氯霉素注射液稳定性的观察

氯霉素在结晶状态很稳定,但其水溶液在室温放置不稳定,易分解产生氨基物,影响其稳定性。国内多家药厂生产的氯霉素注射液,在贮存一年期后,氯霉素的含量大多下降至标示量的90％以下,分解物(氨基物)也多达10％以上。为此,我们对广州地区药厂生产的氯霉素注射液进行稳定性的观察,结果如下。     

(2S,3S)-N-苄氧羰基-4-苯基-3-氨基-1-氯-2-丁醇的合成与结构表征

以天然产物中提取的L-苯丙氨酸为原料,经氨基保护、重氮化反应、氯化和还原反应后合成了(2S,3S)-N-苄氧羰基-4-苯基-3-氨基-1-氯-2-丁醇。并以高效液相色谱-质谱联用技术、单晶X射线衍射等方法对产品进行了分析和结构表征。     

(2S,3R)-1-二甲氨基-3-(3-甲氧基苯基)-2-甲基戊-3-醇的合成工艺研究

目的 对(2S,3R)-1-二甲氨基-3-(3-甲氧基苯基)-2-甲基戊-3-醇合成工艺进行研究。方法 以3-戊酮为起始原料,经Mannich反应、手性拆分、Grignard反应等步骤合成(2S,3R)-1-二甲氨基-3-(3-甲氧基苯基)-2-甲基戊-3-醇,并对化学拆分进行工艺优化。结果 合成(2S,3R)-1-二甲氨基-3-(3-甲氧基苯基)-2-甲基戊-3-醇,总收率为30.6%。结论 工艺改进后提高了目标产物的收率,同时也减少了原料的浪费。     

邻氯扁桃酸的拆分Ⅰ.工艺过程研究

为了制备手性邻氯扁桃酸，选择了具有光学活性的α-苯乙胺等3种胺类物质作为拆分剂，分别考察它们在水、乙醇、甲苯、乙酸乙酯、乙腈等多种溶剂中的拆分特性。结果发现，采用光学活性1-(p-硝基苯基)-2-氨基-1，3-丙二醇为拆分剂，可以顺利地在水中拆分邻氯扁桃酸，产品光学纯度达99％，拆分剂回收率大于90％，易于实现工业化。     

粗吻海龙化学成分的研究

目的 研究粗吻海龙Trachyrhamphtts serratus的化学成分。方法 采用低压柱色谱研究粗吻海龙乙醇提取物的化学成分，经波谱分析鉴定其结构。结果 从粗吻海龙乙醇提取物中分离到8个化合物，分别是：胆甾醇(1)，十六酸(Ⅱ),十四酸(Ⅲ)，六氢-吡咯并吡嗪-1．4-二酮(Ⅳ)，肌酸酐(Ⅴ)，1-甲基-2-氨基-二氢咪唑-4-酮钠盐(肌酸酐钠)(Ⅵ)，尿嘧啶(Ⅶ)，胸腺嘧啶(Ⅷ)。结论 化合物Ⅳ是首次报道的天然产物。     

7-氯4-{4-[2-(2-甲基咪唑-1-基)-乙基]-哌嗪-1-基}-喹啉的合成与结构鉴定

目的 对具潜在抗疟活性的化合物7-氯-4-{4-[2-（2-甲基咪唑-1-基）-乙基]-哌嗪-1-基}-喹啉进行合成设计.方法 采用氨基保护、亲核反应、脱保护等多步反应合成目标产物,并利用硅胶柱层析对其进行纯化.结果 通过GC-MS、IR、1 H-NMR等方法对化合物进行了结构鉴定.结论 本合成方法操作简单,产率高,适...     

改进的"一锅煮"法合成3-氨基-3-芳基丙酸

目的:改进3-氨基-3-芳基丙酸的合成方法,提高化学产率.方法:以甲醇为反应溶剂,芳香醛和3当量醋酸铵反应生成希夫碱,再加入丙二酸,反应混合物剧烈回流16 h得目标产物.将产物用核磁共振仪进行光谱学鉴定.结果:合成出10种3-氨基-3-芳基丙酸,其中5种为新的β-氨基酸,产率为25%～79%,比文献报道产率提高约10%.结论:该合成法简单、易行,降低了反应成本,有很好的工业应用价值.     

