羊蹄根对原发性血小板减少性紫癜模型小鼠外周血小板的影响

目的通过观察原发性血小板减少性紫癜(ITP)小鼠模型外周血血小板数量及功能的变化,探讨羊蹄根改善ITP的效果。方法通过小鼠隔日腹腔注射豚鼠抗小鼠血小板血清(GP-APS),计数血小板数量,确定建立ITP小鼠模型。取50只Balb/c小鼠随机分为阴性对照组、模型组、阳性对照组、高剂量和低剂量羊蹄根组。除阴性对照组外,其余小鼠腹腔注射GP-APS。注射GP-APS 24 h后,阴性对照组和模型组灌服生理盐水,阳性对照组醋酸泼尼松按5 mg/kg灌胃,羊蹄根高剂量和低剂量组按其5,0.5 g/kg灌胃。连续给药14 d后处死小鼠检测外周血小板数量,采用流式细胞仪检测CD41和CD61。结果与阴性对照组比较,通过腹腔注射GP-APS,小鼠外周血血小板数量显著减低(P<0.05),证明ITP模型建立成功。与阴性对照组比较,羊蹄根高剂量组和低剂量组仅能提高ITP模型小鼠外周血血小板数量(P<0.05);高剂量组羊蹄根明显使CD41和CD61上升(P<0.05),并接近正常水平。结论高剂量羊蹄根不仅可明显提高ITP小鼠外周血血小板的数量,还可提高血小板的聚集功能。     

地菍口服液治疗原发免疫性血小板减少症的药效学研究

目的:观察地菍口服液对原发免疫性血小板减少症(primary immune thrombocytopenia,ITP)模型小鼠血小板计数、出凝血时间、骨髓巨核细胞数量、血清白细胞介素-4(IL-4)及干扰素-γ(IFN-γ)的影响。方法:取60只BALB/C小鼠随机分为6组:地菍口服液高、中、低剂量组、醋酸泼尼松组、模型组、正常对照组。以隔日注射豚鼠抗小鼠血小板血清(APS)进行造模。造模第8天开始给药,每日1次,连续14 d后处死小鼠,检测外周血小板计数、出凝血时间、骨髓巨核细胞数量、IL-4及IFN-γ水平。结果:1地菍口服液高、中、低剂量组血小板数量明显高于模型组(P0.05),出血时间及巨核细胞计数明显低于模型组(P0.05);地菍口服液高剂量组凝血时间低于模型组(P0.05),但中、低剂量与模型组间比较无显著变化(P0.05);地菍口服液高、中剂量组血小板计数高于低剂量组(P0.05)。2模型组IL-4、IFN-γ及IFN-γ/IL-4比值水平均高于正常对照组(P0.05),以IFN-γ及IFN-γ/IL-4值升高为主(P0.05);地菍口服液高剂量组IL-4、IFN-γ水平及IFN-γ/IL-4值低于模型组(P0.05),而中、低剂量组仅IFN-γ水平及IFN-γ/IL-4值低于模型组(P0.05);地菍口服液高、中、低剂量组IL-4、IFN-γ及IFN-γ/IL-4值无明显差异(P0.05)。结论:地菍口服液对于提升ITP小鼠血小板计数及改善出血症状有较好疗效,增加剂量有助于提高疗效。通过降低ITP小鼠INF-γ水平及IFN-γ/IL-4比值,使Th1/Th2细胞恢复平衡,可能是其起效的机制之一。     

