番石榴叶总黄酮对胰岛β细胞胰岛素抵抗影响的实验研究

目的：观察番石榴叶总黄酮对HIT-T15胰岛β细胞胰岛素抵抗影响。方法：制备番石榴叶总黄酮（FSL）有效部位,通过HIT-T15胰岛β细胞生长曲线以及不同浓度葡萄糖（GLU）、FSL对HIT-T15胰岛β细胞增殖的影响确定FSL的加药时间、浓度和高糖浓度。然后测定在高糖环境下,FSL对HIT-T15胰岛β细胞胰岛素分泌、胰岛素受体mRNA和胰岛素受体底物1蛋白表达的影响。结果：50 mmol·L^-1葡萄糖能够显著抑制HIT-T15胰岛β细胞增殖（P<0.01）,50 μg·mL^-1 FSL能够促进高糖环境下HIT-T15胰岛β细增殖（P<0.01）、促进胰岛素分泌（P<0.05）、胰岛素受体mRNA表达（P<0.05）和胰岛素受体底物1蛋白表达（P<0.01）。结论：番石榴叶总黄酮能够促进高糖环境下HIT-T15胰岛β细胞胰岛素分泌,可能与其增加胰岛素受体mRNA的表达、胰岛素受体底物（IRS-1）蛋白表达有关。     

中药治疗糖尿病机制研究进展

研究证实中药治疗糖尿病的机制能够通过刺激胰岛素分泌,保护和修复胰岛β细胞,改善胰岛素抵抗,抑制α-葡萄糖苷酶活性,促进葡萄糖利用,改善机体氧化应激水平等途径发挥.如肉桂、苦杏仁、松花粉、仙鹤草、玉竹、黄芪、知母能够刺激胰岛素分泌;南瓜、玉米须、山药、灵芝、栀子能够保护和修复胰岛β细胞;泽泻、葛根、黄连、牡丹皮、黄芩、人...     

罗格列酮钠对葡萄糖胺诱导的HIT-T15细胞超微结构损伤的保护作用

目的:观察罗格列酮钠(RSGN)对葡萄糖胺(GLcN)诱导的HIT-T15细胞超微结构损伤及其保护作用。方法:以叙利亚仓鼠胰岛β细胞株HIT-T15细胞作为研究对象,实验分组:正常对照组;GLcN+高浓度葡萄糖培养组;GLcN+高浓度葡萄糖+RSGN10-6M培养组;GLcN+高浓度葡萄糖+RSGN10-8M培养组。各组培养48h,透射电镜观察HIT-T15细胞线粒体超微结构。结果:透射电镜观察HIT-T15细胞,GLcN组可见凋亡细胞及较多的坏死细胞,多数线粒体模糊不清,个别线粒体有肿胀,核周隙变宽内质网空泡变性的病理变化;RSGN10-8M组的HIT-T15细胞超微结构病变明显减轻,与RSGN10-8M组比较,RSGN10-6M组病变无明显改变。结论:GLcN可使胰岛β细胞株HIT-T15细胞超微结构损伤,RSGN可部分地阻止这种损伤的形态改变,且和其剂量有一定关系。     

复方番石榴制剂对HepG2细胞胰岛素抵抗的改善及对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶抑制作用北大核心CSCD

目的观察复方番石榴制剂对Hep G2细胞胰岛素抵抗(IR)的改善作用,及对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶抑制作用。方法用高浓度胰岛素诱导Hep G2细胞建立胰岛素抵抗细胞模型,用葡萄糖氧化酶法检测复方番石榴制剂对IR-Hep G2细胞葡萄糖的消耗量;分别以可溶性淀粉和4-硝基酚-α-D-吡喃葡萄糖苷(PNPG)为底物测定复方番石榴制剂对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶活性的抑制率。结果与模型组比较,复方番石榴制剂(62.5,250,500μg·m L^(-1))显著增加了IR-Hep G2细胞对葡萄糖的消耗量(P<0.05,P<0.01)。在实验剂量范围内,复方番石榴制剂对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶抑制作用均随浓度升高而抑制作用增加,IC50值分别为0.79 mg·m L^(-1)和0.48 mg·m L^(-1)。结论复方番石榴制剂可促进IR-Hep G2细胞对葡萄糖的消耗,改善Hep G2细胞对胰岛素的抵抗状态,并能体外抑制α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶活性。     

复方番石榴制剂对HepG2细胞胰岛素抵抗的改善及对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶抑制作用

