快速轮状病毒抗原酶标检测及其临床意义

应用轮状病毒Ａ群单克隆抗体检测病毒抗原,对急性腹泻者（主要是婴幼儿）进行鉴别诊断,具有快速,特异,敏感,方法简单,结果准确等优点。作者调查了本区域轮状病毒Ａ群在婴幼儿中的检出率,对发病年龄,大便性状及季节性差异作了初步探讨。 １　材料和方法 １．１标本来源：１９９８年６月～１９９９年１月间急性腹泻婴幼儿粪便标本共１０８份。 １．２实验用品：快速一步法轮状病毒抗原检测盒（珠江生物高科技中心提供）。 １．３方法：根据ＥＬＩＳＡ反应原理。取１滴粪便液加入抗体包被的反应孔内,再加１滴１号（酶结合物）试剂,摇…     

K562及K562/VCR对长春新碱诱导凋亡的敏感性

研究人类白血病细胞株Ｋ５６２及耐长春新碱的Ｋ５６２变异株Ｋ５６２／ＶＣＲ对长春新碱诱导凋亡的敏感性的差异,以探讨抗凋亡在白血病多药耐药性（ＭＤＲ）中的作用。方法将Ｋ５６２及Ｋ５６２／ＶＣＲ分别用浓度为０、０．００１、０．０１０μｇ／ｍｌ的长春新碱诱导２４ｈ,用流式细胞仪ＰＩ染色法、ＴＵＮＥＬ法及ＥＬＩＳＡ法分别进行细胞凋亡检测。结果经浓度为０、０．００１μｇ／ｍｌ长春新碱诱导后,Ｋ５６２细胞凋亡率分别为（４．１０±０．１７）％、（１３．３０±３．７４）％,而Ｋ５６２／ＶＣＲ细胞凋亡率分别为（３．６１±０．６９）％、（９．０６±４．２４）％,统计学显示两者差异无显著性（ｎ＝３,Ｐ＞０．０５）。而长春新碱浓度达０．０１０μｇ／ｍｌ时,Ｋ５６２及Ｋ５６２／ＶＣＲ细胞凋亡率分别为（３６．４８±６．７０）％、（１０．４５±３．７１）％,两者差异有极显著意义（ｎ＝３,Ｐ＜０．０１）。ＴＵＮＥＬ及ＥＬＩＳＡ检测结果与此类似。结论Ｋ５６２及Ｋ５６２／ＶＣＲ对长春新碱诱导细胞凋亡的敏感性不同,耐药细胞对药物诱导细胞凋亡的抵抗性增强可能在白血病ＭＤＲ发生中有重要作用。     

ELISA检测HBsAg中阴性对照吸光值的探讨

为了探讨酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）检测乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）阴性对照吸光值（Ｎ）小于０．０５时，以０．０５作Ｎ值对实验结果的影响，用实际阴性对照吸光值（Ｎ实）和０．０５分别计算阳性对照吸光值（Ｐ）与Ｎ的比值（Ｐ／Ｎ），并用放射免疫法（ＲＩＡ）和聚合酶链法（ＰＣＲ）作进一步检测。结果：ＥＬＩＳＡ所测３３例标本中，Ｐ／０．０５小于２．１的标本１８例，Ｐ／Ｎ实小于２．１的８例，ＲＩＡ检测上述Ｐ／０．０５小于２．１的１８例标本中，５例阳性，ＰＣＲ检测的ＨＢＶＤＮＡ７例阳性。结论：ＥＬＩＳＡ检测ＨＢｓＡｇ，当Ｎ小于０．０５时，以０．０５计算Ｐ／Ｎ值，可导致结果的假阴性     

