蕲蛇药材高效毛细管电泳指纹图谱的研究

目的:建立蕲蛇药材高效毛细管电泳(HPCE)指纹图谱。方法:以20mmol/L硼砂-0.2mol/L硼酸(pH8.4)作为背景电解质缓冲液,柱温25℃,运行电压19kV,245nm波长处检测,25min内完全分离。结果:建立的指纹图谱中共有7个共有峰,且方法学考察达到标准。结论:该方法具有良好的精密度和分离效果,可作为蕲蛇药材的质量控制方法。     

蛤蚧的高效液相指纹图谱初步研究

目的:初步建立蛤蚧高效液相色谱指纹图谱,为蛤蚧药材质量标准制定提供参考。方法:采用高效液相色谱法分析蛤蚧提取液中相关物质的相对保留时间和相对峰面积,以确定适当的色谱条件,获得色谱数据。结果:在选定的色谱条件下,得到了较好的保留时间,建立起蛤蚧的HPLC指纹图谱。结论:蛤蚧HPLC指纹图谱可有效地鉴定蛤蚧,从而更好地控制蛤蚧药材的质量。     

乌梢蛇药材的高效毛细管电泳指纹图谱研究

目的:建立乌梢蛇的HPCE指纹图谱分析方法,并比较乌梢蛇药材的一致性。方法:未涂层石英毛细管柱(65 cm×50μm,55 cm),在80 mmol·L-1硼砂-0.2 mmol·L-1硼酸(p H 8.8),分离电压18 KV,柱温25℃,检测波长230 nm,压力进样,压力30 mbar,时间3 s。测定10批乌梢蛇药材的HPCE图谱,30 min内完全分离。结果:建立乌梢蛇药材的HPCE指纹图谱,共有7个共有峰,通过与共有模式比较,10批乌梢蛇药材的相似度在0.865~0.987;方法学考察符合要求。结论:10批乌梢蛇药材基本一致;该方法具有良好的精密度和分离效果可作为乌梢蛇药材质量评价的有效方法。     

人工养殖与野生蛤蚧药材元素含量的比较研究

目的对人工养殖蛤蚧和野生蛤蚧药材品质进行评价,并为蛤蚧的人工养殖规范化提供科学依据。方法通过测定两种来源的蛤蚧的钙(Ca)、镁(Mg)、磷(P)、硒(Se)、锌(Zn)、铜(Cu)6种元素的含量并进行比较分析。结果养殖和野生蛤蚧这6种元素含量较为丰富,如钙元素的含量高于4.51%,野生蛤蚧锌元素含量高达52.0 mg/kg;除铜、锌元素外,两种来源的蛤蚧中磷、钙、镁、硒4种元素的含量均相差不大。结论作为药材使用人工养殖和野生蛤蚧应该是安全等效的。     

脱氧核糖核酸条形码在蛤蚧真伪品鉴定中的前景

蛤蚧作为重要的动物药材,在咳嗽、哮喘、胆结石及性功能障碍上有治疗功效.由于药材蛤蚧原动物大壁虎(Gekko gecko)物种数量逐年减少,不能满足中药市场的需求而出现了众多伪品.文章概述了近二十年来蛤蚧及其伪品的鉴别研究情况,介绍了传统性状、显微、理化和现代分子生物学技术等鉴定方法,并比较总结了各种方法在蛤蚧真伪品鉴定中的特点.在此基础上,引入物种识别学科前沿-DNA条形码(DNA Barcoding)技术,并阐述了其在蛤蚧真伪品鉴定中的优势和应用前景.     

