硒对氟致大鼠肾脏损伤保护作用的实验观察

目的 观察硒对氟致大鼠肾脏损伤的保护作用,探讨硒的最佳作用剂量及作用靶点.方法 断乳SD雄性大鼠80只,按体质量随机分8组,每组10只.对照组饮用自来水;染氟组饮用50 mg/L的氟化钠溶液;低、中、高硒组分别饮用0.375、0.750、1.500 mg/L的亚硒酸钠溶液;氟+低、中、高硒组分别饮用50 mg/L的氟化钠和0.375、0.750、1.500 mg/L的亚硒酸钠两两组合的溶液.染毒6个月后,测大鼠肾脏组织的氧化水平和核因子κB(NF-κB)的表达量.结果 染氟组大鼠体质量[(695.95±55.89)g]低于对照组[(782.69±56.12)g,P＜0.01],染氟组谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性[(55.86±5.09)U/mgprot]与对照组[(68.66±4.52)U/mgprot]比较,差异无统计学意义(P＞0.05),但有降低的趋势.染氟组大鼠总抗氧化能力(T-AOC)水平[(7.54±1.35)U/mgprot]低于对照组[(9.03±0.37)U/mgprot,P＜0.05],染氟组丙二醛(MDA)水平[(3.86±0.31)nmol/mgprot]高于对照组[(3.14±0.32)nmol/mgprot,P＜0.05].氟+高硒组GSH-Px活性[(74.99±8.41)U/mgprot]高于染氟组[(55.86±5.09)U/mgprot,P＜0.05],MDA水平[(3.17±0.20)nmol/mgprot]低于染氟组[(3.86±0.31)nmol/mgprot,P＜0.05].染氟组、高硒组和氟+低硒组的NF-κB的表达水平(0.360±0.015,0.367±0.007,0.376±0.006)高于对照组(0.312±0.022,P均＜0.05),氟+高硒组(0.312±0.005)低于染氟组(0.360±0.015,P＜0.05).结论 1.500 mg/L硒是本实验条件下硒对慢性氟中毒致大鼠肾脏损伤的最佳保护作用剂量,NF-κB可能是硒拮抗氟中毒的药物靶点.

Abstract：

Objective To explore the protective effect of selenium, an antioxidant, on fluoride-induced renal injury in rats and find out the optimal level of selenium against fluoride toxicity and its valid molecular target.Methods All 80 male weanling SD rats were randomly divided into 8 groups by body weight as follows: normal control group(drinking tap water), fluoride exposed group (drinking water containing 50 mg/L of NaF), low, middle,high selenium exposed groups(drinking water containing 0.375, 0.750, 1.500 mg/L of Na2SeO3) and low, middle,high Se-fluoride groups (drinking water containing both 50 mg/L NaF and three doses of Na2SeO3 as abovementioned, respectively). After 6 months, the rats were killed then the oxidation level and nuclear factor κB(NF-κB)expression level in kidney were measured. Results The weight of the fluoride exposed group[(695.95 ± 55.89 )g]was significantly deceased than the controls[(782.69 ± 56.12)g, P ＜ 0.01]. Glutathione peroxidase(GSH-Px)activity of fluoride exposed group[(55.86 ± 5.09)U/mgprot] was not significantly different but decreased. Tatal antioxidant capacity (T-AOC) activity in fluoride exposed group [(7.54 ± 1.35)U/mgprot] significantly decreased than the controls[(9.03 ± 0.37 )U/mgprot, P ＜ 0.05]. In addition, a significant increase of malondialdehyde ( MDA )in fluoride exposed group[(3.86 ± 0.31 )mnol/mgprot, P ＜ 0.05] was observed than the controls[(3.14 ± 0.32)nmol/mgprot, P ＜ 0.05]. GSH-Px activity of high Se-fluoride group[(74.99 ± 8.41 )U/mgprot] was significantly higher than the fluoride exposed group[(55.86 ± 5.09)U/mgprot, P ＜ 0.05] and its MDA level[(3.17 ± 0.20)nmol/mgprot] was lower than the fluoride exposed group[(3.86 ± 0.31 ) nmol/mgprot, P ＜ 0.05]. NF-κB expression levels of fluoride group, high selenium group and low Se-fluoride group(0.360 ± 0.015,0.367 ± 0.007,0.376 ± 0.006,respecyively) were obviously increased compared with the controls(0.312 ± 0.022, P ＜ 0.05); it was significantly lower in high Se-fluoride group(0.312 ± 0.005) than in fluoride exposed group(0.360 ± 0.015, P ＜ 0.05). Conclusions Na2SeO3 of 1.5 mg/L is the optimal dose against chronic fluorosis on kidney injury under this experimental condition.NF-κB is likely to be a target molecule of the selenium as an antagonist on fluorosis.     

硫辛酰胺对db/db小鼠肝损伤的保护作用研究

目的观察硫辛酰胺(ALM)对db/db小鼠肝损伤的保护作用及可能机制。方法db/db小鼠随机分为糖尿病组(DM)和ALM组,C57BL/6J小鼠为正常对照组(NC),每组各6只。ALM组于第9周时予ALM[100 mg/(kg·d)]进行灌胃干预,干预8周后处死小鼠,检测生化指标及肝组织谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、过氧化氢酶(CAT)活性及丙二醇(MDA)表达量,油红O、HE染色观察肝脏病理学改变,Western blot法检测肝组织中核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素氧合酶1(HO-1)蛋白水平。结果与NC组比较,DM组体重、TG、TC、FBG升高,MDA含量升高[(0.73±0.04)vs(0.92±0.17)nmol/mg,P<0.05],CAT活性降低[(1.08±0.18)vs(0.52±0.14)U/mg,P<0.05],ALT、AST活性升高[(16.85±3.84)vs(22.42±4.56)U/g,(6.07±1.91)vs(8.19±1.51)U/g,P<0.05],Nrf2、HO-1的表达升高[(0.33±0.25)vs(1.81±0.34),(0.29±0.13)vs(1.25±0.19),P<0.05]。与DM组比较,ALM组体重、TG、TC降低,MDA降低[(0.92±0.17)vs(0.56±0.11)nmol/mg,P<0.05],CAT活性升高[(0.52±0.14)vs(0.91±0.20)U/mg,P<0.05],ALT、AST活性降低[(22.42±4.56)vs(17.08±5.08)U/g,(8.19±1.51)vs(5.10±0.46)U/g,P<0.05],Nrf2、HO-1表达降低[(1.81±0.34)vs(1.01±0.30),(1.25±0.19)vs(0.52±0.17),P<0.05]。结论ALM可抑制T2DM小鼠肝损伤的发生发展,其机制可能是通过改善肝组织脂质沉积、抑制氧化应激,调节Nrf2、HO-1蛋白表达以实现。     

