Detection and application of Escherichia coli in dead cases of neonatal pneumonia with molecular biology methods

目的 探讨新生儿重症肺炎死亡病例中大肠埃希菌(E.coli)感染的地位.方法 收集北京儿童医院新生儿重症肺炎组200例和非感染性疾病(对照组)34例的尸检病理标本,应用PCR和Southern blot技术检测E.coli 特异性uidA基因片断,并复习患儿临床资料.结果 肺炎组中.PCR和Southem blot对E.coii检出率明显高于对照组(PCR:5.0％vs.0,x2=11.37,P＜0.01；Southem blot:21.5％ vs.5.9％,x2=4.56,P＜0.05)；晚发型肺炎E.coli检出率明显高于早发型(PCR:8.2％ vs.1.9％,X2=4.18,P＜ 0.05;Southern blot:26.8％vs.16.5％,X2-4.48,P＜0.05).1980年前E.coli检出率高于1981年后(Southem blot法:28.0％vs.15.0％,x2=5.00,P＜ 0.05).E.coli检测阳性组和阴性组比较,临床表现的差异无统计学意义(P＞0.05).结论 E.coli是新生儿重症肺炎死亡病例中的重要病原.分子生物学方法检测E.coli对早期诊断有重要价值.     

贵阳地区夏秋季腹泻病例中致泻性大肠杆菌监测分析

目的了解贵阳地区夏秋季感染性腹泻病例中致泻性大肠杆菌的分布状况,为该地区致泻性大肠杆菌的预防控制提供依据。方法收集2010年贵阳地区6家哨点医院的381例感染性腹泻病例的粪便标本,提取标本DNA,采用实时荧光PCR(RT-PCR)方法进行肠致病性大肠杆菌(Enteropathogenic E Coli,EPEC)、肠产毒性大肠杆菌(Enterotoxigenic E coli,ETEC)、肠粘附性大肠杆菌(Enteroadherent E coli,EAEC)、肠侵袭性大肠杆菌(Enteroinvasive E coli,EIEC)、肠出血性大肠杆菌(Enterohemorrhagic E coli,EHEC)的检测,并进行病原统计分析。结果 381例腹泻病例的粪便标本中致泻性大肠杆菌检出率为34.65%,其中检出率最高的是EAEC,为12.07%;其次是EPEC,检出率为9.45%,其中非典型EPEC占75.00%;ETEC检出率为9.19%,其中ETEC-ST占60.00%;EIEC检出率为3.94%;EHEC未检出;两种病原混合感染检出率为5.25%,以EPEC和EAEC混合感染为主,占40.00%。≤5岁组和5岁组病例病原检出率分别为35.28%和30.91%,差异无统计学意义(P0.05);≤5岁组病原EAEC检出率较高(P0.05);5岁组病原ETEC检出率较高(P0.05)。男性病例检出率高于女性(P0.05)。8月、9月检出率相对较高(P0.001)。结论贵阳地区腹泻病例致泻性大肠杆菌感染以EAEC为主,其次是EPEC和ETEC,未发现有EHEC,8月、9月贵阳地区致泻性大肠杆菌的检出率较高。     

利奈唑胺治疗肺结核合并重症肺炎的疗效及对患者免疫因子和预后的影响

目的 探究利奈唑胺治疗肺结核合并重症肺炎的疗效及其对免疫因子和预后的影响。 方法 选取2016年1月—2017年1月于杭州市红十字会医院就诊的98例肺结核合并重症肺炎患者,按随机数字表法分为对照组(49例)和观察组(49例),在抗结核治疗基础上,分别给予亚胺培南西司他丁和亚胺培南西司他丁联合利奈唑胺治疗,随访28 d,比较2组患者临床疗效、细菌清除率、治疗前后免疫功能、细胞因子水平、生存情况及不良反应发生率。 结果 观察组治疗总有效率高于对照组(89.80% vs.73.47%,P=0.037);观察组的细菌清除率高于对照组(79.59% vs.57.14%,P=0.017);2组患者CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、Ig A及Ig G水平高于治疗前(均P<0.05),观察组上述指标高于对照组(均P<0.05);2组患者IL-6、IL-8和TNF-α水平低于治疗前(均P<0.05),观察组上述指标低于对照组(均P<0.001);观察组患者的生存率高于对照组(HR=0.360,95%CI:0.153~0.849,P=0.027);2组患者治疗后不良反应发生率差异无统计学意义(12.24% vs.10.20%,P=0.749)。 结论 利奈唑胺治疗肺结核合并重症肺炎,可以提高临床疗效,增强免疫功能,降低细胞因子并提高生存率,且安全性有保证。      

