检测抗原特异T细胞反应技术的新进展

研究T细胞的识别、活化和频数分布是现代免疫学的重要课题,其中细胞毒性T淋巴细胞(CTL或Tc)通过识别细胞表面与MHCⅠ类分子结合的抗原肽而杀伤靶细胞,是机体抗肿瘤、抗移植物及有效控制各种感染的重要途径之一。目前缺乏精确分析CTL频数及快速分离扩增这类细胞的技术。最近,发展了一些新技术用来评估T细胞的特异性,这些新方法很敏感,可以直接体外分析T细胞,而不需体外扩增,这样对体内免疫反应提供了更精确的描述。简介如下:1 四聚体方法T细胞通过TCR识别MHC分子呈递的短肽,因此可以用荧光标记的MHC 肽复合物连结TCR来计数抗原特…     

APAAP法检测T细胞亚群的假阳性

ＡＰＡＡＰ法检测Ｔ细胞亚群的假阳性赵新志，葛文华，曹安儒海军桂林疗养院桂林５４１００５在检测外周血Ｔ细胞亚群试验中，凡ＣＤ４细胞和ＣＤ８细胞之和大于ＣＤ３细胞时，一般认为，是部分Ｔ细胞同时表达两种抗原的结果。为探讨利用抗人单克隆抗体研究Ｔ细胞表面标志...     

末梢血T细胞亚型(Tγ、Tμ)微量测定法——微量板法

本文介绍一种快速、简便易行的检测Tγ、Tμ的微量法,其过程如下:l、神经氨酸酶处理绵羊红细胞(EN)单层的制备①多聚一L一赖氨酸(PLL)处理微量板:向微量板的各孔加满PLL溶液     

急性T细胞白血病小鼠脾脏肿瘤特异性反应T细胞研究

应用可选择性杀灭的瘤细胞和淋巴－瘤细胞混合培养的体外致敏方法，从急性Ｔ细胞（Ｌ６１５）白血病小鼠的脾细胞中建立了体外可培养的肿瘤特性反应Ｔ细胞系（ＴＳＲＴｓ）。细胞表型分析和功能测定的结果表明，这些ＴＳＲＴｓ中是以表型ＣＤ４＾＋Ｔ细胞为主（占７５％以上）。对结合Ｌ６１５瘤细胞膜蛋白的硝酸纤维素薄膜颗粒的刺激呈特异性反应，并对Ｌ６１５瘤细胞刺激反应产生白细胞介素２。虽然体外缺乏急性溶细胞活性，但Ｗｉ     

鼻咽癌患者T细胞对EB病毒肽段特异性反应的酶联免疫斑点法检测

ＥＢ病毒感染是鼻咽癌的主要致病因素之一。由于Ｔ细胞可识别由ＭＨＣ分子提呈的多肽 ,在控制病毒感染中扮演着重要的角色[1 ] ,因此 ,鼻咽癌患者的Ｔ细胞对ＥＢ病毒 ,尤其是该病毒肽段的特异性反应能力是近年探讨的热点。我们采用酶联免疫斑点法 (Ｅｌｉｓｐｏｔ) ,检测了鼻咽癌患者外周血Ｔ细胞对ＥＢ病毒抗原ＬＭＰ1、ＬＭＰ2和ＥＢＮＡ3中部分表位的特异性反应能力。1　材料和方法1.1　材料　研究对象 11例 ,6例为鼻咽癌患者 ( 4例来自广西医科大学 ,2例来自英国伦敦ＲｏｙａｌＦｒｅｅ医院 ) ,均经病理学确诊。 5例正常人为健康自愿者…     

流式细胞术检测CFSE标记人T细胞亚群增殖反应

目的探讨应用流式细胞术和活细胞荧光染料CFSE检测T淋巴细胞各亚群增殖反应的方法学。方法人外周血单个核细胞（PBMC）经CFSE染色后,分别用植物凝血素（PHA）、CD3 mAb和结核杆菌抗原（Mtb-Ag）刺激,加IL-2扩增后,用流式细胞术检测活化增殖后T细胞各亚群的比例,并用ModFit软件分析各亚群的增殖动力模型。结果PHA和CD3 mAb主要活化总T细胞,CD8^＋T细胞的增殖优于CD4^＋T细胞,但CD4^＋T细胞前4代细胞明显多于CD8^＋T细胞。Mtb-Ag主要刺激γδT细胞增殖。结论以CFSE标记淋巴细胞,结合流式细胞术可有效检测出不同T细胞亚群对不同刺激剂的增殖反应以及增殖动力学变化。     