湖北钉螺部分保护酶活性的性别差异

目的探索不同性别湖北钉螺之间的保护酶系统是否存在差异。方法采集自然状态下湖北钉螺,分别测定雌、雄两性钉螺体内的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(POD)活性。结果正常钉螺体内SOD活性雌性钉螺为(30.22±3.64)U/mgprot,雄性钉螺为(32.97±5.69)U/mgprot,不同性别之间无统计学意义(P0.05);雌性钉螺的CAT活性(8.16±1.11)U/mgprot大于雄性的(5.66±1.83)U/mgprot(P0.05);POD活性雌螺为(3.51±0.50)U/mgprot雄螺为(2.91±0.49)U/mgprot,雌性大于雄性(P0.05)。结论雌性湖北钉螺部分保护酶活性强于雄性钉螺。为进一步探索钉螺的免疫功能和生理特性提供参考,以便更好地灭螺并控制血吸虫病的传播。     

慢性间歇低氧对大鼠肝脏的损伤及4-羟基-2,2,6,6-四甲基哌啶的干预作用

目的 探讨慢性间歇低氧(CIH)对大鼠肝脏损伤机制和4-羟基-2,2,6,6-四甲基哌啶( tempol)的干预作用及其可能机制.方法 应用CIH大鼠模型,模拟OSAS慢性间歇低氧/再氧和病理生理过程.32只雄性Wistar大鼠采用随机数字表法分为低氧对照组、低氧干预组、低氧盐水组和常氧对照组,共4组,每组8只.CIH各组最低氧浓度均为5％,低氧频率均为30次/h,8 h/d.暴露6周后处死大鼠,取肝脏组织行石蜡切片HE染色观察肝细胞形态变化,酶联免疫吸附法(ELISA)测定大鼠肝脏中核因子-κB、谷胱甘肽过氧化物转移酶(GSH-PX)和丙二醛的水平.结果 肝脏病理检查可见低氧对照组及低氧盐水组肝细胞胞膜破坏,细胞水肿,胞质稀疏,核深染;低氧干预组、常氧对照组未见明显肝脏损害.与常氧对照组比较:低氧对照组和低氧盐水组核因子-κB[(12.4±2.0) ng/g,(12.2±1.9) ng/g]和丙二醛[(101±22)μmol/g,(99±18) μmol/g]水平均升高(均P＜0.05),GSH-PX活性[(88±17) U/mg,(90+15) U/mg]均下降(均P＜0.05);与低氧对照组、低氧盐水组比较,低氧干预组核因子-κB[(7.8 +1.3) ng/g]和丙二醛[(59±10) μmol/g]水平均下降(均P＜0.05),GSH-PX活性[(181±29) U/mg]均升高(均P＜0.05);低氧干预组与常氧对照组比较,GSH-PX和丙二醛水平差异均无统计学意义(均P＞0.05),但核因子-κB水平高于常氧对照组[(4.1±0.9) ng/g,P＜0.05];低氧对照组与低氧盐水组比较以上指标差异均无统计学意义(均P＞0.05).核因子-κB水平与GSH-PX活性和丙二醛水平分别呈负相关(r=-0.0754,P＜0.01)和正相关(r =0.689,P＜0.01)关系.结论 CIH可通过氧化应激和激活前炎性转录因子核因子-κB造成肝脏损伤;tempol可通过抗氧化作用清除活性氧干预CIH肝脏损害的发生.     

异丙酚预处理对急性肺损伤脑组织Gq/11蛋白表达的干预作用

目的 观察异丙酚预处理后Gq/11蛋白在急性肺损伤(acute lung injury,ALI)大鼠脑组织中的动态变化,探讨异丙酚是否通过影响Gq/11蛋白的表达对脑组织起保护作用.方法 用尾静脉注射油酸法复制ALI大鼠模型,将24只健康雄性Wistar大鼠随机分为对照组、ALI组和异丙酚预处理组.检测各组大鼠血气(pH值、PaO2、PaCO2)、平均动脉血压(MABP)以及血浆和脑组织乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、丙二醛(MDA).Western blot检测各组大鼠脑组织中的Gq/11蛋白含量.结果 异丙酚预处理组Gq/11蛋白含量为(133.89±21.59)%,较对照组增加(33.89±21.59)%(P＜0.01),但低于ALI组[(165.84±30.27)%,P＜0.05].异丙酚预处理组及ALI组PaO2较对照组明显降低(P值均＜0.01),但异丙酚预处理组高于ALI组(P＜0.01).异丙酚预处理组及ALI组MABP均较对照组降低(P值均＜0.01),异丙酚预处理组低于ALI组(P＜0.01).异丙酚预处理组脑组织LDH和CK活性分别为(1.51±0.58)U/mg、(35.83±7.09)U/mg,MDA含量为(4.70±1.59)U/mg,均低于ALI组[分别为(2.38±0.72)U/mg(P＜0.01),(44.31±8.15)U/mg(P＜0.01),(6.78±1.38)U/mg(P＜0.05)].血浆LDH和CK活性、MDA含量呈现与之相似的变化趋势.结论 异丙酚预处理能减轻ALI时脑的损伤程度,其保护作用可能与下调Gq/11蛋白有关.     

