X射线诱导肝癌多药耐药细胞模型生物学特性的实验研究

目前，药物介入性治疗是肝癌的重要临床处理手段，但肿瘤细胞多药耐药（MDR）严重限制了疗效。因此研究肝癌MDR细胞生物学特性，能够为肿瘤MDR逆转方法的探讨提供理论依据，对于改善肝癌的治疗有着积极意义。本实验采用X射线诱导建立人肝癌HepG2耐药细胞模型并对其生物学特性进行研究。[第一段]     

非小细胞肺癌多药耐药机制研究进展

肿瘤的多药耐药(MDR)是导致肺癌化疗失败的主要原因,也是肺癌化疗亟待解决的问题[1].研究肺癌细胞的相关耐药机制及寻找逆转耐药的药物已经成为肿瘤研究的热点.肺癌MDR的机制非常复杂,多数是由多蛋白、多种酶、多基因综合作用的结果.现将非小细胞肺癌(NSCLC) MDR机制研究进展综述如下.     

乳腺癌耐药相关蛋白在肝硬化及肝癌组织中的表达

肝癌对化疗药物的敏感性低,其多药耐药是肝癌治疗失败的主要原因.P-糖蛋白(P gP)在肝癌组织中高表达,可能是参与肝癌多药耐药的关键分子[1],然而抑制P-gp的活性,并不能有效逆转肝癌的多药耐药[2].因此,除了P-gp,可能有其他的多药耐药分子共同参与了肝癌的多药耐药.乳腺癌耐药相关蛋白(BCRP)是近年来发现的一个新的多药耐药分子,可排泄多种化疗药物[3-4].已有研究结果显示,BCRP在肝癌中有表达,并可能是肝癌干细胞的一种标志物[5-6].然     

奥曲肽逆转肝细胞肝癌多药耐药的机制

目的 探讨生长抑素（SST）类似物奥曲肽逆转肝癌细胞多药耐药可能的机制。方法 应用MTT法分析肝癌细胞对化疗药物的敏感性；RT—PCR、流式细胞术检测肝癌细胞多药耐药基因多药耐药糖蛋白1（MDR1）、多药耐药相关蛋白2（MRP2）mRNA及其蛋白质的表达。结果 奥曲肽联合化疗药物可以显著降低化疗药物的IC50肝癌细胞有生长抑索受体2（SSTR2）、生长抑素受体3（SSTR3）、MDR1、MRP2的表达，奥曲肽可显著降低肝癌细胞表面MDR1、MRP2的表达。结论 SST可与肝癌细胞表面的SSTR结合，降低其表面MDR2、MRP2的表达，使细胞内细胞毒药物浓度增加，从而逆转肝癌细胞多药耐药。     

谷胱甘肽S-转移酶-π与肿瘤多药耐药的研究进展

肿瘤多药耐药(MDR)是造成肿瘤化疗失败的主要原因,亦是近年肿瘤化疗的研究热点。随着对非P-糖蛋白(P-gp)介导的MDR机制研究的不断深入,证实谷胱甘肽S-转移酶-π(GST-π)在肿瘤MDR中发挥重要作用,有望成为新的肿瘤治疗靶点。本文就GST-π的生理特性、分布、耐药机制、检测手段和逆转由GST-π介导的MDR等方面作一综述。     

microRNAs调控消化系肿瘤多药耐药的研究进展

肿瘤多药耐药(multidrug resistance,MDR)是影响化疗效果的最大障碍,尤其是消化系肿瘤发生耐药的现象最为突出.因此,如何逆转MDR已经成为抗肿瘤研究的热点问题.近年来,有关研究发现微小RNA(microRNAs)与多种肿瘤耐药的发生密切相关.microRNAs是一类内源性非编码RNA分子,通过降解mRNA或抑制mRNA翻译的方式调控着众多基因的表达.本综述重点阐述了microRNAs的生物学特性,与胃癌、肠癌、肝癌、胆管癌及胰腺癌等消化系肿瘤MDR的关系及其潜在的信号调控通路,以期为消化系肿瘤耐药的预防和靶向治疗提供新的思路和手段.     