三叶木通指纹图谱研究

目的应用反相高效液相色谱(RP-HPLC)建立三叶木通指纹图谱。方法Hypersil ODS柱,H2O与CH4梯度洗脱,流速:1m l/m in,柱温:20℃,检测波长:215 nm。结果建立了HPLC指纹图谱共有模式,并应用此共有模式对五叶木通和川木通进行了相似度比较。结论三叶木通药材中各成分均得到很好分离,可作为三叶木通药材专属性指纹图谱。     

蛤蚧及其混伪品基于12S rRNA序列的Bar-HRM鉴定研究

目的:为实现蛤蚧与其常见混伪品的高效鉴别和掺伪检测,并建立蛤蚧中药材的DNA条形码-高分辨率熔解曲线(Bar-HRM)鉴别方法。方法:本研究收集了7个物种48份动物样品和10份蛤蚧粉。基于12S核糖体核糖核酸(12S rRNA)序列对蛤蚧及其6种常见混伪品进行高分辨率熔解曲线(HRM)鉴定研究并测序验证。采用HRM方法进行灵敏度和掺伪检测分析,并对市场蛤蚧粉进行检测验证。结果:蛤蚧及其6种常见混伪品均可通过12S rRNA-HRM曲线分析进行鉴别;可实现纳克级的准确检测,最低掺伪检测限为1%;10份市售蛤蚧粉中6份质量可疑。结论:基于12S rRNA序列的Bar-HRM技术可实现蛤蚧与其常见混伪品的准确鉴别,在掺伪检测中具有独特优势,对市场药材的快速检测及质量评估有一定应用价值。     

快速PCR技术鉴别中药材蛤蚧的方法研究

目的:建立简单快速鉴别蛤蚧的特异性PCR方法。方法:对比蛤蚧及其伪品细胞色素C氧化酶I亚基基因(CO I)序列,设计蛤蚧特异性PCR鉴别引物,优化特异性PCR条件,对蛤蚧及其7种常见混淆品进行扩增及荧光检测。结果:扩增产物经琼脂糖凝胶电泳和荧光检测,所有蛤蚧药材均能扩增出约400 bp的特异性条带,加入SYBR Green I染料后,在365 nm下出现强烈绿色荧光,混伪品不具特异条带和绿色荧光,鉴别操作可在30 min内完成。结论:快速PCR结合荧光染料检测可快速鉴别蛤蚧及其常见伪品,为蛤蚧的快速鉴定提供了新的思路和方法。     

藏药榜嘎生物碱成分分离及质量标准研究

目的:分离、鉴定榜嘎中生物碱成分,并建立其质量标准。方法:采用醇提配合酸碱萃取法得到总生物碱,经硅胶柱层析法分离得到单体生物碱并鉴定其结构;采用HPLC对不同产地榜嘎进行共有成分分析,以共有成分作为参照,结合薄层色谱法对榜嘎药材进行鉴别;按照《中国药典》2010年版(一部)附录方法对榜嘎药材水分、总灰分、酸不溶性灰分进行测定;采用HPLC法测定共有成分含量。结果:分离得到大麦芽碱、异叶乌头碱、塔拉乌头胺3个单体化合物;大麦芽碱为榜嘎药材共有成分,建立了以其为指标成分的薄层鉴别方法及含量测定方法;12批榜嘎药材中大麦芽碱平均含量为0.026%;拟定榜嘎药材水分不得超过9.5%,总灰分不得超过16.5%,酸不溶性灰分不得超过2.9%。结论:以大麦芽碱为对照的定性、定量方法操作简单、稳定性和重复性良好,可用于藏药榜嘎的质量控制。     

河北道地药材连翘的高效毛细管电泳指纹图谱研究

目的:建立河北道地药材连翘的高效毛细管电泳指纹图谱,并与不同产地、不同采收部位连翘药材指纹图谱相比较。方法:石英毛细管柱(75μm×60 cm,30 cm)作为分离通道,以50 mmol.L-1硼砂(用0.1 mol.L-1NaOH调pH 9.9)为电泳缓冲液,工作电压15 kV,温度20℃,检测波长214 nm,按此条件对不同产地、不同采收部位药材进行了比较和评价。结果:建立了河北连翘药材高效毛细管电泳指纹图谱共有模式,确定了12个共有峰。河北产连翘药材指纹图谱较相似,山西、河南产连翘与河北连翘质量相近,不同部位连翘药材化学成分差异较大。结论:该方法简便、快速、准确,为科学评价与有效控制连翘药材质量提供新方法。     