千佛菌对老龄小鼠Th_1/Th_2漂移的影响

目的:通过研究千佛菌对D-半乳糖致衰老模型小鼠外周血Th1、Th2型细胞因子(IFN-γI、L-4)水平及I FN-γ/I L-4比值的影响,探讨千佛菌对衰老机体的免疫调节作用。方法:将小鼠随机分为正常对照组、衰老模型组、千佛菌大、小剂量组。除正常组外,其余均腹腔注射D-半乳糖制备衰老模型。千佛菌大、小剂量组分别以100%和50%药液每只每日0.4 mL灌胃,其余等量生理盐水灌胃。测定血清中IFN-γI、L-4含量并计算IFN-γ/IL-4比值,测定脾脏及胸腺指数。结果:模型组小鼠血清IFN-γI、L-4水平I、FN-γ/IL-4比值、脾脏及胸腺指数均明显降低,与正常组比较P0.001;与模型组比较,千佛菌大、小剂量组IFN-γI、L-4水平、脾脏及胸腺指数均明显升高P0.001I,FNγ/IL-4比值恢复;千佛菌大、小剂量组间IFN-γI、L-4比较P0.001。结论:千佛菌对D-半乳糖致衰老模型小鼠Th1、Th2型细胞因子水平及IFN-γ/IL-4比值具有升高作用,并能够显著增加小鼠的脾脏及胸腺指数,对D-半乳糖导致衰老的Th1/Th2免疫失衡具有一定的调节作用,能使之趋向恢复正常。     

固本止咳中药对COPD模型小鼠脾、胸腺指数及Th1/Th2失衡的影响

目的:观察固本止咳中药对COPD模型小鼠脾、胸腺指数及Th1/Th2失衡的影响,探讨其治疗COPD的作用机制。方法:采用鼻腔滴入LPS加熏香烟的方法建立COPD小鼠模型,实验分为空白对照组、模型对照组、固本止咳中药组;运用HE染色对形态学进行观察,评价COPD小鼠模型;采用双抗体夹心ELISA方法检测小鼠血清中IFN-γ与IL-4分泌水平。结果:COPD小鼠模型形态学结果符合COPD临床病理形态学改变;模型对照组胸腺指数和脾脏指数显著低于空白对照组(P<0.05),与模型对照组比较,固本止咳中药组小鼠的胸腺指数和脾脏指数显著增加,差异有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组比较,模型对照组小鼠血清中IFN-γ升高(P<0.05),IL-4降低(P<0.05),与模型对照组比较,固本止咳中药组小鼠血清中IFN-γ明显降低,IL-4升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:固本止咳中药能纠正COPD模型小鼠Th1/Th2失衡,改善模型小鼠的免疫功能。     

蛤蚧对S_(180)荷瘤小鼠Th1/Th2免疫细胞平衡的影响

目的:观察蛤蚧(GJ)对S180荷瘤小鼠Th1/Th2细胞因子的影响。方法:采用S180瘤株皮下接种昆明种小鼠造荷瘤模型。设正常组、模型组、环磷酰胺组(CTX),GJ高、中、低剂量组。给药14天后,计算抑瘤率、免疫器官指数;酶联免疫吸附法检测Th1类细胞因子(IL-2、IFN-γ)、Th2类细胞因子(IL-4、IL-10)的表达及计算Th1/Th2比值。结果:①与模型组比较,GJ低剂量组肿瘤生长明显受到抑制(P0.05);②与CTX比较,GJ低剂量组脾脏指数明显升高(P0.05),GJ中、高剂量组胸腺指数明显升高(P0.05);③与模型组比较,GJ低剂量组IFN-γ、IL-2含量升高(P0.05),低、中剂量组IL-4含量明显降低(P0.05),GJ各剂量组IL-10含量降低,差异无统计学意义(P0.05);④GJ低剂量组IFN-γ/IL-4比值、IL-2/IL-4比值均高于模型组(P0.05)。结论:GJ可有效纠正荷瘤小鼠Th1/Th2失衡,增强机体的抗肿瘤免疫功能。     