自身免疫性甲状腺疾病患者血清纤维化指标观察

目的 观察自身免疫性甲状腺疾病(AITD)患者血清Ⅲ型前胶原(PCⅢ)和透明质酸(HA)水平.探讨其临床意义.方法 按甲状腺功能将114例AITD患者分为3组:①Graves病甲状腺功能亢进(简称甲亢)组(38例),②桥本甲状腺炎甲状腺功能低下(简称甲低)组(35例),③桥本甲状腺炎亚临床甲状腺功能低下(简称哑甲低)组(41例),另设40例健康人作为对照组.用免疫化学发光法检测以上各组人群血清游离三碘甲腺原氨酸(FT3),游离甲状腺素(FT4),超敏促甲状腺激素(sTSH)水平.用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清PCⅢ水平,用放射免疫分析法(RIA)检测血清HA水平.结果 甲亢组血清FT3,FT4水平[(18.35±6.19),(76.28±23.49)pmol/L]明显高于对照组[(4.75±0.31),(16.12±3.27)pmol/L],sTSH水平[(0.15±0.07)mU/L]明显低于对照组[(3.78±0.15)mU/L],差异均有统计学意义(P＜0.01),甲低组FT3,FT4水平[(3.36±0.26),(6.37±2.19)pmol/L]均低于对照组(P＜0.05),sTSH[(44.58±13.29)mU/L]明显高于对照组(P＜0.01),亚甲低组FT3,FT4水平[(4.86±0.45),(15.26±2.78)pmol/L]与对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05),sTSH[(14.26±4.73)mU/L]明显高丁对照组(P＜0.01).甲亢组血清PCⅢ水平[(4.63±1.22)μg/L]明显高于甲低组[(3.64±1.12)μg/L],亚甲低组[(3.54±1.17)μg/L],对照组[(3.56±1.07)μg/L],组问两两比较差异有统计学意义(P＜0.05),而甲低组,哑甲低组,对照组PCⅢ水平任意两组间比较,差异均无统计学意义(P＞0.05),甲低组血清HA水平[(31.13±10.28)μg/L]高于甲亢组[(22.24±7.22)μg/L],亚甲低组[(22.43 4-7.99)μg/L]和对照组[(23.09±9.19)μg/L],组间两两比较差异均有统计学意义(P＜0.05),而甲低组,亚甲低组,对照组HA水平任意两组比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 在排除肝纤维化等病变的情况下,检测甲亢患者血清PCⅢ,对了解早期的心肌纤维化有重要意义,对病程较长的甲亢患者,血清HA,PCⅢ的榆测可作为早期发现肝损伤和纤维化的参考依据.     

维持性血液透析患者外周血单个核细胞核因子κB活性与微炎症、氧化应激状态及心血管疾病的关系

目的:探讨维持性血液透析(MHD)患者外周血单个核细胞(PBMC)核因子κB (NF-κB)活性与微炎症、氧化应激状态及心血管疾病(CVD)的关系. 方法:选取MHD治疗3个月以上的患者(32例),以体检健康者(12例)为对照组.采用ELISA法检测受试者PBMC的NF-κB活性,比色法检测血清总抗氧化能力(TAOC)及丙二醛(MDA).Pearson相关和线性回归分析PBMC的NF-κB活性与其他指标的相关性.二分类Logistic回归分析NF-κB活性与CVD的关系. 结果:MHD患者PBMC的NF-κB活性[(1 142.4±413.0)ng/mg核蛋白vs(208.3±39.5) ng/mg核蛋白,P＜0.05]、血清高敏C反应蛋白(hsCRP)(3.2 mg/L vs0.5 mg/L,P＜0.05)、TAOC[ (21.9±6.6)U/ml vs (15.7±2.3)U/ml,P＜0.05]和MDA[ (6.80±0.86) nmol/ml vs (3.89±0.51) nmol/ml,P＜0.05]皆显著高于对照组.单次HD后MHD患者PBMC的NF-κB活性显著升高[(2 076.5±690.1)ng/mg核蛋白vs(1 142.2 ±413.0)ng/mg核蛋白,P＜0.05],TAOC显著降低[(13.6±5.0) U/ml vs(21.9±6.6)U/ml,P＜0.05].Pearson相关分析显示PBMC的NF-κB活性与白细胞计数(r=0.454,P＜0.05)、血清hsCRP(r =0.590,P＜0.05)及MDA(r=0.390,P＜0.05)呈正相关.线性回归分析显示白细胞计数(β=0.338,P＜0.05)、血清hsCRP(β =0.440,P＜0.05)及MDA(β=0.319,P＜0.05)皆与PBMC的NF-κB活性独立相关.Logistic回归分析显示PBMC的NF-κB活性升高(＞1 170.0 ng/mg核蛋白)是CVD的独立危险因素(OR=8.47,P＜0.05). 结论:MHD患者PBMC的NF-κB活性显著升高,且与微炎症、氧化应激状态及CVD相关,可作为患者的炎症标志物.     

转染人白介素-10基因对未成熟心肌缺血再灌注损伤的影响

目的:观察转染人白细胞介素10(hIL-10)基因对未成熟心肌缺血再灌注(IR)的影响并探讨其可能作用机制。方法:24只3~4周龄的幼兔被随机分为空白对照组、空载对照组和基因转染组,每组8只。以阻断左冠左室支30 min再开放120 min,建立IR动物模型;阻断前经左室内注射重组腺病毒转染hIL-10。结果:IR后,空载对照组的血流动力学各项指标恢复率明显差于空白对照组(P均0.05),基因转染组的各项指标明显优于空载对照组(P0.05);与空白对照组比较,空载对照组和基因转染组的丙二醛(MDA)含量[(6.33±1.03)μmol/gwet∶(14.35±1.28)μmol/g wet∶(8.78±1.22)μmol/g wet]和髓过氧化物酶(MPO)活性[(5.42±0.72)U/g wet∶(19.35±2.32)U/g wet∶(9.26±1.26)U/g wet]明显升高(P均0.05),超氧化物歧化酶(SOD)活性明显下降[(215.25±26.65)U/g wet∶(93.82±12.61)U/g wet∶(176.33±19.84)U/g wet,P均0.05];与空载对照组比较,基因转染组的MDA含量和MPO活性明显下降,SOD活性明显升高(P均0.05)。结论:经左室内注射重组腺病毒载体介导hIL-10转基因有效可行,可减轻未成熟心肌缺血再灌注损伤。     