目的观察复方番石榴制剂对Hep G2细胞胰岛素抵抗(IR)的改善作用,及对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶抑制作用。方法用高浓度胰岛素诱导Hep G2细胞建立胰岛素抵抗细胞模型,用葡萄糖氧化酶法检测复方番石榴制剂对IR-Hep G2细胞葡萄糖的消耗量;分别以可溶性淀粉和4-硝基酚-α-D-吡喃葡萄糖苷(PNPG)为底物测定复方番石榴制剂对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶活性的抑制率。结果与模型组比较,复方番石榴制剂(62.5,250,500μg·m L~(-1))显著增加了IR-Hep G2细胞对葡萄糖的消耗量(P0.05,P0.01)。在实验剂量范围内,复方番石榴制剂对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶抑制作用均随浓度升高而抑制作用增加,IC50值分别为0.79 mg·m L~(-1)和0.48 mg·m L~(-1)。结论复方番石榴制剂可促进IR-Hep G2细胞对葡萄糖的消耗,改善Hep G2细胞对胰岛素的抵抗状态,并能体外抑制α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶活性。     

番石榴酸改善INS-1胰岛β细胞胰岛素抵抗

目的考察番石榴酸对INS-1胰岛β细胞胰岛素抵抗的作用,并探讨其可能的作用机制。方法 40 mmol/L葡萄糖干预INS-1胰岛β细胞48 h建立胰岛素抵抗模型,设番石榴酸干预组(0.3、1、3、10、30 nmol/L),以及空白对照组、二甲亚砜对照组,胰岛素抵抗模型组,正钒酸钠组(1 mmol/L)和罗格列酮组(1 mmol/L),药物作用48 h。分别以5.6、16.7 mmol/L葡萄糖干预细胞1 h作为基础胰岛素分泌(BIS)、高糖刺激胰岛素分泌(GSIS)条件,用放射免疫法检测药物对胰岛素分泌的影响,结果以该细胞总蛋白量校正。荧光定量PCR法检测药物对胰岛素抵抗INS-1细胞内PTP1B、PPARγmRNA表达的作用。结果与胰岛素抵抗模型组比较,0.3 nmol/L番石榴酸便能促进胰岛素抵抗INS-1细胞的GSIS(P<0.05或P<0.01);1 nmol/L番石榴酸即可显著促进基础胰岛素分泌(P<0.01)。0.3、3、30 nmol/L番石榴酸均能显著下调胰岛素抵抗INS-1细胞的PTP1B mRNA相对表达(P<0.05或P<0.01),其中0.3和3 nmol/L番石榴酸下调作用优于正钒酸钠,上调PPARγmRNA相对表达作用优于罗格列酮。结论番石榴酸能够改善INS-1细胞胰岛素抵抗,可能通过下调PTP1B和上调PPARγ基因表达有关。番石榴酸可能通过改善胰岛β细胞自身胰岛素抵抗而发挥抗糖尿病作用。     

苦瓜降糖作用研究

近年国内外对苦瓜研究发现其含有三萜类、植物甾醇、苷类、甾体类和肽类等多种降血糖活性成分.苦瓜的果汁、水、醇及醚等多种提取物具有降糖作用.多项研究表明苦瓜的上述成分可通过抑制葡萄糖在小肠黏膜的吸收、促进葡萄糖的利用、促进胰岛素的分泌和类胰岛素作用、保护胰岛β细胞并促进β细胞的增殖抑制其凋亡,以及免疫调节作用来降低血糖达到治疗糖尿病的目的.     

半夏泻心汤对H2O2诱导的RIN-m5F细胞凋亡和胰岛素分泌的影响

目的探讨半夏泻心汤对胰岛β细胞凋亡及胰岛素分泌的影响。方法 33只雄性SD大鼠随机分组灌胃,取血收集含药血清,H2O2处理RIN-m5F细胞建立氧化应激细胞凋亡模型,造模成功后探索半夏泻心汤最佳浓度并随机分组,流式细胞术检测各组细胞凋亡率、放免法检测胰岛素分泌浓度。结果 H2O2半数致死浓度为300 mmol/L,半夏泻心汤最佳浓度为10%(P0.01);半夏泻心汤可显著增强胰岛细胞活力,降低胰岛细胞凋亡率,增加胰岛素分泌(P0.05)。结论半夏泻心汤可抑制胰岛细胞凋亡,促进胰岛素分泌,其机制有待进一步探讨。     

