中性粒细胞凋亡在大鼠急性肺损伤发病机制中的意义

目的从细胞凋亡的角度探讨急性肺损伤(ALI)的发病机制。方法雄性SD大鼠36只,随机分为模型组(ALI组)30只和正常对照组6只,观察肺组织病理切片,进行肺损伤评分(LIS)、肺水含量测定、肺通透性测定(LPI)、肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)测定、BALF中性粒细胞(PMN)凋亡测定。结果模型组可见肺泡腔狭窄、炎性细胞渗出等ALI表现,且随时程延长病变加重。模型组各时相肺损伤评分较对照组有显著性差异(P均<0·05),随时程延长肺损伤评分逐渐增加。模型组各时相点肺湿干重比较对照组明显升高(P均<0·05),但各时相点之间无差异。模型组LPI2、4h与对照组无差异,6、8、16h显著升高(P均<0·01)。模型组2hBALF中TNF-α达高峰(P<0·01),4、6h与对照组有显著差异(P均<0·05),8、16h与对照组组无差异。BALF中PMN凋亡结果,模型组各时相点均低于对照组(P均<0·01)。结论PMN在肺泡内的凋亡在ALI的发生发展中起重要作用。ALI时BALF中PMN凋亡率呈下降的趋势,总体低于正常值。     

机械通气对急性肺损伤大鼠细胞凋亡的影响

目的 研究不同潮气量及不同呼气末正压(PEEP)水平对急性肺损伤(AU)大鼠支气管和肺组织细胞凋亡的影响,并初步探讨细胞凋亡在呼吸机相关性肺损伤(VILI)中的作用机制.方法 选用40只SD大鼠,制作ALI模型,随机(随机数字法)分为:(1)小潮气量组(LV组),潮气量8 mL/kg,不加PEEP;(2)大潮气量组,潮气量30 mL./kg,不加PEEP;(3)小潮气量+ 2PEEP组(LV2P组),潮气量8 mL/kg,同时给PEEP 2 cmH2O(1 crnH2O =0.098 kPa);(4)小潮气量+5PEEP组(LV5P组),潮气量8 mL/kg,同时给PEEP 5 cmH2O;(5)小潮气量+8PEEP组(LV8P组),潮气量8 mL/kg,同时给PEEP 8 cmH2O.通气2h后处死动物,留取肺标本.用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的末端标记法(TUNEL)分析肺组织中的细胞凋亡情况,用免疫组化法检测肺组织中caspase-3蛋白的表达及分布.结果 大潮气量组支气管和肺组织细胞凋亡的明显增加(P＜0.01),caspase-3蛋白酶表达最强.采用PEEP后,支气管和肺组织细胞凋亡减少,capase-3蛋白酶表达弱阳性,以LV5P组最为显著(P＜0.01).结论 小潮气量对肺组织有保护作用,采用PEEP后保护作用更加明显,细胞凋亡在VILI的发生中有重要作用.     

急性肺损伤中肺泡Ⅱ型细胞凋亡机制的研究现状

急性肺损伤 (acute lung injury,AL I)肺组织的病理变化为肺泡上皮细胞的严重损伤。近年来的研究表明 ,支气管肺泡灌洗液 (bronchoalveolar lavage,BAL )中肺泡上皮细胞损伤的标记物对AL I或急性呼吸窘迫综合征 (ARDS)患者早期诊断及预后判断有重要意义〔1〕。许多损伤性刺激并非直接杀死细胞 ,而是触发细胞凋亡 (apoptosis)信号的瀑布样传递过程。细胞凋亡存在两条不同的途径 :其一是经过受体介导的凋亡 ;其二是线粒体依赖性的凋亡。肺泡 型上皮细胞 (alveolar type cell,AT 细胞 )是肺泡上皮细胞的干细胞 ,AT 细胞的凋亡在 AL …     

