核酶抑制端粒酶活性的实验研究

目的为有效切割肿瘤细胞端粒酶ＲＮＡ组分使端粒酶活性降低,从而使细胞不能维持端粒长度而在有限分裂后进入凋亡。方法设计并合成了针对端粒酶ＲＮＡ组分的锤头状核酶基因,构建了该核酶基因的体外转录和真核表达质粒,检测了核酶对端粒酶ＲＮＡ组分的体外切割效力和对ＨｅＬａ细胞端粒酶活性的抑制效力。结果该核酶对端粒酶ＲＮＡ组分的体外切割效率达到６０％左右。导入ＨｅＬａ细胞后使端粒酶活性降至原来的１／８～１／１０,细胞生长速度明显变慢,传至１９～２０代时出现９５％凋亡。结论该核酶可望成为有效的端粒酶抑制剂,在肿瘤基因治疗中发挥作用。     

端粒,端粒酶的结构功能与肿瘤研究新进展

从ＤＮＡ、ＲＮＡ和蛋白质三方面，综合分析以往关于端粒和端粒酶的结构和功能的研究进展，及今年以来多项关于端粒结合蛋白及端粒酶结构蛋白的研究新突破，阐明了端粒长度及端粒酶活性与细胞凋亡、肿瘤发生和进展具有十分密切的关系。另外还注意到，随着“克隆羊”的诞生，以往关于端粒、端粒酶的理论势必面临新的挑战。     

端粒、端粒酶的结构功能与肿瘤研究新进展

从ＤＮＡ、ＲＮＡ和蛋白质三方面，综合分析以往关于端粒和端粒酶的结构和功能的研究进展，及今年以来多项关于端粒结合蛋白及端粒酶结构蛋白的研究新突破，阐明了端粒长度及端粒酶活性与细胞凋亡、肿瘤发生和进展具有十分密切的关系。另外还注意到，随着“克隆羊”的诞生，以往关于端粒、端粒酶的理论势必面临新的挑战。     

端粒,端粒酶与肿瘤

端粒是真核生物细胞染色体末端的一种由许多简单重复序列及其相关蛋白质组成的复合结构，具有防止染色体末端丢失及解决末端复制难题的作用。端粒酶是一种逆转录酶，由蛋白质和ＲＮＡ组成，其作用是以自身ＲＮＡ为模板，合成端粒序列。研究发现在恶性肿瘤细胞中端粒变短，并在端粒酶作用下维持一种动态平衡状态。端粒酶的活化可能是细胞永生化的一个重要条件，针对端粒酶的基因治疗可能为肿瘤的治疗开辟一条新的途径。     

端粒酶活性抑制与肿瘤治疗的研究

端粒酶是一种核糖蛋白，包括人端粒酶ＲＮＡ、端粒酶相关蛋白和端粒酶催化蛋白亚单位三个主要组成部分，可向染色体末端添加端酶ＤＮＡ序列。端粒酶在８５％～９５％的恶性肿瘤组织中有阳性表达，而正常体细胞则一般阴性，是进行肿瘤基因治疗的理想靶点。目前以抑制端粒酶活性为靶点的肿瘤治疗研究较多，其主要策略有：①阻断人端粒酶ＲＮＡ的模板作用；②抑制端粒酶催化蛋白亚单位；③核苷类似物竞争性抑制反转录过程；④细胞分化诱     

端粒酶的研究进展,存在问题及其在病理学中的应用

从Ｋｉｍ等于 1994年报道了用ＴＲＡＰ法能检测到数十个肿瘤细胞的端粒酶活性以来 ,端粒酶的研究已经取得了长足的进展。重要的进展可概括为其蛋白质成分的分离、纯化及其基因克隆 ;端粒酶的功能研究 ;表达细胞群的研究和潜在的应用价值 4个方面。一、端粒酶蛋白质成分分离端粒酶是一个以自身ＲＮＡ为模板逆转录出一段ＤＮＡ以补充染色体ＤＮＡ在复制中由于末端ＲＮＡ引物被水解后 ,其缺口不能被ＤＮＡ聚合酶修复而丢失的端粒末端ＤＮＡ的核蛋白。不同种属的端粒酶的ＲＮＡ在 1995年和 1996年先后由Ｇｒｅｉｄｅｒ等[1 ] 克隆到。但端粒酶蛋…     

一种简便快捷的端粒酶活性原位检测法

端粒酶是一种特殊的逆转录酶,其由ＲＮＡ和蛋白质组成,并以本身ＲＮＡ为模板催化端粒的合成和延伸〔１〕。在体细胞中除成人生殖细胞、胚胎细胞和造血干细胞外,绝大多数正常体细胞该酶呈失活状态,而大多数癌细胞和永生化细胞具有端粒酶活性。目前认为端粒酶激活与肿瘤...     