中药单体逆转肿瘤多药耐药的研究进展

肿瘤多药耐药(multidrug resistance,MDR)是目前肿瘤临床化疗失败的主要原因之一,中药因其低毒高效和多阶段性作用的优势已在肿瘤MDR逆转方法的研究中逐步受到重视.目前已从多种中药中发现了具有逆转肿瘤MDR作用的中药单体成分.本文对肿瘤MDR的形成机制及近年来中药单体在逆转肿瘤MDR领域的最新研究成果进行综述.     

人肝癌顺铂耐药细胞模型的建立及耐药机制的初步探讨

多药耐药性(multidrug resistance,MDR)的产生常常导致化疗失败。我们采用逐步递增顺铂(CDDP)浓度,间歇作用体外诱导法,建立了人肝癌顺铂耐药细胞模型,并对亲代细胞系与耐药细胞系进行了对比研究,以期寻找出肿瘤细胞对CDDP产生耐药的可能机制,为临床筛选耐药逆转剂提供依据。     

多药耐药基因反义寡核苷酸逆转肝癌细胞耐药的研究

目的 观察反义硫代磷酸酯寡核昔酸(AsODN)联合逆转耐药肝癌细胞多药耐药基因1(MDR1)和多药耐药相关蛋白基因(MRP)的作用。 方法 用人工合成互补于MDR1基因及MRP基因的反义20聚硫代磷酸寡核苷酸,以脂质体作载体,转染入耐阿霉素(ADM)肝癌细胞SMMC-7721/ADM,四甲基偶氮唑蓝法测定细胞对化学疗法药物的敏感性,流式细胞仪分析细胞相对荧光强度,激光扫描共聚焦显微镜测定细胞内Rhdaming123(Rh123)及柔红霉素(DNR)潴留以反映蛋白质p170和p190功能。 结果 ASODN/MDR1 MRP联合转染SMMC-7721/ADM细胞,能更大程度增加细胞对ADM(47.8倍)和DNR(21.6倍)的敏感性。ASODN/MDR1 MRP联合转染SMMC-7721/ADM细胞,与单独任一种ASODN转染相比,对p170或p190表达的抑制并不增加(q值分别为3.23、3.24,P>0.05)。 结论 针对MDR1 MRP的ASODN联合转染SMMC-7721/ADM细胞,能更大程度逆转肝癌细胞的耐药性。     

携多药耐药基因1反义RNA重组腺病毒逆转肝癌多药耐药细胞的实验研究

目的探讨携带多药耐药基因1(multidrug resistance gene 1,MDR1)反义RNA重组腺病毒载体在裸鼠体内逆转肝癌多药耐药细胞HepG2/阿霉素(adriamycin,ADM)的疗效及作用机制。方法构建携带AFP和asmdr1的重组腺病毒载体Adeno-asmdr1,ADM分级诱导肝癌细胞HepG2为多药耐药细胞HepG2/ADM,建立HepG2/ADM裸鼠皮下移植瘤模型,Adeno asmdr1局部注射,观察移植瘤的体积、透射电镜检测移植瘤组织细胞凋亡、RT-PCR检测MDR1转录水平,评价Adeno-asmdr1的抗肿瘤活性。结果在Adeno-asmdr1 ADM组,移植瘤体积无增大,而PBS组、ADM组体积明显增大;RT-PCR检测移植瘤细胞1周和4周MDR1 mRNA水平, ADM组无明显变化,Adeno-amdr1 ADM组在4周时MDR1转录水平仅为单纯ADM组的20%,经ADM Adeno-asmdr1处理组,可见凋亡增加,ADM组和PBS处理组的裸鼠移植瘤组织中出现少量或没有凋亡。结论携带MDR1反义RNA重组腺病毒部分逆转HepG2/ADM的多药耐药,阻止肿瘤生长,下调MDR1转录水平,导致肿瘤细胞凋亡。     

