镉对大鼠睾丸毒作用的酶学研究

为研究镉对睾丸的生化毒作用机理,应用氯化镉对成年雄性SD大鼠进行腹腔染毒,染毒剂量分别为0.2、0.4和0.8mg/kg体重.连续染毒7天后将动物处死,测定睾丸中各种酶的活性,同时进行睾丸精子头计数并计算每日精子生成量.结果显示,中剂量组碱性磷酸酶(ALP)和乳酸脱氢酶同工酶.X(LDHX)活性即有显着降低,高剂量组降低更明显.而其它一些酶的活性如酸性磷酸酶(ACP)、乳酸脱氢酶同工酶(LDH)、葡萄糖6.磷酸脱氢酶(G6PD)、山梨醇脱氢酶(SDH)等及睾丸精子头计数和每日精子生成量仅在高剂量组出现明显降低.因此镉的雄性生殖毒性机理与酶的活性间存在一定关系.ALP和LDHX可作为反映镉雄性生殖毒性较敏感的生化指标.     

3,4-二氯苯胺短期重复染毒对雄性大鼠精子的影响

目的研究3,4-二氯苯胺(3,4-DCA)对雄性大鼠精子的影响,以探讨3,4-DCA对雄性大鼠的生殖毒性作用。方法将40只健康成年SPF级Wistar雄性大鼠按体重随机分为39、81、170、357 mg/kg 3,4-DCA染毒组和溶剂对照组(玉米油),每组8只,经口灌胃染毒,灌胃容积为5 ml/kg,1次/d,连续染毒35 d。染毒结束后,处死大鼠,取附睾制成精子悬液,测定精子密度;台盼蓝染色测定精子的存活率,观察精子的活动能力并分级,计算精子活动率;测定精子的畸形率。结果与对照组比较,39 mg/kg 3,4-DCA染毒组体重略有增加,但差异无统计学意义(P>0.05);与对照组比较,170、357 mg/kg 3,4-DCA染毒组体重降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。各组大鼠睾丸系数和附睾系数比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,170和357 mg/kg 3,4-DCA染毒组精子密度降低,81、170、357 mg/kg 3,4-DCA染毒组精子存活率和精子活动率降低,39、81、170和357 mg/kg 3,4-DCA染毒组精子畸形率升高,差异均有统计学意义(P<0.05...     

不同粒径纳米和微米二氧化硅对雄性大鼠生殖毒性的实验研究

目的探讨不同粒径纳米二氧化硅与微米二氧化硅对雄性大鼠的生殖毒性效应。方法将104只健康SPF级雄性SD大鼠随机分为13组,分别为对照(生理盐水)组和低(1.5 mg/kg)、中(4.5 mg/kg)、高剂量(13.5 mg/kg)20、60、100 nm纳米二氧化硅及微米二氧化硅染毒组,每组8只。采用非暴露气管插管直接滴注法进行染毒,隔日染毒1次,共染毒6周。检测大鼠睾丸内睾酮(T)含量及附睾精子数量、精子存活率和精子畸形率。结果与对照组比较,各剂量20、60 nm纳米二氧化硅染毒组及4.5、13.5 mg/kg的100 nm纳米二氧化硅染毒组大鼠T分泌量均降低(P0.05),13.5 mg/kg的20 nm纳米二氧化硅染毒组大鼠T分泌量低于相同浓度的100 nm纳米二氧化硅染毒组(P0.05),各剂量微米二氧化硅染毒大鼠睾丸T分泌量无明显变化(P0.05);4.5、13.5 mg/kg的20 nm纳米二氧化硅染毒组和13.5 mg/kg的60、100 nm纳米二氧化硅及13.5 mg/kg的微米二氧化硅染毒组大鼠的精子数、精子存活率均降低(P0.05),4.5、13.5 mg/kg的20、60、100 nm纳米二氧化硅染毒组大鼠的精子畸形率升高(P0.05),各剂量微米二氧化硅染毒大鼠精子畸形率无明显变化(P0.05)。结论纳米二氧化硅及微米二氧化硅均对雄性大鼠具有生殖毒性,且纳米二氧化硅的生殖毒性效应明显强于微米二氧化硅;纳米二氧化硅的粒径越小,生殖毒性效应愈强。     

