Comparison of culture and PCR assay for detection of susceptibility bacteria of pneumonia in children

目的 探讨PCR法和培养法对儿童肺炎易感细菌检测的应用价值.方法 采用PCR法及细菌培养法对113例呼吸道感染患儿的临床标本进行检测,对两种检测方法的结果进行比较.结果 113例临床标本中,培养法检测阳性率46.9％(53/113),其中流感嗜血杆菌2例,大肠埃希菌8例,肺炎克雷伯菌15例,肺炎链球茵3例,金黄色葡萄球菌12例,表皮葡萄球菌6例,铜绿假单胞菌7例.PCR法检测阳性率69.9％(79/113),在79例阳性标本中检出病原菌85株,其中73例标本检测出单一病原.6例标本为混合感染.流感嗜血杆菌18例,大肠埃希菌8例,肺炎克雷伯菌17例.肺炎链球菌16例,金黄色葡萄球菌10例.表皮葡萄球菌10例,铜绿假单胞菌6例.结论 与培养法相比,PCR法可以提高肺炎链球菌、流感嗜血杆菌等较难培养细菌的检出率,应将PCR法与培养法结合作为肺炎易感细菌的检测方法.为临床医师合理选择抗生素奠定基础.     

小儿肺炎176例病原菌检测及药敏分析

目的 探讨小儿肺炎的病原菌分布及药敏情况,以指导抗生素的使用.方法 采用无菌操作吸取176例患儿咽喉深部痰液进行细菌培养及药敏试验.结果 痰培养阳性94例,检出率为53.4%,其中大肠埃希氏菌20例,肺炎克雷伯菌19例,金黄色葡萄球菌13例,流感嗜血杆菌13例,粘质沙雷式菌10例,其它包括副流感嗜血杆菌、铜绿假单胞菌、链球菌、表皮葡萄球菌、产气肠杆菌等19例.革兰氏阴性杆菌对亚胺培南高度敏感,对阿莫西林、庆大霉素耐药.革兰氏阳性球菌对万古霉素高度敏感,对青霉素耐药.结论 大肠埃希氏菌、肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌、流感嗜血杆菌为小儿肺炎的主要病原菌,其中大肠埃希氏菌及肺炎克雷伯菌对多种药物不敏感,应据药敏合理选用抗生素治疗.     

小儿肺炎167例病原学临床分析

目的探讨本地区近期引起小儿肺炎的常见病原体及临床流行病学特征,为临床合理使用抗菌药物提供参考。方法对我院儿科2011年1月～2012年12月收治的618例肺炎患儿痰培养结果进行统计分析。结果阳性标本167例,阳性率27.02%。检出病原菌10余种,其中大肠埃希菌31例(18.56%),流感嗜血杆菌25例(14.97%),肺炎克雷伯氏菌23例(13.77%),表皮葡萄球菌20例(11.98%),金黄色葡萄球菌18例(0.78%),不动杆菌11例(6.59%),其他包括链球菌、绿脓假单胞菌、白色念珠菌、副流感杆菌等共39例(23.35%)。结论细菌感染是小儿肺炎的重要原因,大肠埃希菌、流感嗜血杆菌、肺炎克雷伯氏菌、表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌是主要的致病菌;季节不同感染病原菌所占比例也不同。     

银川地区儿童社区获得性肺炎病原学研究

目的分析银川地区儿童社区获得性肺炎(CAP)的病原菌分布特点及其与临床的关系,为合理使用抗菌药物提供依据。方法对309例CAP患儿采用一次性无菌收集器负压抽取深部呼吸道分泌物送细菌培养,做菌种鉴定和药敏试验。结果分离培养出病原菌87株,阳性率28.16%。检出细菌依次为肺炎链球菌(32.18%)、肺炎克雷伯菌(22.99%)、金黄色葡萄球菌(10.34%)、流感嗜血杆菌(10.34%)、大肠埃希菌(9.52%)、鲍曼不动杆菌(4.59%)、阴沟肠杆菌(4.59%)、产气肠杆菌(1.19%)、铜绿假单胞菌(1.19%)。肺炎链球菌主要见于3个月至5岁儿童,肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌、鲍曼不动杆菌、阴沟杆菌1岁内小儿多见,流感嗜血杆菌主要发生于1岁以上儿童,大肠埃希菌多见于3个月以下儿童。肺炎链球菌、肺炎克雷伯菌对常用抗生素有多重耐药性。结论本地区儿童CAP病原菌以肺炎链球菌、肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌、流感嗜血杆菌、大肠埃希菌等为主,各年龄段儿童感染的病原菌有所不同。最常见的肺炎链球菌、肺炎克雷伯菌对多种抗菌素耐药,临床应根据细菌培养和药敏试验结果合理选用抗生素。     

