豚鼠膀胱Cajal样间质细胞钙震荡特性

目的:探讨正常成年豚鼠膀胱Cajal样间质细胞(Cajal-like interstitial cells)是否有自发周期性钙震荡(calcium oscillation),以期为膀胱兴奋性起搏细胞为Cajal样间质细胞这一学说提供实验依据。方法:运用胶原酶V消化法,获得原代豚鼠膀胱Cajal样间质细胞进行培养,采用激光共聚焦显微镜成像技术,Fluo-4AM负载后的Cajal样间质细胞内钙离子荧光强度的变化采用激光共聚焦显微镜成像技术进行记录,荧光强度的改变代表细胞内钙离子浓度的变化。结果:培养后的Cajal样间质细胞保持其固有特征,可见胞体为梭形且胞体两极有两个细长突起;培养的Cajal样间质细胞有两类不同的钙震荡:一类震幅小而频率不规则,另一类震幅大而频率慢。第二类钙震荡与膀胱逼尿肌细胞的钙震荡显著不同。结论:与消化道起搏细胞Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICCs)自发性钙震荡类似,成年豚鼠膀胱Cajal样间质细胞亦存在自发钙震荡,提示膀胱收缩活动的起搏细胞可能为其中一种类型的膀胱Cajal样间质细胞。     

肝硬化大鼠肠道Cajal间质细胞的研究

目的:观察肝硬化大鼠肠道Cajal间质细胞的改变,探讨肝硬化胃肠动力障碍的相关机制.方法:Wistar大鼠20只随机分为肝硬化模型组和对照组,每组10只,采用CCl4溶剂大腿根部皮下注射法制作肝硬化模型,用葡聚糖蓝-2000为胃肠内标记物,观察大鼠肠道传输,免疫组化染色观察空肠c-kit阳性Cajal间质细胞的变化,并用透射电镜观察Cajal间质细胞超微结构的改变.结果:与对照组比较,肝硬化组大鼠小肠动力明显减弱(P<0.01),空肠c-kit阳性Cajal间质细胞减少(P<0.01),透射电镜观察显示Cajal间质细胞的超微结构发生明显改变.结论:肝硬化大鼠肠道传输减弱与肠道Cajal间质细胞减少及其超微结构改变有关.     

哺乳类小脑组织学的一些观察

Cajal 氏对小脑组织学作了详尽的研究,我国臧玉洤教授也发表了一系列关于小脑的研究论文,增添了不少的材料。作者在去年曾用 Cox、Golgi、Cajal 三法,观查了白鼠、荷兰豬、猫及人的小脑;仔细观察了小脑细胞的侧(束束)和念珠及一些比较少见的细胞。其中有些在前人的研究中曾记述过,而成功的 Cox 法小脑切     

豚鼠膀胱Cajal样细胞缺失模型的建立

目的:探讨通过体内阻断c-kit信号途径来建立豚鼠膀胱Cajal样细胞缺失模型的方法。方法:选取新生豚鼠20只,随机分成实验组、对照组。实验组在出生24h内的豚鼠腹腔内隔天注射c-kit抗体(ACK2)100μg,共5次,对照组腹腔内注射生理盐水,于第10天取膀胱。然后将两组豚鼠膀胱制作冰冻切片行免疫荧光染色及激光共聚焦显微镜观察。结果:10d后实验组与对照组豚鼠逼尿肌中Cajal样细胞在激光共聚焦显微镜下比较:实验组膀胱逼尿肌中Cajal样细胞数量减少甚至消失(P<0.01),Cajal样细胞二聚体消失(P<0.01)。结论:通过阻断c-kit信号通路可以成功建立豚鼠膀胱Cajal样细胞缺失模型。     

Cajal样细胞缺失对豚鼠逼尿肌自主收缩的影响及机制探讨

目的:观察在体内阻断c-kit信号途径造成豚鼠膀胱Cajal样细胞缺失后,豚鼠逼尿肌自主收缩活动的变化,探讨逼尿肌中Cajal样细胞的作用。方法:选取新生豚鼠20只,随机分成实验组、对照组。实验组在出生24h内的豚鼠腹腔内隔天注射c-kit抗体(ACK2)100μg,共5次,对照组腹腔内注射生理盐水,于第10天取膀胱。然后将两组豚鼠膀胱制作冰冻切片行免疫荧光染色及激光共聚焦显微镜观察。制作豚鼠膀胱逼尿肌肌条,记录逼尿肌肌条自主收缩活动的变化。结果:10d后实验组与对照组豚鼠逼尿肌中Cajal样细胞在激光共聚焦显微镜下比较:实验组膀胱逼尿肌中Cajal样细胞数量减少甚至消失(P<0.01)。与对照组比较,实验组逼尿肌肌条收缩幅度、收缩频率明显下降(P<0.01)。结论:Cajal样细胞与豚鼠逼尿肌自发收缩活动密切相关。     