僵蚕HPCE指纹图谱研究

目的:建立僵蚕的HPCE指纹图谱分析方法,并比较其生品、制品的区别。方法:未涂层石英毛细管柱(50cm×65μm,有效长度55cm),以30mmol/L硼砂-0.2mol/L硼酸(pH8.6)为缓冲液,分离电压18kV,柱温25℃,检测波长245nm,测定不同规格10批僵蚕商品药材的HPCE图谱2,0min内完全分离。结果:建立僵蚕的HPCE指纹图谱,共有8个共有峰,通过与共有模式比较,10批僵蚕药材的相似度在0.959～0.997;方法学考察达到标准。结论:10批僵蚕两种商品规格具有相似性,炮制品间的差异较生品间的稍大;该方法具有良好的精密度和分离效果,可作为僵蚕品种鉴定与质量控制方法。     

蒲公英药材CZE-DAD指纹图谱研究

目的:研究并建立不同产地蒲公英药材CZE-DAD指纹图谱。方法:选择毛细管区带电泳分离模式,以20 mmol/L硼砂为缓冲溶液(pH=9.18),分离电压为15 kV,检测波长为244 nm,以咖啡酸为参照峰,测定各样品指纹图谱,并用聚类分析及不同相似度评价方法对其结果进行分析。结果:建立了不同产地蒲公英药材CZE-DAD指纹图谱共有模式,标定15个共有峰,10批药材的相似度为0.926~0.983。结论:本方法操作简便,准确可靠,重现性好,可作为蒲公英药材鉴别和质量控制方法。     

藤黄药材的指纹图谱研究

目的:建立藤黄药材的高效液相指纹图谱方法.方法:采用Lung C8(4.6 nun × 250 mm,5 μm)色谱柱,柱温25℃,以乙腈-0.1%冰乙酸水溶液为流动相梯度洗脱,检测波长362 mm,流速为1.0 mL·min-1.采用国家药典委员会出版的<中药色谱指纹图谱相似度评价>(2004年A版)软件,对11批不同批次的藤黄药材指纹图谱进行相似度计算.结果:各批藤黄药材中有13个共有峰,各峰分离度良好,各批次藤黄药材间共有峰的相对保留时间RSD均<1.0%,药材间相似度均>90%,结论:本方法具有良好的精密度、重复性、稳定性,各共有峰间分离度高,可用于藤黄药材的真伪鉴别和质量综合评价.     

野菊花药材HPLC指纹图谱

目的:建立野菊花药材的指纹图谱,为野菊花药材的质量控制提供依据。方法:采用HPLC,Agilent Eclipse XDB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-1.0%醋酸水为流动相梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长290 nm,柱温30℃,进样10μL。结果:建立了16批野菊花药材的指纹图谱,选择11个野菊花样品作为标准药材,标准药材有16个共有峰,多数峰可以达到较好分离,具有较高的相似度。结论:建立的高效液相指纹图谱有较好的精密度、重复性和稳定性,可作为野菊花质量评价参考。     

北五味子药材指纹图谱研究

目的:为提高五味子药材的质量控制水平,建立北五味子药材的HPLC指纹图谱,并进行方法学考察.方法:用HPLC方法,在检测波长250 nm下,以五味子醇甲为对照品,采用甲醇(A)、水(B)二元流动相进行梯度洗脱建立北五味子药材的HPLC指纹图谱.结果:在检测波长250 nm下,北五味子药材共有8个共有色谱峰,且以甲醇(A)、水(B)二元流动相梯度洗脱的条件下,供试品出峰较多,色谱峰分离度良好,所建立的指纹图谱更具代表性.另对10个批次五味子药材指纹图谱进行了相关性考察及聚类分析,结果表明共有色谱峰相似系数均在0.999以上,10批样品间具有较高的相似度,可以继续扩大样品范围、数量.可用于建立北五味子的道地药材的HPLC指纹图谱模型并提高五味子药材的质量控制水平.结论:此方法精密度、稳定性、重复性均良好,且简便可行,可用于五味子药材的质量控制;     

