星形胶质细胞上的清道夫受体与神经炎症的关系

在神经退行性疾病的发生与发展中,脑中始终存在着以胶质细胞激活为主要特征的炎症反应。星形胶质细胞作为脑中最丰富的神经胶质细胞群,可分泌大量的促炎因子和抑炎因子,在中枢神经系统的炎症反应中发挥着至关重要的调节作用。星形胶质细胞表达有多种模式识别受体参与炎症反应,清道夫受体是其中重要的一种。清道夫受体是一种细胞表面糖蛋白,能够识别广泛而多样的配基,具有多种生物学功能,对星形胶质细胞上多个与炎症相关的信号通路的激活具有重要影响,可产生宿主防御和促进炎症等多种作用,进而参与了星形胶质细胞对神经炎症的调节,在神经退行性疾病等多种疾病的发生发展中起着重要作用。本文主要介绍了在星形胶质细胞上表达的几种清道夫受体及其功能,详细总结了这些清道夫受体如何调控与炎症相关的信号转导通路,进而参与星形胶质细胞对于神经炎症的调节。     

白细胞介素-4对原代星形胶质细胞炎症因子的影响

目的：探讨白细胞介素‐4（IL‐4）对星形胶质细胞炎症因子释放的影响。方法选取新生1～2 d的C57乳鼠,取大脑皮层制备原代星形胶质细胞,传代3次,检测星形胶质细胞纯度,IL‐4刺激后,用Q‐PCR来检测多种炎症因子的释放。结果原代培养的星形胶质细胞纯度高达95％,用IL‐4刺激后,抗炎因子A RG1、CD206、TGFβ、IFNβ、IL‐10表达升高,促炎因子 TNFα、IL‐6表达降低。结论 IL‐4对星形胶质细胞抗炎因子的分泌有促进作用,对促炎因子的分泌有抑制作用。     

缺氧处理后鼠脑星形胶质细胞基因表达谱的初步分析

目的：本实验利用基因芯片技术研究缺氧处理后鼠脑星形胶质细胞基因表达谱的变化，以深入认识星形胶质细胞在缺氧处理后基因表达变化规律，为进一步全面认识神经胶质细胞在缺血情况下基因变化规律以及神经胶质细胞与神经元在损伤条件下相互依存关系提供实验依据和理论基础。方法：用TRIzol试剂经过多个步骤提取各组制备好的星形胶质细胞样本总RNA；利用基因芯片技术获取缺氧处理后鼠脑星形胶质细胞的基因表达谱；利用Gene Ontology Consortium分析系统、Gene Cards数据库和Pubmed检索系统对基因表达谱进行初步分析。结果：基因表达谱：在基因芯片上测定了4096个点，共有差异表达基因153个，其中，已知差异表达基因45个，未知差异表达基因108个(EST片段)；己知差异表达基因：在45个已知差异表达基因中，表达下调的基因有22个，表达上调的基因有23个，未见报道的与缺氧处理相关基因28个，已报道的有17个；已知差异表达基因功能聚类：共8类。结论：本实验获得鼠脑星形胶质细胞缺氧处理后的基因表达谱；首次发现28个与缺氧相关的未见报道基因；初步明确已知差异表达基因在缺氧处理后的基本变化规律．     

脑星形细胞瘤组织中肝细胞生长因子及其受体的表达

目的探讨肝细胞生长因子(HGF)mRNA及其受体(c-Met)mRNA在脑星形细胞瘤组织中的表达规律,及其与肿瘤增殖、肿瘤血管生成、临床病理及预后之间的关系。方法用原位杂交法检测76例脑星形细胞瘤组织标本HGFmRNA、c-MetmRNA的表达;用免疫组化法检测增殖细胞核抗原(PCNA)及CD34在肿瘤中的表达,计算微血管密度(MVD),并结合临床和病理资料进行分析。结果HGFmRNA、c-MetmRNA、PCNA在低级别脑星形细胞瘤组织中阳性率分别为34·5%、44·8%和15%±9%,在高级别脑星形细胞瘤组织中阳性率分别为74·5%、78·7%和48%±12%(P<0·05),MVD在低级别和高级别脑星形细胞瘤组织中分别为17个±7个和31个±13个(P<0·05),与患者的性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤直径无显著相关(P>0·05);c-Met表达与HGF、PCNA的表达及MVD呈显著相关;Cox回归多因素分析显示,病理级别、肿瘤部位、HGF、c-Met、PCNA和MVD6个因素对星形细胞瘤患者生存期的影响具有统计学意义。结论HGF/c-Met在星形细胞瘤的形成与发展过程中起重要作用,它可促进肿瘤增殖及瘤组织内微血管的发生,并对其预后判断有指导意义。     