急性肺损伤大鼠肺组织细胞凋亡及Fas／FasL系统表达改变？…

目的：探讨细胞凋亡与急性肺损伤（ＡＬＩ）发生,发展的关系以及Ｆａｓ和／ＦａｓＬ系统表达改变的意义,方法：复制内毒素性大鼠ＡＬＩ模型;采用ＴＵＮＥＬ法,原位杂交,半定量转录聚合酶链反应（ＳｑＲＴ－ＰＣＲ）及免疫组化等技术观察大鼠ＡＬＩ发生过程中,肺组织细胞凋亡变化以及Ｆａｓ／ＦａｓＬ系统蛋白质和ｍＲＮＡ表达的改变。结果：内毒素性ＡＬＩ早期（〈２４小时）大鼠肺泡上皮细胞和肺血管内皮细胞凋亡明显增加,肺     

急性肺损伤与中性粒细胞凋亡

研究表明 ,急性肺损伤 (ＡＬＩ)是始于有害环境及内源性因子作用下的肺泡壁爆炸性炎症反应。中性粒细胞的增多与激活以及血管内皮细胞的功能受损 ,释放多种炎症介质是ＡＬＩ的主要发病机制 ,其病理组织学表现为肺泡Ⅱ型细胞增生、成纤维细胞增殖及胶原的聚集[1 ] 。传统观念认为 ,急性损伤常引起组织坏死 ,自从 1972年Ｋｅｒｒ等人提出细胞凋亡的概念后 ,细胞凋亡已被证实在许多生物过程中起着重要的调节作用 ,包括炎症反应[2 ] 。有实验显示 ,内毒素、烧伤、缺血与再灌流损伤及脑外伤等均可导致相关脏器的细胞凋亡[3 ] 。本文即是从细胞凋…     

内质网应激在大鼠急性肺损伤中的意义

目的探讨内质网应激在脂多糖内毒素诱导的大鼠急性肺损伤（Au）中的意义。方法Wistar大鼠40只,分为4组：30只大鼠用脂多糖内毒素制作急性肺损伤模型,分别于制模后1、6、12h三个时间点分批处死大鼠,命名为Au1组、ALI2组、Au3组,各10只;同时设对照组10只。对所有大鼠进行动脉血气分析,并采用逆转录聚合酶链反应法和免疫印迹法分别检测葡萄糖调节蛋白78（GRP78）、CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白（CHOP）mRNA及其蛋白表达情况。采用流式细胞术定量分析肺组织细胞caspase-12的表达。结果与对照组比较,Au各组大鼠的二氧化碳分压（PaCO2）、动脉血样分压（PaO2）及氧合指数均明显下降（P均〈0．05）,且Au2组、ALI3组大鼠各指标较AU1组下降更为明显P均〈0．05）。AU各组大鼠GRP78的mRNA水平及caspase-12表达较对照组显著增加（P均〈0．05）,且ALl2组、ALI3组大鼠较ALI1组增加更为明显（P均〈0．05）。而GRP78蛋白水平、CHOPmRNA及其蛋白表达水平仅在ALI2组、ALI3组与对照组比较时有统计学意义（P均〈0．05）。结论内质网应激是内毒素源性的急性肺损伤的重要病理生理机制。     

急性肺损伤大鼠肺组织细胞凋亡及Fas/FasL系统表达改变及其意义

目的：探讨细胞凋亡与急性肺损伤（ＡＬＩ）发生、发展的关系以及Ｆａｓ和／ＦａｓＬ系统表达改变的意义。方法：复制内毒素性大鼠ＡＬＩ模型;采用ＴＵＮＥＬ法、原位杂交、半定量逆转录聚合酶链反应（ＳｑＲＴ ＰＣＲ）及免疫组化等技术观察大鼠ＡＬＩ发生过程中,肺组织细胞凋亡变化以及Ｆａｓ／ＦａｓＬ系统蛋白质和ｍ ＲＮＡ表达的改变。结果：内毒素性ＡＬＩ早期（＜ ２４ 小时）,大鼠肺泡上皮细胞和肺血管内皮细胞凋亡明显增加;肺组织Ｆａｓ／ＦａｓＬｍ ＲＮＡ和蛋白质表达明显上调,且与肺组织细胞凋亡的增加相一致。结论：肺组织细胞凋亡以及Ｆａｓ／ＦａｓＬ系统表达明显上调可能参与大鼠ＡＬＩ的发病机制。     