自身反应T细胞与自身免疫病

自身反应Ｔ细胞参与许多自身免疫病的致病过程，并且被机体的克隆型调节网络所调节。上调机体的克隆型调节网络，活化抗克隆型Ｔ细胞，特异性抑制呀清除自身反应Ｔ细胞，可能成为预防和治疗某些自身免疫病发如多发发性硬化症和类风湿关节炎的有效疗法。     

自身反应T细胞与自身免疫病

自身反应Ｔ细胞参与许多自身免疫病的致病过程，并且被机体的克隆型调节网络所调节。上调机体的克隆型调节网络，活化抗克隆型Ｔ细胞，特异性抑制或清除自身反应Ｔ细胞，可能成为预防和治疗某些自身免疫病如多发性硬化症和类风湿关节炎的有效疗法。     

HIV感染者中结核杆菌ESAT-6蛋白特异性T细胞反应的检测

目的 检测结核杆菌抗原早期分泌抗原靶分子(ESAT-6)融合蛋白其在人类免疫缺陷病毒感染患者中特异性T细胞反应,从而为艾滋病合并结核杆菌感染的诊断方法的建立提供理论依据.方法利用重组表达结核杆菌ESAT-6蛋白做为抗原,通过酶联免疫斑点技术(ELISPOT)检测HIV感染者中特异性T细胞反应,并以正常健康者、无HIV感染的结核患者作为对照.结果 ESAT-6重组蛋白对结核患者外周血单核细胞ELISPOT方法检测证实其具有良好的抗原性,斑点形成单位数(SFU/106 PBMC)在结核组和HIV合并结核感染组中显著升高,并与无合并结核感染临床表现的HIV组以及健康对照组间均存在明显的差别.结论重组结核杆菌ESAT-6蛋白可以作为抗原通过ELISPOT方法检测HIV感染者中结核杆菌合并感染.     

组胺受体法检测小鼠脾脏T细胞亚群的初探

<正> 根据不同T淋巴细胞亚群具有不同的组胺受体,即T_H和T_S细胞分别具有组胺H_1和H_2受体,另外苯海拉明和甲氰咪胍分别是有效的H_1和H_2受体阻断剂,本文从受体的角度对T细胞亚群进行检测研究。     

角膜移植排斥反应前后患者外周血T淋巴细胞亚群及NK细胞检测

角膜移植排斥反应前后患者外周血Ｔ淋巴细胞亚群及ＮＫ细胞检测马传香，纪恩美，郭宝强，王继兵，许福亮潍坊医学院附属医院中心实验室潍坊２６１０３１在角膜移植手术的患者中，部分病例难以避免角膜移植排斥反应的发生。山口达夫曾报告：初次角膜移植手术排斥反应的发生...     

多功能T细胞的检测及其意义

近年来,在对小鼠实验和人体免疫的研究中发现,疫苗的保护效果和病人的预后及转归与多功能性T细胞的数量和质量密切相关.以往仅仅检测某种或少数几种效应T细胞的功能,远远不能代表机体的特异性免疫状态.在单个细胞水平上,同时产生两种或以上效应功能,包括细胞因子、趋化因子及杀伤功能的细胞被称为多功能性T细胞.多功能性T 细胞与疾病的保护效果密切相关.为此,功能性T细胞的检测,能更准确、完整地反映机体特异性细胞免疫应答,尤其对于疫苗的设计和保护效果评价具有十分重要的意义.     

分子嵌合细胞降低小鼠脾脏T细胞对异基因小鼠T细胞刺激反应的研究

本文通过构建分子嵌合骨髓造血干细胞(bone marrow hematopoietic stem cells,BHSCs)及前体T(pre-T)细胞,探讨输注分子嵌合细胞后,受体对异基因供体来源T细胞刺激的反应能力的影响. 依据GenBank中C57 BL/6小鼠MHC Ⅰ等位基因H-2Db和H-2Kb序列,构建重组质粒pIRES-H-2Db和pIRES-H-2Kb.BALB/c小鼠BHSCs和pre-T细胞培养,无菌条件取股骨、胫骨,收集骨髓细胞.     