表皮生长因子受体配体在星形胶质细胞上的表达

目的:探讨表皮生长因子受体(EGFR)配体在星形胶质细胞上的表达。方法:采用RT-PCR技术检测星形胶质细胞上表皮生长因子、转化生长因子α、肝素结合上皮生长因子和双调蛋白的表达。结果:表皮生长因子、转化生长因子α、肝素结合上皮生长因子在星形胶质细胞上均有表达。而双调蛋白在星形胶质细胞上无表达。结论:星形胶质细胞在促进神经发生和有丝分裂后期神经元存活和分化中发挥重要的作用。     

人胎脑星形胶质细胞原代分离培养及鉴定

目的探索并建立人胎脑星形胶质细胞的原代培养方法.方法分别以组织块法和消化法分离、培养和纯化人胎脑星形胶质细胞,并用形态学观察和免疫细胞化学方法进行鉴定.结果组织块法的培养效果优于消化细胞培养法;原代培养、纯化的细胞生长稳定,经鉴定为星形胶质细胞.结论采用组织块法原代培养人胎脑星形胶质细胞,简单易行、所获细胞纯度高,可用于体外星形胶质细胞的进一步研究.     

星形胶质细胞参与脑内炎症致大鼠多巴胺能神经元变性

目的 观察脑室内注射脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)引起的脑内炎症对大鼠黑质多巴胺能神经元的慢性毒性作用,探讨星形胶质细胞是否参与脑内炎症致大鼠多巴胺能神经元变性.方法 60只SD大鼠分为LPS实验组和生理盐水(NS)对照组(n=30).大鼠右侧脑室一次性注射LPS 20μl(1.25μg/μl)或同体积的NS.于给药后不同时间检测大鼠行为,免疫组织化学染色法观察黑质内酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元,并用Western blot检测大鼠黑质纹状内胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达.结果 1)LPS给药后大鼠平均运动速度呈进行性下降,与相应NS对照组相比,在16周[(2.12±0.43) cm/s,(1.67±0.36)cm/s,t=2.537,P<0.05]、20周[(2.03±0.31)cm/s,(1.46±0.33) cm/s,t=3.981,P<0.01]和24周[(2.00±0.36)cm/s,(1.46±0.32)cm/s,t=3.545,P<0.01]均差异有显著性.LPS给药后大鼠黑质TH阳性神经元数量减少,在24周时是相应NS对照组的75.4% (P<0.01).2) LPS实验组大鼠给药后2周时,黑质纹状体部位GFAP蛋白表达量比相应NS对照组明显增高,为NS对照组的258%(P<0.01).到给药后24周时,LPS实验组大鼠黑质纹状体内GFAP蛋白表达量又比NS对照组明显增高,为NS对照组的168%(P<0.05).结论 侧脑室注射LPS引发大鼠黑质部位星形胶质细胞激活,参与了黑质多巴胺能神经元的变性过程.     

左旋咪唑对实验性变态反应性脑脊髓炎星形细胞反应的影响

目的：观察左旋咪唑对实验性变态反应性脑脊髓炎（EAE）中枢神经系统星形胶质细胞的影响。方法：用豚鼠全脊髓匀浆免疫Wistar大鼠建立EAE动物模型，应用免疫组化法观察左旋咪唑在不同给药方式（1次给药或3次给药）和不同剂量（分别为5、10、30mg/kg）的情况下对EAE大鼠炎性脱髓鞘病灶内或周围星形胶质细胞数量和形态影响的变化。结果：左旋咪唑可提高Wistar大鼠EAE的发病率，加重其临床症状，在免疫后16d，炎性脱髓鞘病灶内和周围星形胶质细胞数量增多，胞体肥大，其中3次给药的作用强于1次给药，在3次给药时剂量为10mg/kg时最重。结论：左旋咪唑可加重EAE星形胶质细胞反应。     

糖化终末产物受体在大鼠胰腺星形细胞中的表达

目的研究胰腺星形细胞(PSCs)是否表达糖化终末产物受体(RAGE),并探讨糖化终末产物(AGEs)对RAGE表达的调节作用。方法分离培养SD大鼠PSCs,采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫细胞化学检测静息和活化的PSCs RAGE在mRNA和蛋白水平的表达,同时用RT-PCR检测AGEs刺激后RAGE表达的变化。结果静息和活化的PSCs均表达RAGE,且活化后表达水平提高;AGEs能上调RAGE的表达。结论静息和活化的PSCs均表达RAGE,活化的PSCs RAGE表达上调,提示PSCs是AGEs作用的靶细胞。     