耐多药肺结核188例的外科治疗

目的总结耐多药肺结核（MDR—PTB）的外科治疗经验。方法上海市肺科医院胸外科自1990年1月至2005年11月共行肺结核手术906例，其中MDR—PTB188例（20．8％），手术200例次，2次手术12例；肺叶切除85例次，肺叶切除并袖式及气管、支气管成形16例次，全肺切除48例次，余肺切除术3例次，支气管胸膜瘘（BPF）瘘管修补术5例次，胸廓成形并BPF修补22例次，脓胸剥脱并BPF修补6例次，开窗引流9例次，肋床引流5例次，右总支气管节段切除1例次。术前均行有效个体化抗结核治疗2—3个月。结果术中死亡率为0．5％（1／200）。术后1年内死亡率为3．2％（6／187），其中呼吸衰竭和心肌梗死各2例，肾衰竭和大咯血各1例。并发症率为13．9％（26／187），BPF11例，占并发症的42．3％（12／26）。所有患者术前痰菌均为阳性，术后阳性2例。随访时间6．7年（3个月至15年）。术后继续术前的抗结核方案治疗3—18个月。结论对持续痰菌阳性、病灶已局限的耐多药肺结核患者，应在有效抗结核治疗的基础上手术治疗。     

RNA interference-mediated control of hepatitis B virus and emergence of resistant mutant

BACKGROUND & AIMS: Present therapy for chronic hepatitis B attains control only in limited proportions. Small interfering RNA (siRNA) offers a new tool with potential therapeutic applications for hepatitis B virus (HBV). Given the importance of sequence identity in the effectiveness of siRNA and the heterogeneity of HBV sequences among different isolates, a short hairpin RNA (shRNA)-expressing plasmid, pSuper/HBVS1, was developed to target a region conserved among major HBV genotypes and assess its effectiveness control of HBV. METHODS: HBV replication-competent plasmid was cotransfected with pSuper/HBVS1 to HuH-7 cells or to mice. The levels of viral proteins, RNA, and DNA were examined in transfected cells and animals. The effects of pSuper/HBVS1 on clinical isolates with genotypes B and C were also determined. RESULTS: pSuper/HBVS1 significantly decreased levels of viral proteins, RNA, and DNA for HBV genotype A in cell culture and in mice. Comparable suppressive effects were observed on clinical isolates of genotypes B and C. A clone with a silent mutation in the target region was identified from a patient with genotype C. This mutant revealed diminished sensitivity to pSuper/HBVS1 and could be selected out in the presence of pSuper/HBVS1 in cell culture. CONCLUSIONS: These findings indicated that shRNA could suppress HBV expression and replication for genotypes A, B, and C, promising an advance in treatment of HBV. However, the emergence of resistant mutants in HBV quasispecies should be considered.     

984株结核分枝杆菌耐药情况分析

目的了解浙江省当前结核病对一线抗结核药物的耐药水平及耐多药情况，为今后结核病防治工作提供参考依据。方法采用WHO推荐的药敏比例法对984株临床分离结核分枝杆菌进行药物敏感性试验。结果总耐药率为30．6％，初始耐药率为26．6％，获得性耐药率为52．3％，耐多药（MDR）率为7．6％。结论浙江省耐药水平有上升趋势，应引起相关卫生部门的关注。     

耐多药结核病患者管理模式的系统综述

目的 系统回顾国际上不同国家和地区耐多药结核病患者的管理模式,探讨适合我国的患者管理模式。 方法 全面搜索了PubMed、ProQuest、中国医院知识仓库（CHKD）和万方数据资源系统等数据库中发表于2000-2010年的文章,以及相关出版物、会议资料汇编等材料。共检索到文献1151篇,排除观点性文章、信件、新闻、社论、评论、文献目录、会议摘要等,对符合条件的14篇文献和3个出版物进行分析。 结果 目前各国采取的耐多药结核病患者管理模式主要有4种：以住院治疗为基础的管理模式,主要在美国、法国等经济发达国家实施,要求患者接受住院治疗（共3篇文献）;以门诊治疗为基础的管理模式,要求患者定期到门诊进行检查和领取药品（1篇文献）;以住院和门诊治疗相结合的管理模式,规定患者强化期或细菌学检查阴转前在医院接受治疗,尔后在门诊继续接受治疗（共4篇文献）;以社区关怀为基础的管理,为中低收入国家采取的主要方法,是以门诊治疗为基础管理模式的升级,更为强调结核病防治规划的覆盖（共6篇文献）。 结论 耐多药结核病患者管理模式的选择与当地的疫情、经济、结核病防治规划和医疗卫生体系的覆盖程度相关,我国应进一步完善住院治疗和社区关怀相结合的患者管理模式。     