DEHP亚慢性暴露对大鼠精子运动参数影响

目的 观察邻苯二甲酸（2-乙基已基）酯（DEHP）染毒90 d对大鼠精子运动能力的毒性作用。方法 将健康清洁级SD雄性大鼠40只随机分为对照组和3个DEHP染毒组（5、50、500 mg/kg）,进行90 d经口染毒;取睾丸、附睾称重,并用扩散法收集大鼠附睾尾精子,应用计算机辅助精子分析系统（CASA）对精子的运动参数进行检测。结果 5 mg/kg DEHP组大鼠精子直线性（LIN）为（44.00±2.52）%,明显低于对照组（50.00±2.71）%（P<0.05）;500 mg/kg DEHP组大鼠精子鞭打频率（BCF）为（5.8±4.2）Hz,明显低于对照组（10.4±1.7）Hz（P<0.05）;与对照组比较,500 mg/kg DEHP组大鼠精子的平均路径速度（VAP）、直线运动速度（VSL）、曲线运动速度（VCL）、精子头侧摆幅度（ALH）、BCF明显下降,差异均有统计学意义（均P<0.05）;随着DEHP染毒浓度增加,大鼠精子各项运动参数逐渐降低,精子的运动能力下降。结论 DEHP对大鼠附睾精子的运动能力有直接毒性作用。     

十溴联苯醚对雄性大鼠生殖系统的影响

将60只SD雄性大鼠随机分为空白对照组、溶剂对照组及BDE-209低、中、高(250 mg/kg,500 mg/kg,1 000 mg/kg)剂量组,每天灌胃1次,持续30 d;显微镜下观察并计算大鼠精子的数量、活动度和畸形率;应用放射免疫法测定雄性大鼠血清中睾酮(testosterone,T)、黄体生成素(luteinizing hormone,LH)、卵泡刺激素(follicle stimula-ting hormone,FSH)的水平。与对照组比较,BDE-209染毒组大鼠睾丸和附睾脏器系数明显下降,大鼠睾丸和附睾脏器系数与染毒剂量存在效应关系(P<0.05)。BDE-209染毒组大鼠精子数量和精子活动度明显低于对照组,精子畸形率明显高于对照组,大鼠精子的数量、活动度和畸形率与染毒剂量存在效应关系(P<0.05)。BDE-209染毒组大鼠血清中T、LH和FSH水平明显低于对照组,且呈剂量-效应关系。提示BDE-209亚急性染毒对雄性成年大鼠具有一定的生殖毒性。     

低剂量氯化镉亚慢性染毒对大鼠精子运动功能的影响

[目的]应用计算机辅助精子分析(computer assisted sperm analysis,CASA)技术研究低剂量氯化镉(Cd-Cl2)亚慢性染毒对大鼠精子运动能力的影响. [方法]40只健康雄性SD大鼠分成4组,剂量分别为0(生理盐水)、0.1、0.2、0.4 mg/kg·bw,腹腔注射染毒,每周染毒5 d(次),共染毒8周,实验结束颈椎脱臼处死,用扩散法收集大鼠附睾尾精子制成精子悬液.1:9稀释液后甩CASA仪测定反映精子活率、精子运动能力及运动方式的各项参数. [结果]各剂量组的精子活率间差异无统计学意义(P>0.05).高剂量组的快速运动精子、中速运动精子、低速运动精子百分比与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05).高剂量组的VAP、VSL值与对照组比较均降低,差异有统计学意(P<0.05).高剂量组的BCF与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).LIN随染毒剂量增加而降低(r=-0.399,P<0.05).STR、ALH、ELON在各组间的差异无统计学意义(P>0.05). [结论]0.4 mg/kg·bw的氯化镉染毒可以引起大鼠精子运动功能的下降.     