黄岑素对脊神经结扎大鼠星形胶质细胞极化及其炎症反应的影响

目的 既往研究已肯定黄岑素的镇痛作用,但其调节机制需进一步明确。文中分析黄岑素对神经病理性疼痛大鼠星形胶质细胞极化和炎性因子的影响,为神经病理性疼痛治疗提供依据。方法 采用脊神经结扎(SNL)对36只雄性SD大鼠建立神经病理性疼痛模型,并按照完全随机方法将大鼠分为sham组、SNL组及SNL+BE组(n=12)。SNL+BE组于术后开始腹腔注射黄岑素(30 mg/kg),1次/d,连续7 d。在术前1 d以及术后1、3、5、7 d分别检测各组大鼠机械缩足反应阈值(MWT)和热缩足潜伏期(TWL)的变化。于术后7 d收集脊髓腰膨大段。免疫荧光双标法检测GFAP和A1星形胶质细胞标志物C3的共表达;免疫印迹法检测C3和A2星形胶质细胞标志物S100A10的蛋白表达;实时荧光定量PCR检测C3、S100A10和炎症相关因子(TNF-α、IL-1β和IL-6)的mRNA表达。结果 与sham组相比,SNL组术后机械痛阈值和热痛阈值均显著降低(P<0.01);与SNL组相比,SNL+BE组机械痛和热痛明显减轻(P<0.01)。与SNL组相比,SNL+BE组大鼠脊髓GFAP和C3免疫荧...     

腺苷及其受体对中性粒细胞在炎症中的作用与机制研究进展

腺苷,作为机体内ATP代谢过程中的重要产物,通过激活腺苷受体（adenosine receptors, AR）（A1R、A2AR、A2BR、A3 R）参与了机体的许多生理及病理过程的调节。腺苷受体在体内的各个组织器官具有广泛的分布,在免疫系统尤为丰富,如中性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞、树突状细胞均有较高表达。炎症,是机体抵御外来刺激的一种防御性免疫机制,过度的炎症反应则会对机体造成损伤,中性粒细胞是其中重要的参与者之一,腺苷及其受体的调节密切参与了其黏附、迁移、细菌杀伤作用、炎症介质产生、凋亡等过程,从而对炎症起到调节作用。     

NMDA受体在缺血缺氧性脑损伤中的研究进展

缺血缺氧性脑损伤是当今社会一个倍受关注的疾病,N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyL-D-aspartate,NMDA)受体及其亚基与介导缺血缺氧性脑损伤密切相关。缺血缺氧性脑损伤的发病机制复杂,现仅就缺血缺氧性脑损伤时NMDA受体的作用以及临床研究进展作如下综述。     

脊髓星形胶质细胞FGFR3在神经病理性疼痛中的表达改变及作用

目的观察成纤维细胞生长因子受体3(fibroblast growth factor receptor 3,FGFR3)在坐骨神经分支选择结扎后神经病理性疼痛中大鼠脊髓的表达变化。方法 40只SD雄性大鼠,分为假手术对照组(sham)和手术组(SNI),每组20只。使用坐骨神经分支选择结扎方式建立大鼠神经病理性疼痛模型,观察sham组和SNI组大鼠术前1 d以及术后1、3、5、7 d的行为学改变并检测2组大鼠的机械痛阈,采用免疫荧光双标观察2组大鼠术后7 d脊髓背角星形胶质细胞FGFR3和胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)的共表达,Western blot法检测SNI术后各时间点2组大鼠FGFR3蛋白表达。结果术前1 d 2组大鼠机械痛阈无明显差异(P>0.05),术后1、3、5、7 d SNI组大鼠机械痛阈值分别为(6.67±2.12)、(3.17±0.99)、(2.33±0.65)、(1.75±0.31),相应时间点sham组大鼠机械痛阈值分别为(12.75±2.83)、(12.33±2.84)、(12.08±2.57)、(11.50±2.65),SNI组大鼠机械痛阈在各时间点较sham组明显降低(P<0.05);术后7 d患侧脊髓背角GFAP阳性表达的细胞,FGFR3也呈阳性表达;术后1、3、5、7 d sham组大鼠脊髓FGFR3蛋白表达分别为(0.192 8±0.013 0)、(0.213 6±0.021 4)、(0.294 6±0.025 1)、(0.266 4±0.027 3),相应时间点SNI组大鼠脊髓FGFR3蛋白表达分别为(0.280 4±0.015 3)、(0.328 2±0.026 3)、(0.567 7±0.027 0)、(0.528 8±0.032 8),与sham组比较,SNI组脊髓FGFR3蛋白表达随时间增长而上调(P<0.05)。结论在神经病理性疼痛过程中FGFR3表达下调并可能参与GFAP的激活,提示FGFR3在神经病理性疼痛的发生以及发展过程中可能发挥着重要的作用。     