大鼠血红素加氧酶-1基因在乳酸乳球菌中的表达

目的:在乳酸乳球菌中表达大鼠血红素加氧酶-1(HO-1)基因。方法:采用RT-PCR技术从大鼠脾总RNA中分离扩增血红素加氧酶HO-1基因,将该基因克隆进pGEM-Teasy质粒中,转化大肠杆菌DH5α提取质粒,鉴定HO-1基因。酶切后与pSEC质粒连接,经电击转化,将重组质粒转入乳酸乳球菌NZ9000中,转化子在含有氯霉素的脑心浸液培养基上培养。用nisin诱导HO-1表达,SDS-PAGE、Westernblot鉴定表达产物,并采用分光光度法测定HO-1活性。结果:表达产物相对分子量约为32kU,表达量约为7.0mg/L,HO-1活性为2.386U/(mg·h)。结论:乳酸乳球菌能够表达具有生物活性的大鼠HO-1。     

三唑头孢菌素衍生物的合成及其抗菌活性

以青霉素G的扩环产物7-苯乙酰氨基-3-甲基-3-头孢烯-4-羧酸为起始原料,合成了13个3′位上有4,5-双取代-V-三唑基的未见文献报道的头孢菌素衍生物,经元素分析及光谱数据确证其结构。体外抑菌试验结果表明,其中7个化合物(9a～g)具有较强的广谱抗菌活性。     

6-氨基胡椒酸的合成工艺改进

目的 改进6-氨基胡椒酸的合成工艺.方法 以胡椒酸为原料,经发烟硝酸硝化、铁粉或保险粉(Na2S2O4)还原,合成6-氨基胡椒酸.结果 产物经HRMS,MS,1H-NMR,IR等分析手段进行了结构确证,总收率达到64%.结论 本文首次以胡椒酸为原料合成了6-氨基胡椒酸.工艺路线合理可行,比传统的工艺路线易于控制,操作简单.     

泰唑巴坦关键中间体的合成研究

目的　改进β-内酰胺酶抑制剂泰唑巴坦关键中间体2α-甲基-2β[(1,2,3-三唑-1-基)-甲基]青霉烷酸砜二苯甲酯(Ⅰ)的合成。方法　将2α-甲基-2β-氯甲基-青霉烷酸二苯甲酯(Ⅱ)与1,2,3-三唑直接反应,再经氧化,成功地合成了Ⅰ。结果　对本合成路线中关键步骤的反应条件进行了优化,提出了可能的反应机理。结论　该研究结果　为提高合成泰唑巴坦的收率奠定了基础。     

4-1BB/4-1BBL在自身免疫性心肌炎小鼠心肌中的表达及意义

目的:探讨4-1BB/4-1BBL在实验性自身免疫性心肌炎(EAM)小鼠心肌组织中的表达及意义。方法:将提纯的猪心肌肌球蛋白和完全弗氏佐剂等体积混合成乳浊液在1 d、8 d免疫具有遗传易感性的BALB/c小鼠,建立EAM模型。对照组小鼠仅用完全弗氏佐剂皮下注射。分别于初次免疫后21 d、80 d进行心肌炎症评分及血清cTnI测定,采用免疫荧光及RT-PCR技术检测4-1BB/4-1BBL在小鼠心肌组织中的表达。结果:在急性期21 d,模型组小鼠心肌组织见不同程度的急性炎性细胞浸润和心肌细胞变性坏死、cTnI水平高于对照组(P<0.05);80d模型组小鼠心肌组织炎症减弱伴有纤维化出现、cTnI较前期降低;免疫荧光见4-1BBL在模型组心肌中表达明显,在对照组小鼠心肌中少量表达(P<0.05);21 d模型组小鼠心肌组织中4-1BB/4-1BBL基因表达水平均高于对照组(P<0.01),80 d时表达仍然升高(P<0.01)。结论:4-1BB/4-1BBL在EAM小鼠心肌中的表达是上调的,4-1BB/4-1BBL通路参与了自身免疫性心肌炎的发生发展过程。     

