栽培平贝母不同生长期总生物碱的含量测定

栽培平贝母不同生长期总生物碱的含量测定黑龙江中医学院王栋，贾树帜，王启迪齐齐哈尔市中医院李承今，战雅莲哈尔滨中药二厂郝学志，王君黑龙江省武警总队医院刘洪艳平贝母（ＦｒｉｔｉｌｌａｌｌａｕｓｓｕｎｅｎｄｓＭｂｏｍ）为百合科贝母属植物，主产于我国东北，以...     

平贝母中总生物碱的含量测定

<正> 近年来研究证明平贝母有效成分主要为生物碱类,不仅具有祛痰作用,还有明显的降压作用(徐东铭等。药学学报1982;17:355)。对其内在质量的研究文献报道较少[李萍等。中国药科大学学报1990;21(5):319]。本文利用溴麝香草酚蓝和平贝母中生物碱在pH5时形成离子对后,定量萃取于氯仿中进行比色测定这一原     

不同产地和采收期的平贝母总生物碱含量

目的:测定不同产地、不同采收期平贝母总生物碱含量,为平贝母的质量评价提供依据。方法:采用酸性染料比色法与两相滴定法。结果:11个不同产地的平贝母总生物碱含量以辽宁新宾县和吉林桦甸市桦效乡较高;不同采收期中高含量有两个时期,即花果期与8月开始延至10月份的枯萎中后期。结论:采用酸性染料比色法测定平贝母中总生物碱含量较准确,且方法简便快速。     

南充与不同产地的半夏总生物碱含量比较

目的　比较南充与不同产地半夏总生物碱含量。方法　紫外分光光度法。结果　相同和不同产地野生与栽培半夏总生物碱含量都有一定差异。结论　这种差异在一定程度上反映了南充与不同产地半夏质量的优劣     

唐半夏栽培品总生物碱含量测定

目的:以半夏总生物碱含量为指标,评价唐半夏内在质量优劣。方法:采用紫外分光光度法,测定唐半夏总生物碱含量,并与不同产区半夏中总生物碱含量进行比较。结果:唐半夏总生物碱含量为0.0415%,与其他产区相比位居第二。结论:唐半夏总生物碱含量相对较高,属优质种质资源,值得大面积规范化种植和资源保护。     

附子总生物碱含量测定方法比较

目的　比较滴定法和紫外分光光度 (U V)法在测定附子总生物碱中差异 ,探讨适宜附子总生物碱的含量测定方法。方法　用两种方法测定相同样品 ,比较测定结果差异 ,并考察操作步骤对测定结果的影响。结果　两种不同的测定方法对附子总生物碱含量测定结果有较大的影响 ,滴定法的加样回收率为 97.7% ,而U V法为 75 .6 % ,滴定法测定结果更准确。水分及萃取静置时间对 UV法测定结果有一定影响。结论　附子总生物碱含量测定以滴定法 (药典法 )为宜 ,紫外分光光度法用于其测定有待于进一步改进     

全国不同产地续断中总生物碱的含量测定

目的：测定全国23个不同产地续断中总生物碱的含量。方法：采用溴甲酚绿显色,紫外-可见分光光度法在416nm处测定续断中总生物碱的含量。结果：不同产地续断样品中总生物碱的含量在0.0106%～0.1212%之间,有显著差异。结论：该方法准确、可靠,为续断的质量评价及质量控制提供研究基础。     

不同产地益母草总生物碱含量的比较

采用药典方法并加以改进,测定了全国１９个省市药材益母草的总生物碱含量,结果表明各地区益母草中总生理碱含量有很大判别,其中,以北京,新疆,辽宁产益母草品质最优,可见产地对药材质量影响很大。     

栽培、野生及不同产地半夏总生物碱测定

半夏为天南星科植物半夏Pinalliaternata (Thunb .)Breit.的干燥块茎[1] 。其主要成分含有淀粉,辣性物,半夏蛋白,苷类,酚类,甾醇类,脂肪酸类,无机元素,生物碱类等多种化学成分[2 ] 。其药理作用有镇咳,止吐,防矽肺,解毒等功效[3 ] ,生物碱是半夏药理作用的主要有效成分。药材中生物碱含量的多少是评价药材质量好坏的重要指标之一。为此,作者对不同产地的野生半夏和栽培品种的总生物碱成分,以盐酸麻黄碱为对照品进行测定,比较含     