Toll样受体4在人肺泡上皮细胞株中的表达及其在细胞炎症反应中的作用

目的 明确人Ⅱ型肺泡上皮细胞是否表达Toll样受体4(TLR4),探讨TLR4在慢性阻塞性肺疾病(COPD)气道炎症中的作用.方法 将人Ⅱ型肺泡上皮细胞系A549细胞分为正常对照组、转染腺病毒E1A质粒(E1A+组)和转染不含有腺病毒E1A的空白质粒组(E1A-组),分别以不同浓度的脂多糖(LPS,0、0.1、1、10μg/ml)、白细胞介素1β(IL-1β,0、0.1 ng/ml)、香烟提取物(CSE,0、10%、20%、40%)刺激.刺激后12、24 h,用反转录聚合酶链反应技术检测各组细胞IL-8 mRNA和TLR4 mRNA的表达,用蛋白质印迹技术测定核因子κB(NF-κB)亚单位P65蛋白的表达.结果 10μg/ml LPS、0.1 ng/ml IL-1β或20%CSE刺激24 h后,E1A+组IL-8 mRNA表达量(2.82、1.87、4.70)明显高于正常对照组(0.95、0.78、1.02,均P<0.05)和E1A-组(0.97、0.81、1.12,均P<0.05).10μg/ml的LPS刺激后12、24 h,E1A+组细胞TLR4 mRNA表达水平分别为4.52、7.99,明显高于正常对照组(1.91、3.81,均P<0.05)和E1A-组(2.00、3.88,均P<0.05);IL-1β也可增加TLR4 mRNA表达.CSE刺激对各组细胞TLR4 mRNA表达水平均无明显影响.3种刺激因子均可引起各组细胞NF-κB亚单位P65蛋白表达水平增高.结论 人Ⅱ型肺泡上皮细胞表达TLR4,LPS、IL-1β引起IL-8释放可能与TLR4介导的NF-κB激活有关.     

星形胶质细胞在糖尿病脑病中的变化及作用

糖尿病可引起中枢神经系统病变,功能上表现为学习和记忆能力的减退,病理学证实脑内结构和功能改变,即糖尿病脑病。星形胶质细胞是中枢神经系统的重要组成部分,数量庞大且功能广泛。现已发现,在糖尿病的早期,脑内星形胶质细胞就已发生改变,表现为细胞体积和数量的变化,随后相继发生糖原、能量供应、递质转运体和酶活性、以及炎症介质和神经营养因子释放的改变,对糖尿病脑病的发生可能有重要作用。     

核受体NR4A1蛋白在大鼠卵泡发育中的定位及其表达规律

目的：通过研究核受体NR4A1蛋白在正常雌性SD大鼠不同卵巢功能周期和不同发育阶段卵泡及黄体细胞中的表达，推测其在卵泡发育中的生物学作用。方法：利用阴道涂片的方法，按不同的卵巢功能周期将实验大鼠24只分为四组，采集不同时期卵巢标本，采用免疫组织化学方法观察卵巢中NR4A1蛋白的定位及其表达情况。结果：NR4A1蛋白主要表达于卵巢卵泡膜细胞和黄体细胞胞质中，且在成熟卵泡卵泡膜细胞的表达量显著高于生长卵泡（P〈0．01）；在新鲜黄体细胞中表达量最高，显著高于动情前期和动情期的生长卵泡和成熟卵泡以及陈旧黄体细胞中的表达水平（P〈0．01）。结论：核受体NR4A1蛋白表达与卵泡的发育、成熟、闭锁、黄体萎缩有明显的相关性。     