某院2013-2014年血培养病原体分布及其耐药性分析

目的对某院2013-2014年间血培养病原体分布状况以及病原菌耐药性进行调查。方法收集某院2013年1月至2014年11月间送检的2 415份血培养标本,对其病原体检测情况进行统计,并对株菌耐药性进行分析。结果2 415份送检的血培养标本中有541例为阳性标本,阳性率为22.4%。表皮葡萄球菌比例为27.73%;大肠埃希菌比例为11.09%;溶血葡萄球菌比例为10.35%;金黄色葡萄球菌比例为8.5%;肺炎克雷伯菌比例为7.39%;白色念珠菌比例为4.62%;粪肠球菌比例为4.07%;鲍曼不动杆菌比例为3.88%;铜绿假单胞菌比例为2.03%;屎肠球菌比例为2.03%;阴沟肠杆菌比例为1.11%;肺炎链球菌占比例的1.11%。大肠埃希菌的ESBLs比例为58.3%;肺炎克雷伯菌为31.3%;表皮葡萄球菌为41.2%;溶血葡萄球菌为10.7%;金黄色葡萄球菌为12.3%。结论某院病原体感染主要病原为表皮葡萄球菌,其次为大肠埃希菌、溶血葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌,株菌耐药性有所增加。     

下呼吸道感染常见菌和药敏分析

对门诊、临床住院下呼吸道感染患者痰检标本进行细菌培养分离鉴定和药敏试验。占前6位的感染病原菌为大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、硝酸盐不动杆菌,其次为嗜麦芽假单胞菌、肺炎链球菌、肠球菌等。各种病原菌耐药率与往年资料相比呈上升趋势。     

小儿肺炎患者痰培养病原菌分布与药敏结果分析

目的研究小儿肺炎的痰培养致病菌特点以及药敏试验结果。方法选择120例小儿肺炎患者在入院后即采集痰液标本进行痰培养及分离,并对分离出来的细菌做常规药敏测试和统计分析。结果 120例痰标本检出致病菌83株,总阳性率69.2%,其中革兰氏阴性细菌59株,革兰氏阳性细菌19株,真菌5株。主要致病菌依次为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌。其中大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌对氨苄西林耐药率最高,金黄色葡萄球菌为青霉素,铜绿假单胞菌为头孢曲松。结论小儿肺炎病原菌已经发生变迁,革兰氏阴性杆菌现已成为主要病原菌,而且大部分对三代头孢抗生素敏感。     

516例小儿细菌性肺炎细菌学监测及分析

目的了解东莞地区小儿肺炎的细菌感染情况。方法对516例细菌性肺炎患儿于住院当天采集痰液并进行细菌学检测。结果516例中获得阳性标本259例,阳性率为50.19%,革兰阴性(G-)杆菌155株(59.85%),革兰阳性(G+)球菌77株(29.73%),其中前8位细菌依次为肺炎克雷伯肺炎亚种55株,大肠埃希菌52株,肺炎链球菌26株,金黄色葡萄球菌26株,流感嗜血杆菌26株,表皮葡萄球菌25株,鲍氏不动杆菌12株,铜绿假单胞菌10株。G-杆菌对亚氨培南及阿米卡星敏感性高,对头孢二代、三代敏感性不很高。G+球菌对万古霉素及左氧氟沙星敏感性高,对青霉素及红霉素敏感性低,G-杆菌及G+球菌对增加β-内酰胺酶抑制剂的药物敏感性高。结论东莞地区小儿肺炎细菌感染率较高,肺炎克雷伯肺炎亚种、大肠埃希菌及肺炎链球菌等8种细菌为该地区小儿细菌性肺炎的常见细菌。     

兴义少数民族地区婴幼儿肺炎的病原菌及耐药情况调查

目的：调查兴义少数民族地区婴幼儿肺炎的病原菌及其耐药性。方法：对1239例婴幼儿肺炎患儿的痰液标本培养及药敏试验进行回顾性统计和分析。结果：分离培养出病原菌656株,总阳性率52．9％。革兰阴性菌以肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、阴沟肠杆菌为主,较敏感的抗生素为亚胺培南、丁胺卡那、环丙沙星、头孢西丁、阿莫西林／棒酸、头孢吡肟、头孢他啶。革兰阳性菌以肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌为主,对亚胺培南、环丙沙星、头孢西丁、阿莫西林／棒酸、万古霉索、利福霉素较敏感。结论：兴义地区婴幼儿肺炎的病原菌以革兰阴性为主,肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、阴沟肠杆菌、肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌为主要病原菌。对抗生素的耐药性较强,临床上应注意对这些菌株的检测,积极防治。     