氯化锂对帕金森病小鼠黑质多巴胺能神经元保护作用的实验研究

目的研究氯化锂（LiCl）对KM小鼠中脑黑质受损伤的多巴胺（DA）能神经元的保护作用。方法利用1-甲基4-苯基1，2．3，6四氢吡啶（MPTP）腹腔注射构建帕金森病（PD）动物模型，将实验动物分为MPTP组、NS组（生理盐水组）、LiCl组、PBS组（磷酸盐生理盐水缓冲液组）。模型动物存活1周后，一部分取其中脑黑质节段，固定、包埋做连续冠状石蜡切片，以免疫组织化学染色方法，显示各组酪氨酸羟化酶（TH）和钙结合蛋白（CB）表达阳性细胞，光镜观察并细胞计数，统计学分析；另一部分取其中脑黑质组织匀浆，行TH、CB的Western blot免疫印迹方法检测．用LabWorks软件分析处理。结果免疫组织化学染色结果显示LiCl组、NS组小鼠黑质致密部TH与CB阳性神经元数量分别显著多于PBS组（P〈0．01）、MPTP组（P〈0．01）；Western blot免疫印迹结果显示LiCl组TH、CB表达水平显著高于PBS组（P〈0．05）。结论LiCl对成年PD小鼠黑质DA能神经元具有保护作用，且这种保护作用可能与细胞内CB表达增加有关。     

间接ELISA检测HIV－1／－2抗体

报告了一种检测人类免疫缺陷病毒Ⅰ型和Ⅱ型（ＨＩＶ－１／－２）抗体的间接酶联免疫吸附测定（ＥＬＩＳＡ）方法。通过检测４ｌ份ＨＩＶ抗体参比血清（其中１３份为ＨＩＶ抗体阳性，２８份为ＨＩＶ抗体阴性），未见假阴性结果（０／１３）。在２８份阴性参比血清中，有２份呈假阳性。变异系数（ＣＶ）小于１５％。该结果符合参比血清说明书规定的标准。     

1-氰基-2-苯甲酰基-7-苯甲酰氧基-1,2-二氢异喹啉的催化氢化研究

本文对1-氰基-2-苯甲酰基-7-苯甲酰氧基-1,2-二氢异喹啉(Ⅲ)(Reissert化合物)的催化氢化反应进行了探讨。按文献报道这类化合物的催化氢化发生在烯键、氰基被还原的同时进行分子重排。作者对氢化产物进行分离、纯化,并采用元素分析、MS、IR、~1HNMR及~(13)CNMR等进行了测定。证明反应产物为1-苯甲酰氨甲基-2-苯甲酰基-7-苯甲酰氧基-1,2-二氢异喹啉(Ⅳ)。充实了Reissert化合物催化氢化反应的实验研究。     

HA14-1诱导不同Bcl-2表达水平的白血病细胞凋亡

[目的]探讨HA14-1对不同Bcl-2表达水平的白血病细胞的作用以寻求克服白血病耐药的新药物.[方法]用不同浓度的HA14-1(0、25、50、75、100 μmol/L)作用于白血病细胞株(HL60、Jurkat clone E6-1、BALL-1),4 h后在流式细胞仪上检测细胞凋亡及作用0、1、3、4、5 h时细胞中胱冬肽酶(caspase)3和caspase9的含量.[结果]随HA14-1剂量的增加,存活细胞逐渐减少,HL60从(94.3±1.4)%降至(62.1±2.3)%;Jurkat clone E6-1从(94.7±1.5)%降至(12.4±1.3)%;BALL-1从(94.7±0.8)%降至(0.9±0.6)%.同一剂量时,不同细胞的存活率与Bcl-2表达高低呈负相关.随剂量的增加细胞凋亡率逐渐增加,如Jurkat clone E6-1凋亡率从(0.5±0.1)%上升至(60.1±2.6)%;在较高剂量时(100 μmol/L),细胞大幅度坏死,坏死率从<(3.3±0.6)%增至(26.8±1.6)%.在凋亡时,caspase9于1 h开始激活,caspase3于3 h开始升高.[结论]在一定剂量范围内,HA14-1通过抑制Bcl-2诱导细胞凋亡,HA14-1有可能成为克服白血病细胞耐药的新药.     

