基于UHPLC-Q-TOF-MS的醋甘遂萜类化学成分研究

目的 应用UHPLC-Q-TOF-MS对醋甘遂的萜类化学成分进行定性分析。方法 采用ACQUITY UPLC C₁₈ 色谱柱(100 mm×2.1 mm，1.7 μm)，以0.1%甲酸（A）-乙腈（B）溶液为流动相进行梯度洗脱，流速0.4 mL/min，柱温40 ℃，进样量4 μL。质谱为ESI离子源，正、负离子模式下进行检测。结果 通过Peak View SoftwareTM质谱分析软件，结合保留时间、质谱特征碎片和裂解途径等信息，并通过对照品及文献比对，从醋甘遂中推测鉴定出32个萜类化合物，包含15个巨大戟烷型二萜、12个假白榄烷型二萜以及5个三萜，并对其所含主要萜类化合物巨大戟烷型和假白榄烷型的裂解规律进行了归纳分析。结论 该方法可快速鉴别醋甘遂中的萜类化学成分，并根据质谱信息将其所含主要萜类化合物进行归类，从而为醋甘遂的毒-效物质基础和质量控制提供一定的参考。     

固相萃取-快速分离液相-四级杆串联飞行时间质谱联用分析荷叶中的生物碱

目的 建立固相萃取-快速分离液相-四级杆串联飞行时间质谱（SPE-RRLC-Q-TOF）联用技术分析荷叶中的生物碱类化合物的方法。方法 样品采用1%盐酸超声提取,经固相萃取（SPE）小柱净化,再用氨水-甲醇进行洗脱,洗脱液浓缩后用甲醇定容。选用Welch Materials C₁₈柱,以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,在正离子模式下,经快速分离液相-飞行时间质谱（RRLC-Q-TOF）分析。结果 分离并检测了9种生物碱。结论 快速分离液相-四级杆串联飞行时间质谱结合阳离子交换固相萃取柱前处理技术,可以快速准确鉴定荷叶中的生物碱成分。     

HPLC-QTOF-MS法鉴别雷公藤多苷工艺残渣中的化学成分

建立高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱法(HPLC-QTOF-MS)快速鉴定雷公藤多苷柱色谱工艺残渣化学成分。采用Zorbax SB-C₁₈色谱柱(4.6 mm×50 mm,1.8 μm),流动相为乙腈-0.2%甲酸溶液,梯度洗脱,采用ESI-Q-TOF检测,正离子模式扫描。根据色谱峰精确相对分子质量、碎片离子信息及液相色谱保留时间比较鉴别化合物。结果表明,采用HPLC-QTOF-MS法鉴定了雷公藤多苷工艺残渣中30个成分,包括15个生物碱类化合物,10个二萜类化合物,4个三萜类化合物,1个不饱和脂肪酸。本研究工作为雷公藤多苷工艺残渣的综合开发利用提供定性分析依据。     

UPLC-MS结合模式识别用于罗汉果不同部位化学成分的比较分析

目的 采用超高效液相色谱-飞行时间质谱（UPLC-TOF-MS）技术建立了罗汉果不同部位（果瓤、果皮、叶、茎）化学成分的分析方法。方法 色谱分离采用Waters Acquity HSS C₁₈色谱柱（100 mm×2.1 mm,1.7 μm）,0.1%甲酸水溶液-乙腈梯度洗脱。质谱分析采用电喷雾离子源,负离子模式检测;所得数据应用主成分分析法（PCA）进行模式识别。结果 PCA结果显示,果瓤和果皮的成分类似,但与叶、茎部位存在显著差异;13种对分类贡献较大的特征化合物被筛选为“标志物”;利用TOF-MS精确分子质量、同位素匹配以及色谱保留规律,鉴定出其中5种罗汉果苷（果实标志物）和5种黄酮苷（叶、茎标志物）。结论 为罗汉果不同部位的识别和化学成分的比较提供了一种新模式,并为其活性研究提供了科学数据。     