小鼠小肠Cajal间质细胞的分布与c-kit mRNA表达初步研究

目的观察Cajal间质细胞在BALB/c小鼠小肠中的分布及c-kit mRNA表达的研究.方法选取成年BALB/c小鼠,采用免疫组化法鉴定Cajal间质细胞,采用RT-PCR及mRNA提取法检测c-kit mRNA的表达情况.结果Cajal间质细胞主要分布在小肠环肌层纵肌层间以及浆膜下区,小肠肌条中c-kit mRNA表达量很低,需经过mRNA提取后方能检测出.结论明确了Cajal间质细胞在BALB/c小鼠小肠中的分布,探讨了c-kit mRNA表达情况并进一步提出了研究c-kitmRNA表达的方法,为更深入研究Cajal间质细胞奠定了基础.     

胃肠起搏者Cajal间质细胞基础研究状况与临床意义展望

已知平滑肌和壁内神经是胃肠动力发生与调节的重要结构。一百多年前 ,西班牙神经解剖学家Cajal率先在肠道发现一种特殊的间质细胞。其后学者们进行了大量有关研究。越来越多的研究显示 ,这类间质细胞在胃肠电和动力发生及动力障碍机制上具有举足轻重的作用。为纪念Cajal的这个重要发现 ,人们将此类细胞命名为Cajal间质细胞(interstitialcellsofCajal,ICC)。1　Cajal间质细胞研究的 5个时期ICC的研究可分为 5个时期。在 1 889年之前的三十年 ,已有学者报道动物肠道存在特殊的结缔组织细胞 ;这很可能就是后来Cajal发现的特殊间质细胞。 1…     

小鼠结肠Cajal间质细胞超微结构及其与肠神经的关系

目的：探讨小鼠结肠组织Cajal间质细胞超微结构及其与肠神经系统的关系。方法：用透射电镜观察健康成年雄性ICR小鼠结肠组织Cajal间质细胞的超微结构、分布及其与肠神经系统的关系。结果：小鼠结肠组织Cajal间质细胞主要结构特点：细胞呈纺锤形,有巨大的卵圆形核及向外伸展的长突起,胞质内有丰富的线粒体、大量光面内质网和粗面内质网;环肌层和纵肌层内Cajal间质细胞与肠神经元之间形成突触样连接,Cajal间质细胞突起包绕神经纤维。结论：Cajal间质细胞具有独特的超微结构．其与肠神经系统解剖与结构上的特殊关系可能是Cajal间质细胞调节多种胃肠功能的基础。     

肝硬化大鼠胃肠动力与Cajal间质细胞关系的研究

目的:观察肝硬化大鼠胃肠动力及胃肠道Cajal间质细胞的变化.方法:40只Wistar大鼠随机分为肝硬化模型组和对照组,采用CCL4溶剂大腿根部皮下注射法制作肝硬化模型,用葡聚糖蓝-2000作为胃肠内标记物观察大鼠胃肠道传输,免疫组化观察大鼠胃肠道c-Kit阳性间质细胞的变化.结果:与对照组比较,肝硬化组大鼠胃肠动力明显减弱(P＜0.05);胃肠道c-Kit阳性Cajal间质细胞明显减少(P＜0.05).结论:肝硬化大鼠胃肠道传输减弱与肠道Cajal间质细胞的减少有关.     

痛泻要方对FD大鼠Cajal间质细胞内IP3R、RyR蛋白的影响

目的观察痛泻要方对功能性消化不良(FD)大鼠Cajal间质细胞IP3R、Ry R蛋白的影响。方法通过夹尾刺激法制备FD模型,以痛泻要方灌胃为干预手段,最后一次灌胃结束24 h后处死大鼠,腹主动脉采血,制备含有痛泻要方组分的血清(含药血清)。分离并培养幼鼠小肠Cajal间质细胞,将已制备的含药血清分两次分别加入Cajal间质细胞培养瓶中,Western-blot法检测Cajal间质细胞内IP3R、Ry R的蛋白表达。结果含药(痛泻要方)血清可显著升高Cajal间质细胞内IP3R、Ry R蛋白的表达。结论痛泻要方调节FD胃肠动力障碍的作用机制可能与其对Cajal间质细胞内IP3R、Ry R蛋白表达的调节有关。     