血水草血根碱对钉螺肝脏损伤的研究

目的分析血水草血根碱（SAN）对钉螺肝脏糖原、重要酶活性及脂质过氧化的影响,探讨SAN对钉螺肝脏损伤的机理。方法自血水草粉末中分离SAN,配制5 mg/L水溶液,每500 ml溶液投放50只钉螺,25℃浸泡36 h,解剖活螺,分离肝脏,另设清水对照组。测定钉螺肝脏糖原和丙二醛（MDA）含量以及丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、酸性磷酸酶（ACP）、碱性磷酸酶（AKP）、超氧化物岐化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）的活性,采用独立样本t检验对统计结果进行分析。结果 SAN组和清水对照组钉螺的肝脏糖原含量分别为（12.151±0.204）mg/g和（18.113±0.163）mg/g,差异有统计学意义（P〈0.05）;MDA水平分别为（5.298±0.441）nmol/mgprot和（4.351±0.197）nmol/mgprot,差异无统计学意义（P〉0.05）;SAN组钉螺的肝脏ALT、AST、ACP、AKP、SOD分别为（2.760±0.076）U/mg-prot、（68.723±2.295）U/mgprot、（407.949±19.868）U/gprot、（191.287±0.771）U/gprot、（48.452±0.193）U/mgprot,清水对照组钉螺分别为（1.104±0.000）U/mgprot、（49.448±1.626）U/mgprot、（344.475±30.186）U/gprot、（121.905±3.127）U/gprot、（38.814±2.765）U/mgprot,两组差异均具有统计学意义（P均〈0.05）,SAN组和清水对照组钉螺肝脏POD活性分别为（22.170±0.018）U/mgprot、（21.747±0.264）U/mgprot,两组POD差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 SAN可引起钉螺肝脏糖原含量及一些重要酶活性的改变而导致钉螺肝功能损伤。     

氟致体外培养人脐静脉血管内皮细胞损伤的实验观察

目的 观察不同剂量的氟对体外培养人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)的影响.方法 在HUVEC培养液中加入不同剂量的氟化钠(NaF),分别为0(对照)100、400、700、1000、2000 μmol/L,每组设6个复孔,连续培养48 h,收集细胞培养液与细胞.瑞氏-吉姆萨染色观察细胞形态,吖啶橙荧光染色测定细胞凋亡,四唑氮蓝(MT T)比色法检测细胞活性;分光光度法检测细胞培养液中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、丙二醛(MDA)水平及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性;RT-PCR法检测细胞iNOS mRNA和eNOS mRNA表达水平;双抗体夹心ELISA法检测细胞培养液中细胞黏附因子(ICAM-1)、血管黏附因子(VCAM-1)水平.结果 随染氟剂量增加,HUVEC细胞数量减少,结构改变;400～2000μmol/L NaF组SOD活性[(6.627±0.213)、(6.668±0.152)、(5.935±0.122)、(4.755±0.182)kU/L]较对照组[(7.457±0.398)kU/L]降低(P＜0.05或＜0.01),GSH-Px活性[(481.284±43.785)、(492.223±16.474)、(382.762±25.167)、(293.687±24.881)kU/L]较对照组[(585.078±47.323)kU/L]降低(P＜0.05或＜0.01),MDA水平[(0.609±0.011)、(0.646±0.016)、(0.852±0.013)、(1.188±0.045)nmol/L]较对照组[(0.512±0.027)nmol/L]升高(P＜0.05或＜0.01);iNOS活性[(3.604±0.115)、(3.615±0.075)、(3.848±0.103)、(4.275±0.079)kU/L]较对照组[(2.798±0.136)kU/L]增强(P均＜0.01),iNOS mRNA表达增强,eNOS活性[(5.539±0.079)、(5.503±0.064)、(5.226±0.142)、(4.809±0.107)kU/L]较对照组[(5.996±0.155)kU/L]减弱(P＜0.05或＜0.01),eNOSmRNA表达减弱;ICAM-1水平[(0.852±0.102)、(0.886±0.061)、(0.961±0.158)、(1.418±0.167)μg/L]较对照组[(0.687±0.046)μg/L]升高(P＜0.05或＜0.01),VCAM-1水平[(2.719±0.197)、(2.946±0.167)、(3.173±0.225)、(3.613±0.153)μg/L]较对照组[(2.375±0.067)μg/L]升高(P均＜0.01).结论 高剂量氟降低抗氧化酶活性,使一氧化氮代谢紊乱,细胞因子异常表达,以此抑制血管内皮细胞生长、结构改变并致细胞凋亡,为高氟致血管内皮损伤的重要因素.