傣药芽鲁哈咪卖的化学成分研究

目的 研究傣药芽鲁哈咪卖Rhinacanthus nasutus的化学成分。方法 用色谱方法分离成分,根据理化性质和光谱分析鉴定结构。结果 分离得到9个化合物和2个混合物,鉴定为C₂₆～C₃₂烷混合物(Ⅰ)、α-软脂酸单甘油酯(Ⅱ)、软脂酸(Ⅲ)、硬脂酸(Ⅳ)、木焦油酸(Ⅴ)、β-谷甾醇(Ⅵ)、羽扇豆醇(Ⅶ)、对羟基苯甲酸(Ⅷ)、胡萝卜苷(Ⅸ)、α-乙基-D-吡喃艾杜糖苷(Ⅹ)、硝酸钾与硝酸钠混合物(Ⅺ)。结论 化合物Ⅹ是分离过程产生的人工新化合物,化合物Ⅰ～Ⅴ、Ⅷ～Ⅺ是首次从傣药芽鲁哈咪卖中分得。     

UPLC/ESI-Q-TOF MS法分析远志中的化学成分

[目的]阐明远志中的化学成分。[方法]采用超高效液相色谱-电喷雾离子化-四级杆飞行时间串联质谱（UPLC/ESI-Q-TOF MS）法分析远志中的化学成分,采用Masslynx V 4.1软件,通过分析准分子离子和二级碎片离子信息,并进一步根据标准品的色谱保留时间和质谱裂解规律,鉴定远志中的化学成分。[结果]鉴定了远志中29个化学成分,主要为口山酮、低聚糖酯、皂苷类成分。[结论]总结归纳了远志药材中主要化学成分的质谱裂解规律,阐明了远志中的主要化学成分。     

HPLC-DAD-MS研究黄芪的化学成分

目的 建立HPLC-DAD-MS快速分离分析黄芪Astragali Radix化学成分的方法。方法 色谱柱为Thermo Hypersil-Hypurity C₁₈（150 mm×2.1 mm,5 μm）分析柱,柱温40 ℃,流动相水-甲醇（梯度洗脱）,体积流量0.25 mL/min。二极管阵列扫描范围200～370 nm。质谱采用大气压化学电离（APCI^＋）离子源,扫描范围m/z 100～650。结果 通过与已有文献报道的质谱、紫外光谱和保留行为比较可以初步定性5个化合物,分别为calycosin-7-O-β-D-glycoside、ononin、calycosin、formononetin、(3R)-7,2′-dihydroxy-3′,4′-dimethoxyisoflavan。结论 因为能够同时提供相对分子质量、紫外光谱和保留行为,所以HPLC-DAD-MS是一种分析中药化学成分的有力方法。     

HPLC-TOF/MS快速鉴别相思藤中的化学成分

目的 采用高效液相色谱-飞行时间质谱(HPLC-TOF/MS)技术对相思藤的化学成分进行快速鉴别。方法 色谱柱：安捷伦Zorbax Eclipse SB-C₁₈ (3.0′100mm,3.5mm),流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱,流速0.4mL.min_-1,柱温25℃,紫外检测波长254nm,进样10mL;飞行时间质谱采用ESI源,正离子模式监测,质量数扫描范围50~2000。结果 共鉴别出相思藤中15个化学成分,其中正离子模式下10个、负离子模式下11个、正负离子均有响应6个。结论 采用HPLC-TOF/MS可以快速鉴别相思藤药材中的化学成分,为相思藤药材的质量控制研究及临床合理应用提供依据。     

液-质联用技术鉴定安立生坦有关物质

采用液相色谱-飞行时间质谱(LC-TOF/MS)和液相色谱-二级质谱联用(LC-MS/MS)两种液-质联用技术对安立生坦有关物质进行结构鉴定。采用XBridge C₁₈(4.6 mm×150 mm,3.5 μm)色谱柱,以乙腈-水溶液(含0.15%甲酸)为流动相线性梯度洗脱,对安立生坦及其有关物质进行分离;通过电喷雾正离子化TOF/MS检测,并结合MS/MS碎片和对照品对照鉴定各有关物质的结构。在建立的色谱条件下安立生坦及其有关物质均分离良好,共检测到10个有关物质,并通过联用技术和有机反应机制解析确证了它们的结构。液-质联用技术能够有效地鉴定安立生坦有关物质,为其质量控制和工艺优化提供参考依据。     