糖尿病大鼠胃窦SCF-Kit信号改变及其对Cajal间质细胞的影响

目的 研究糖尿病胃轻瘫大鼠胃Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICC)的形态学改变,测定干细胞因子(stem cellfactor,SCF)及Kit含量变化,探讨糖尿病大鼠胃窦SCF-Kit信号在Cajal间质细胞受损中作用.方法 用链尿佐菌素建立大鼠糖尿病模型,3个月后采用美蓝方法测定胃排空速率,对胃窦组织进行透射电镜观察Cajal间质细胞超微结构变化,采用RT-PCR方法测定胃窦平滑肌组织SCF mRNA的表达,Western blot法检测胃窦平滑肌组织c-kit蛋白变化.结果 与正常大鼠相比,糖尿病大鼠胃排空明显延迟,胃Cajal间质细胞与其他细胞间的缝隙连接显著减少、结构破坏、连接松散;细胞器变性、减少;胞质广泛溶解;核周间隙增宽.糖尿病大鼠胃窦平滑肌组织SCF mRNA以及c-kit蛋白表达均明显低于正常大鼠.结论 SCF-Kit系统受损与糖尿病大鼠胃窦Cajal间质细胞变性、数量减少以及网络结构破坏有关,最终导致胃运动障碍.     

便秘二号方治疗结肠慢传输型便秘的实验研究

目的：观察便秘二号方治疗结肠慢传输型便秘（STC）模型大鼠的疗效,并采用免疫组化的方法检测其对STC大鼠结肠组织Cajal间质细胞的影响。方法：取STC模型大鼠16只,分为实验、对照两组,各8只,实验组大鼠予灌服便秘二号方10ml／（kg·d）,对照组大鼠予灌服生理盐水10m／（kg·d）,共30天。停药1周后,用活性炭灌胃法检测结肠传输功能,用免疫组化法观察结肠组织Cajal间质细胞的形态和数量,比较实验组和对照组的情况。结果：炭末推进长度实验组与对照组比较,差异有显著性意义（P〈0．05）,推进率比较差异有显著性意义（P〈0．01）;实验组与对照组比较,各肌层Cajal间质细胞数量增加,差异有显著性意义（P〈0．01）。结论：中药便秘二号方可以增强STC大鼠的结肠蠕动功能,改善结肠组织中Cajal间质细胞的数量扣形态。     

益气开秘方调控肠道Cajal细胞NO-cGMP-PKG通路的实验研究

目的：探讨益气开秘方对Cajal细胞的影响及其调控肠道动力的可能作用机制。方法：皮下注射吗啡法制备慢传输型便秘小鼠模型,酶解法分离及体外培养Cajal细胞,C-Kit免疫荧光染色鉴定Cajal细胞,Fluo-4AM标记Cajal细胞,激光共聚焦显微镜连续拍摄模式测定基础钙流,并记录相对荧光强度;加入外源性一氧化氮（NO）及蛋白激酶G（PKG）抑制剂,观察其对Cajal细胞胞内[Ca2＋]i影响。结果：吗啡诱导慢传输型便秘小鼠制模方法简便可靠,重复性好;酶解法成功分离小鼠小肠Cajal细胞,Fluo-4AM成功标记Cajal细胞;体外培养各组Cajal细胞均存在钙离子振荡,其中模型组Cajal细胞钙振荡幅度明显减弱,益气开秘方中药组Cajal细胞钙振荡幅度接近正常组;加入外源性NO供体后,细胞内荧光强度在数秒内迅速上升,再经PKG抑制剂干预后,细胞内荧光强度迅速下降至接近药物干预前的基础水平。结论：益气开秘方对吗啡诱导的慢传输型便秘小鼠具有一定肠动力恢复作用。其作用可能通过增加一氧化氮合成酶（NOS）表达,促进NO的释放,发挥NO对Cajal细胞的保护作用,益气开秘方对Cajal细胞的调控作用可能是通过NO-cGMP-PKG途径发挥作用。     

Cajal间质细胞在先天性巨结肠发病中的作用

目的:观察Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICCs)在先天性巨结肠患儿狭窄段和扩张段的分布情况,探讨ICCs在巨结肠发病中的作用.方法:应用免疫组化PV法,检测32例先天性巨结肠患儿和10例对照组肠标本ICCs,光镜下观察不同肠段肌间神经丛及环肌层内ICCs分布情况.结果:在对照组及巨结肠扩张段,ICCs大量分布在肌间神经丛周围及环肌层内,并形成网络结构.在狭窄段,肠壁各层ICCs细胞密度明显减少甚至消失,正常所见的网络结构遭到破坏.结论:Cajal间质细胞分布异常是先天性巨结肠病理改变之一,可能是该病重要的发病机制,参与肠运动障碍的发生.     