MTS和MTT法检测小鼠NK及特异性细胞毒性T细胞活性的比较

ＭＴＳ和ＭＴＴ法检测小鼠ＮＫ及特异性细胞毒性Ｔ细胞活性的比较叶萍李燕谷淑燕本文受国家８６３高科技生物技术领域基金资助作者单位：１０００５２北京中国预防医学科学院病毒学研究所１９９７年９月７日收稿１１月１２日修回四唑类化合物由于其使用方便，无放射性等优...     

日本血吸虫病的T细胞反应的控制机构

在日本血吸虫感染的慢性期,对虫卵抗原的T细胞反应被抑制的现象与本病的临床症状有密切关系。因日本血吸虫病的特征性改变是肝脾病变,此病变的实质是肝内静脉支被虫卵阻塞并在其周围形成肉芽肿。这种反应是T 细胞控制下的宿主反应,其反应调节是通过抑制性T 细胞(Ts)作媒介和通过     

诱导杀伤性T细胞反应的恶性疟疫苗研究进展

杀伤性Ｔ细胞（ＣＴＬ）是恶生疟红前期免疫反应的关键环节。本文主要就利用ＭＨＣ分子结合肽基序确定ＣＴＬ表位进行综述，并围绕如何克服ＣＴＬ的ＭＨＣ限制性，对多抗原成分疫苗的设计、多表位疫苗的设计和ＭＨＣⅠ类分子结合亚型和共用肽段等的研究进行了探讨。     

诱导杀伤性T细胞反应的恶性疟疫苗研究进展

杀伤性Ｔ细胞（ＣＴＬ）是恶性疟红前期免疫反应的关键环节。本文主要就利用ＭＨＣ分子结合肽基序确定ＣＴＬ表位进行综述，并围绕如何克服ＣＴＬ的ＭＨＣ限制性，对多抗原成分疫苗的设计、多表位疫苗的设计和ＭＨＣⅠ类分子结合亚型和共用肽段等方面的研究进行了探讨。     

对自身非T细胞起反应的人T细胞的特异性和抑制功能

用正常人的非 T 淋巴细胞刺激自身 T 细胞,可使后者增殖,称之为自身混合淋巴细胞反应(MLR)。最近发现,SLE 患者的T 细胞即使在异体 MLR 中也能起反应,却不能产生自身 MLR 反应,也不能用 ConA     

T细胞疫苗抗同种移植排斥反应的研究

应用Ｔ细胞疫苗于同种心脏移植的研究，用Ｃｏｎ Ａ和ＣＤ３单抗诱导受同种特异性抗原（Ｃ５７ＢＬ／６（Ｈ－２＾ｂ）小鼠脾细胞）免疫的ＢＡＬＢ／Ｃ（Ｈ－２＾ｄ）小鼠，取后者脾细胞所制备的Ｔ细胞疫苗具有延长同种心脏移植物的存活期。受Ｔ细胞疫苗接种的ＢＡＬＢ／Ｃ（Ｈ－２＾ｄ）鼠脾细胞对经Ｃｏｎ Ａ激活或未激活的Ｃ５７ＢＬ／６小鼠脾细胞皆表现出特异的强烈的增殖反应，而对同系脾细胞呈低的反应。Ｔ细胞疫苗表型分析     

判定肿瘤抗原特异性T细胞反应的新方法

几十年来 ,人们致力于肿瘤疫苗的研究 ,旨在激活患者自身的免疫系统 ,产生持久有效的抗肿瘤免疫。在肿瘤疫苗治疗前后 ,如何准确地定量、定性判定肿瘤抗原特异性Ｔ细胞应答 ,评价疗效 ,是影响抗肿瘤疫苗发展的关键。51 Ｃｒ释放法和有限稀释法 (ｌｉｍｉｔｉｎｇｄｉｌｕｔｉｏｎａｎａｌｙｓｅｓ,ＬＤＡ) ,一直被认为是评价特异性Ｔ细胞反应的金标准 ,但实践证明这两种方法费时、费力且敏感性低。近 5、6年来 ,一些评价Ｔ细胞功能和特异性的新方法逐渐建立起来[1 ,2 ] ,由于这些方法更加敏感 ,提供的信息更有意义。尤为重要的是 ,有的方法…