上海地区儿童化脓性链球菌的红霉素耐药基因研究

目的 了解上海地区化脓性链球菌对红霉素的耐药情况及耐药基因谱的特点.方法 2004年11月至2006年6月经复旦大学附属儿科医院传染病门诊诊断为猩红热的患儿,其咽拭子培养分离获得100株化脓性链球菌.应用PCR及序列分析法检测红霉素耐药基因mefA、ermA、ermB在该批菌株中的分布规律及其与红霉素耐药性的关系.结果上海地区化脓性链球菌的红霉素耐药率为98%,克林霉素耐药率为95%,两者耐药性的一致率为97%.100株菌株中含ermB基因的化脓性链球菌94株,占所有菌株的94%,对红霉索耐药率为100%;含mefA基因的化脓性链球菌16株,占所有菌株的16%,对红霉素耐药率为100%;100株菌株中未发现ermA基因.5株菌株未发现ermB基因及mefA基因,其中2株对红霉素敏感,3株对红霉素耐药.mefA基因单独阳性的菌株仅占1%.结论上海地区化脓性链球菌对红霉奈普遍具有较高耐药率,且与克林霉素存在较严重的交叉耐药.ermB基因是决定上海地区化脓性链球菌对红霉素耐药的重要基因.     

Bacteroides fragilis resistant to the administration of clindamycin.

The susceptibility of Bacteroides fragilis to the administration of clindamycin, and the efficacy of this agent in Bacteroides infections are well documented. Clindamycin-resistant strains of B. fragilis were isolated from two patients with bacteremia at two institutions. Clinically significant resistance to clindamycin therapy has not been noted previously in B. fragilis infections.     

多重耐药鲍曼不动杆菌分子流行病学研究

目的 了解我院临床分离的43株多重耐药鲍曼不动杆菌的遗传背景和可能性来源,以及不同来源菌株整合子的携带情况.方法 采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)方法对鲍曼不动杆菌进行分子分型,限制性内切酶选择Apa I;采用多位点序列分型(MLST)技术对全部菌株的等位基因谱进行比较分析;采用PCR方法对全部菌株的整合子进行扩增.结果 PFGE结果显示43株鲍曼不动杆菌共分成4个型,其中A型和B型又分别划分为4个和2个亚型,MUST结果则显示有3个等位基因谱,分别为1-3.3-2-2-7-3,1.3-3-2-2-11-3,1-3-3_2-2-14-3,其中PFGE方法中B型和D型菌株具有相同的等位基因谱(1-3-3-2-2-11-3);A型克隆株主要分布于ICU,烧伤科病房仅检测到B型和D型克隆株;43株菌株整合子的携带率为62.8%,其中A1、A2、A3、A4、B1、B2、C及D型菌株所占的构成比分别为40.7%、18.5%、7.4%、3.7%、14.8%、3.7%、3.7%及7.4%.结论 本地区多重耐药鲍曼不动杆菌不仅呈多克隆系并存,而且同一克隆系在不同环境条件刺激下可进一步分化成不同亚型;相同类型整合子的不同携带情况也证实了菌株在进化过程中耐药机制可能会出现变化.     

Surveillance of ESBL producing multidrug resistant Escherichia coli in a teaching hospital in India

Objective

To record nosocomial and community-acquired accounts of antibiotic resistance in Escherichia coli (E. coli) strains, isolated from clinical samples of a teaching hospital by surveillance, over a period of 39 months (November 2009-January 2013).