短期胰岛素强化治疗2型糖尿病疗效观察

目的探讨短期胰岛素强化治疗对2型糖尿病患者胰岛β细胞功能、后期血糖控制情况、糖尿病并发症发生情况的影响。方法对空腹血糖(FBG)≥11.1 mmol/L和/或餐后2 h血糖(2hPG)≥14 mmol/L的18例初诊2型糖尿病患者和5例2型糖尿病3～5 a患者进行2周胰岛素强化治疗,对比治疗前后FBG、静脉葡萄糖耐量试验(IVGTT)时胰岛素及C肽分泌相。结果经短期胰岛素强化治疗后,血糖得到良好控制,IVGTT时出现明显胰岛素及C肽分泌相,部分患者在停止治疗后仅依靠饮食控制和运动就可维持良好的血糖代谢至少1 a,1例继发性糖尿病患者3 a内停止使用降糖药物治疗。结论短期胰岛素强化治疗可改善胰岛β细胞功能,有利于血糖控制。     

中药降糖作用机理的研究进展

总结了近年来对中药降糖机理的研究结果,认为中药具有保护修复和促进胰岛B细胞分泌,拮抗升糖激素,提高胰岛素的敏感性,增强对糖的吸收利用和糖原合成,抑制α-葡萄糖苷酶活性,防止胰岛β细胞的凋亡等.为中医药治疗糖尿病的研究提供了重要参考.     

血脂康通过葡萄糖感受器影响db/db小鼠胰岛分泌功能的研究

目的探讨血脂康对db/db小鼠胰岛内葡萄糖转运蛋白-2(GLUT-2)和葡萄糖激酶(GCK)表达的影响。方法将40只8周龄清洁级雄性C57BL/Ks J-db/db小鼠随机分为血脂康组和db/db组,每组20只,分别给予300 mg/(kg·d)血脂康和等剂量安慰剂(0.5%纤维素钠)灌胃;选取20只同周龄同窝C57BL/Ks J-db/m小鼠作为非糖尿病对照组(db/m组),给予安慰剂灌胃。各组小鼠均连续灌胃8周后行腹腔葡萄糖耐量试验,以离体胰岛灌流法评价胰岛分泌功能,分别采用qRT-PCR和Western blot方法检测胰岛β细胞葡萄糖感受器GLUT-2和GCK mRNA及蛋白表达水平。结果在糖负荷后30,60,120 min,血脂康组血糖水平均明显低于db/db组(P均<0.05),但均高于db/m组(P均<0.05);在糖负荷后30 min,血脂康组血浆胰岛素水平明显高于db/db组(P<0.05)。与db/db组比较,血脂康组在2.8 mmol/L低糖灌流时胰岛素分泌无明显升高,而给予16.7 mmol/L高糖刺激1 min后胰岛素分泌明显升高(P<0.05),但仍低于db/m组(P<0.05)。db/db组GLUT-2和GCK mRNA及蛋白表达水平均明显低于db/m组(P均<0.05),血脂康组GLUT-2和GCK mRNA及蛋白表达水平均明显高于db/db组(P均<0.05)。结论血脂康能通过增加胰岛β细胞GLUT-2和GCK的表达改善胰岛分泌功能。     

青蒿琥酯对体外培养角质形成细胞的影响

目的:了解青蒿琥酯(artesunate,ART)对角质形成细胞生长的抑制作用及机制。方法:用不同浓度ART处理人角质形成细胞株HaCat,MTT法检测ART对HaCat增殖情况的影响,流式细胞仪分析ART处理后的HaCat的趋化因子CXCR2表达的改变。对正常人表皮角质形成细胞进行原代培养,观察ART处理后,培养液中TGF-β1含量的变化。结果:0·01～0·5mg/mlART可抑制HaCat细胞的增殖,干预24小时后即可见到明显的抑制作用,但CXCR2的表达稍高于正常对照组。同时,正常原代的角质形成细胞的培养上清中TGF-β1分泌增加。结论:0·01～0·5mg/ml青蒿琥酯可促进角质形成细胞TGF-β1分泌,抑制角质形成细胞的增殖。     

两种新的小鼠2型糖尿病胰岛素抵抗模型

目的:复制与临床更为接近的2型糖尿病胰岛素抵抗模型.方法:采用肌肉注射地塞米松造糖耐量降低模型,静脉注射小剂量四氧嘧啶并灌服高浓度葡萄糖造2型糖尿病胰岛素抵抗模型,通过检测糖耐量、血糖、胰岛素、胰岛素敏感指数、β细胞功能指数、胰岛细胞病理改变来观察造模药物对小鼠的影响.结果:2mg/kg地塞米松可造成小鼠糖耐量降低模型,小剂量四氧嘧啶50mg/kg分别于实验第1、14天注射并灌服高浓度葡萄糖能使血糖升高,胰岛素敏感性下降,胰岛β细胞损伤.结论:2mg/kg地塞米松可造成小鼠糖耐量降低模型;注射小剂量四氧嘧啶并灌服高浓度葡萄糖能造成2型糖尿病胰岛素抵抗模型.     