栀子大黄汤化学成分的HPLC-PDA-ESI-MS/MS分析

目的： 对栀子大黄汤中的化学成分进行归属研究,以揭示其可能的药效物质基础。方法： 采用高效液相色谱/光电二极管阵列检测/串联质谱(HPLC-PDA-MS/MS)技术,分析研究栀子大黄汤中主要化学成分的结构。色谱条件：C₁₈柱,0.1%乙酸-甲醇二元梯度;PDA扫描范围：210～480 nm;ESI离子源,负离子模式,Data dependent scan方式采集数据。结果： 建立栀子大黄汤水煎液的HPLC-PDA-ESI-MS/MS色谱分离分析体系。根据各色谱峰对应物质的质谱裂解碎片、紫外吸收光谱特征、提取离子流结果,初步归属鉴定出20个化学成分,分属黄酮类、蒽醌类、环烯醚萜类等。结论： 高效液相色谱结合光谱检测技术、质谱检测技术,可以在基本不依赖对照品的情况下,实现对中药复杂体系中主要成分的定性分析。     

LC—MS／MS测定乌头属中药中8个生物碱含量

目的：建立LC-MS／MS测定乌头属中药8种生物碱含量的方法。方法：以甲醇-水（水相含0．1％甲酸和2．5mM醋酸铵溶液）为流动相,C18柱分离,采用ESI（＋）源,MRM监测,对制川乌、制草乌、制附子药材饮片中的双酯型生物碱（乌头碱、新鸟头碱、次乌头碱）,单酯型生物碱（苯甲酰乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱）,胺醇型生物碱（乌头原碱、新鸟头原碱）进行含量测定。结果：上述8种生物碱的线性关系良好,精密度、重复性的RSD都低于6％,加样回收率为95．77％-101．90％。结论：该方法简便、快速、精密度高、重复性好,可应用于乌头属中药的质量控制。     

蒙药草乌芽中药效组分的电喷雾串联质谱分析

目的 分析蒙药草乌芽的药效组分。方法 利用电喷雾串联质谱技术对蒙药草乌芽的乙醇提取液进行了直接分析鉴定。结果 ESI-MS可以给出相对分子质量信息,ESI-MSⁿ方法则可以从复杂体系中获得结构信息,在草乌芽中发现乌头碱、中乌头碱、次乌头碱及它们的水解产物和脂类生物碱等15种二萜类生物碱。结论 草乌芽中的药效组分二萜类生物碱为首次报道,这些生物碱的结构相似,在电喷雾串联质谱中碎裂方式相同,因此根据电喷雾串联质谱结果确定了这些生物碱的结构。     

制川乌与法半夏不同比例配伍组合对乌头类生物碱的影响

目的 研究制川乌与法半夏不同配伍组合中乌头类生物碱的变化趋势,阐明两药配伍后的化学物质基础。方法 采用LC-MS技术分析久煎处理的不同配伍组合,结合药液pH值的变化,运用化学计量学方法寻找、分析差异标记物。结果 制川乌与法半夏不同配伍组合化学成分的量差异明显,随着法半夏比例的增大,药液pH值呈上升趋势,乌头类双酯型生物碱的量整体呈下降趋势。结论 制川乌与法半夏配伍后毒性物质减少,这可能与法半夏中的某些成分影响了乌头类生物碱的稳定状态有关。     

附子的新二萜生物碱

采用Al₂O₃、硅胶柱色谱及制备高效液相色谱等方法对附子Aconitum carmichaeli的化学成分进行分离纯化,通过NMR,MS,和单晶X衍射等波谱技术鉴定化合物结构,分离鉴定了4个化合物,分别为:(13R,15S,19S)-13,15,19-三羟基-海替生(1),附子灵(2),尼奥灵(3),和北乌亭(4)。其中化合物1为新化合物。     

“乌头属一支蒿”的研究进展

"乌头属一支蒿"是我国重要的活血化瘀、祛风湿和镇痛的药用植物,资源丰富而又混乱。研究者对"乌头属一支蒿"的植物资源和民间药用情况进行了调查和整理。随着二萜乌头碱抗炎止痛生理活性在临床上广泛应用,"乌头属一支蒿"中的活性成分二萜生物碱以及这类化合物的抗炎止痛机制的研究成了热点。通过查阅文献,对"乌头属一支蒿"的来源、化学成分、药理活性等进行综述,以期为"乌头属一支蒿"的开发利用提供基础。     