肾移植受者与肝移植受者术后肺部感染的比较

目的 分析肾移植与肝移植术后肺部感染的异同点,探讨有效诊治措施.方法 对2004年1月至2008年12月间发生肺部感染的肾移植受者及肝移植受者进行回顾性分析,比较两组受者肺部感染的特点.结果 肾移植组肺部感染45例,肝移植组肺部感染23例,其肺部感染发生率分别分7.4%vs 56.1%(P<0.001),重症肺炎发生率2.6%vs 46.3%(P<0.001),肺炎诊断距移植中位时间(d)230(29-1080)vs 4(2-104)(P<0.001),肺炎病死率6.7%vs 17.4%(P=NS),肺部感染导致移植受者的死亡率0.5%vs 9.8%(P<0.001);两组细菌性感染的病原菌均以G-菌为主,但肝移植组受者多重耐药菌的比例较高(12.9%vs 37.0%,P=0.005).结论 了解肾移植及肝移植术后肺部感染的规律,能够为移植术后预防性抗感染治疗以及感染早期的经验性治疗提供依据,减少感染患者的死亡率及提高移植受者的存活率.     

丙种球蛋白辅助盐酸氨溴索静注对新生儿肺炎血气指标和免疫功能的影响

目的探讨丙种球蛋白(IG)辅助盐酸氨溴索静脉滴注(静注)对新生儿肺炎血气指标和免疫功能的影响。方法选取2014年7月‐2017年5月该院收治的92例新生儿肺炎患儿,随机分为盐酸氨溴索组(n=46)和联合组(n=46)。盐酸氨溴索组患儿仅单独使用盐酸氨溴索静注治疗,联合组患儿在盐酸氨溴索组基础上给予IG静注治疗。分析比较两组患儿治疗前后的血气指标和免疫功能指标的变化。结果治疗后,联合组患儿动脉血氧分压(PaO_2)、氧合指数大于盐酸氨溴索组,二氧化碳分压(PaCO_2)小于盐酸氨溴索组(P 0.05);联合组患儿免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)及免疫球蛋白M(IgM)水平高于盐酸氨溴索组(P 0.05);联合组患儿治疗有效率高于盐酸氨溴索组(100.00%vs. 89.13%, P 0.05)。结论 IG辅助盐酸氨溴索静注治疗能显著改善新生儿肺炎患儿的血气指标和免疫功能,提高患儿临床疗效。     

胆总管结石的成因观察

目的:探讨细菌感染、胃肠激素及胆汁生化在胆总管结石形成中的作用. 方法:实验分为胆总管结石(CBDS)组(n=56)、非结石胆总管梗阻(NCBDS)对照组(n=16). ①内窥镜下逆行胰胆管造影术(ERCP)中抽取胆汁作需氧菌培养及进行总胆汁酸(TBA), Ca2 , P2 和胆固醇(CHO)测定. ② ERCP术中取结石用PCR法行结石大肠杆菌检测. ③采静脉血行胃动素及生长抑素检测. 结果:① CBDS组56例胆汁标本需氧菌培养中,有53例检出细菌(95%),NCBDS组16例胆汁标本中,有8例检出细菌(50%),两组细菌检出率比较有统计学意义(P<0.05). 用PCR方法对11例CBDS患者结石进行大肠杆菌DNA片段检测,3例出现阳性(27%). ② CBDS组血浆胃动素水平较NCBDS组明显偏低(202±151 vs 315±161) ng/L,而生长抑素则明显升高(15±5 vs 12±3) ng/L,组间比较差异显著(P<0.05). ③ CBDS组胆汁中Ca2 显著高于NCBDS组[(1.4±0.9 vs 0.7±0.3) mmol/L, P<0.05],TBA则显著低于NCBDS组[(12±6 vs 16±7) nmol/L, P<0.05]. 结论:胆汁理化性质改变、胆道感染及胃肠激素紊乱在胆管结石形成中可能具有重要作用.     