11633例痰培养及药敏结果分析

目的:了解小儿呼吸道感染的病原菌及耐药情况。方法:对11633例小儿呼吸道感染的痰标本进行培养和药敏试验。结果:11633例痰标本检出致病菌8076株,阳性率为69.42%,检出最高菌株为大肠埃希菌1429株(17.7%),其次为肺炎克雷伯菌1389株(17.2%),流感嗜血杆菌1026株(12.7%),草绿色链球菌840株(10.4%),真菌695株(8.6%),不动杆菌662株(8.2%),金黄色葡萄球菌517株(6.4%),铜绿假单胞菌436株(5.4%),肺炎链球菌355株(4.4%),阴沟肠杆菌299株(3.7%)。耐药情况:大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌对氨苄西林耐药率最高,流感嗜血杆菌对克林霉素的耐药率最高93.8%,草绿色链球菌对阿奇霉素的耐药率最高95.9%,不动杆菌对头孢克罗的耐药率最高90.2%。结论:临床应重视病原菌检测及药敏试验,为临床合理使用抗生素提供依据,预防细菌耐药性的增加。     

老年社区获得性肺炎124例临床分析

目的:研究老年社区获得性肺炎(CAP)患者的致病菌株种类,为CAP患者的治疗提供经验与方法。方法:对124例老年社区获得性肺炎患者的发病情况进行详细了解,并取所有患者痰液进行细菌培养,分析老年社区获得性肺炎患者的致病菌的分布情况。结果:124例老年社区获得性肺炎患者感染的细菌分布情况为:肺炎链球菌39例,金黄色葡萄球菌11例,肺炎克雷伯杆菌8例,肺炎支原体9例,铜绿假单胞菌14例,大肠埃希菌12例,流感嗜血杆菌2例,痰培养阴性患者29例。且致病菌中以肺炎链球菌(31.45%),明显多于其他各种致病菌,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:老年社区获得性肺炎患者的致病菌种类多,主要以肺炎链球菌为主。     

193例院内感染致病菌分析

从我院193例院内感染患者临床标本中分离到金黄色葡萄球菌、腐生葡萄球菌、表皮葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、阴沟杆菌、肺炎克雷伯氏杆菌、粘质沙雷氏杆菌、奇异变形杆菌、白色念珠菌等10种193株细菌,其中金黄葡萄球菌66例,占院内感染病例的34%;大肠杆菌32例,占院内感染病例的16%;腐生葡萄球菌28例,占院内感染病例的14.5%;绿脓杆菌19例,占院内感染病例的10%;其他菌48例共占院内感染病例的25.5%。     

血培养标本病原菌的科室分布及耐药性分析

目的了解医院血培养阳性病原菌的科室分布及对抗菌药物敏感性,为临床治疗提供依据。方法采用WHONET 5.6软件对2010年6月-2011年7月血培养结果进行回顾性分析。结果 1895件血培养标本共分离出病原菌398株,阳性率为21.0%,其中革兰阳性球菌占79.9%,革兰阴性杆菌占16.8%,真菌占3.3%。表皮葡萄球菌主要分布在围产儿科和重症医学科,溶血葡萄球菌主要分布在围产儿科,人葡萄球菌主要分布在呼吸内科、泌尿科和血液肿瘤科,大肠埃希菌主要分布在泌尿科、血液肿瘤科和内分泌肾科,铜绿假单胞菌主要分布在重症医学科。凝固酶阴性葡萄球菌的耐药率高于金黄色葡萄球菌,未发现耐万古霉素、利奈唑胺、奎奴普丁的葡萄球菌;未分离出耐亚胺培南的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和铜绿假单胞菌。结论血培养阳性病原菌在不同科室的分布和抗菌药物敏感性不同,医生应了解本科室细菌分布及药敏情况,合理使用抗菌药物。     

热带地区3170株病原菌的分布及耐药监测分析

目的：分析我院临床标本分离病原菌的分布特征及耐药情况,为临床抗感染治疗提供合理用药依据。方法采用Whonet 5.6软件对我院2015年分离的3170株病原菌资料进行回顾性分析。结果3170株病原菌中G-菌占67.8%、G+菌占26.4%、真菌占5.8%。排名前8位的依次为大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、白色念珠菌。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的检出率为33%,铜绿假单胞菌对多粘菌素耐药为1.11%,肠杆菌科和鲍曼不动杆菌的多重耐药现象很严重,发现对碳氢霉烯类耐药的肠杆菌。结论医院感染的病原菌种类繁多,其耐药性也日趋严重,应定期开展耐药监测,及时为临床合理用药提供依据。     