硫代修饰型反义寡核苷酸抑制肺癌细胞系端粒酶活性及增殖的研究

了解人肺癌细胞系的端粒酶活性情况。探讨硫代修饰型端粒酶ＲＮＡ反义寡核苷酸封阻端粒酶ＲＮＡ,对癌细胞代谢,生长的抑制作用。方法采用端粒酶ＰＣＲ ＥＬＩＳＡ方法检测８种体外培养从肺癌细胞系端粒酶活性。合成端粒酶ＲＮＡ的反义硫代寡核苷酸（６聚体、９聚体、１２聚体）和随机序列寡核苷酸,分别导入ＬＴＥＰ－ａ－２细胞系,作用７２ｈ。采用端粒酶ＰＣＲ ＥＬＩＳＡ方法检测端粒酶活性,四甲基偶氮唑盐（ＭＴＴ）光吸收     

端粒酶活性调控的研究进展

端粒酶是一种ＲＮＡ－蛋白质复合物,它通过逆转录过程将富含Ｇ的单链ＤＮＡ重复序列合成至染色体末端。端粒酶的激活和抑制影响到端粒长度的改变,进而对衰老和肿瘤发展有所贡献。建立其活性调控模型,讨论细胞内外因子及其自身组分对它活性的影响,将能够给予关于端粒酶的应用性研究奠定重要基础。     

端粒酶活性调控的研究进展

端粒酶是一种ＲＮＡ－蛋白质复合物,它通过逆转录过程将富含Ｇ的单链ＤＮＡ重复序列合成至染色体末端。端粒酶的激活和抑制影响到端粒长度的改变,进而对衰老和肿瘤发展有所贡献。建立其活性计控模型,讨论细胞内外因子及其自身组分对它活性的影响,将能够给予关于端粒酶的应用性研究奠定重要基础。     

端粒体--调节端粒的多聚复合体

因端粒与衰老、肿瘤密切相关,近年来对端粒调节的研究进一步深入。最近发现端粒长度的动态平衡是由端粒、端粒酶、端粒结合蛋白组成的高分子复合体———端粒体调节的。在端粒体中,端粒、端粒酶、端粒结合蛋白相互作用,共同完成对细胞基本生命活动的调节。近年来,分子生物学技术的进展从分子水平上阐明了端粒体各组分间的关系,为端粒长度的调节开辟了新的靶点。     

端粒及端粒酶研究的新进展

端粒是染色体末端高度保守的重复核苷酸序列，对染色体具有保护作用，随着细胞分裂的不断进行，端粒逐渐缩短，减少到一定程度，细胞就趋向衰亡，被认为是细胞有丝分裂的“生物钟”。端粒酶是影响端粒长度的主要因素，以其ＲＮＡ为模板，向端粒末端添加（ＴＴＡＧＧＧ）ｎ序列，使端粒延长，从而延长细胞的寿命甚至使其永生。端粒酶的功能区主要在ｈＴＲ的４４－２０３核苷酸区，３ｐ和１０ｐ上存在着编码调整端粒酶的基因，Ｅｓｔｌ可能是端粒末端结合蛋白，是端粒酶的识别位点。正常情况下，此酶活性较低或无活性，但在干细胞、永生型细胞或肿瘤细胞此酶活性较强。端粒酶的活性主要与细胞分裂速度、细胞周期因素及细胞分化程度有关，细胞分化程度低、细胞增生活跃及肿瘤细胞在Ｓ期时活性较高。在恶性肿瘤中端粒酶活性较高，但在良性肿瘤和非肿瘤中活性较低，因而可利用ＴＲＡＰ技术对端粒酶活性进行检测来进行肿瘤诊断及良恶性鉴别。同时可利用端粒酶抑制剂能抑制端粒酶的活性，缩短端粒，使恶化细胞良转，达到治疗肿瘤的作用，而且还可利用检测端粒酶作为治疗效果好坏的指标。     

端粒,端粒酶和肿瘤发生的关系

端粒是真核生物染色体的天然末端,它对染色体的稳定起重要作用。其长度缩短或丢失可导致细胞死亡或恶变。端粒酶是一种特殊的核糖核蛋白逆转录酶,它的活性可以自身ＲＮＡ为模板合成端粒ＤＮＡ加到染色体末端,以维持端粒长度,使细胞永生。端粒及端粒酶与肿瘤发生的关系成为近年来的研究热点。端粒酶可望成为肿瘤治疗领域的新的靶分子。本就这一领域里的新进展作一综述。     