火炭母药材HPLC指纹图谱研究

目的:建立火炭母药材的HPLC指纹图谱分析方法,为火炭母药材质量评价提供参考依据。方法:色谱柱PlatisilODS C18(4.6 mm×250 mn,5μm),流动相乙腈-0.05%磷酸溶液,梯度洗脱进行色谱分离;洗脱时间60 min,流速1.0 mL.min-1,检测波长360 nm。结果:确定17个共有色谱峰为特征峰构成火炭母药材HPLC指纹图谱,相似度评价结果表明,各产地火炭母药材相似度均在0.90以上。结论:所用方法准确可靠,所得指纹图谱共有模式可作为火炭母药材质量控制的依据。     

狼毒(月腺大戟)药材高效液相色谱指纹图谱研究

目的建立狼毒(月腺大戟)药材的高效液相指纹图谱。方法取月腺大戟生品粉末,用甲醇超声提取制备供试品溶液。采用Welchorm-C18柱(5μm,4.6 mm×250 mm),在检测波长226 nm,柱温25℃下,以乙腈(A%)-水(B%)为流动相,流速1ml·min-1梯度洗脱,建立不同批次饮片的指纹图谱。结果初步建立了月腺大戟药材生品指纹图谱。以月腺大戟乙素峰作为对照峰,各批狼毒(月腺大戟)药材中有20个共有峰,各峰分离度良好。结论该方法具有良好的精密度、重复性、稳定性,各共有峰间分离度高,可用于狼毒(月腺大戟)药材的真伪鉴别和质量综合评价。     

红花药材水溶性成分HPLC指纹图谱研究

目的:建立红花药材水溶性成分HPLC指纹图谱。方法:运用Agilent1100 DAD-HPLC高效液相色谱仪,采用大连依利特SinoChrom ODS-BP(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,甲醇-磷酸水梯度洗脱,流速1.0 ml/min,检测波长280 nm,柱温30℃,进样量20μl,测定了18批红花药材并进行聚类分析。结果:聚类分析结果表明,新疆不同地区的10批红花药材相似度较好。本文以新疆10批红花药材建立了药材指纹图谱共有模式,包含22个共有峰。结论:采用RP-HPLC方法建立的红花药材指纹图谱,方法稳定可靠简便,色谱图展现的各峰分离度较好,特征明显,可做为红花药材真伪鉴别标准。     

蓬莪术HPLC指纹图谱研究

目的:建立蓬莪术药材的指纹图谱。方法:采用HPLC法,色谱柱:Kromasil ODS-1(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-水(梯度洗脱);流速:1.0 ml/min;柱温:25℃;检测波长:210 nm。结果:建立了蓬莪术HPLC指纹图谱共有模式,并对不同产地的莪术药材进行了相似度比较。结论:蓬莪术药材中各成分均得到了较好的分离,可作为蓬莪术药材专属性的指纹图谱。     

火炭母药材HPLC指纹图谱研究

目的:建立火炭母药材的HPLC指纹图谱分析方法,为火炭母药材质量评价提供参考依据。方法:色谱柱:Platisil ODS C18(250mn×4.6mm,5μm);流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液,梯度洗脱进行色谱分离;洗脱时间为60min,体积流量:1.0mL.min-1,检测波长:360nm。结果:确定17个共有色谱峰为特征峰构成火炭母药材HPLC指纹图谱,相似度评价结果表明,各产地火炭母药材相似度均在0.90以上。结论:所用方法准确可靠,所得指纹图谱共有模式可作为火炭母药材质量控制的依据。