染锰鼠支持细胞波形蛋白表达与精子数量关系

目的 探讨染锰鼠支持细胞波形蛋白(vimentin,VM)表达与精子数量关系。方法 雄性SD大鼠48只随机分为6组,15,30 mg/kg MnCl₂组分别染锰4周和6周,空白对照组给予等溶生理盐水(4,6),腹腔注射;取睾丸和附睾分别检测支持细胞VM表达(免疫组织化学法)和精子数量。结果 染锰15,30 mg/kg 4和6周组支持细胞波形蛋白阳性细胞率分别为(30.55±2.33)%,(9.01±2.27)%和(7.62±1.08)%,(2.33±0.63)%;精子数量分别为(0.53±0.11),(0.47±0.06)和(0.26±0.07),(0.23±0.04)×10⁷/mL;与空白对照组比较,各染锰组支持细胞VM阳性细胞率及精子数量均明显降低(P<0.01),并呈一定时间-效应和剂量-效应关系;各组大鼠精子数量和支持细胞VM阳性细胞率呈正相关(r=0.895,P<0.01)。结论 过量锰可诱发支持细胞VM表达降低,导致大鼠精子数量减少,可能是大鼠生精障碍的主要分子机制之一。     

氯乙烯对大鼠精子生成量和畸形率的影响

[目的 ]探讨氯乙烯 (vinylchloride ,VC)对雄性大鼠精子生成和畸形发生的影响。 [方法 ] 68只SD雄性大鼠随机分成 4组 ,分别为 5 ,10 ,2 0mg/kg 3个染毒组和对照组 ,进行 12周亚慢性实验 ,分别在染毒 3 ,6,9周每组随机处理 3只大鼠观察睾丸的精子头计数、每日精子生成量 (dailyspermproduction ,DSP)、精子畸形发生率和睾丸组织碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶同工酶 (LDHx)的动态变化。 [结果 ]染毒结束时 ,各染毒组睾丸精子头计数和DSP均低于对照组 (P<0 .0 5 ) ;高剂量组ALP和LDHx活性分别为 71.60 μmol/(min·gpro)和 173 6.0 2 μmol/(min·gpro) ,都低于对照组 (P <0 0 5 )。 [结论 ] 2 0mg/kg氯乙烯经 12周亚慢性染毒对雄性大鼠具有一定的生殖毒性。     

雷公藤甲素对雄性大鼠附睾功能与精子动力学参数的影响

目的 研究雷公藤甲素对雄性性成熟期大鼠附睾功能及精子运动的影响,探讨雷公藤甲素生殖毒性的作用机制.方法 将2月龄健康清洁级Sprague-Dawley雄性大鼠40只随机分为对照组(0.5%的羧甲基纤维素钠)及低、中、高雷公藤甲素染毒组(染毒剂量分别为25、50、100 μg/kg),经口灌胃染毒,每天1次.连续染毒50d后,取双侧附睾称重,并计算附睾系数.唾液酸含量的测定采用5-甲基苯二酚法,蛋白含量的测定采用考马斯亮兰法,肉毒碱含量的测定采用酶联免疫吸附法.采用计算机辅助精子分析(CASA)系统评价左附睾尾精子动力学参数.结果 各染毒组大鼠体重间比较,差异无统计学意义(P＞0.05).与对照组相比,中、高剂量组唾液酸含量和高剂量组附睾脏器系数和肉毒碱含量均较低,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).与对照组比较,高剂量组精子曲线速度(VCL)、平均路径速度(VAP)、侧摆幅度(ALH)、鞭打频率(BCF)和中、高剂量组精子直线速度(VSL)、直线性(LIN)、前向性(STR)均较低,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).结论 雷公藤甲素可以引起附睾功能损伤,继而影响附睾尾精子运动速度与线性方向.     