中性粒细胞凋亡与急性肺损伤

急性肺损伤时,中性粒细胞是造成过度性、失控性炎症反应的主要因素.中性粒细胞凋亡异常引起的功能和数量上的改变,可能是参与过度炎症反应的重要机制之一.中性粒细胞凋亡涉及到多基因、多因素的综合作用.深入了解Au时PMN凋亡的规律及调控机制,不仅有助于进一步阐明ALI发病机制,而且可能为治疗ALI提供新的思路和手段.     

抗凋亡蛋白肽对大鼠急性肺损伤的保护作用

目的 探讨重组构建的抗凋亡蛋白肽对脂多糖（LPS）诱导大鼠急性肺损伤（ALI）的保护作用.方法 雄性SD大鼠28只随机分4组（7只／组）：对照组、LPS组、抗凋亡蛋白肽高剂量组和抗凋亡蛋白肽低剂量组。对照组腹腔注射抗凋亡蛋白肽溶剂0．1mL／只，LPS组气管内注射4mg／kg LPS，抗凋亡蛋白肽高、低剂量组在给予LPS前2h腹腔注射浓度分别为125μg／kg和25μg／k的抗凋亡蛋白肽。给予LPS 24h后，检测支气管肺泡灌洗液（BALF）、肺湿／干质量比、TUNEL、caspase-3的表达和肺组织病理学变化。结果 抗凋亡蛋白肽高剂量预处理组BALF白蛋白和肺湿／干质量比显著降低（P〈0．05），肺泡壁细胞的凋亡指数明显下降（P〈0．05），肺组织学病变明显减轻（P〈0．05）。结论 抗凋亡蛋白肽高剂量预处理对脂多糖诱导的大鼠肺损伤有保护作用。     

脂联素在急性肺损伤中的机制探讨

通过对急性肺损伤发病机制及脂联素作用机制等相关文献复习,探索脂联素在急性肺伤损治疗中的潜在作用和可能机制。脂联素有可能通过保护内皮、抗炎抗氧化等作用减轻急性肺损伤程度。     

肺脏局部内皮素水平变化在急性肺损伤发病中的意义

目的 探讨肺脏局部内皮素(ET)在内毒素性急性肺损伤(ALI)发病中的作用.方法 根据注射内毒素与否及注射内毒素后的观察时间不同将56只雄性SD大鼠随机均分为0(对照组,不注射内毒素)、0.5、1、2、4、6、24 h 7个组;采用体视学方法测定大鼠肺泡隔面积密度(PASAD)和中性粒细胞(PMN)计数.ET水平测定用放射免疫分析法.结果 ALI组大鼠随致伤时间延长PASAD和肺泡隔PMN计数进行性增加,两者均于6 h达峰值,24 h基本恢复至正常水平;致伤后0.5 h大鼠肺组织匀浆液中ET含量开始升高,4 h达峰值,6 h后逐渐降低,24 h恢复至正常水平.结论 肺脏局部ET水平变化在内毒素性ALI的发病中有重要作用.     