白蛋白联合低氧对NRK-52E细胞凋亡的影响

目的:探讨白蛋白联合低氧对肾小管上皮细胞(NRK-52E)凋亡的影响.方法:应用流式细胞技术检测NRK-52E细胞在不同质量浓度白蛋白(0、10、20、30和40 g/L)和常氧(含体积分数为5%CO2的空气)条件下培养24 h的凋亡率,得到最适的白蛋白质量浓度;再应用流式细胞技术检测NRK-52E细胞在30 g/L白蛋白和低氧(体积分数为1%O2、5%CO2和94%N2)联合培养24 h的凋亡率,同时设常氧对照组、低氧对照组和常氧+30 g/L白蛋白培养组.采用RT-PCR检测凋亡相关基因bcl-2和bax mRNA表达.结果:在常氧环境下NRK-52E细胞凋亡率随白蛋白质量浓度的增加而增高(F=55.748,P＜0.001).常氧对照组、低氧对照组和常氧+30 g/L白蛋白培养组及低氧+30 g/L白蛋白培养组NRK-52E细胞凋亡率(F=112.174,P＜0.001)、bax mRNA(F=114.522.P＜0.001)和bcl-2 mRNA(F=63.097,P＜0.001)的表达差异均有统计学意义.低氧+30 g/L白蛋白培养组的凋亡率[(37.36.±4.95)%vs(25.59±3.32)%.P＜0.05)和bax mRNA的表达(2.54±0.19vs1.87±0.19,P＜0.05)高于常氧+30 g/L白蛋白培养组,而bcl-2 mRNA的表达则低于常氧+30 g/L白蛋白培养组[(0.42±0.08)vs(0.66±0.05)](P＜0.05).结论:低氧可加剧向蛋白诱导的NRK-52E细胞凋亡,其机制可能与促进bax mRNA高表达和bcl-2 mRNA低表达有关.     

七氟醚和氟烷麻醉对小儿斜视矫正术中眼心、眼呼吸反射程度的比较

目的比较七氟醚(Sevoflurane)和氟烷(Halothane)对小儿斜视矫正术眼心、眼呼吸反射程度的影响.方法60例2～8岁拟在吸入全麻下行斜视矫正术的小儿随机分为七氟醚-N2O-O2麻醉组(S组,n=30)和氟烷-N2O-O2麻醉组(H组,n=30),所有小儿均使用喉罩并保留自主呼吸.分别于手术野消毒铺单后和牵拉眼肌期间记录眼心反射(oculocardiac reflex,OCR)指标(HR,心律失常、MAP)和眼呼吸反射(oculorespiratory reflex,ORR)指标(RR,SpO2,PET CO2).以消毒铺单后的数值作基础值.结果S组基础HR高于H组[S vs H:(119±23)vs(108±20),P＜0.05];与基础值比较,牵拉眼肌期间两组病人HR急剧降低[S:(119±23)vs(95±13),P＜0.01;H:(108±20)vs(75±15,P＜0.01],但OCR期间S组最低HR明显高于H组[S vs H:(95±13)vs(75±15),P＜0.01];S组OCR发生率和OCR期间心律失常发生率均明显低于H组(OCR发生率:S vs H:41%vs 79% P＜0.01,心律失常发生率:S vs H:4%vs 20%,P＜0.01).两组病人OCR期间P R明显低于基础值[S:(32.3±3.0)vs(38.0±2.2),P＜0.05,H:(28.0±3.7)vs(34.5±3.0),P＜0.05],但S组基础RR和OCR期间最低RR均高于H组(P＜0.05).结论小儿斜视矫正术中,部分小儿经历了急剧的眼心、眼呼吸反射.七氟醚组眼心、眼呼吸反射程度明显低于氟烷组,七氟醚是用于小儿斜视矫正术较安全的一种新型吸入麻醉剂.     

乙型肝炎病毒前S1抗原检测的应用与评价

目的评价乙型肝炎病毒(HBV)前S1抗原(PreS1)检测的临床应用价值.方法用双抗体夹心ELISA一步法对280例HBV感染者进行PreS1检测,其结果与HBV-DNA聚合酶链反应(PCR)和HBV血清标志物的检测结果相比较.结果 PreS1在乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)阳性组的检出率为83.0%,显著高于HBeAg阴性组的检出率36.7%(P＜0.05).PreS1在HBV-DNA阳性组的检出率为80.9%,显著高于HBV-DNA阴性组的检出率29.1%(P＜0.05).PreS1与HBV-DNA检测结果的符合率为77.9%,两者检出率的相关系数r=0.983 0(P＜0.01).结论 PreS1是反映HBV复制与传染性的一个可靠指标,可作为HBV血清标志物检测的重要补充.     