Methods

Clinical samples from nosocomial sources, i.e., wards and cabins, intensive care unit (ICU) and neonatal intensive care unit (NICU), and community (outpatient department, OPD) sources of the hospital, were used for isolating strains of E. coli, which were subjected for testing for production of ‘extended spectrum beta-lactamase’-(ESBL) enzyme as well as determining antibiotic sensitivity pattern with 23 antibiotics.

Results

Of the total 1642 (100%) isolates, 810 (49.33%) strains were from OPD and 832 (50.66%) were from hospital settings. Occurrence of infectious E. coli strains increased in a mathematical progression in community sources, but in nosocomial infections, such values remained almost constant in each quarter. A total of 395 (24.05%) ESBL strains were isolated from the total 810 isolates of community; of the total of 464 (28.25%) isolates of wards and cabins, 199 (12.11%) were ESBL strains; and among the total of 368 (22.41%) isolates of ICU and NICU, ESBLs were 170 (10.35%); the total nosocomial ESBL isolates, 369 (22.47%) were from the nosocomial total of 832 (50.66%) isolates. Statistically, it was confirmed that ESBL strains were equally distributed in community or hospital units. Antibiogram of 23 antibiotics revealed progressive increases of drug-resistance against each antibiotic with the maximum resistance values were recorded against gentamicin: 92% and 79%, oxacillin: 94% and 69%, ceftriaxone: 85% and 58%, and norfloxacin 97% and 69% resistance, in nosocomial and community isolates, respectively.

Conclusions

This study revealed the daunting state of occurrence of multidrug resistant E. coli and its infection dynamics in both community and hospital settings.     

Double-blind comparison between propranolol and bendroflumethiazide in captopril-treated resistant hypertensive patients

In a double-blind crossover trial, 15 captopril (daily dose 600 mg) treated patients received in addition to the converting enzyme inhibitor, placebo, propranolol (240 mg), or bendroflumethiazide (7.5 mg). Propranolol produced an additional hypotensive effect, while pulse rate slowed, indicating effective beta-adrenoceptor blockade. Plasma renin activity decreased, but the hypotensive effect of propranolol was not accompanied by changes in the plasma angiotensin II and aldosterone levels or in the urinary aldosterone excretion. Also bendroflumethiazide lowered blood pressure, while body weight decreased slightly. During captopril-bendroflumethiazide treatment, serum sodium and potassium decreased while the plasma renin-angiotensin-aldosterone system was stimulated. In these captopril-treated patients, the hypotensive response to bendroflumethiazide tended to be somewhat larger than the response to propranolol, but the difference was small and statistically not significant.     

耐多药肺结核耐药基因突变与临床疗效探讨

目的 了解耐多药肺结核耐药基因的突变与临床疗效的关系，为耐多药肺结核的治疗提供参考依据。方法 108例病人痰标本用PCR-SSCP方法检测了五种耐药基因和传统的药敏试验，并与临床疗效进行比较分析。结果 耐多药肺结核耐药基因检测率分别是耐异烟肼的katG基因突变率为70．4％，耐利福平的rpoB基因突变率72．2％，耐链霉素的rpsL基因突变率71．9％，耐吡嗪酰胺的pncA基因突变率53．4％，耐乙胺丁醇的embB基因突变率31．7％，其中高浓度耐药菌的基因突变率远高于低浓度的突变率。根据药敏试验及耐药基因检测结果指导治疗，应用以KAOP为基础的化疗方案，配合患者过去未曾用过的1-2种抗结核药物，经过平均1．4年的治疗，108例耐多药病人74．1％的病人痰菌阴转，且67．5％的病人痰结核杆菌培养阴转，83．3％的病人病灶吸收好转，65．3％的空洞闭合，取得了临床上较为满意的疗效。结论 对耐多药肺结核进行耐药基因检测是一项重要工作，对指导治疗及预后判断有一定的参考价值。但尚需进行更多的观察。