亚慢性镉中毒所致小鼠睾丸、精子损伤及锌保护作用研究

目的 了解亚慢性镉中毒对睾丸及精子的损伤及锌保护作用。方法 以ICR小鼠为研究对象,以不同剂量的氯化镉(0．4,0．8,3．2mg／kg)每周连续4次背部皮下注射染毒,连续7周;皮下注射1．6mg／kg氯化镉溶液的同时给予350μg／ml硫酸锌水溶液喂饲7周为锌保护组。建立亚慢性镉中毒模型,并观察锌对镉所致睾丸组织病理改变以及对附睾精子畸变的影响。实验同时设立阴性对照组(蒸馏水,ip)和精子畸变阳性对照组(处死前6d给予环磷酰胺50mg／kg,ip,连续2d)。结果 随着染毒剂量的增加,低、中、高各剂量组睾丸组织异常病理变化及精子畸形率呈逐渐增高趋势,表现出明显的剂量—反应关系。锌保护组与高、中染毒组比,精子畸变率明显降低,而与低剂量组和阴性对照组比较精子畸形率差异无显著性;同时镜下病理表现仅见生精细胞上皮层次略有减少,成熟精子数无减少现象,损伤程度明显低于相应染毒组。结论 镉对小鼠的睾丸和附睾有明显的毒性作用,锌对镉的生殖毒性有一定保护作用。     

顶体完整率与形态正常精子百分率及精子密度的关系

目的:探讨顶体完整率与形态正常精子百分率、精子密度之间的关系。方法:对410例男性不育者进行精液常规分析并作顶体完整率、精子形态分析。结果:形态正常组顶体完整率明显高于形态异常组(P<0.001)。精子密度正常组顶体完整率与密度异常组顶体完整率比较,差异不显著(P>0.05),顶体完整率正常组形态正常精子百分率明显高于顶体完整率异常组(P<0.001)。结论:精子顶体完整率与形态正常精子百分率有密切关系。     

精子核成熟度与精子形态的关系

目的:研究精子核成熟度与精子形态关系,探讨精子形态异常机制。方法:收集55例精液样本,其中生育组19例,畸形精子症组36例。应用CASA分析精子密度、活力,伊红染色检测精子活率,联苯胺染色分析精液白细胞浓度,改良巴氏染色分析精子形态,苯胺蓝染色法评价精子核成熟度。结果:畸形精子症组苯胺蓝染色阳性率显著高于生育组(P<0.05)。头部异常、颈部异常、尾部异常、无定型、其它畸形精子组苯胺蓝染色阳性率显著高于形态正常精子组苯胺蓝染色阳性率(P<0.05)。结论:精子核成熟异常可导致精子形态异常。     

积水输卵管液对精子运动及形态学的影响

目的:通过体外研究积水输卵管液对精子运动及形态学的影响,探讨输卵管积水引起不孕的原因,并为单侧输卵管积水(对侧输卵管通畅)患者的处理提供依据。方法:优化处理后的高质量的精子体外与输卵管积水患者的输卵管液(积水组n=18)及正常输卵管液(对照组n=18)孵育2h、7h和24h后,精子分析仪(CASA)测量精子的各项运动参数,应用精子Diff-Quick涂片染色法分析精子形态。结果:①培养2h、7h和24h后,各时间点积水组精子的前向性运动百分率、平均曲线运动速度(VCL)、平均直线运动速度(VSL)、平均路径运动速度(VAP)、快速直线运动精子活率(MOT)、直线性(LIN)、摆动性(WOB)及前向性(STR)各项精子运动参数均低于对照组(P<0.05),且输卵管积水加快精子的运动速度参数(VCL、VSL、VAP)随时间延长而降低的速度(P<0.05)。②培养2h、7h和24h后,积水组与对照组精子的正常形态率对比无统计学差异,且不随时间延长而改变(P>0.05)。结论:输卵管积水在体外能降低精子的前向性运动百分率、精子运动速度参数(VSL、VCL、VAP)及精子运动方式参数(MOT、LIN、WOB、STR)各项运动指标,并提示输卵管积水不仅干扰了精子活动力,并可能对精子的获能产生不良影响,推测体内输卵管积水对精子产生一定的损害作用,从而影响受孕,但对精子正常形态精子率未有明显影响。     