1999年夏季118例婴幼儿肺炎患儿病原体检测

探讨１９９９年夏季婴幼儿肺炎的病原体分布情况,方法采用ＥＬＩＳＡ法及血凝技术对１１８例下呼吸道感染的婴幼儿及新生儿进行了７种病原体检测。结果共检出阳性７１例,其中１种以上病原体混合感染１７例,各种病原体单独检测的阳性率为：呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ－ＩｇＭ）为９．３％（１１／１１８）,腺病毒（ＡＤＶ－ＩｇＭ）为１２．７％（１５／１１８）,巨细胞病毒（ＣＭＶ－ＩｇＭ）为１３．６％（１６／１１８）,柯萨病     

圆斑酶联免疫吸附试验诊断囊虫病——生物素-亲和素酶复合物在该方法中的应用

目的：应用生物素－亲和素－酶复合物系统，建立一种繁感、特异、经济简便的囊虫病血清学诊断。方法：生物素－亲和素－酶复合物圆斑酶联免疫吸附试验（ＡＢＣ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）、滤纸血斑ＡＢＣ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ。结果：ＡＢＣ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ 诊断囊虫病，检出率（９５．９２％ ）远较圆斑酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）高８３．６７％ ，平均几何滴度（１∶２ ８０１．７３）约为Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ（１∶５８７．２６）的５ 倍；用该方法对４℃条件下保存３ 月的患者滤纸血斑样本进行检测，阳性率为９４．７４％ （５４／５７），无假阳性反应（０／４５）；对相同患者血清和滤纸血斑双份血样进行检测，阳性率均为９０％ （２０／２２）。结论：该方法提高了检出率，简化了采样及送样程序，适合于边远地区和用于流行病学调查。     

应用生物素—亲和素系统检测类风湿因子

目的 研究准确定量检测ＩｇＭ，ＩｇＧ，ＩｇＡ型类风湿因子（ＲＦ）的方法。方法 应用生物素－亲和素结合ＥＬＩＳＡ法（ＡＢＣ－ＥＬＩＳＡ）对５７例类风湿关节炎患者及１００例正常人血清进行检测，并与胶乳凝集试验（ＬＡＴ）及常规ＥＬＩＳＡ法测定的ＲＦ作对比。结果 ５７例病人ＩｇＭＲＦ阳性率在ＡＢＣ，ＥＬＩＳＡ法及ＬＡＴ法分别为８９．５％，８０．７％和６３．２％（Ｐ〈０．０１）。在ＬＡＴ法ＩｇＭＲＦ阴性的１     

EBV-EAIgG抗体测定在鼻咽癌诊断和筛查中的应用

目的：探讨ＥＢ病毒早期抗原（ＥＡ）ＩｇＧ抗体测定在鼻咽癌诊断和筛查中的应用。方法：对４５４例鼻咽癌和３００例健康人的血清分别用免疫酶法测定抗ＥＡ抗原的ＩｇＡ／ＥＡ抗体,用ＥＬＩＳＡ法测定ＩｇＧ／ＥＡ抗体,以及用抗酶率法测定抗ＥＢＶＤＮＡ酶抗体。并用免疫酶法测定ＩｇＡ／ＶＣＡ和ＥＬＩＳＡ法测定ＩｇＧ／ＥＡ的方法对鼻咽癌高发区人群的９５３６例血清进行鼻咽癌筛查。结果：３种方法中ＥＬＩＳＡ法检测ＩｇＧ／ＥＡ诊断鼻咽癌的效率最高（９２５％）。以双项检测阳性（ＩｇＧ／ＥＡＡ值≥０１８和ＩｇＡ／ＶＣＡ滴度≥１∶８０）为标准,鼻咽癌筛查的阳性预示值（鼻咽癌数／阳性血清数）为１６５％（１３／７９）,高于单项阳性标准,Ｐ＜００５。结论：ＥＬＩＳＡ检测血清ＩｇＧ／ＥＡ的方法适用于鼻咽癌的血清学诊断,与检测ＩｇＡ／ＶＣＡ的免疫酶法联合应用的双阳性标准适合于在鼻咽癌筛查中采用。为了提高筛查的敏感性,建议将双项阳性标准中的ＩｇＡ／ＶＣＡ滴度定为≥１∶５。ＩｇＡ／ＶＣＡ滴度从≥１∶８升高到≥１∶５。     