大鼠脑组织局灶性挫伤后ApoE和S-100表达及其意义的研究

目的:研究脑损伤后神经元和神经胶质细胞内ApoE和S-100的表达随脑损伤时间变化的规律及其在脑损伤时间推断中的作用.方法:通过建立大鼠脑挫伤模型,利用免疫组化染色法(S-P法)对对照组及伤后不同时间组内脑细胞中的S-100和ApoE两种蛋白进行检测,并作统计学分析.结果:伤后0.5 h组大脑皮质神经元中ApoE即出现显著表达(P<0.01),而S-100阳性细胞在伤后2 h开始表达显著增强(P<0.01).随着损伤时间的延长,ApoE和S-100阳性细胞数目及阳性表达范围逐渐扩大.伤后3 d组ApoE阳性细胞表达数量及染色强度达到高峰,且分布广泛,随后表达下降;到5 d组时,S-100阳性产物达到高峰,后下降,但仍高于对照组.结论:脑挫伤后S-100和ApoE在损伤局部的染色变化有一定的时间规律性,可以用于脑挫伤的时间推断.     

Time-dependent changes of astrocytes following microinjection of kainic acid and irradiation by gamma-knife in adult rat brain

Asisoneofthemostimportantsupportivecellsinthecentralnervoussystem(CNS),astro-cyteisessentialinmaintainingahomeostaticmi-croenvironmentforneurons.WhenCNSisin-jured,astrocyteswillrespondbyhyperplasiaandhypertrophywithoverexpressionofGFAP-Suchphenomenonwasnamedasastrogliosisorreactiveastrocytosis,whichhasbeeninvestigatedformanyyearsinvariousinjurymodels.SinceGFAPisthemajorcytoskeletalproteininastrocytes,changesinGFAPamountorstructurewillinevitablychangemorphologyandfunctionofastrocytes.No…     

CVB3感染对星形胶质细胞表达agrin的影响及意义

目的检测柯萨奇B3病毒（coxsackievirus group B type3,CVB3）感染体外培养的星形胶质细胞后集聚蛋白（agrin）的表达变化及其意义。方法采用免疫细胞化学的方法鉴定培养的星形胶质细胞,在显微镜下观察CVB3感染后的细胞形态,并用RT-PCR方法扩增CVB3RNA的正负链以确证感染成功,用RT-PCR检测CVB3感染细胞后agrin的动态表达变化。用脂质体将agrin反义质粒pcDNA3-As-AG转染到星形胶质细胞,并用RT-PCR检测转染的细胞中agrin的表达。3H-TdR掺人法测定CVB3不同感染时间点的星形胶质细胞裂解液和经agrin反义质粒pcDNA-As-AG转染细胞后的细胞裂解液对T细胞增殖的影响。结果（1）CVB3感染星形胶质细胞后agrin的表达水平下调。（2）病毒感染后随着agrin表达量的降低,星形胶质细胞裂解液对T细胞的活化增殖作用也降低。未转染和空质粒转染的细胞裂解液对T细胞的活化增殖有促进作用,而用反义核酸技术下调星形胶质细胞agrin表达后,星形胶质细胞裂解液对T细胞增殖的促进作用也随之下降,进一步证实agrin表达水平的下调可影响T细胞的活化和增殖。结论CVB3感染星形胶质细胞后agrin表达水平下凋,降低对T细胞活化增殖的能力,这可能是CVB3病毒性脑炎中,病毒逃逸机体免疫清除的一种机制。     

大鼠液压冲击脑损伤脑组织Toll样受体4表达与神经功能的关系

目的 观察大鼠液压冲击脑损伤Toll样受体4（TLR4）表达变化,探讨其与神经功能的关系.方法 成年雄性SD大鼠56只,随机分为损伤组（n=48）和假手术组（n=8）.采用液压冲击制备颅脑损伤模型,术后1h、6h、12h、24 h、3d、7d对动物进行神经功能评分,并用干湿重法、免疫组化法和Western Blot 分别测定水肿脑组织含水量及TLR4蛋白表达.结果 神经功能评分6h出现下降[（3.86±0.42）分],24 h下降至最低值[（2.65±0.32）分],3d逐渐升高[（3.25±0.17）分];免疫组化和Western Blot均显示水肿脑组织TLR4的表达均6h开始增高,24h至3d达到高峰,7d后降低.线性相关性分析发现TLR4表达与神经功能评分呈显著负相关（r1=-0.824,rw=-0.867,P＜0.05）.结论 大鼠颅脑液压冲击伤TLR4出现高表达,可能诱发了继发性炎性脑损伤导致神经功能障碍.