超高效液相色谱串联质谱同时测定瓦布贝母中6个生物碱成分

目的:建立超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)同时测定瓦布贝母中西贝母碱苷、西贝母碱、贝母辛、贝母素甲、贝母素乙和湖贝甲素的方法。方法:采用Agilent Eclipse XDB C18色谱柱(2. 1 mm×100 mm,1. 8μm),流动相0. 1%甲酸溶液(含0. 01 mol·L~(-1)甲酸铵)-乙腈,梯度洗脱,柱温35℃,流速0. 4 m L·min~(-1);采用电喷雾离子源(ESI),正离子模式扫描,质谱多反应监测(MRM)模式检测; 6个生物碱成分的定量定性离子对为西贝母碱苷m/z 592. 4 574. 4,138. 2,96. 1,西贝母碱m/z 430. 4 412. 3,138. 2,96. 1,贝母辛m/z 430. 4 412. 3,109. 2,67. 2,贝母素甲m/z 432. 4 414. 4,95. 2,67. 2,贝母素乙m/z 430. 4 412. 3,396. 3,91. 1,湖贝甲素m/z 416. 4 98. 2,81. 2,67. 2。结果 6个成分在各自线性范围内线性关系良好(r 0. 999 1),方法精密度、重复性、稳定性良好,加样回收率在98. 07%~106. 62%,RSD均5%。结果:样品测定结果表明各批次间6个成分含量差异较大,总体上西贝母碱和西贝母碱苷含量最高,贝母辛居中,贝母素乙、贝母素甲和湖贝甲素依次递减。结论:所建立的方法灵敏准确,适用于瓦布贝母中生物碱成分的含量测定,并为瓦布贝母药材的质量控制和综合评价提供方法依据。     

HPLC-ELSD测定太白贝母和瓦布贝母中贝母辛的含量

 目的 测定川贝母新的基源植物太白贝母（Fritillaria taipaiensis P. Y. Li）、瓦布贝母[Fritillaria unibracteata Hsiao et K. C. Hsia var.wabuensis (S. Y. Tang et S. C. Yue) Z. D. Liu, S. Wang et S. C. Chen]鳞茎中贝母辛的含量。方法 采用HPLC-ELSD法,色谱柱为Agilent Hypersil BDS-C₁₈(4.0 mm×250 mm,5 μm),流动相为乙腈-水-二乙胺溶剂系统,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min-1,蒸发光散射检测器检测。结果 贝母辛在40.75～815.00 μg·mL-1内,峰面积对数与进样量对数呈良好线性关系（r=0.999 4）,贝母辛加样回收率为98.7%,RSD为2.5% (n= 6);太白贝母中贝母辛含量为0.017 3%～0.037 6%,瓦布贝母中贝母辛含量为0.023 3%～0.052 8%。结论 所测太白贝母和瓦布贝母样品中贝母辛的含量高于曾报道过的川贝母其他基源植物样品。     

不同浙贝母栽培品种贝母素甲累积规律研究

研究以狭叶种、宽叶种、多籽种及小三子4个浙贝母栽培品种为供试材料,采用HPLC-ELSD测定并比较了不同浙贝母栽培品种及其不同大小鳞茎和部位中贝母素甲的含量。结果表明,4个浙贝母栽培品种间及不同大小鳞茎和部位间贝母素甲含量差异显著。浙贝母小鳞茎中贝母素甲含量明显高于大鳞茎;芯芽中贝母素甲含量明显高于鳞片;小三子浙贝母鳞茎贝母素甲含量最高,但单株贝母素甲产量以多籽种浙贝母最高。     