轮状病毒RT—PCR快速诊断方法研究

采用自制逆转录套式－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测婴幼儿病毒性肠炎粪便中的轮状病毒，结果阳性率为５６．５％（６１／１０８），显著高于采用ＰＡＧＥ，ＥＬＩＳＡ，ＬＡ检测的阳性率（Ｐ〈０．０１），而检测时间短，敏感性高，采用磷灰石抽提病毒ＲＮＡ的方法也优于其它三法试验盒的效果，国内尚未报道。     

酶联免疫吸附检测鼻咽癌方法的建立

目的：探讨检测鼻咽癌的酶联免疫吸附（ＥＬＩＳＡ）方法。方法：以正丁酸和巴豆油诱导Ｒａｊｉ细胞表达的ＥＢ病毒早期蛋白为抗原，用ＥＬＩＳＡ方法检测血清中抗ＥＢ病毒相关早期蛋白的ＩｇＧ抗体水平（吸光度Ａ４９０）。其中鼻咽癌４５４例，肝癌４０例，肺癌２３例，肠癌２０例，乳腺癌２３例，卵巢癌１６例，头颈肿瘤１５例和健康人５２４例。结果：在所有被检血清中鼻咽癌血清Ａ值最高（０．３３３±０．１００），（Ｐ＜０．００１）。以正常人９５％特异性Ａ４９０＜０．１８为界，ＥＬＩＳＡ方法诊断鼻咽癌的敏感性为８９％（４０５／４５４）特异性为９４％（４９３／５２４）。结论：用来自Ｒａｊｉ细胞内的ＥＢ病毒早期蛋白为抗原建立的ＥＬＩＳＡ方法可以应用于鼻咽癌的血清学诊断。     

抗胆固醇酯转运蛋白单克隆抗体的制备及其应用

目的：自行制备胆固醇酯转运蛋白（ＣＥＴＰ）单克隆抗体（ＭｃＡｂ），建立人血清ＣＥＴＰ的酶联免疫吸附测定法（ＥＬＩＳＡ），调查中国人群ＣＥＴＰ参考值及临床意义。方法：应用杂交瘤技术制备ＣＥＴＰＭｃＡｂ。用棋盘试验确定ＥＬＩＳＡ法的反应条件；进行灵敏度、精密度、回收率、特异性试验。结果：制备出一株特异性好、反应性强的ＣＥＴＰＭｃＡｂ。筛选出ＥＬＩＳＡ法最佳反应条件，样本稀释２０００倍，可检测０．２８～４．５２ｍｇ／Ｌ的血清ＣＥＴＰ水平；平均批内ＣＶ为４．９％，平均批间ＣＶ为１０．２％；平均回收率为９２．５％～９７．２％；特异性高。检测结果同国外实验室ＥＬＩＳＡ法高度相关。１１２８例参考人群血清ＣＥＴＰ浓度为１．８４±１．５５ｍｇ／Ｌ，女性高于男性；随着年龄增高，ＣＥＴＰ浓度降低。冠心病患者ＣＥＴＰ浓度为２．６６±２．０８ｍｇ／Ｌ，较相应对照组显著升高（Ｐ＜０．０１）。结论：该法具有方便、快速、准确、特异等优点，对了解ＣＥＴＰ在动脉粥样硬化发生中的作用有着十分重要的意义。     

ELISA检测HBsAg中阴性对照吸光值的探讨

为了探讨酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）检测乙型肝炎表面抗原阴性对照吸光值小于０．０５时，以０．０５作Ｎ值对实验结果的影响，用实际阴性对照吸光值（Ｎ实）和０．０５分别计算阳性对照吸光值（Ｐ）与Ｎ的比值（Ｐ／Ｎ），并用放射免疫法（ＲＩＡ）和聚合酶链法（ＰＣＲ）作进一步检测。结果：ＥＬＩＳＡ所测３３例标本中，Ｐ／０．０５小于２．１的标本１８例，Ｐ／Ｎ实小于２．１的８例，ＲＩＡ检测上述Ｐ／０．０５小于２．１     