吸烟对精液的影响

目的 探讨吸烟对精液的影响。 方法 选择门诊265例男性不育症患者精液标本,其中165例为吸烟者、100例为非吸烟者,观察比较2组精液标本的各项参数。 结果 吸烟者和非吸烟者的精子形态正常率、精子头尾畸形率、精子体畸形率2组间差异有显著性(P<0.001,P<0.05),其它精液参数差异无显著性。结论 吸烟与精子畸形关系密切。香烟烟雾中含有大量的氧化剂和诱变剂,可能是造成精细胞的DNA损伤断裂导致畸形精子增多的重要原因。     

吸烟对精子DNA完整性、精子参数的影响

目的:探讨吸烟对精子DNA完整性、精子参数的影响。方法:调查191例男性不育患者的吸烟情况,采用吖啶橙荧光染色后检测精子DNA完整性,计算机自动分析精子密度与活力,精子形态检测系统下人工修正方法进行精子形态分析。结果:吸烟组精子活力显著低于不吸烟组(P<0.05),精子密度和形态低于不吸烟组,但差异无统计学意义(P>0.05)。吸烟组精子DNA完整率异常例数显著高于不吸烟组(χ2=5.393,P<0.05),精子DNA完整率异常组精子密度显著低于精子DNA完整率正常组(P<0.05),精子DNA完整率异常组的精子活力、形态与正常组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:吸烟影响精子DNA完整率;精子DNA完整率异常与精子参数异常相关;吸烟可能通过影响精子DNA完整性影响精子参数。     

流产患者丈夫精子因素初步分析

目的:探讨流产的精子因素。方法:采用精液常规分析、精子形态分析、吖啶橙荧光染色方法对156例自然流产1～4次患者的丈夫及80例正常生育男性的精子进行分析。结果:对照组与流产组a级精子百分率、a+b级精子百分率、精子密度、精子活率、正常形态精子百分率、异常形态精子百分率、尾部异常精子百分率和精子DNA完整率方面差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:精子运动参数、形态参数、精子DNA损伤可能与流产有关。     

Evaluation of the effect of implanted depleted uranium on male reproductive success, sperm concentration, and sperm velocity

Depleted uranium (DU) projectiles have been used in battle in Iraq and the Balkans and will continue to be a significant armor-penetrating munition for the US military. As demonstrated in the Persian Gulf War, battle injury from DU projectiles and shrapnel is a possibility, and removal of embedded DU fragments from the body is not always practical because of their location in the body or their small size. Previous studies in rodents have demonstrated that implanted DU mobilizes and translocates to the gonads, and natural uranium may be toxic to spermatazoa and the male reproductive tract. In this study, the effects of implanted DU pellets on sperm concentration, motility, and male reproductive success were evaluated in adult (P1) Sprague-Dawley rats implanted with 0, 12, or 20, DU pellets of 1x2 mm or 12 or 20 tantalum (Ta) steel pellets of 1x2 mm. Twenty DU pellets of 1x2 mm (760 mg) implanted in a 500-g rat are equal to approximately 0.2 pound of DU in a 154-lb (70-kg) person. Urinary analysis found that male rats implanted with DU were excreting uranium at postimplantation days 27 and 117 with the amount dependent on dose. No deaths or evidence of toxicity occurred in P1 males over the 150-day postimplantation study period. When assessed at postimplantation day 150, the concentration, motion, and velocity of sperm isolated from DU-implanted animals were not significantly different from those of sham surgery controls. Velocity and motion of sperm isolated from rats treated with the positive control compound alpha-chlorohydrin were significantly reduced compared with sham surgery controls. There was no evidence of a detrimental effect of DU implantation on mating success at 30-45 days and 120-145 days postimplantation. The results of this study suggest that implantation of up to 20 DU pellets of 1x2 mm in rats for approximately 21% of their adult lifespan does not have an adverse impact on male reproductive success, sperm concentration, or sperm velocity.     

