为(116.80±8.92) mm-2、(98.80±3.96) mm-2、(62.20±7.01) mm-2(Pa＜0.05).与模型组比较,FTY720治疗组大鼠肾功能下降程度轻,肾间质浸润细胞数明显减少,肾间质纤维化程度、α-SMA、COLⅢ表达明显减少,且术后7、14、21 d PTC密度均高于模型组,分别为(132.50±8.32) mm-2、(119.40±12.21)mm-2、(85.00±2.59) mm-2 (Pa＜0.05).PTC密度与肾小管间质纤维化程度、肾间质炎性细胞浸润数、血清肌酐、BUN、24h尿蛋白量均呈负相关(r=-0.75、-0.72、-0.64、-0.65、-0.67,Pa＜0.01).结论 FTY720能明显减少单侧输尿管梗阻大鼠肾间质炎性细胞浸润及肾间质毛细血管丢失,保护肾功能,减轻肾间质纤维化程度.     

小儿肾小球疾病的肾小管上皮细胞表型特征及其纤维化关系探讨

目的 探讨肾小管间质的损害、细胞的表型转化在小儿。肾小球疾病进展中的作用。方法 对123例患儿。肾穿刺标本进行免疫组织化学染色，观察α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波型蛋白(Vimentin，Vim)及Ⅳ型胶原(ColⅣ)的表达。对44例伴有小管间质损害的患儿进行增殖细胞核抗原(PCNA)的表达检测。结果 123例中：①肾小管间质无损害者占23．6％，轻度损害者占46.3％，中度损害者占22．8％，重度损害者占7.3％。②肾小管间质有损害者，肾小管上皮细胞可出现间质细胞标志物Vimentin及α-SMA的表达。③随着肾小管间质损害加重，α-SMA的表达增加，重度损害者。肾间质内出现大量α-SMA阳性细胞，并伴有Ⅳ型胶原(ColⅣ)的聚积增多；α-SMA的表达与肾小管间质损害的程度、球性硬化及Scr呈正相关。④PCNA在轻度、中度损害。肾小管间质病变时表达增加，在重度损害时表达减弱。轻度、中度。肾小管间质病变时，PCNA的表达与α-SMA的表达、肾小管间质损害及球性硬化呈正相关，与肌肝清除率呈负相关。重度。肾小管间质病变时，PCNA与肾小管间质损害程度、尿蛋白呈负相关。结论 随着肾小球疾病发展，肾小管上皮细胞和间质成纤维细胞可发生向肾间质肌纤维母细胞的表型转化，参与肾间质纤维化的发展肾小管间质损害越重，患儿的病情也越重。