脾胃虚实证大鼠局部与整体Th平衡的研究

目的探讨脾胃虚实证候大鼠模型胸腺、脾脏、外周血Th1/Th2平衡的相关性。方法将60只SPF级SD大鼠随机分为3组,其中一组为脾虚组,一组为湿热组,一组为正常组,每组20只,雌雄各半,采用酶联免疫吸附法(ELISA)技术对大鼠模型血浆、胸腺、脾脏组织Th1/Th2细胞因子水平进行检测。结果在胸腺方面,与正常组对比,脾虚组的IFN-γ表达下降,IL-4表达和IFN-γ/IL-4比值升高,但均无统计学意义(P0.05);湿热组的IFN-γ表达和IFN-γ/IL-4比值明显升高(P0.05),IL-4表达下降,但无统计学意义(P0.05)。在脾脏方面,与正常组对比,脾虚组的IFN-γ表达下降,但无统计学意义(P0.05),IL-4表达明显下降(P0.05),IFN-γ/IL-4比值明显升高(P0.05);湿热组的IFN-γ表达升高,但无统计学意义(P0.05),IL-4表达明显下降(P0.05),IFN-γ/IL-4比值明显上升(P0.05)。在外周血方面,与正常组对比,脾虚组的IFN-γ表达明显下降(P0.05),IL-4表达升高,IFN-γ/IL-4比值下降,但均无统计学意义(P0.05);湿热组的IFN-γ表达与IFN-γ/IL-4比值明显升高(P0.05),IL-4表达下降,但无统计学意义(P0.05)。结论脾虚组和湿热组在脾脏的IL-4表达均表现出下降趋势,IFN-γ/IL-4比值呈升高趋势,脾脏的Th1/Th2平衡在不同证型中可能均向Th1漂移。胸腺、脾脏、外周血等不同组织的IFN-γ/IL-4比值在脾胃虚实证候的呈现不同,提示不同部位的细胞因子表达差异性与不同证候的相关性,这可能是脾胃虚实证候的发病机制之一。     

益气补肾方对自然流产小鼠Th17/Treg细胞及相关细胞因子的影响

目的:观察益气补肾方对自然流产模型小鼠外周血Th17/Treg及相关细胞因子的影响及其对妊娠结局的影响。方法:孕鼠随机分为正常妊娠模型组、自然流产模型组、环孢素组、中药高、中、低剂量组,每组6只。正常妊娠模型组和自然流产模型组给予生理盐水;环孢素组给予环孢素A;中药高、中、低剂量组分别给予48、24、12g/kg益气补肾方,连续2周,每天1次。给药结束后取血,检测外周血Th17、Treg细胞含量及Th17/Treg细胞比例,检测干扰素-γ(IFN-γ)、白介素-4(IL-4)、白介素-17(IL-17)、白介素-10(IL-10)含量。观察子宫胚胎数量并计算胚胎吸收率。结果:连续给药2周,中药各剂量组均能显著减少胎盘吸收率(P0.05),增加胎盘存活数量;中药各剂量自然流产模型小鼠Th17/Treg细胞百分率比值均显著降低,中药高、中剂量组Th17细胞比例显著降低(P0.05);中药低、中剂量组Treg细胞比例显著升高(P0.05);中药各剂量自然流产模型小鼠IL-17、IFN-γ含量均显著降低(P0.05);中药低剂量组IL-10含量显著升高(P0.05);中药中剂量组IL-4含量显著升高(P0.05)。结论:益气补肾方可能通过调节Th17及Treg细胞的表达水平,降低Th17/Treg比例,并调节相关细胞因子的表达水平,影响Th17/Treg平衡,诱导妊娠免疫耐受,促进胚胎发育,从而改善妊娠结局。     