精索静脉曲张对精子形态的影响

目的:探讨精索静脉曲张对精子形态的影响。方法:分析71例已有生育男性和417例男性不育患者精液样本,其中不育患者分为精索静脉曲张组Ⅰ°(130例)、Ⅱ°(64例)、Ⅲ°(88例)和无精索静脉曲张组(135例)4组。采用精子形态检测系统下人工修正方法进行精子形态分析。结果:精索静脉曲张Ⅱ°和Ⅲ°组正常形态精子百分率均显著低于生育组(P<0.05,P<0.001),但两组之间差异没有显著性(P>0.05)。精索静脉曲张Ⅰ°组正常形态精子百分率与生育组之间差异无显著性(P>0.05)。精索静脉曲张不育组正常形态精子百分率显著低于生育组和无精索静脉曲张组(P<0.005,P<0.05),梨形头精子、尾部/中部缺陷精子百分率显著高于生育组(P<0.05,P<0.005),大头精子、颈部/中段缺陷精子和尾部缺陷精子百分率显著高于无精索静脉曲张组(P<0.05),而其它畸形精子百分率显著低于无精索静脉曲张组(P<0.005)。结论:精索静脉曲张能够影响精子形态,Ⅱ°和Ⅲ°能导致正常形态精子百分率下降。     

过度训练对人精子染色质结构的影响

目的　探讨过度训练是否对人精子DNA产生影响。方法　应用流式细胞仪快速测量精子核原位DNA损伤和完整性 ,分析精子染色质结构 (SCSA) ,对两组不同作业环境 (过度训练组与非训练组 )的 2 4 9名男性官兵进行分子流行病学调查。结果　训练组SCSA中COMPατ的平均值为11.0 2 % ,而对照组仅为 5 .90 % ,两组比较差异有显著性 (P <0 .0 1)。COMPατ参数与精子活力密切相关 (r=0 .4 1,P <0 .0 5 )。结论　过度训练后可导致精子染色质结构的变化 ,影响精子活力 ,使生育潜能降低。     

SCSA法检测精子DNA碎片指数与辅助生育结局关系的meta分析

目的:探究精子染色质结构分析法(SCSA)检测精子DNA碎片指数(DFI)与体外受精(IVF)、卵胞浆内单精子注射(ICSI)妊娠结局的关系。方法:计算机检索Pubmed、Cochrane library、EMBASE、Springer Link、CNKI、万方和维普等数据库,收集使用SCSA法检测DFI(DFI阈值27%或30%)与IVF、ICSI妊娠结局关系的文献,由两位检索人员根据纳入、排除标准独立筛选文献,提取数据后采用Stata 12.0软件进行meta分析。妊娠结局包括生化妊娠(BP)、临床妊娠(CP)、流产(PL)。相对危险度(RR)和95%可信区间(95%CI)用于评估DFI与妊娠结局的关系。结果:meta分析中纳入9篇有效文献(共2008个周期)。meta分析结果显示,DFI升高显著增加ICSI组生化妊娠率(RR=1.24,95%CI 1.00~1.52)、流产率(RR=2.21,95%CI 1.29~3.78),而与临床妊娠率无显著相关;DFI升高与IVF组的生化妊娠率、临床妊娠率、流产率均无显著相关。结论:SCSA法检测DFI对ICSI的妊娠结局有预测价值,而对IVF的妊娠结局无预测作用,仍需要纳入更多的大样本优质研究以进一步验证。