CAP患者CURB-65评分与临床指标、IL-1β、IL-4的相关性研究

目的分析社区获得性肺炎(CAP)患者CURB-65评分与其临床指标、IL-1β、IL-4之间的相关性。方法研究中共收入80例研究对象,其中21例健康志愿者作为对照组;CAP病例共59例,其中轻症CAP25例,重症CAP34例。所有患者入院后采用CURB-65进行评分,常规行动脉血气分析,计算氧合指数,同时采用ELISA检测降钙素原(PCT)、IL-1β、IL-4。结果轻症肺炎组与健康对照组比较,其PaO2[(99.5±13.4)mmHgvs(105.1±9.4)mmHg]及PCT水平[(1.62±1.65)pg/mlvs(0.04±0.01)pg/ml]差异均无统计学意义(P0.05);轻症肺炎组患者CURB-65评分(0.9±0.8vs0)、FiO2[(26.6±7.8)%vs21%、IL-1β[(118.79±32.29)pg/mlvs(9.33±2.51)pg/ml]、IL-4[(41.24±6.52)pg/mlvs(18.46±4.05)pg/ml]高于健康对照组,氧合指数(406.59±126.03vs500.45±44.82)则低于健康对照组(P0.05);重症肺炎组CURB-65评分(3.5±0.7vs0.9±0.80)、FiO2[(41.9±12.0)%vs(26.6±7.8)%21%)、PCT[(11.96±7.59)pg/mlvs(1.62±1.65)pg/ml(0.04±0.01)pg/ml]、IL-1β[(200.13±48.27)pg/mlvs(118.79±32.29)pg/ml(9.33±2.51)pg/ml]、IL-4[(55.41±13.71)pg/mlvs(41.24±6.52)pg/ml(18.46±4.05)pg/ml]明显高于轻症肺炎组及健康对照组,而PaO2[(74.4±13.1)mmHgvs(99.5±13.4)mmHg(105.1±9.4)mmHg]及氧合指数(204.14±110.10vs406.59±126.03500.45±44.82)则明显低于轻症肺炎组及健康对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。CURB-65评分与氧合指数呈负相关(r=-0.833,P0.05),而与PCT(r=0.900)、IL-1β(r=0.893)、IL-4(r=0.838)均呈正相关(P均0.05)。结论 CAP患者的CURB-65评分与患者氧合指数、炎症反应指标呈明显相关性,可以作为评估重症肺炎的一种简易手段。     

Relationship between time to positivity of blood culture with clinical characteristics and hospital mortality in patients with Escherichia coli bacteremia

Background  Previous studies indicated that the time to positivity (TTP) of blood culture is a parameter correlating with degree of the bacteremia and outcome in patients with bloodstream infections caused by Escherichia coli (E. coli). The objective of this study was to further investigate the diagnostic and prognostic power of using TTP to predict E. coli bacteremia.

Methods  A retrospective cohort study at two university hospitals was conducted. We retrieved all the medical records of those with E. coli bloodstream infection according to the records generated by their microbiology departments. Univariate and multivariate analyses were applied to identify clinical factors correlating with fast bacterial growth and significant prognostic factors for hospital mortality.

Results  Medical records of 353 episodes of E. coli bacteremia diagnosed between January 1, 2007 and December 31, 2009 were retrieved in the investigation. Univariate analysis demonstrated that the TTP ≤7 hours group is associated with higher incidence of active malignancies (41.7% vs. 27.2%, P=0.010), neutropenia (30% vs.14.3%, P=0.007), primary bacteremia (55.0% vs. 33.4%, P=0.002), and poorer outcome (hospital mortality 43.3% vs.11.9%, P=0.000) than the TTP >7 hours group. Multivariate analysis revealed that the significant predictors of hospital mortality, in rank order from high to low, were TTP (for TTP ≤7 hours, odds ratio (OR): 4.886; 95% confidence interval (CI): 2.572–9.283; P=0.000), neutropenia (OR: 2.800; 95% CI: 1.428–5.490; P=0.003), comedication of steroids or immunosuppressive agents (OR: 2.670; 95% CI: 0.971–7.342; P=0.057).