Abstract：

Objective To study the effect of different concentrations of fluoride on cultured human umbilical vein vascular endothelial cells(HUVEC). Methods Different doses of sodium fluoride (NaF) were added to HUVEC culture medium, fluoride concentrations were 0(control), 100,400,700,1000,2000 μmol/L, respectively,6 re-set hole in each group. After continuous culture for 48 h, cells and culture medium were collected. Cell morphology was studied by Wright-Giemsa staining; cells apoptosis was determined by acridine orange fluorescence staining; cell activity was measured by methyl thiazolyl tetrazolium (MTT) assay; superoxide dismutase (SOD),glutathione peroxidase(GSH-Px) activity, malonaldehyde(MDA) content, induced nitricoxide synthase(iNOS), and endothelia nitricoxide synthase(eNOS) activity in cell culture medium were determined by spectrophotometry; cell iNOS mRNA and eNOS mRNA expression were detected by RT-PCR; intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1)and vascular cell adhesion molecule-1 (VCAM-1) levels were detected by double antibody sandwich ELISA method.Results With increased dose of fluoride, HUVEC cells decreased, the structure changed. In 400 - 2000 μmol/L group, the SOD activity[(6.627 ± 0.213), (6.668 ± 0.152), (5.935 ± 0.122), (4.755 ± 0.182)kU/L] was lower than those of the control group[(7.457 ± 0.398)kU/L, P ＜ 0.05 or ＜ 0.01], GSH-Px activity[(481.284 ± 43.785),(492.223 ± 16.474), (382.762 ± 25.167), (293.687 ± 24.881 )kU/L] was also lower than those of the control group [(585.078 ± 47.323)kU/L, P ＜ 0.05 or ＜ 0.01], MDA level[(0.609 ± 0.011 ), (0.646 ± 0.016), (0.852 ± 0.013),(1.188 ± 0.045)nmol/L] was higher than those of the control group[(0.512 ± 0.027)nmol/L, P ＜ 0.05 or ＜ 0.01];iNOS activity[(3.604 ± 0.115), (3.615 ± 0.075), (3.848 ± 0.103), (4.275 ± 0.079)kU/L] also was higher than those of the control group[(2.798 ± 0. 136)kU/L, all P ＜ 0.01], iNOS mRNA expression increased, eNOS activity [(5.539 ± 0.079), (5.503 ± 0.064), (5.226 ± 0.142), (4.809 ± 0. 107)kU/L] decreased compared to those of control group[(5.996 ± 0.155)kU/L, P ＜ 0.05 or ＜ 0.01], eNOS mRNA expression decreased; ICAM-1 levels [(0.852 ± 0. 102), (0.886 ± 0.061 ), (0.961 ± 0.158), (1.418 ± 0. 167)μg/L] increased compared to those of the control group[(0.687 ± 0.046)μg/L, P ＜ 0.05 or ＜ 0.01], VCAM-1 levels[(2.719 ± 0.197), (2.946 ± 0.167),(3.173 ± 0.225 ), (3.613 ± 0. 153 ) μg/L] was higher than those of the control group [(2.375 ± 0.067 ) μg/L, all P ＜0.01]. Conclusions High concentrations of fluoride reduce the activity of antioxidant enzymes, which leads to metabolic disorders of nitric oxide and abnormal cytokines expression, thereby inhibiting vascular endothelial cell growth, structural change and induced apoptosis. This is an important factor in high fluoride-induced vascular endothelial injury.     

α-硫辛酸治疗糖尿病周围神经病变的疗效观察

目的观察糖尿病周围神经病变(DPN)患者加用α-硫辛酸后对神经症状及氧化应激反应的作用。方法选取DPN患者45例,分为α-硫辛酸联合甲钴胺(A)组17例及单药甲钴胺(B)组28例,比较两组治疗前后神经症状评分(NSS)、神经缺陷评分(NDS)及氧化应激指标水平。结果与治疗前相比,治疗后A组NSS得分下降[(4.88±0.94)vs(4.06±0.91)分,P0.05],过氧化氢酶(CAT)上升[(33.50±3.60)vs(37.07±6.47)U/L,P0.05],丙二醛(MDA)下降[(3.16±0.51)vs(2.77±0.27)mmol/L,P0.05],还原型谷胱甘肽(GSH)上升[(82.93±9.55)vs(88.78±13.16)ng/L,P0.05],氧化型谷胱甘肽(GSSG)下降[(115.00±23.20)vs(102.25±13.20)ng/L,P0.05]。B组仅CAT上升[(34.16±6.47)vs(37.12±5.99)U/L,P0.05],SOD、MDA、GSH和GSSG水平治疗前后比较差异无统计学意义。结论与单药甲钴胺相比,加用α-硫辛酸可更显著改善DPN患者氧化应激水平,从而更好地改善症状。     

Tempol对过氧化氢致RAW264.7巨噬细胞氧化损伤的保护作用

目的:研究4-羟基-2,2,6,6-四甲基哌啶(Tempol)对过氧化氢(H_2O_2)引起的RAW264.7巨噬细胞氧化损伤的影响。方法:建立H_2O_2诱导的RAW264.7巨噬细胞氧化损伤模型,分为空白对照组、H_2O_2损伤组(0.2 mmol/L H_2O_2)、低剂量Tempol组(0.2 mmol/L H_2O_2+0.4 mmol/L Tempol)和高剂量Tempol组(0.2 mmol/L H_2O_2+0.8mmol/L Tempol),测定每组细胞培养上清液中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和乳酸脱氢酶(LDH)活性。结果:与空白对照组相比,H_2O_2损伤组培养上清中MDA含量和LDH活性显著升高,SOD活性显著降低(P均0.05)。与H_2O_2损伤组相比,低剂量Tempol组与高剂量Tempol组细胞培养上清中MDA的含量[(7.27±0.35)nmol/mL和(7.27±0.26)nmol/mL对(9.55±0.31)nmol/mL,P均0.05]和LDH的活性[(509.36±38.73)U/L和(492.81±40.36)U/L对(706.24±48.46)U/L,P均0.05]均显著降低,而SOD的活性[(24.84±0.54)U/mL和(24.84±0.28)U/mL对(21.16±0.61)U/mL,P均0.05]均显著升高。低剂量Tempol组和高剂量Tempol组MDA含量、SOD和LDH活性无明显差异,Tempol的作用不呈剂量依赖性。结论:Tempol可能通过调节细胞氧化还原系统,对H_2O_2引起的RAW264.7氧化损伤起到保护作用。     

青海省兴海县大骨节病病区儿童血清丙二醛和抗氧化酶水平观察

目的 观察青海省兴海县大骨节病(KBD)病区儿童血清中丙二醛(MDA)及抗氧化酶的变化,探讨体内氧自由基损伤与KBD的关系.方法 在青海省兴海县KBD病区唐乃亥乡小学、下鹿圈村小学以及曲什安乡小学选择7～ 12岁的KBD患儿64名作为KBD组,46名健康儿童作为内对照组,在非病区陕西省长安区南樊小学选择59名健康儿童作为外对照组.分别采集其枕部发样和清晨空腹外周血,采用单纯随机抽样方法在每组中各抽取20例发样及血样,应用2,3-二告氨基萘(DAN)荧光法测定发硒和血硒水平;通过生化方法检测样本血清中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活力,总抗氧化能力(T-AOC)及MDA水平.结果 KBD组发硒[(67.64±17.28)μg/L]、血硒[(36.27±13.29)μg/L]和GSH-Px活力[ (59.53±25.23)kU/L]明显低于内对照组[(153.32±24.31)、(63.06±13.66) μg/L,(91.88±22.99)kU/L]和外对照组[ (242.35±38.56)、(98.93±17.18)μg/L,( 122.68±41.74)kU/L],且内对照组明显低于外对照组(P均＜ 0.05);KBD组和内对照组SOD活力[(55.80±8.14)、(57.45±6.96)kU/L]、CAT活力[(16.45±5.61)、( 15.63±9.18)kU/L]和T-AOC水平[(19.80±6.64)、(21.71±8.82)kU/L]均高于外对照组[(42.79±8.10)、(6.05±2.71)、(13.56±5.38)kU/L,P均＜0.05];KBD组MDA水平[(4.64±1.11 )μmol/L]高于内对照组[(3.31±1.22) μmol/L]和外对照组[(3.43±1.29) μmol/L,P均＜0.05].结论 KBD存在氧化应激损伤,抗氧化酶在KBD病区儿童血清中升高是一种代偿性反应,体内氧自由基损伤与KBD的发生发展可能有一定的关系.     