HPLC同时测定东北产区白屈菜6个生物碱成分的含量

目的 建立测定东北产区白屈菜中6种生物碱含量的方法,完善和提升白屈菜药材现有的质量评价体系。方法 采用高效液相色谱法。色谱柱为SB-C₁₈（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为乙腈-1%三乙胺（用磷酸调节pH值至3.0）,梯度洗脱（0~5 min,10%~20%A;5~15 min,20%~24%A;15~55 min,24%A;55~60 min,24%~10%A）,流速1.0 mL?min^–1,柱温35 ℃,检测波长274 mm。结果 12批东北产区白屈菜药材中白屈菜碱、二氢黄连碱、人血草碱、血根碱、小檗碱、白屈菜红碱的质量浓度分别在1.68~33.60、3.40~68.00、2.32~46.40、3.84~76.80、1.72~34.40、1.89~37.76 μg?mL^–1与峰面积呈良好的线性关系（r≥0.999 9）,精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于2.0%,平均加样回收率分别为99.12%、98.79%、98.60%、98.94%、98.25%、99.39%,RSD均小于2.0%。结论 该方法操作简单、准确、灵敏、重复性好,可为东北产区白屈菜药材质量标准的提升和完善提供实验依据和参考。     

促生细菌的分离及复配菌剂对甘肃贝母产量的影响

目的 研究叶片喷施厚壁菌门芽孢杆菌属复合菌剂（T1）,假单孢菌属和根瘤菌属复合菌剂（T2）两类复配促生菌剂对甘肃贝母生理特征与生长的影响,以期为甘肃贝母生态种植开发功能性微生物菌剂奠定基础。方法 采用常规方法分离鉴定出甘肃贝母内生细菌;对3年生甘肃贝母叶面喷施T1和T2,并测定产量;试剂盒法测定植物和微生物相关酶活性及生理生化指标;液相色谱-质谱联用技术（LC-MS）检测植物和微生物相关激素含量。结果 从甘肃贝母中分离到的内生细菌分属于厚壁菌门、变形菌门、放线菌门;T2处理的超氧化物歧化酶（SOD）,过氧化物酶（POD）活性及生长素含量显著高于T1处理,T1处理的嗜铁素、水杨酸、赤霉素含量显著高于T2处理;TI和T2处理较空白组（CK）提高了贝母叶片内源赤霉素、细胞分裂素、生长素含量,茉莉酸、脱落酸差异无统计学意义,T1处理促进了贝母叶片内源水杨酸的积累,T2处理差异无统计学意义;TI和T2处理较CK提高了贝母叶片SOD,POD,过氧化氢酶（CAT）活性,降低了丙二醛含量,T2处理促进了贝母叶片过氧化氢的积累,T1处理差异无统计学意义;TI和T2处理较CK提高了贝母叶绿素、根际土铁平均含量及百株重。结论 T1,T2处理都有促进增产的作用,具体机制有所区别,T1优于T2处理。     

基于UPLC-Q-TOF-MS/MS的皖贝母生物碱类化学成分分析

目的：采用超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱法（UPLC-Q-TOF-MS/MS）对皖贝母醇提取物的生物碱类化学成分进行分析鉴定。方法：采用CORTECS C18色谱柱（150 mm×4.6 mm,2.7μm）,流动相为乙腈-0.1%甲酸和10 mmol·L–1甲酸铵水溶液,梯度洗脱,流速为0.40 mL·min–1,进样体积为2μL。质谱使用电喷雾离子源（ESI）,正离子模式扫描采集数据。结果：通过二级高分辨质谱分析结合对照品数据及相关文献,共鉴定出皖贝母醇提取物中14个化合物的结构,包括生物碱类成分12个、非生物碱类2个,其中8个成分为首次从皖贝母中鉴定出来。结论：采用UPLC-Q-TOF-MS/MS建立了快速分析皖贝母中生物碱类化学成分的方法,该法快速、准确,为皖贝母生物碱化学成分鉴定提供了新的策略,并为皖贝母质量控制和物质基础研究提供了参考。     