端粒及端粒酶研究的新进展

端粒是染色体端高度保守的重复核苷酸序列，对染色体具有保护作用，随着细胞分裂的不断进行，端粒逐渐缩短，减少到一定程度，细胞就趋向衰亡，被认为是细胞有丝分裂的“生物钟”端粒酶是影响端粒长度的主要因素，以其ＲＮＡ为模板，向端粒末端添加（ＴＡＧＧＧ）ｎ序列，使端粒延长，从而延长细胞的寿命甚至使其永生，端粒酶的功能区主要在ｈＴＲ的４４－２０３核苷酸区，３ｐ和１０ｐ上存在着编码调整端粒酶的基因，Ｅｓｔｌ可能是     

端粒酶反义腺病毒载体对乳腺癌细胞MCF-7端粒酶的抑制作用

端粒酶ＲＮＡ的反义地人乳腺癌细胞系ＭＣＦ－７细胞端粒酶活性的影响。方法用重组腺病毒转移并表达端粒酶ＲＮＡ的反义ｃＤＮＡ,采用基因重组腺脂质体共转当闰酶反义重组病毒,用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交鉴定病毒的整合功能,用ＴＲＡＰ－ 染法检测端粒酶活性。结果ＭＣＦ－７细胞是恶性乳腺癌的典型细胞系。对对照组ＭＣＦ－７、ＭＣＦ－７、ｖＡｄ－ＡＡＶ细胞相比,反义病毒感染后的细胞是恶性乳腺癌的典型细胞系。与对照组ＭＣＦ     

二亚硝基哌嗪诱发SD大鼠鼻咽癌变中端粒酶和端粒酶RNA的表达

目的 :端粒酶是一种反转录酶 ,由ＲＮＡ和蛋白质组成的复合物 ,能以自身为模板催化合成端粒ＤＮＡ ,以弥补细胞有丝分裂时端粒的丢失 ,使得细胞无限地增殖 ,呈永生化。端粒酶激活与肿瘤的发生密切相关。研究证明 ,端粒酶的激活是肿瘤发生的早期事件 ,细胞的恶性改变依赖于端粒酶的激活研究。二硝亚基哌嗪 (ＤＮＰ)为一间接致癌物 ,不仅可在体内诱发大鼠鼻咽癌 ,而且可诱发体外培养的人胚鼻咽上皮细胞恶性转化 ,其致癌作用可能与ＤＮＡ损伤和基因突变有关。方法 :采用二硝亚基哌嗪 (ＤＮＰ)诱发大鼠鼻咽癌 ,研究鼻咽癌变过程中端粒酶的表达规…     

端粒酶结构与功能的研究进展

端粒和端粒酶对于细胞生存和肿瘤发生具有非常重要的意义 ,端粒酶各个组分的结构、功能及其调控已成为肿瘤学的研究热点。端粒酶的活性有赖于其结构的完整 ,但活性变化的限速步骤是由催化亚基决定的。另外值得注意的是 ,在无端粒酶活性的永生化细胞中也有端粒长度维持现象     

端粒酶与细胞增殖及炎性疾病的关系

人端粒酶由RNA亚基、催化亚基和端粒酶调节蛋白组成，端粒酶对端粒结构的稳定起着重要作用。端粒酶与肿瘤细胞增殖、分化密切相关，近年还发现在许多良性炎性疾病、非肿瘤衍生原代细胞中表达一定程度端粒酶活性，了解端粒酶在炎性疾病中的表达情况有助于更深入认识端粒酶本质及端粒酶在相关疾病中的作用。本文介绍风湿性疾病、甲状腺疾病及肝病的端粒酶活性表达情况。     

端粒酶结构与功能的研究进展

端粒和端粒酶对于细胞生存和肿瘤发生具有非常重要的意义,端粒酶各个组分的结构、功能及其调控已成为肿瘤学的研究热点。端粒酶的活性有赖于其结构的完整,但活性变化的限速步骤是由催化亚基决定的。另外值得注意的是,在无端粒酶活性的永生化细胞中也有端粒长度维持现象。     

端粒酶与喉肿瘤

端粒酶是维持染色体端粒长度和功能稳定的重要物质 ,在肿瘤发生发展中具有重要作用及功能。因此 ,端粒酶与肿瘤的关系日益受到重视。近年来大量研究资料表明 ,喉肿瘤中有端粒酶的表达 ,并在不同时期有不同程度的表达 ,端粒酶有可能成为喉肿瘤早期诊断的标志物。本文就端粒酶结构、功能、活性检测及其与喉癌关系的研究作一简要综述。1　端粒酶的结构与功能1.1　端粒的结构与功能　端粒 (TL M)是真核生物染色体末端由简单重复富含 G的 DNA序列及端粒特异结合蛋白组成的一种特殊结构。在脊椎动物 ,端粒是由 10～ 15 kb的重复序列 (TTAGGG…