苦参碱对H9c2细胞缺氧复氧损伤的保护作用及机制

目的探讨苦参碱对H9c2细胞缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法建立H9c2细胞缺氧复氧模型,用苦参碱进行干预。取对数生长期细胞,采用随机数字表法随机分成4组:(1)对照组:不作任何处理;(2)缺氧复氧组:将细胞放入缺氧箱中缺氧12 h,再复氧6 h;(3)和(4)苦参碱处理组:分别用含10μmol/L和30μmol/L苦参碱的DMEM完全培养基预处理细胞12 h,然后进行缺氧复氧处理。处理后用MTT方法检测细胞存活率,收集细胞上清,检测丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性,Annexin V-FITC/PI双标法和Tunnel法检测细胞凋亡水平,流式细胞术检测细胞中活性氧(ROS)含量变化,Western Blot检测凋亡信号调节激酶1(ASK1)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)及B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)蛋白表达量的变化。结果 (1)细胞生存率:与缺氧复氧组(47.7%±3.4%)比较,苦参碱低剂量组(59.3%±3.1%)和高剂量组(70.6%±2.7%)显著提高(均为P<0.05);(2)细胞凋亡率:与缺氧复氧组(67.4%±6.8%)比较,苦参碱低剂量组(34.6%±4.2%)和高剂量组(18.5%±1.9%)明显降低(均为P<0.05);(3)细胞上清中MDA含量:与缺氧复氧组[(2.17±0.19)nmol/mgprot]比较,苦参碱低剂量组[(1.14±0.21)nmol/mgprot]和高剂量组[(0.83±0.14)nmol/mgprot]显著降低(均为P<0.05);(4)SOD活性:与缺氧复氧组[(128.45±9.34)U/mgprot]比较,苦参碱低剂量组[(147.54±6.47)U/mgprot]和高剂量组[(179.76±5.85)U/mgprot]明显增加(均为P<0.05);(5)ROS含量的荧光值:与缺氧复氧组(935±73)比较,苦参碱低剂量组(1 165±75)和高剂量组(1 535±123)明显增加(均为P<0.05);(6)JNK蛋白表达量:与缺氧复氧组(0.212±0.015)比较,苦参碱低剂量组(0.408±0.027)和高剂量组(0.729±0.085)明显增加(均为P<0.05);(7)ASK1蛋白表达量:与缺氧复氧组(0.343±0.025)比较,苦参碱低剂量组(0.428±0.027)和高剂量组(0.759±0.067)明显增加(均为P<0.05);(8)Bcl-2蛋白表达量:与缺氧复氧组(0.821±0.055)比较,苦参碱低剂量组(0.597±0.047)和高剂量组(0.329±0.037)明显降低(均为P<0.05)。结论苦参碱可以通过影响细胞氧化应激及JNK信号通路,对细胞缺血再灌注损伤起到保护作用。     

社区获得性肺炎患者血清丙二醛和血清总抗氧化力水平测定的临床意义

目的 观察社区获得性肺炎(CAP)患者血清丙二醛(MDA)和血清总抗氧化力(T-AOC)水平的变化,探讨其临床意义.方法 以徐州医学院附属医院呼吸科2010年9月-2011年9月收治的90例CAP患者[男54例,女36例,平均年龄(54±20)岁]和30名同期在我院体检健康者[男20名,女10名,平均年龄(52±11)岁]为研究对象.CAP患者进行肺炎严重指数(PSI)评分,将其分为Ⅰ～Ⅲ级低危险组46例,Ⅳ～Ⅴ级为高危险组44例;检测血清MDA和血清T-AOC水平.组间采用t检验或者x2检验;CAP组中根据患者存活或死亡的转归,进行Logistic回归分析.结果 CAP组血清MDA[(6.5±2.4) μmol/L]高于对照组[(3.6±0.3)μmol/L];CAP组血清T-AOC[(12.6±1.6) U/ml]低于对照组[(17.7±2.1) U/ml];高危险组及死亡组血清MDA[(8.1±2.5) μmol/L;(9.9±1.6)μmol/L]高于低危险组及存活组[(4.9±0.7) μmol/L;(6.1±2.2)μmol/L];高危险组及死亡组血清T-AOC[(11.5±1.6) U/ml;(10.6±1.5)U/ml]低于低危险组及存活组[(13.6±0.6) U/ml;(12.8±1.4) U/ml];血清MDA与PSI评分呈正相关,相关系数为0.745;差异均有统计学意义(P＜0.05).经过有效治疗后血清MDA水平总体呈下降趋势,血清T-AOC呈上升趋势.Logistic回归分析血清MDA是影响CAP患者预后的危险因素.结论 CAP患者血清MDA水平能够反应病情的严重程度及判断预后.动态监测血清MDA和T-AOC水平可以帮助判断治疗效果.     