三种标志物联检对肺癌的诊断价值探讨

肺癌是一种临床常见的恶性肿瘤之一，严重危害人类生命；肺癌又是一种异位分泌的肿瘤。可以从患者血清中检出许多种属于异位分泌的激素类物质，在血清学诊断方面，常用的肺癌标志物有癌胚抗原（CEA）、神经烯醇化酶（NSE）、血清铁蛋白（SF）、CYFRA21—1等，由于单个检测项目结果对肺癌评估效果不尽理想，同时其假阴性与假阳性在所难免，为了提高诊断准确率与阳性率。我们提倡应联合检测，取长补短，综合分析。我们对105例肺癌患者血清中的CEA、CYFRA21—1、NSE联合检测的结果进行了分析，初步探讨其对肺癌的诊断价值。     

混合皮肤移植中自体角朊细胞转染B7-1后诱导抑制功能的改变

目的 分析混合皮肤移植中自体角朊细胞转染B7-1基因后功能的改变，并探讨传统共刺激分子和MHC Ⅱ类分子等在自体角朊细胞诱导的局部免疫耐受中的作用。方法 利用建立的MELC体外模拟系统，对自体角朊细胞进行B7-1基因的转染，观察转染前后自体角朊细胞诱导抑制能力的变化，同时通过抗CTLA-4单抗及HLA Ⅱ类分子的封闭实验，观察这些分子在自体皮岛抑制效应中的作用。结果 自体角朊细胞转染B7-1基因后，诱导局部免疫抑制的能力消失，如果加入抗B7-1单抗阻断B7-1的作用后，其诱导抑制的能力又恢复；抗CTLA-4单抗不能阻断自体角朊细胞在实验体系中的抑制作用；用单抗所作的封闭实验结果表明。抗HLA-DR单抗封闭组对自体角朊细胞对MELR抑制诱导的影响最小（P〉0．05），抗DQ单抗则可以对MELR的抑制得到最大幅度的回复，而抗DP单抗也可以使体系中cpm值有一定的回升。结论 混合皮肤移植中，自体角朊细胞之所以可以诱导局部免疫耐受，是通过B7-1以外的其他共刺激信号激活Th2亚群、进而遏制Th1亚群来诱发抑制的，而且这种抑制与CTLA-4的负向调节无关。并具MHC限制性。     

病毒介导多种基因对胆管癌细胞免疫原性的影响

目的 探讨IFN－γ、IL－2或B7－1基因修饰对胆管癌细胞免疫原性的作用。方法 构建携带人IFN－γ或IL－2基因的逆转录病毒表达载体，和含人B7－1基因的腺病毒载体，导入胆管癌细胞系QBC939，运用淋巴细胞杀伤试验、肿瘤细胞在裸鼠体内成瘤性分析、混合淋巴细胞和肿瘤细胞培养，研究导入的目的基因对QBC939细胞免疫原性的影响。结果 导入IFN－γ基因的QBC939细胞体外能增强胆管癌病人外周血淋巴细胞杀伤亲本瘤细胞的活性；导入IL－2基因的QBC939细胞在裸鼠体内的成瘤性降低；导入B7－1基因的QBC939细胞能刺激外周血T淋巴细胞的增殖。结论 人IFN－γ、IL－2和B7－1基因修饰能增强胆管癌QBC939细胞的免疫原性。     

血清角质素在肺癌诊断及鉴别诊断中的应用

目的研究CYFRA21-1在肺癌诊断、鉴别诊断中的临床应用价值.方法应用酶联免疫法(EIA)测定110例健康人,92例非肿瘤肺疾病和423例癌症患者(其中包括123例肺癌、97例肝癌、105例乳腺癌和108例鼻咽癌)血清中的CYFRA21-1的水平.结果肺癌组CYFRA21-1的水平为(8.24±6.72)μg/L明显高于健康对照组(1.67±0.68)μg/L及良性肺疾病组(1.92±0.95)μg/L,差异均有高度显著性(P<0.001).以>3.3μg/L为阳性判断值,各组别阳性率分别为良性肺疾病组5.4%、肺癌组61.0%、乳腺癌组26.7%、肝癌组23.7%、鼻咽癌组12.0%.经统计学分析,肺癌组其含量及阳性率与其他组别之间差异有显著性(P<0.05).不同组织类型肺癌阳性率在35.7%～76.1%,其中以鳞癌为最高.结论血清中CYFRA21-1的测定对肺癌的实验室诊断,尤其是鳞癌的诊断有重要的临床应用价值,它是敏感、特异性较高的肺癌肿瘤标志物.