原代大鼠胰岛的分离纯化及功能鉴定

目的 探讨成年大鼠胰岛分离、纯化的方法,为成人胰岛的分离纯化奠定基础.方法通过用胶原酶P消化胰腺及利用Histopaque 1077分离液离心分离纯化雄性SD大鼠胰岛,用双硫棕（DTZ）染色,吖啶橙-碘化丙啶（AO/PI）染色和胰岛素分泌实验来鉴定胰岛的纯度、活性和功能;利用激光共聚焦技术检测胰岛细胞中钙离子浓度.结果 分离获得的胰岛可被DTZ和AO/PI分别染成猩红色和绿色;体外刺激胰岛素分泌实验,2.8 mM、8.3 mM、16.7mM葡萄糖情况下胰岛素分泌量分别是：（11.7 ± 1.4）uIU/mL、（38.2 ± 8.7）uIU/mL、（86.3 ± 5.1）uIU/mL;在2.8 mM葡萄糖基础上,8.3 mM葡萄糖明显增加胰岛细胞中钙离子浓度,16.7 mM葡萄糖在8.3 mM葡萄糖基础上又进一步升高钙离子浓度.结论采用胶原酶P消化法及Histopaque 1077分离液离心分得的胰岛纯度高,活性、功能良好,随着葡萄糖浓度的增加,胰岛细胞中钙离子浓度明显增加.     

天花粉多糖促人外周血单个核细胞增殖和对人乳腺癌细胞人子宫颈癌细胞的生长抑制作用

目的 研究天花粉多糖促人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)增殖作用和对人乳腺癌细胞(MCF-7细胞)、人子宫颈癌细胞(HeLa细胞)生长抑制作用.方法 分离健康人PBMC,采用MTT法测定不同浓度天花粉多糖(0.5,1.0,2.0,5.0,10.0,20.0 mmol·L-1)作用于人PBMC 72h后,对人PBMC的促增殖作用;不同浓度天花粉多糖对MCF-7细胞和HeLa细胞生长的抑制作用.结果 2.0～20.0 mmol·L-1天花粉多糖具有显著促进人PBMC增殖(P<0.05),且呈一定的浓度依赖关系;5.0,10.0,20.0 mmol·L-1天花粉多糖均能有效抑制MCF-7细胞和HeLa细胞生长(P<0.05).结论 天花粉多糖具有促人PBMC的增殖作用,并可显著抑制肿瘤细胞MCF-7和HeLa细胞的生长.     

高糖素样肽1用于糖尿病的研究进展

胰高糖素样肽1(GLP-1)是一种生理性肽类肠道激素,主要由回肠末端、结肠和直肠中的神经内分泌细胞L细胞分泌.GLP-1与胰岛β细胞上特异性受体结合后,具有刺激胰岛素分泌、提高β细胞对葡萄糖的敏感性、刺激β细胞中胰岛素基因的转录和翻译等作用.现就GLP-1的生物学功能及应用作一综述.     

大黄酸治疗对db/db小鼠第1相胰岛素分泌的影响

目的:通过db/db小鼠先天性2型糖尿病动物模型,探讨大黄酸对胰岛β细胞第1相胰岛素分泌功能的影响。方法:20只4周龄db/db雄性小鼠,随机分成治疗组和对照组,每组10只。另取10只db/m雄性小鼠作为非糖尿病正常对照。治疗组每日固定时间给予大黄酸120 mg.kg-1灌胃,db/db对照组和db/m对照组均给予相同体积的1%纤维素钠,连续给药8周,测定给药前后小鼠体重和空腹血糖,并于给药结束后分离胰岛,建立离体胰岛灌流系统,开始2.8 mmol.L-1KRB0.5 mL.h-1速度灌流1 h,后换为16.7 mmol.L-1KRB 1 mL.h-1灌流,在-30,-20,-10,0,1/3,2/3,1,4/3,5/3,2,3,4,5,6,7,8,9,10,15,20,30 min时分别收集灌流出的液体,-80℃保存后测定胰岛素。结果:db/db大黄酸治疗组和对照组相比,空腹血糖明显下降。db/db对照组小鼠的离体胰岛第1相胰岛素分泌明显受损,而db/db大黄酸治疗组小鼠离体胰岛在高糖刺激后立即出现明显的第1相胰岛素分泌高峰,较db/db明显好转。结论:早期大黄酸治疗可以明显改善db/db小鼠的葡萄糖耐量,恢复第1相胰岛素分泌功能,保护胰岛功能。     