细胞凋亡在烫伤鼠肺组织损伤中的作用及其机制的实验研究

目的 :探讨细胞凋亡在烫伤鼠肺组织损伤中的作用及基因调控机制 ,为进一步阐明烫伤鼠肺组织损伤机制和在细胞凋亡水平防治烧伤后脏器损伤提供理论依据。方法 :采用原位末端标记 (TUNEL)法及免疫组织化学技术观察烫伤鼠肺组织细胞凋亡及肺组织 Fas/Fas L、核因子κB(NFκB) /IκB和 Bcl 2基因表达、鼠烫伤后肺组织通透性及 VE 钙黏附分子表达 ;电镜扫描肺组织血管内皮细胞连接的变化。结果 :1烫伤鼠肺组织细胞发生凋亡 ,尤其是肺泡上皮细胞和肺血管内皮细胞凋亡增加明显 ;2烫伤鼠肺组织对 99锝标记的亚锡喷替白蛋白通透性明显增加 ,同时肺组织血管内皮细胞 VE 钙黏附分子表达下降 ,与肺组织细胞凋亡呈平行关系 ;3烫伤鼠肺组织 Fas/Fas L 表达明显上调 ,Bcl 2表达明显下调 ,Fas/Fas L 表达的增加与肺组织细胞凋亡增加呈平行关系 ;4NFκB/IκB的表达与 Fas/Fas L表达相一致 ;5电镜扫描见肺组织血管内皮细胞连接增宽。结论 :鼠烫伤后肺泡上皮和肺血管内皮细胞发生凋亡 ,细胞凋亡参与了烫伤鼠肺组织损伤、通透性增加及内皮细胞连接损伤的发生过程 ;鼠烫伤后肺组织 Fas/Fas L、NFκB/IκB和 Bcl 2系统活化 ,可能参与了烫伤后肺脏损伤的机制及肺组织细胞凋亡的信号转导     

Biomarkers in acute lung injury: insights into the pathogenesis of acute lung injury

Studies of potential biomarkers of acute lung injury (ALI) have provided information relating to the pathophysiology of the mechanisms of lung injury and repair. The utility of biomarkers remains solely among research tools to investigate lung injury and repair mechanisms. Because of lack of sensitivity and specificity, they cannot be used in decision making in patients with ALI or acute respiratory distress syndrome. The authors reviewed known biomarkers in context of their major biologic activity. The continued interest in identifying and studying biomarkers is relevant, as it provides information regarding the mechanisms involved in lung injury and repair and how this may be helpful in identifying and designing future therapeutic targets and strategies and possibly identifying a sensitive and specific biomarker.     

The role of donor antibodies in the pathogenesis of transfusion-related acute lung injury: a systematic review

BACKGROUND: The majority of cases of transfusion‐related acute lung injury (TRALI) are thought to be caused by the presence of leukocyte antibodies in the blood of the donor. We performed a systematic search of the literature to quantify the contribution of donor antibodies to the occurrence of TRALI. STUDY DESIGN AND METHODS: We conducted a systematic search of the PubMed and EMBASE databases. Retrieved articles were judged by three authors independently. Reference lists of all articles were subsequently screened for relevant references. All articles in English, German, French, and Dutch, published at any time before December 2007, were eligible for inclusion. RESULTS: Of 77 articles on leukocyte antibodies in donors involved in a case of TRALI, 14 articles contained sufficient data. These 14 articles reported leukocyte antibodies in 24 of 51 donors (47%) associated with 24 of 28 TRALI cases (86%). Of 15 articles that reported the prevalence of leukocyte antibodies in the general donor population, 2 articles reported a prevalence of 17 percent in (452) randomly selected donors. The odds ratio for developing TRALI was 15 (95% confidence interval [CI], 5.1‐45) for patients who received a transfusion from a donor who tested positive for the presence of leukocyte antibodies, compared to donors who tested negative. Leukocyte antibodies contributed to 80 percent (95% CI, 51%‐92%) of all TRALI cases. CONCLUSION: Leukocyte antibodies were more prevalent in donors involved in TRALI cases than among randomly selected donors. These findings suggest that donor antibodies contribute to four‐fifths of all TRALI cases.     