Conclusions  Incidence of malignancies, neutropenia and primary bacteremia correlates with fast bacterial growth in patients with E. coli bacteremia. The parameter of TTP has been identified as a variable of highest correlation to hospital mortality and therefore can be potentially utilized as a mortality prognostic marker.

     

大肠杆菌临床分离株多重耐药过程中的主动外排机制

目的　探讨临床分离大肠杆菌多重耐药机制。方法　应用荧光法测定临床分离大肠杆菌对环丙沙星的主动外排功能 ;PCR及Southernblot测定主动外排系统AcrAB结构基因acrAB ;RT PCR测定acrAB表达水平 ;自动荧光测序法测定acrAB基因扩增产物DNA序列。结果　临床分离大肠杆菌多重耐药株细胞内环丙沙星稳态浓度显著低于敏感株 (0 .73mg/L± 0 .0 4mg/L比 2 .0 0mg/L± 0 .0 7mg/LA660 ,P <0 .0 0 1) ;临床分离大肠杆菌无acrAB缺失 ;多重耐药株acrAB表达水平显著高于其他菌株 ;多重耐药株以及敏感株acrAB基因扩增产物无点突变和缺失。结论　主动外排系统acrAB的高表达导致临床分离大肠杆菌产生多重耐药性 ;acrAB的表达可能受多重耐药操纵子调控。     

HIV-1基质蛋白P17的原核表达与纯化

目的 :HIV- 1p17基因在大肠杆菌中高效表达并纯化目的蛋白。方法 :1PCR法扩增的 HIV-1p17基因片段克隆至 p ET2 8c质粒 ;2重组质粒分别在大肠杆菌 BL 2 1、BL 2 1(DE3)、BL 2 1(DE3) plys S及 HMS174 (DE3)中表达 ;3用 Ni- NTA金属树脂层析法纯化目的蛋白 ;4用酶联免疫法和免疫印迹法检测纯化蛋白的特异性。结果 :重组质粒在 BL (DE3)中表达量最高 ,目的蛋白表达量占全菌体裂解物的32 % ,纯化后其纯度达 95% ,纯化蛋白可与 p17Mc Ab和 HIV- 1阳性血清发生特异反应。结论 :带有HIV- 1p17片段的重组质粒 p ET2 8c在大肠杆菌 BL2 1(DE3)中获得高效表达 ,蛋白表达量可满足其免疫、生物活性的进一步研究 ;用 Ni- NTA金属树脂层析法纯化蛋白 ,方法简便 ,蛋白丢失少 ,纯度高 ;纯化的重组蛋白 HIV- 1p17可用来临床早期诊断 HIV- 1感染者 ,同时可预测患者的临床进程。     

血清PCT与hs-CRP对新生儿细菌感染性肺炎的诊断价值

目的 比较血清降钙素原(PCT)和超敏C反应蛋白(hs-CRP)对新生儿细菌感染性肺炎的诊断价值.方法 选择2015年1月至2016年6月期间我院收治的新生儿肺炎90例为研究对象,根据病原体的不同分为细菌性肺炎组(n=46)与非细菌性肺炎组(n=44),比较两组患儿血清PCT和hs-CRP阳性率,以及细菌性肺炎患儿治疗后血清PCT和hs-CRP阳性率的变化.结果 细菌性肺炎组患儿的hs-CRP、PCT阳性率分别为71.74%、91.30%,明显高于非细菌性肺炎组患儿的18.18%和4.55%,差异均有统计学意义(P<0.05);细菌性肺炎患儿治疗1周后,PCT阳性率为32.61%,高于hs-CRP的13.04%,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗2周后PCT和hs-CRP阳性率分别为4.35%和2.17%,差异无统计学意义(P>0.05).结论 血清PCT对于新生儿细菌性肺炎具有更好的诊断及鉴别诊断价值,且PCT有助于评估治疗效果并指导抗菌药物的应用.     