黄精多糖的提取及其对α-葡萄糖苷酶抑制作用

目的:研究黄精Polygonatum sibiricum不同分子量级的多糖组分对α-葡萄糖苷酶的抑制作用,探究黄精多糖分子量大小、单糖组成、单糖比例和黄精对α-葡萄糖苷酶抑制作用之间的联系。方法:采用DEAE2纤维素柱色谱和透析袋透析等操作对黄精的醇提物进行分离纯化分段。然后用气相色谱分析多糖不同分子量级组分的组成、单糖比例。结果:黄精中抑制α-葡萄糖苷酶活性的主要成份为黄精多糖。对黄精多糖分离纯化分段,得到4个分子量级别的多糖,对其组成分析:M2 000,含有2种单糖,分别为阿拉伯糖、葡萄糖,对α-葡萄糖苷酶的抑制率为44.90%;2 000M14 000,含有一种单糖为葡萄糖,对α-葡萄糖苷酶的抑制率为68.10%;14 000M50 000,含有3种单糖,分别为甘露糖、葡萄糖、半乳糖,对α-葡萄糖苷酶的抑制率为55.30%;M50 000,含有2种单糖,分别为甘露糖、葡萄糖,对α-葡萄糖苷酶的抑制率为63.80%。结论:单一葡萄糖形成的黄精多糖抑制α-葡萄糖苷酶活性最强,降糖活性也最强。     

平糖方药物血清急性抑制软脂酸刺激的INS-1β细胞胰岛素分泌

目的:观察平糖方药物血清对高浓度软脂酸刺激下的INS-1β细胞胰岛素分泌的影响。方法:以大鼠胰岛β细胞株INS-1细胞为模型,以平糖方药物血清作为刺激因素,通过MTT方法,测定INS-1细胞的生长和增殖能力;在0.5mmol/L PA的条件下,分别观察平糖方药物血清对INS-1细胞胰岛素分泌和ATP合成的影响,胰岛素分泌采用RIA方法检测,ATP采用荧光素酶方法检测。结果:平糖方药物血清对INS-1β细胞的生长增殖有一定的抑制趋势,其中高剂量组与细胞对照组相比出现了明显的降低。PA作用于细胞24h可以导致胰岛素分泌增加、ATP合成升高,平糖方药物血清可使PA促进的胰岛素分泌降低、ATP合成降低;而作用于细胞72h可以导致胰岛素分泌减少、ATP合成降低,平糖方药物血清对PA引起的ATP降低没有明显的改善作用。结论:平糖方药物血清急性抑制PA促进胰岛素分泌和ATP合成,还可能通过抑制ATP合成而急性抑制PA促进胰岛素分泌。     

益气养阴活血方对2型糖尿病大鼠糖脂代谢及胰岛功能的影响

目的研究益气养阴活血方对2型糖尿病大鼠糖脂代谢及胰岛β细胞功能的影响。方法 50只SD大鼠随机分为5组:模型组,津力达(1. 5 g/kg)组,益气养阴活血方高、中、低剂量(55. 00、27. 50、13. 75 g/kg)组。另设10只SD大鼠为空白对照组。灌胃给药,1次/d,周期4周。测定空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(2hBG)、血清胰岛素(FINS)和血脂四项(TC、TG、LDL-C、HDL-C),并计算胰岛素敏感指数(ISI)和胰岛素分泌指数(HOMA-β),取大鼠胰腺组织观察胰岛病理变化。结果与模型组比较,益气养阴活血方能明显降低糖尿病大鼠FBG、2hBG、TC、TG、LDL-C水平(P 0. 05),升高FINS、ISI、HOMA-β、HDL-C水平(P 0. 05)。结论益气养阴活血方能够有效改善糖脂代谢紊乱,保护胰岛细胞功能,促进胰岛素分泌。