重庆地区小儿肺炎细菌耐药性及抗生素应用分析

目的分析重庆地区小儿肺炎常见病原菌构成及其耐药性,探讨临床抗生素的合理应用.方法吸取1 165例小儿肺炎下呼吸道分泌物,利用microscan全自动微生物分析仪进行细菌鉴定、培养及药敏试验,并统计临床初始抗生素应用情况.结果细菌总分离数为392株(33.7%),其中革兰阴性菌257株(65.6%),前5位依次为肺炎克雷伯菌、流感嗜血杆菌、副流感嗜血杆菌、铜绿假单胞菌及大肠埃希菌;革兰阳性细菌为135株(34.4%),依次为肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌.药物敏感实验显示:铜绿假单胞菌与葡萄球菌呈多重耐药,其它细菌对抗生素敏感性差异较大,较敏感的有头孢呋辛、头孢曲松等;而泰能、阿米卡星、万古霉素则高度敏感.1 165例小儿肺炎使用抗生素种类达21种,使用率100%.单用一种者占38.5%,联合二种者占61.5%;无一例首选万古霉素或泰能.初始抗生素治愈率为76.7%(894/1 165例),好转率为18.5%(216/1 165例).结论重庆地区小儿肺炎病原菌以革兰阴性菌占优势,不同细菌对抗生素敏感性差异较大;临床多选用二、三代头孢菌素.积极监测细菌耐药性,有助于提供选择抗生素的依据,对提高疗效和避免耐药菌株的快速增长有重要意义.     

急救部医护人员手机携带病菌状况与手卫生调查分析

目的：调查急救部一线护理人员手机带菌情况与手卫生之间的关系。方法：连续3 d对急诊病房12名一线护理人员使用手机表面进行细菌培养及药敏试验,并与同期急救部患者送检标本细菌培养药敏检查进行比较。结果：护理人员手机表面细菌培养结果检出金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌等9种菌株,并发现广泛耐药菌2株;同期急救部送检患者细菌培养检出金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌等8种菌株,耐药菌3株。结论：一线医护人员工作中使用手机可能引起细菌交叉感染。     

儿童急性下呼吸道感染的病原菌及耐药性调查

目的了解儿童急性下呼吸道感染的主要病原菌及其耐药性。方法将本院2008年1月—2009年12月住院及门诊1169例儿童急性下呼吸道感染的痰液标本经分离培养,做菌株鉴定和药物敏感试验。结果共分离培养出病原菌531株,总阳性率45.42%,其中革兰阴性菌317株,占59.7%;革兰阳性菌214株,占40.3%。革兰阴性菌以肺炎克雷伯杆菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌和流感嗜血杆菌为主。肺炎克雷伯杆菌和大肠埃希菌较敏感的抗生素为亚胺培南、环丙沙星、阿米卡星、阿莫西林/克拉维酸钾、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌林/舒巴坦。对氨苄西林、哌拉西林钠、头孢唑啉、头孢呋辛、头孢噻肟钠耐药率较高。革兰阳性菌以肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌和肠球菌为主。肺炎链球菌对苯唑类霉素、PG和红霉素的耐药率达63.95%～90.72%,金黄色葡萄球菌对红霉素、青霉素、克林霉素的耐药率平均超过63.74%,对万古霉素的耐药率为0。结论儿童急性下呼吸道感染的病原菌以革兰阴性菌为主,肺炎克雷伯杆菌、大肠埃希菌、肠球菌为主要病原菌对抗生素的耐药率较高,应积极加强监控,采取必要措施,防止耐药菌的流行。     

Original Article Simultaneous Detection of 13 Key Bacterial Respiratory Pathogens by Combination of Multiplex PCR and Capillary Electrophoresis