双氢青蒿素与火把花配伍的免疫抑制作用及机制研究

目的:研究双氢青蒿素与火把花配伍对迟发型超敏反应小鼠的免疫抑制作用及可能的作用机制。方法:建立迟发型超敏反应(delayed-type hypersensitivity,DTH)小鼠模型,观察双氢青蒿素、火把花及两者配伍对DTH小鼠的免疫抑制效应;ELISA法检测血清中γ干扰素(Interferon,IFN-γ)和白介素4(Interleukin,IL-4)含量;RT-qPCR技术检测淋巴结中Th1/Th2细胞转录因子T-bet及GATA-3的基因表达。结果:与正常对照比较,模型对照组小鼠耳肿胀度、胸腺、脾脏指数显著升高,血清中IL-4、IFN-γ含量及IFN-γ/IL-4比值显著升高,淋巴结中T-bet mRNA表达水平显著上调,GATA-3 mRNA表达水平显著下调;与模型对照组比较,双氢青蒿素与火把花配伍组(0.2+7.5)g/kg小鼠耳肿胀度、胸腺、脾脏指数显著降低,血清中IFN-γ含量显著降低、IL-4含量显著升高,IFN-γ/IL-4比值显著降低,淋巴结中T-bet的mRNA表达水平显著下调,GATA-3的mRNA表达水平显著上调。结论:青蒿素与火把花配伍能够明显抑制DTH反应,其可能通过降低IFN-γ含量、升高IL-4含量,以及调节Thl/Th2免疫平衡从而发挥免疫抑制作用。     

补肺平喘汤对支气管哮喘大鼠Th1/Th2失衡及JAK/STAT信号通路影响

目的观察补肺平喘汤对支气管哮喘大鼠Th1/Th2细胞因子失衡及JAK/STAT信号通路影响。方法将50只健康大鼠随机分为正常组,模型组,中药低剂量组,中药中剂量组,中药高剂量组5组,每组10只。除正常组外,其余各组给予卵白蛋白和氢氧化铝免疫反应制备支气管哮喘大鼠模型。造模4周后,中药低、中、高剂量组分别按照生药量10.8,21.6,32.4 g/kg进行灌胃给药,正常组和模型组给予等量生理盐水灌胃,灌胃4周后,分离大鼠血清和肺组织,Elisa法检测大鼠血清IFN-γ、IL-4水平变化,RT-PCR法检测大鼠肺组织JAK/STAT信号通路变化。结果与正常组比较,模型组大鼠血清IL-4水平显著升高(P0.01),而IFN-γ呈显著下降趋势(P0.01),IL-4/IFN-γ提示免疫调节显著向Th2水平失衡,肺组织JAK1、STAT6 mRNA水平明显升高;与模型组比较,中药中、高剂量组大鼠血清IL-4水平显著降低(P0.05,P0.01),IFN-γ水平显著升高(P0.05),免疫调节明显向Th1方向调节(P0.01),肺组织JAK1、STAT6 mRNA水平明显降低(P0.05,P0.01)。结论补肺平喘汤能有效改善支气管哮喘大鼠Th1/Th2细胞因子失衡,降低JAK1、STAT6 mRNA表达,调节Th1/Th2细胞因子平衡。     

梓醇对哮喘小鼠气道炎症影响的实验研究

目的观察梓醇的抗哮喘作用并探讨其可能的作用机制。方法 40只雄性BALB/c小鼠随机分成正常对照组、模型组、梓醇低剂量组和梓醇高剂量组;除正常对照组外,其他实验组采用体外卵清蛋白诱导建立小鼠哮喘模型,支气管肺泡灌洗液内细胞Diff-quik染色后观察细胞总数和各分类细胞数;肺组织切片HE染色观察肺部炎症情况;ELISA和Western blot分别检测BALF和肺组织中IL-4、IL-5、IFN-γ水平的变化。结果与正常组比较,模型组炎症细胞计数、IL-4和IL-5表达增高(P0.05),但IFN-γ表达降低(P0.05);梓醇低、高剂量组炎症细胞数、IL-4和IL-5的表达明显降低(P0.05),但IFN-γ的表达显著升高(P0.05)。结论梓醇通过抑制调节Th1/Th2细胞因子失平衡发挥抗哮喘作用。