改良分子信标实时PCR快速检测大肠杆菌O157：H7

目的建立改良分子信标实时PCR快速检测大肠杆菌O157：H7的快速方法。方法根据GenBank公布O157：H7的rfbE保守序列，设计一对引物和改良分子信标探针，用FAM荧光剂标记探针的5’端，建立改良分子信标实时PCR检测O157：H7的反应体系，应用于食物中毒快速诊断和食品微生物检测。结果共检测11种细菌。只有大肠杆菌O157：H7有荧光信号，其余10种全无荧光信号，且与其他细菌无交叉反应，DNA灵敏度为64fg，菌液灵敏度为59cfu／ml或2cfu／PCR反应体系。应用改良分子信标实时PCR反应体系检测10株O157：H7均出现特异的荧光信号，无干扰。对89份食品样品进行检测，5份O157：H7实时PCR阳性，其余样品为阴性，检测仅需2h。5份阳性样本，经传统方法培养，有3份检出大肠杆菌O157：H7。结论改良分子信标实时PCR检测体系快速、灵敏度高，特异性强，可用于大肠杆菌O157：H7食物中毒的快速诊断和食品微生物检测，为食源性疾病的分子流行病学调查提供新的检测手段。     

2013-2018年北京市顺义区哨点医院腹泻病例中致泻性大肠埃希菌流行特征分析

目的 了解北京市顺义区腹泻病例中致泻性大肠埃希菌(diarrheagenic Escherichia coli,DEC)的流行特征,为顺义区DEC引起的腹泻防控工作提供科学依据。方法 收集2013至2018年北京市顺义区2家哨点医院肠道门诊腹泻患者临床和流行病学资料,采集粪便标本进行DEC检测,数据采用SPSS 25.0和Excel 2010进行流行病学分析。 结果 2 068例腹泻监测病例中检出DEC 182例(8.80%),检出率由高到低依次为肠产毒性大肠埃希菌(enterotoxigenic E.coli, ETEC)(111例,5.37%)、肠致病性大肠埃希菌(enteropathogenic E.coli,EPEC)(45例,2.18%)、肠集聚性大肠埃希菌(enteroaggregative E.coli, EAEC)(27例,1.31%)(各类型DEC检出数相加大于阳性例数是由于混合感染者分别计算到各类型引起),且不同户籍、不同性别、不同年龄的检出率差异无统计学意义。DEC的季节性发病特征明显,各菌型的流行高峰均在夏季,主要表现为ETEC(χ²=76.591,P<0.001)和EAEC(χ²=10.204,P<0.05);本市患者EPEC(χ²=12.243,P<0.001)和EAEC(χ²=7.947,P<0.01)阳性检出率高;不同年龄EAEC检出率差异有统计学意义(χ²=17.171,P<0.05)。发热、恶心、腹痛、脱水症状对DEC检出率无影响,但无呕吐症状病例DEC检出率高(χ²=7.099,P<0.01),主要体现为ETEC(χ²=15.073,P<0.001);伴发热与无发热组EAEC检出率差异有统计学意义(χ²=4.951,P<0.05)。结论 北京市顺义区DEC流行的优势菌型主要为ETEC、EPEC和EAEC,季节性发病特征明显,夏季应加强DEC引起腹泻的防控工作。     

两种常见产超广谱β-内酰胺酶菌的检测及临床应用

目的:筛选检测肺炎克雷伯氏菌及大肠杆菌的超广谱的β-内酰胺酶(ESBLs)的敏感方法,并探讨肺炎克雷伯氏菌及大肠杆菌产ESBLs的情况与耐药的关系,为临床合理使用抗生素提供实验依据。方法:临床分离的78份菌株分别用4种方法进行ESBLs及耐药性的检测,比较其检出率及差异性。结果:单纸片加克拉维酸扩散法敏感性最好。肺炎克雷伯氏菌、大肠杆菌产ESBLs的阳性率在我院明显高出许多文献报道。结论:在仪器自动鉴定时,若ESBLs阳性的标本,应采取纸片法重新检测。我院肺炎克雷伯氏菌、大肠杆菌产ESBLs的阳性率应引起医务人员的重视,临床应加强监测,依据药敏情况合理选用抗生素。     

Identification of Shiga- like toxin Escherichia coli isolated from children wi th diarrhea by polymerase chain reaction