川贝母转录组密码子使用偏好性分析

研究川贝母表达基因的密码子的使用模式,探讨其密码子使用偏好性特点,为运用基因工程技术实现贝母碱的异源生物合成提供理论依据。以川贝母转录组9 843条全长转录本序列为数据来源,使用Codon W软件对川贝母表达基因的密码子GC含量特点、有效密码子数和同义密码子相对使用频率各项参数进行计算、统计,分析发现,川贝母表达基因密码子偏好程度整体水平不高。该研究确定了15个密码子为川贝母最优密码子UUG,CUU,AUU,GUU,UCA,CCU,CCA,ACU,ACA,GCA,UAU,CAU,AAU,AGA和GGA,最优密码子偏好A/T结尾。计算结果显示26个川贝母生物碱合成相关基因中大肠杆菌和酿酒酵母稀有密码子所占比例较低。根据稀有密码子比例,逐个分析26个关键酶基因在大肠杆菌和酿酒酵母体系中表达时可采用的密码子优化方案。该研究为通过合成生物学手段异源合成川贝母生物碱奠定了前期研究基础。     

不同产地粉萆薢总皂苷含量测定

目的:建立粉萆薢总皂苷含量测定方法.方法:以薯蓣皂苷元为对照品,高氯酸为显色剂,测定波长408 nm,采用可见分光光度法测定了5个不同产地粉草薢药材总皂苷含量.结果:薯蓣皂苷元线性范围为1.55 ～ 12.42 mg·L-1,r=0.999 5(n=6),加样回收率为100.69％,RSD 2.75％,不同产地粉萆薢总皂苷含量分别为广西玉林2.85％,RSD 1.32％;广西南宁2.76％,RSD 1.16％;浙江临安2.54％,RSD 1.38％;湖北宜昌1.94％,RSD 1.83％;四川崇州0.84％,RSD 1.75％.结论:测定方法简便,准确,重复性好,可作为粉萆薢总皂苷的含量测定.     

HPLC测定苦豆子不同部位中苦豆碱的含量

目的:建立苦豆子中苦豆碱的HPLC法;对苦豆子药材不同部位中苦豆碱含量进行考察,确定药材最佳采收部位.方法:采用Kromasil NH2(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-无水乙醇-3％磷酸水溶液(70:15:15)为流动相,检测波长205 nm,柱温25℃,流速1.0 mL· min-1.结果:苦豆碱的线性范围为11.21 ～224.20 mg·L-1(r=0.9999),平均回收率(n =6)98.18％ (RSD 4.1％);苦豆子叶、茎中苦豆碱含量分别为0.38％,0.02％,豆荚、花及种子中不含苦豆碱.结论:该方法简便、准确、重复性好,可以作为苦豆子中苦豆碱的含量测定方法;研究结果显示苦豆碱在叶子中含量最高,可以将叶子作为提取分离苦豆碱的最佳药材部位.     

浙贝母植株各部位中生物碱和黄酮的LC-LTQ-Orbitrap MS~n分析

利用LC-LTQ-Orbitrap MS~n对浙贝母花、花蕾、茎、叶以及鳞茎中的生物碱和黄酮类成分进行鉴定。生物碱鉴定采用ACQUITY UPLC BEH C18(2.1 mm×50 mm,1.7μm)色谱柱,10 mmol·L~(-1)甲酸铵溶液-乙腈为流动相,梯度洗脱,正离子质谱检测模式;黄酮鉴定采用Agilent-Zorbax SB C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,0.2%乙酸-乙腈为流动相,负离子质谱检测模式。根据高分辨质谱提供的精确质量数和二级碎片离子信息,并结合文献报道,从浙贝母植株各部位中鉴定37个生物碱,主要包括7个生物碱(浙贝宁苷、贝母辛、贝母素甲、贝母素乙、去氢鄂贝啶碱或浙贝丙素、鄂贝啶碱或蒲贝素A、贝母辛氮氧化物)及同分异构体;同时鉴定了16个黄酮类成分,主要包括槲皮素、山柰酚及其苷。上述结果表明,浙贝母植株地上各部位与鳞茎所含的生物碱种类大致相同,且含有鳞茎中未检测到的黄酮类成分,具有一定的开发利用价值。