Balb/c小鼠小肠慢波活力及肠肌间丛Cajal间质细胞的观察

目的测定Balb/c小鼠小肠慢波活动,并观察慢波的起搏细胞肠肌间丛Cajal间质细胞的分布特征.方法选取成年Balb/c小鼠,在体记录小肠慢波活动的频率与振幅;通过小肠肌条切片和铺片,以c-kit作为其标记,采用免疫组化法观察肠肌间丛Cajal间质细胞的分布情况.结果 Balb/c小鼠小肠慢波频率为(7.8±2)次/min,振幅为0.4±0.07mV;肠肌间丛Cajal间质细胞分布在小肠环肌层纵肌层间,呈网状分布特征.结论 Balb/c小鼠小肠存在慢波活动,肠肌间丛Cajal间质细胞的网络状分布特征可能与其产生和传导肠道慢波有重要关系.     

显示小脑皮质篮细胞与蒲氏细胞关系的技术方法

1 引言小脑篮细胞与蒲氏细胞的关系,在过去已有较多论述。但是,如何在切片上更好地显示出二者的相互联系,还没有一个最理想的方法。为此,我们进行了有关这方面的研究。 2 材料和方法采用成年健康猫,在麻醉下断头进行小脑取材,其大小约0.4×0.8×1cm,按Cajal氏法固定于氨洒精(95％酒精100ml,氨水8滴)24小时后用滤纸吸干组织块,浸入1.5％     

Cajal间质细胞在出口梗阻性便秘直肠肌壁中的表达相关研究

目的:观察出口梗阻性便秘(OOC)患者(OOC组)相对于混合痔患者(对照组)直肠肌壁的黏膜层、黏膜下层和肌层中Cajal间质细胞的异常变化,研究OOC患者疾病发生的病理生理机制。方法:通过改良TST法切除手术收集出口梗阻性便秘(OOC)患者及混合痔患者的梗阻段直肠黏膜及肌壁各36例,应用免疫组化标记物CD117标记Cajal间质细胞,然后人工计数和免疫组化分析软件观察CD117在患者黏膜层和黏膜下层中的表达有无异常改变。结果:出口梗阻性便秘患者直肠黏膜下层和肌层中CD117的表达数量较对照组减少(P<0.05)。出口梗阻性便秘患者直肠黏膜固有层中CD117的表达数量与对照组比较变化不大,甚至有所升高。结论:出口梗阻性便秘直肠黏膜下层及肌层中CD117的表达下调,这可能和Cajal间质细胞的分化障碍有关。     

Cajal细胞的研究进展

Cajal细胞(InterstitialcellsofCajal,ICC)是分布在消化道自主神经末梢和平滑肌细胞之间的一类特殊细胞,目前认为它是胃肠运动的起搏细胞并介导神经递质的传递。这些细胞表达酪氨酸激酶受体(C -KIT),并以干细胞因子(SCF)为配体,其生长发育和表型的维持有赖于SCF与KIT的结合发挥的信号传导作用。近年研究发现ICC与某些疾病的发病有联系。由于体外分离培养Cajal细胞的技术限制,这在很大程度上制约了人们对Cajal细胞的认识。近年来新技术的应用使该领域有了一定的进展。笔者对Cajal细胞的一般生物学特性及相关的研究进展做一综述。1Cajal细胞的一般生物学特性1911年,西班牙神经解剖学家Cajal采用甲基蓝及嗜银染色法发现了存在于胃肠道的一种特殊类型的细胞,被称为Cajal间质细胞ICC。ICC表达酪氨酸激酶受体C -KIT(CD117)。C -KIT是一种原癌基因,其表达产物是酪氨酸激酶受体,该蛋白分子量为160Kda ,具有细胞外、细胞膜和胞浆内3个部分。细胞外的部分为SCF的受体区,细胞内部分为酪氨酸激酶区。SCF与C -KIT结合活化了酪氨酸激酶,导致了一系列磷酸化过程...     

胃肠道间质瘤24例CT与病理分析

胃肠道间质瘤(GIST)是近年来被临床和病理医生逐渐认识的、起源于胃肠道壁Cajal细胞与Cajal细胞同源的间叶干细胞肿瘤,是最常见的间叶源性肿瘤[1].本文回顾性分析24例资料完整的GIST,着重探讨其CT表现及病理特征,以期提高对本病的认识. 1 资料与方法     

慢传输型便秘模型的建立及其机制探讨

目的 :建立实验型慢传输型便秘模型。　方法 :实验组小鼠皮下注射吗啡建立慢传输型便秘模型 ,记录小鼠粪便重量 ,利用炭沫推进试验比较实验组与对照组小鼠结肠传输功能 ;利用免疫组化技术比较两组小鼠结肠组织中Cajal细胞数量。　结果 :实验组小鼠粪便重量减轻 (P <0 .0 1) ,结肠推进率较对照组明显延长 (P <0 .0 1) ,Ca jal细胞数量较对照组明显减少 (P <0 .0 1)。　结论 :吗啡皮下注射诱导小鼠结肠慢传输型便秘模型符合疾病的基本特点 ,其发病机制可能与内源性阿片肽增多和 (或 )肠道Cajal细胞异常改变有关