核因子-κB在小鼠急性肺损伤中的作用

目的　探讨核因子 (NF) κB在内毒素 (LPS)诱导的急性肺损伤小鼠发病中的作用。方法　腹腔内注射LPS诱导小鼠急性肺损伤模型。LPS注射后 0、 1、 3、 6、 12测定肺湿重 /干重比值 (W/D) ,迁移率改变电泳法检测肺组织NF κB活性 ,同时酶联免疫吸附法测定肺组织匀浆中肿瘤坏死因子 (TNF) α、白介素 (IL) 10浓度 ,RT PCR检测mRNA表达。结果　LPS注射后 ,W/D比值明显增高 ,6h升高最明显 (4 82± 0 10 ) ,显著高于LPS注射前 (3 6 7± 1 0 4 ,P <0 0 5 )。LPS注射后肺组织核蛋白NF κB活性明显增强 ,6h达到峰值 (40 5 7± 6 2 4 ) ,显著高于LPS注射前 (44 8± 30 9,P <0 0 5 )。肺组织匀浆TNF α和IL 10浓度分别在LPS注射后 6h和 12h升高最明显 ,分别为 (197 1± 5 2 4 )pg/ml和 (6 4 9± 39 7)pg/ml,显著高于LPS注射前 [分别为 (6 1 2± 10 7)pg/ml和 (71 6± 15 9)pg/ml]。与LPS注射前比较 ,LPS注射后 3～ 12h ,肺组织匀浆TNF α和IL 10mRNA表达显著增高。肺组织病理显示肺泡出血、水肿、大量炎症细胞浸润 ,电镜下见Ⅰ型肺泡上皮细胞断裂 ,Ⅱ型肺泡上皮细胞变性。结论　LPS导致肺组织NF κB的活化 ,介导炎症介质大量表达 ,参与急性肺损伤发生     

中性粒细胞凋亡对急性胰腺炎相关性肺损伤的影响

目的 研究中性粒细胞（PMN）在急性胰腺炎相关性肺损伤（PALl）中自发性凋亡的变化及与肺损伤的相关性，探讨PMN凋亡在这一过程中的病理意义。方法 采用5％牛磺胆酸钠（TAC）逆行胆胰管注射造成大鼠急性出血坏死性胰腺炎（AHNP）模型。将36只实验动物随机分为AHNP组、假手术组及地塞米松（DXM）治疗组，3h后处死动物。从支气管肺泡灌洗液分离PMN，在体外分别孵育1、3、6h后，以Annexin V／PI双染色法测定其自发性凋亡率。取肺组织测定肺湿／干比值、髓过氧化物酶（MPO）含量及肺通透性指数，研究自发性凋亡率与肺损伤之间的相关性。结果 三组大鼠支气管肺泡灌洗液PMN的自发性凋亡率随体外孵育时间的延长而逐渐增加；在3、6h时，AHNP组均低于假手术组及DXM治疗组，而肺温／干比值、MPO含量及肺通透性指数则高于后两组。AHNP组3h凋亡率与肺温／干比值、MPO含量及肺通透性指数呈负相关。结论 肺PMN凋亡减低与PALI大鼠模型肺损伤成负相关，同时伴有活性增强，是PALI发生的重要原因；DXM可减轻PALI，与其促进PMN凋亡。     

烧伤复合内毒素血症早期肺损害及其机制的实验研究

目的：探讨烧伤复合内毒素血症早期肺损害的病变特点及发生机制。方法：采用20％Ⅲ度体表烧伤复合一次性腹腔内注射低剂量内毒素（1mg/kg)为实验动物模型并分别以单纯烧伤（单烧组）、单纯内毒素注射（单注组）、生理盐水为对照组,血小板激活因子（PAF）受体拮抗剂BN50739为治疗组。动态观察烧伤后0．5、1、1．5、3、6、12、24和48小时肺的形态和功能变化,血浆肿瘤坏死因子（TNF）、PAF、肺泡灌洗液（BALF）中蛋白含量以及肺组织内TNF分布。结果：烧注组出现肺病变较单烧组、单注组出现早,程度重,持续时间长;病变发展过程可大致分为间质性肺水肿、间质性肺炎和肺泡内渗出3个阶段。烧注组血PAF和TNF分别于伤后0．5和1小时显著高于对照组,于1．5小时呈大峰值并持续至伤后48小时;BALF蛋白含量也于伤后0．5小时明显升高;治疗组血PAF、TNF和BALF蛋白含量均显著下降,TNF阳性细胞也明显减少,肺水肿以及损伤程度明显减轻。结论：PAF和TNF是烧伤内毒素血症急性肺损伤时的重要炎症介质,能增加肺血管对蛋白质的通透性,能相互促进合成,发挥协同损伤效应。而PAF拮抗剂BN50739能阻断这些效应,减轻肺损伤。