Objective Lower respiratory tract infections continue to pose a significant threat to human health. It is important to accurately and rapidly detect respiratory bacteria. To compensate for the limits of current respiratory bacteria detection methods, we developed a combination of multiplex polymerase chain reaction (PCR) and capillary electrophoresis (MPCE) assay to detect thirteen bacterial pathogens responsible for lower respiratory tract infections, including Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae, Moraxella catarrhalis, Pseudomonas aeruginosa, Klebsiella pneumoniae, Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Mycoplasma pneumoniae, Legionella spp., Bordetella pertussis, Mycobacterium tuberculosis complex, Corynebacterium diphtheriae, and Streptococcus pyogenes. Methods Three multiplex PCR reactions were built, and the products were analyzed by capillary electrophoresis using the high-throughput DNA analyzer. The specificity of the MPCE assay was examined and the detection limit was evaluated using DNA samples from each bacterial strain and the simulative samples of each strain. This assay was further evaluated using 152 clinical specimens and compared with real-time PCR reactions. For this assay, three nested-multiplex-PCRs were used to detect these clinical specimens. Results The detection limits of the MPCE assay for the 13 pathogens were very low and ranged from 10-7 to 10-2 ng/μL. Furthermore, analysis of the 152 clinical specimens yielded a specificity ranging from 96.5%-100.0%, and a sensitivity of 100.0% for the 13 pathogens. Conclusion This study revealed that the MPCE assay is a rapid, reliable, and high-throughput method with high specificity and sensitivity. This assay has great potential in the molecular epidemiological survey of respiratory pathogens.     

支气管肺泡灌洗液细菌培养阳性患儿165例临床分析

目的：分析支气管肺泡灌洗液（BALF）细菌培养阳性患儿的临床特征、病原谱及药敏结果,为儿童下呼吸道感染临床诊治提供依据。方法：回顾性分析2013年1月-2015年12月送检BALF培养的1 159例住院患儿的临床资料、病原学检查及药敏试验结果等。结果：检出致病菌株165例,其中男99例（占60.0%）,女66 例（占40.0%）。临床诊断肺炎最多见,为116例（占70.4%）,其中支气管肺炎91例,大叶性肺炎25例;其次是毛细支气管炎合并细菌感染19例（占11.5%）,迁延性细菌性支气管炎（PBB）12例（占7.3%）。165株细菌革兰染色阳性112株（占67.9%）,其中肺炎链球菌最多见,为102株,其次为金黄色葡萄球菌8株;革兰染色阴性53株（占32.1%）,其中以流感嗜血杆菌最多见,为14株,其次为铜绿假单胞菌13株,大肠埃希菌8株。65例（占39.4%）患儿存在基础疾病,其中呼吸道畸形最多见,共22例,主要为气管和（或）支气管软化、狭窄,其次是支气管哮喘,共14例。102株肺炎链球菌药敏结果显示对青霉素敏感25株,对青霉素中介35株,对青霉素耐药42株,提示以青霉素不敏感菌株为主（占75.5%）。金黄色葡萄球菌中以耐甲氧西林菌株为主,但无耐万古霉素及利奈唑胺菌株。流感嗜血杆菌对青霉素及二代头孢菌素耐药率高,对三代头孢菌素仍较敏感。大肠埃希菌8株,其中产超广谱β内酰胺酶5株。肺炎克雷伯菌5株,其中产超广谱β内酰胺酶3株。结论：BALF细菌培养阳性患儿临床诊断以肺炎最多见,其次是毛细支气管炎合并细菌感染和迁延性细菌性支气管炎;细菌病原以肺炎链球菌及流感嗜血杆菌为主。     

福建省2021年血流感染细菌耐药情况分析

目的 了解福建省血流感染病原菌的分布及耐药现状,为临床合理用药提供参考依据。方法 对福建省31所医疗机构按统一方案对血培养标本分离菌株进行细菌鉴定和抗菌药物敏感性试验,参照美国临床实验室标准化协会（CLSI）2021年药敏执行标准,采用WHONET5.6软件对数据进行统计分析。结果 剔除重复菌株后,共收集到 10 356株细菌,革兰阳性菌3 668株（占35.4%）,革兰阴性菌6 688株（占64.6%）。排前5位的细菌为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌。本研究甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌（MRSA）检出率为24.5%,甲氧西林耐药凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）检出率为76.8%。未发现对万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺耐药的葡萄球菌。青霉素耐药肺炎链球菌的检出率为3.2%。万古霉素耐药粪肠球菌、屎肠球菌检出率分别为0.8%、1.1%。大肠埃希菌对碳青霉烯类药物的耐药率为0.8%,对左氧氟沙星的耐药率达41.9%;肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类药物的耐药率为15.0%。鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类药物的耐药率为45.1%;铜绿假单胞菌则仅为14.2%,且对大多数药物保持了较高的敏感性。结论 福建省血流感染多由大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和葡萄球菌引起,部分菌种的耐药情况不容乐观,应继续加强抗菌药物的临床应用管理,正确合理使用。