目的：探讨产志贺样毒素大肠埃希菌（SLTEC）在小儿腹泻中的病原学地位。方法：根据肠出血性大肠埃希菌（EHEC）0157：H7SLT1、SLT2、eaeA基因片段设计了3对引物,采用PCR法检测大肠埃希菌中SLT1、SLT2、eaeA毒力基因。结果：29株标准致泻大肠埃希菌（EHEC、EPEC、ETEC）和10株其它肠道病原菌中,只有1株EHEC检出SLT1、SLT2、eaeA毒力基因,其它均为阴性。从1032例腹泻患儿粪便中分离的474株未定型大肠埃希菌中,检出SLT1 20株（4.2％）,SLT2 7株（1.5％）;74株产志贺样毒素侵袭性大肠埃希菌（ESIEC）中检出SLT115株（20.3％）,SLT2 5株（6.8％）。结论：SLTEC是太原地区引起小儿腹泻的一种重要的致泻病原菌。     

联合应用抗生素测定并鉴别超广谱和Ⅰ型β—内酰胺酶

目的：联合用抗生素测定并鉴别大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌产生的超广谱和Ⅰ型β－内酰胺酶。方法：用头孢噻肟（TX）、头孢他定（CTD）、氨曲南（ATN）、奥格门丁（AOA）、头孢西丁（CXT）和亚胺培能在MH琼脂上进行双纸片搭格耕检测和鉴别大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、沟沟肠杆菌的超广β－内酰胺酶（ESBLs)及Ⅰ型β－内酰胺酶。结果：265株大肠埃希菌、95株肺炎克雷伯菌、67株阴沟肠杆菌均对亚胺培能敏感;对三代头孢菌素的耐药率分别为23．4％、36．8％、58．2％,产生的能水解超广谱β－内酰胺类抗生素的β－内酰胺酶可分为两类,这些菌株对CXT有不同的耐药性,CTX＋CTD＋ATN的ESBLs检出率与单一CTX、CTD、ATN的检出率差异有显性,与CTX＋CTD的ESBLs检出率差异无显性（P＞0．05）。结论：应用不同抗生素可将水解超广谱β－内酰胺类抗生素的β－内酰胺酶分为ESBLs和Ⅰ型,有不同的耐药特点;联合应用两种以抗生素可提高检出率,双纸片搭桥法适合临床使用,临床分离菌株应用将超广谱和Ⅰ型β－内酰胺酶的检测作为常规。     

雷帕霉素对符合米兰标准的肝细胞癌肝移植患者生存的影响

目的探讨雷帕霉素对符合米兰标准的肝细胞癌（HCC）肝移植患者生存的影响。方法回顾性分析2004年11月至2012年1月北京佑安医院移植中心收治的90例符合米兰标准的HCC肝移植患者的临床资料。按患者是否加用雷帕霉素分为两组。对照组45例,初始免疫抑制方案为：他克莫司（FK506）＋吗替麦考酚酯（MMF）＋甲泼尼龙（Pred）;维持期免疫抑制方案为：FK506＋/-MMF。雷帕霉素组45例,初始免疫抑制方案同对照组;维持期免疫抑制方案为：FK506＋雷帕霉素。比较两组患者术后生存时间、生存率、无瘤生存率和肿瘤复发率。结果至随访结束时,对照组45例,死亡11例,其中因肿瘤复发死亡9例;雷帕霉素组45例,死亡4例,其中因肿瘤复发死亡2例。对照组术后平均生存时间（72.6±5.8）月,明显低于雷帕霉素组[（84.0±4.0）月,差异有统计学意义（P〈0.05）。对照组和雷帕霉素组术后1、2、3、5年的生存率分别为86.5%和97.8%（P=0.11）,76.5%和97.8%（P〈0.05）,73.6%和91.2%（P=0.06）,73.6%和87.0%（P=0.20）;术后1、2、3、5年的无瘤生存率分别为81.6%和97.7%（P〈0.05）,73.7%和97.7%（P〈0.05）,73.7%和88.1%（P=0.15）,73.7%和88.1%（P=0.15）;术后1、2、3、5年的肿瘤复发率分别为13.3%和2.2%（P=0.11）,18.6%和2.2%（P〈0.05）,21.6%和2.2%（P〈0.05）,21.6%和6.8%（P=0.06）。结论雷帕霉素能够显著提高符合米兰标准的HCC患者肝转移术后生存时间,降低肿瘤复发率并提高其术后生存率。