双抗体夹心ELISA法检测血浆凝血酶原及其初步应用

目的：ＥＬＩＳＡ法检测血浆凝血酶原含量。方法：双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法。结果：４８例肝硬化病人血浆凝血酶原含量明显低于正常对照组（８７．４±１２．１ｍｇ／ＬＶＳ１６７．６±１５．７ｍｇ／Ｌ，Ｐ＜０．０１）。结论：该ＥＬＩＳＡ法测定血浆凝血酶原可靠、稳定、重复性好，可广泛应用于临床。     

快速ELISA一步法检测轮状病毒抗原方法及应用

快速ＥＬＩＳＡ一步法检测轮状病毒抗原方法及应用（２２３００２）江苏省淮阴市妇产儿童医院丁梅芳，高大林，吴又生我院自１９９４年９月，采用快速ＥＬＩＳＡ一步法对３０５例秋季腹泻患儿的粪便标本进行轮状病毒（简称ＲＶ）抗原检测，现将快速ＥＬＩＳＡ一步法技术检...     

四川地区小儿轮状病毒腹泻病原流行分析

目的：为了解小儿轮状病毒腹泻病原流行情况，方法：采集四川地区９４９例３岁以下疑诊为冬季腹泻患儿全大便，用ＥＬＩＳＡ法，直接电镜和核酸电泳进行轮的和形态的检测。结果：轮状病毒捩的阳性７１．１％；直接电镜阳性为８０．０％；核酸电泳阳性为８７．５％。结论：小儿轮状病毒感洒季节为每年１１月一次年２月，流行高峰为１２月。１岁以下患儿占７５．６％，性别、男女比例为２：１。     

CyP A三类免疫球蛋白自身抗体测定方法的建立与临床应用

目的：利用基因重组技术、大肠杆菌表达人环孢菌素Ａ结合蛋白（ｒｈＣｙＰＡ），建立测定抗ＣｙＰＡ自身抗体的酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ），探讨抗ＣｙＰＡ抗体与临床疾病的关系。方法：重组菌可溶性蛋白经饱和硫酸铵盐析和ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－６Ｂ柱层析，获取ｒｈＣｙＰＡ蛋白，用该纯化物作为抗原，方阵滴定，建立ＥＬＩＳＡ技术，对各类自身免疫病进行评估测定。结果：ｒｈＣｙＰＡ经十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）分析，分子量为１８０００。在系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者中，发现有４０．３％的患者检出有抗ＣｙＰＡ自身抗体（５８／１４４），三类免疫球蛋白（Ｉｇ）中，又以ＩｇＧ类抗体检出率最为突出，为２８％（４０／１４４）；而其它自身免疫病患者抗ＣｙＰＡ抗体总体检出率为０％～１８．１％。结论：建立的检测抗ＣｙＰＡ抗体的ＥＬＩＳＡ法，敏感、特异、可半定量测定。抗ＣｙＰＡ抗体的存在似与ＳＬＥ的发病有关。     

酶联检测CA125在妇科的应用

采用酶联法（ＥＬＩＳＡ）检测了２２９例妇科患者的血清上皮性卵巢癌抗原（ＣＡ１２５），并进行分析。结果：１．卵巢癌患者血清ＣＡ１２５明显高地良性病例，两者阳性率分别为８１．２５％和８．９％，有极显著性差异。其中浆液性癌阳性率明显高于粘液性癌，分别为９３．７％和７０％；２．内膜异位癌ＣＡ１２５水平亦升高，阳性率为５２．６％。结论：ＥＬＩＳＡ检测血清ＣＡ１２５与传统的放免法（ＲＩＡ）相比，具有同等的价值     