低剂量亚慢性砷染毒家兔血清酶和生物化学指标的变化

目的 观察低剂量亚慢性砷染毒家兔在染毒不同时期血清酶和生物化学指标的变化,为筛选有意义的砷中毒早期诊断血液学指标提供依据.方法 成年家兔12只,体质量2.0～3.5kg,按体质量随机分为4组,每组3只,分别饮用含亚砷酸钠0(对照)、0.01、0.05、0.25 mg/L的水.染毒8周和12周后,采用SYSMEX-180型全自动生化分析仪测定各组家兔血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)和γ-谷氨酰基转移酶(γ-GT)的活性以及总蛋白、白蛋白、球蛋白和白蛋白/球蛋白比值(简称白球比).结果 染毒家兔0.05 mg/L剂量组第12周ALT水平[(60.00±4.14)U/L]较同期对照组[(41.50±2.12)U/L]升高(P＜0.05);0.25 mg/L剂量组第8周、第12周AST水平[(46.50±3.21)、(52.33±3.81)U/L]较同期对照组[(21.33±3.53)、(29.50±3.23)U/L]升高(P均＜0.05);0.05 mg/L剂量组和0.25 mg/L剂量组第12周ALP水平[(78.68±4.85)、(103.00±7.83)U/L]较同期对照组[(45.50±5.50)U/L]升高(P均＜0.05);0.05mg/L剂量组第12周γ-GT水平[(19.33±7.50)U/L]较同期对照组[(8.50±3.53)U/L]升高(P＜0.05).各剂量组第8周和第12周的血清总蛋白、白蛋白、球蛋白水平和白球比与同期对照组比较,差异无统计学意义(F值分别为0.77、0.02、0.16、3.14和0.51、0.29、0.41、0.52,P均＞0.05).结论 0.05 mg/L及以上剂量亚慢性砷染毒主要对肝脏有一定损伤.在肝脏的相关血清酶学中,AST是较为早期的反映砷中毒肝脏损伤的敏感指标.

Abstract：

Objective To observe the sub-chronic effects of low doses of arsenic poisoning in rabbits exposed to different periods on some of the serum enzymes and biochemical indicators, and to provide the basis for screening of meaningful hematologic indicators for early diagnosis of arsenic poisoning. Methods Twelve adult rabbits,weighing 2.0 - 3.5 kg, were randomly divided into four groups, 3 in each group, and they were fed with drinking water containing sodium arsenite 0(control),0.01,0.05,0.25 mg/L, respectively. Serum alanine aminotransferase (ALT), aspartate amino transferase (AST), alkaline phosphatase (ALP), γ-glutamyl transacylase (y-GT), total protein(TP), albumin(ALB), globulin(GLP), and ALB/GLP of rabbit were measured by SYSMEX-180 automated biochemistry analyzer after 8 weeks and 12 weeks exposure. Results The results showed that ALT in 0.05 mg/Lgroup of 12 week[(60.00 ± 4.14)U/L]increased significantly compared with the control[(41.50 ± 2.12)U/L, P ＜0.05];AST in 0.25 mg/L group of 8 week and 12 week[(46.50 ± 3.21 ), (52.33 ± 3.81 )U/L]increased significantly compared with the control[(21.33 ± 3.53), (29.50 ± 3.23 )U/L, all P ＜ 0.05];ALP in 0.05 mg/L and 0.25 mg/L group of 12 week [(78.68 ± 4.85 ), ( 103.00 ± 7.83 ) U / L]increased significantly compared with the control [(45.50 ± 5.50)U/L, all P ＜ 0.05];γ-GT in 0.05 mg/L group of 12 week[(19.33 ± 7.50)U/L]increased significantly compared with the contro1[(8.50 ± 3.53)U/L, P＜ 0.05]. TP, ALB, GLP, ALB/GLP of different groups of 8 week and 12 week were not significantly different statistically(F= 0.77,0.02,0.16,3.14 and 0.51,0.29,0.41,0.52, all P ＞ 0.05). Conclusions Zero point zero five mg/L and higher doses of sub-chronic arsenic exposure has some major damage to the liver. Compared with other serum enzymes and the biochemical indexes, serum AST is a early sensitive indicator of liver injury of the arsenic poisoning.     

脑白质疏松症患者执行功能障碍的弥散张量成像研究

目的 应用弥散张量成像(DTI)技术探讨脑白质疏松症(LA)患者脑白质微结构的改变与执行功能障碍的关系. 方法 对23例LA患者和19例健康对照进行蒙特利尔认知评估(MoCA)和4项执行功能测验包括Stroop色词干扰测验、连线测验(TMT)、数字符号测验(DST)、言语流畅性测验(VF),行DTI扫描,测量LA患者病灶区(WML)、LA患者正常表现白质区(NAWM)、对照组半卵圆中心、脑室前后部周围白质区的各向异性值(FA)、表观扩散系数(ADC)、平均扩散率(MD),并对LA组白质参数与认知功能进行相关性分析. 结果 LA患者存在明显的执行功能障碍,LA患者在Stroop色词干扰测验B、Stroop色词干扰测验C和Stroop色词干扰测验C-B、TMT-A 和TMT -B、DST行为学成绩均较对照组相应测验值差[(69.4±13.4)和(43.3±5.0),t=8.03,P＜0.05]、[(141.4±42.1)和(65.4±10.3),t=7.66,P＜0.05]、[(72.0=41.4)和(22.1±9.6),t=5.13,P＜0.05]、[(73.2±15.3)和(31.2±7.2),t=10.97,P＜0.05]、[(125.6±18.0)和(81.6±5 9),t=10.22,P＜0.05]和[(24.8=5.6)和(36.8±5.1),t=7.19,P＜0.05].WML在半卵圆中心、脑室前部和后部FA显著低于NAWM与对照组的相应区域的检验值[(0.2±0.1),(0.4±0.1)和(0.4±0.1),F=45.08,P＜0.05]、[(0 2±0.0),(0.4±0.1)和(0.4±0.1),F=70.11,P＜0.05]和[(0.3±0.1),(0.4±0.1)和(0.4±0.1),F=8.54,P＜0.05]；而WML在半卵圆中心、脑室前部和后部ADC显著高于NAWM和对照组的相应区域的检验值[(1.2±0.2),(0.8±0.1)和(0.8±0.1),F=46.77,P＜0.05]、[(1.2±0.3),(0.8±0.0)和(0.8±0 1),F=68.22,P＜0.05]和[(1.4±0.3),(0.8±0.0)和(0.9±0.1),F- 17.08,P＜0.05]；WML在半卵圆中心、脑室前部和后部MD显著高于NAWM和对照组的相应区域的检验值[(127.8±14.5),(95.3=25.4)和(100.8±9.4),F=19.72,P＜0.05]、[(127.4±16.0),(101.8±13.9)和(93.4±5.6), F=39.26, P＜0.05]和[(134.4=21.2),(114.8±14.5)和(114.4±11.7),F=10.66,P＜0.05].相关性分析得出LA患者脑室前角旁白质FA与Stroop C-B(r =-0.46,P＜0.05)、TMT-A(r=0.48,P＜0.05)和TMT-B(r=0.46,P＜0.05)呈负相关,与DST测验呈正相关(r=0.42,P＜0.05). 结论 DTI能够准确显示LA患者的特征性脑白质微结构的改变,且这种改变与执行功能密切相关.LA患者的执行功能障碍可能与前额叶皮层下环路功能受损有关.     