丹参抗成纤维细胞增殖作用的分子机制研究

目的 探讨丹参抗成纤维细胞增殖作用的有效成分及分子作用机制。方法 采用索氏提取法制备丹参多种提取物及萃取部位;以抗人增生性瘢痕成纤维细胞（HSF）增殖的活性为导向,MTS法筛选活性部位,流式细胞仪检测细胞周期; UPLC-Q/TOF法分析丹参活性成分;通过反向对接预测试药抗细胞增殖的机制,RT-PCR检测caspase-3、MAP2K1、MAPK1增殖相关基因的表达水平。结果 丹参石油醚提取部位有较强的抗HSF增殖的活性,能显著增加G₀/G₁ 期细胞的比例,降低增殖指数（PI）,其主要活性成分为丹参酮类化合物;反向对接预测结果显示,丹参酮类化合物抗HSF增殖机制主要与调节caspase-3和MAP2K1等靶点及其相关通路有关;隐丹参酮能够上调caspase-3基因的表达,下调MAP2K1、MAPK1基因的表达,与预测结果相吻合。结论 丹参抗HSF增殖作用的机制与丹参酮类成分调节MAPK、VEGF等信号通路有关。     

乌头生物碱镇痛作用及机制研究进展

乌头属植物资源丰富、药用历史悠久、在临床上应用广泛。二萜生物碱是乌头属植物的主要药理活性成分,按结构可分为C-18 型、C-19 型、C-20 型和双二萜生物碱,具有抗炎、镇痛、抗肿瘤等活性。本文旨在综述临床中广泛使用的乌头属药物中几种主要二萜生物碱,包括草乌甲素（C-19 型）、雪上一枝蒿甲素（C-20 型）、高乌甲素（C-18 型）及乌头碱（C-19 型）的镇痛作用和机制的研究进展,以及乌头炮制的药理学依据。草乌甲素、雪上一枝蒿甲素、高乌甲素和乌头碱在多种疼痛模型和临床研究中均表现出良好的镇痛作用,其镇痛作用系通过Gs/cAMP/PKA/p38β/CREB 信号通路,刺激脊髓背角的小胶质细胞释放强啡肽,随后作用于神经突触后膜神经元上的κ- 阿片受体而产生。乌头碱经炮制生成苯甲酰乌头原碱,毒性降低,治疗指数增加。此外,多种乌头属二萜生物碱和乌头提取物均不产生镇痛耐受作用,并能有效抑制吗啡的镇痛耐受,亦与它们的镇痛作用机制有关。     

四逆汤煎煮过程中乌头类生物碱的溶出和水解平衡

目的 研究四逆汤中乌头类生物碱的溶出平衡和水解平衡。方法 利用电喷雾质谱分析，比较了制附子、四逆汤、四逆汤药渣和含有3种双酯型生物碱的混合对照品体系中的乌头碱类二萜生物碱。结果 在煎煮过程中双酯型生物碱溶解并发生水解反应，而脂类生物碱则难溶于水。乌头碱、中乌头碱、次乌头碱水溶性相近，但是次乌头碱在水中的热稳定性更高，C19二萜骨架上C3取代基(—OH或—H)的变化影响生物碱的稳定性。结论四逆汤中的乌头碱类生物碱的种类及含量由其溶解性和化学稳定性共同决定。     

当归肌动蛋白基因片段的克隆及序列分析

目的 对当归肌动蛋白（Actin）基因进行克隆及序列分析。方法 根据已经克隆的植物Actin基因的保守序列设计一对简并性引物,以当归根部总RNA为模板,采用RT-PCR方法扩增Actin基因片段并连接到pMD19-T载体上,阳性克隆经PCR检测后进行测序。结果 得到一段598 bp的序列,序列分析表明,该片段编码198个氨基酸,与高等植物Actin基因核苷酸序列同源性在83%以上,与其他肌动蛋白氨基酸序列同源性达94%以上。结论 首次从当归中克隆出了Actin基因,为有效利用该基因奠定了基础。