ELISA法和免疫印迹法检测抗ENA抗体的比较

目的：将目前国内新开展的两种检测ＥＮＡ技术,即免疫印迹法（ＩＢＴ）和酶免疫法（ＥＬＩＳＡ）进行对比、分析。方法：用 ＩＢＴ法及 ＥＬＩＳＡ法同时检测 １３０例各种结缔组织病、非结缔组织病人及健康人血清中的抗ＥＮＡ抗体。结果：２０例健康人,两法均为阴性;８０例结缔组织病患者,两法检出抗 Ｓｍ抗体的符合率为 ９１．３％,检测抗 ＲＮＰ抗体的符合率为 ８２．５％,以上抗体两法的敏感性无显著差异（Ｐ＞０．０５）。检测抗ＳＳＡ抗体,ＩＢＴ法检出率低。抗ＳＳＢ抗体检出率两法亦无显著差异（Ｐ＞０．０５）,符合率为８７．５０％,在１２例ＳＳ的检测中符合率比较低,为５０％。结论：两种方法在检测抗Ｓｍ、ＲＮＰ、ＳＳＢ抗体时,敏感性无显著差异,ＥＬＩＳＡ法检测抗ＳＳＡ抗体优于ＩＢＴ法。上述两种方法在临床应用于抗ＥＮＡ抗体的检测中于可互相验证和补充。     

应用PCR技术及ELISA法检测HBV的结果分析

本文报道用酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）及聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测６４６例似肝火患者血清乙肝病毒标志物（ＨＢＶ－Ｍ）－乙肝二对半及乙肝病毒ＤＮＡ（ＨＢＶ－ＤＮＡ）的分析结果。用ＥＬＩＳＡ法检出ＨＢｓＡｇ（＋），ＨＢｅＡｇ（＋）及ＨＢｅＡｇ（＋）ＨＢｃＡｂ（＋）这两种模式ＨＢＶ－ＤＮＡ（＋）检出率分别高达９５．６％（４４／４６）及９１．１％（１２３／１３５），在虽然有ＨＢｓＡｇ（＋）出现，无（或     

酶免疫淋球菌快速检测与涂片法比较

应用ＥＬＩＳＡ法检测淋球菌抗原，灵敏度可达１×１０５／ｍｌ，具有快速、简便、准确的特点，并与涂片法进行对照。结果显示，ＥＬＩＳＡ法检测淋球菌阳性率为５１．２２％（１２６／２４６），涂片法找淋球菌阳性率为３１．７１％（７８／２４６），两法结果比较，差异有高度显著性（Ｐ＜０．０１）。两法检测男性患者，结果差异无显著性（Ｐ＞０．０５）；女性患者用ＥＬＩＳＡ法检测淋球菌阳性率为３８．２１％（９４／２４６），涂片法找淋球菌阳性率为１９．５１％（４８／２４６），两法结果差异有高度显著性（Ｐ＜０．０１）。结果表明酶免疫淋球菌快速检测非常适用于临床检测女性病人及无症状带菌者，能够提高女性病人的淋菌检出率，可在４０ｍｉｎ内完成一次检测，方法快速、简便，同时也为合理选择检查方法提供了较客观的参考数值     

K562及K562／VCR对长春新碱诱导调亡的敏感性

目的 研究人类白血病细胞株Ｋ５６２长春新碱的Ｋ５６２变异株Ｋ５６２／ＶＣＲ对长春新碱诱导凋亡的敏感性的差异,以探讨抗凋亡在白血病多药耐药性（ＭＤＲ）中作用。方法 将Ｋ５６２及Ｋ６２／ＶＣＲ分别用浓度为０、０．００１、０．０１０μｇ／ｍｌ的长春新碱诱导２４ｈ,用流式细胞仪ＰＩ染色法、ＴＵＮＥＬ法及ＥＬＩＳＡ法分别进行细胞凋亡检测。结果 经浓度为０、０．００１μｇ／ｍｌ长春新碱诱导后,Ｋ５６２细胞凋亡