不同碘营养水平对妊娠期大鼠胎盘激素分泌的影响

目的 探讨不同碘营养水平对妊娠期大鼠胎盘激素分泌的影响.方法 Wistar大鼠225只(雌鼠165只,雄鼠60只),体质量约80～ 100g.将雌鼠按体质量随机分为5组:低碘1组、低碘2组、适碘(对照)组、高碘1组、高碘2组,每组33只.2个低碘组大鼠食用病区粮食,含碘量为13.46 μg/kg,分别饮用含0、5μg/L碘酸钾的去离子水;对照组和2个高碘组大鼠食用普通粮食,含碘量为22.00 μg/kg,分别饮用含50、3000、10000 μg/L碘酸钾的去离子水.饲养3个月,雌鼠与雄鼠合笼交配,于孕早期(5±2)d、孕中期(12±2)d、孕晚期(17±2)d处死母鼠,取血清.采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测血清绒毛膜促性腺激素(HCG)、绒毛膜促甲状腺激素(HCT)、孕激素.结果 孕晚期大鼠血清HCG组间比较差异有统计学意义(F=4.16,P＜ 0.05);孕晚期低碘1组[(16.08±4.45)U/L]、低碘2组[(17.43±2.70)U/L]较对照组[(13.68±3.52)U/L]显著升高(P均＜ 0.01).孕中、孕晚期大鼠血清HCT组间比较差异有统计学意义(F值分别为3.59、3.40,P均＜0.05);孕中期高碘1组[(70.11±10.97 )μU/L]、孕晚期高碘2组[(74.93±13.22)μU/L]较对照组[(57.14±12.56)、(58.17±8.54) μU/L]显著升高(P均＜0.01).低碘1组、对照组大鼠血清孕激素组内比较差异有统计学意义(F值分别为4.06、4.43,P均＜0.05);低碘1组孕晚期[(1462.80±286.48)pmol/L]低于孕旱[(1929.93±158.37)pmol/L,P＜0.05]、孕中期[(1856.44±542.08)pmol/L,P＜0.05];对照组孕中期[(2046.45±475.67)pmol/L]高于孕早期[(1714.39±461.71 )pmol/L,P＜ 0.05].结论 妊娠期母体胎盘HCG分泌在缺碘条件下增加,HCT分泌在碘过量条件下增加.孕激素在重度低碘情况下,随孕期增加而分泌下降,与HCG在孕期的变化趋势相反,易造成不良妊娠结果.     

连续性血液净化对脓毒血症患者肝损伤的保护作用

目的观察连续性血液净化对脓毒血症伴发肝损伤患者的肝功能保护作用。方法 2018年1月—2019年7月我院治疗的脓毒血症伴发肝损伤患者88例,患者按照入院顺序使用数表法随机分为对照组和观察组,每组44例。比较两组治疗前、3 d后TBil、AST、ALT肝功能指标、TNF-α、IL-6炎性因子、MDA、SOD氧化应激指标和SOFA、APACHE II评分。结果治疗前两组TBil、AST、ALT、TNF-α、IL-6、MDA、SOD表达水平和SOFA、APACHE II评分差异无统计学意义(P0.05)。治疗后观察组TBil[(27.46±3.14)μmol/L对(34.52±4.47)μmol/L]、AST[(64.59±10.13)U/L对(90.15±12.52)U/L]、ALT[(74.28±10.62)U/L对(97.22±12.81)U/L]、TNF-α[(27.32±4.02)μg/L对(38.54±5.13)μg/L]、IL-6[(23.56±3.12)μg/L对(32.35±4.17)μg/L]、MDA[(18.42±2.37)μg/L对(24.18±3.06)μg/L]表达水平和SOFA[(3.13±0.44)分对(4.27±0.64)分]和APACHEⅡ评分[(8.25±1.32)分对(12.32±2.53)分]显著低于对照组(P0.01),SOD[(25.68±3.52)U/L对(18.74±3.13)U/L]表达水平显著高于对照组(P0.01)。结论连续性血液净化可以快速清除炎症氧化应激因子,保护脓毒血症患者肝功能,提高临床治疗效果。     

卡氏肺孢子菌肺炎大鼠超氧化物歧化酶和过氧化脂质变化的研究

24只SD大鼠分为卡氏肺孢子菌肺炎感染组(18只)和健康对照组(6只)。感染组以地塞米松磷酸钠3.5mg/(只.次),每周2次,连续8周腹股沟皮下注射SD大鼠,建立卡氏肺孢子菌肺炎动物模型。肺组织印片六亚甲基四胺银染色和肺组织病理切片伊红-苏木素(HE)染色观察实验大鼠肺组织的病理学变化。分光光度法检测肺组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)活力和过氧化脂质(LPO)含量。结果显示,感染组大鼠可见卡氏肺孢子菌包囊并发现典型病理改变;感染组SOD值[(31.49±7.18)U/mgprot]与健康对照组[(54.41±8.97)U/mgprot]相比,差异有统计学意义(P<0.01);感染组LPO值[(2.26±0.21)nmol/mgprott]与健康对照组[(1.63±0.01)nmol/mgprot]相比,差异有统计学意义(P<0.01)。