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1.
目的构建大鼠肾移植急性排斥反应模型,为探索其实验室诊断提供良好的技术平台。方法近交系Brown-Norway(BN)大鼠作为供体,Lewis大鼠作为受体,采用原位低温灌洗,左侧供肾,行腹部肾移植模型,供体肾动脉与受体腹主动脉端侧吻合、供体肾静脉与受体下腔静脉端侧吻合,输尿管采用带部分膀胱瓣与受体膀胱吻合。结果共构建大鼠肾移植模型58例次,成功49例,手术成功率为84.5%,受体死亡原因主要为输尿管吻合口漏尿致弥漫性腹膜炎、动脉血栓形成、麻醉意外等。肾移植术后第1、2、3、5及7天均有急性排斥反应发生。结论 BN-Lewis大鼠肾移植模型可作为大鼠肾移植后急性排斥反应模型,对肾移植术后急性排斥反应的相关研究具有应用价值。  相似文献   

2.
大鼠肾移植模型建立方法的探讨   总被引:1,自引:0,他引:1  
麦海星 《医学争鸣》2007,28(23):2202-2204
0 引言 大鼠原位肾移植模型是开展肾移植基础研究的重要实验手段.国外Lee等[1]早在20世纪60年代就有关于大鼠肾移植模型的报道.国内陈金芝等[2]在20世纪80年代初期建立了大鼠肾移植模型.众多的学者在大鼠肾移植手术方式上进行了探索.对大鼠肾移植模型的建立方法也提出了各种不同的意见,本文对供体,受体手术方式以及在建立模型过程中需要注意的问题进行了探讨.  相似文献   

3.
大鼠原位异体肾移植硬化加快模型的建立   总被引:4,自引:0,他引:4  
目的 建立大鼠移植肾慢性失功加快动物模型。方法 分别采用雄性SD大鼠和Wistar大鼠作为供受体,进行原位肾移植。术中强化缺血/再灌注损伤,观察术后2、4、6、8及12周各时相血肌酐及移植肾病理变化。结果 经强化缺血/再灌注损伤1h处理的异体原位肾移植大鼠于术后6周起血肌酐开始明显升高,8周出现明显的慢性同种异体移植肾肾病(CAN)的病理改变,与未强化缺血/再灌注损伤对照组相比有明显的统计学差异.结论采用SD→Wistar 大鼠作为供受体,通过强化缺血/再灌注损伤建立原位异体肾移植硬化加快模型简便可行。  相似文献   

4.
大鼠双侧供肾移植模型的建立   总被引:1,自引:1,他引:0  
目的:首创了一种可以同时取供体的双肾作供肾的大鼠肾移植模型。方法:以近交系Brown-Norway大鼠和近交系Lewis大鼠作为供、受体,取供体的双肾作为供肾,借助静脉支架管,行供体的静脉与受体肾静脉的端端吻合,肾动脉与腹主动脉行端侧吻合。结果:手术均于60min内完成。所有的受体均存活超过7天,围手术期死亡数为0。结论:首创双侧供肾大鼠肾移植模型是一种节省、可靠、实用的大鼠肾移植模型。  相似文献   

5.
一种大鼠异体肾移植模型的建立   总被引:3,自引:0,他引:3  
目的:建立一种稳定,操作简便的肾移植模型.方法:以SD大鼠和Wistar大鼠分别作为供、受体.静脉用临时支架管,将供肾的下腔静脉与受体左肾静脉作端端吻合,供肾腹主动脉与受体腹主动脉端侧吻合,以及输尿管带膀胱瓣与膀胱吻合.结果:建立并改进了大鼠肾移植模型,手术总时间(130±16)min,热缺血时间小于20 s,冷缺血时间小于50 min,手术成功率90.77%.结论:此模型稳定、可靠,易于掌握.  相似文献   

6.
目的:建立一种简易、实用的大鼠肾移植慢性移植.肾肾病(Chronic allograft nephropathy,CAN)模型,为研究肾移植术后慢性排斥反应的发病机理、治疗和预防提供平台.方法:F344近交系大鼠和Lewis近交系大鼠作为供、受体,取供体的左肾作为供肾,在裸眼直视下行供体的下腔静脉与受体肾静脉的端端吻合.供体腹主动脉与受体腹主动脉行端侧吻合,进行原位异体肾移植.术后10mg/(kg·d)×10d环孢素口服液灌胃,于4周后分别观察各受体移植.肾组织病理变化情况.结果:手术于2.5h内完成,成功率达97.50%.移植术后4周开始出现移植肾CAN的病理改变,12周可见典型慢性排斥反应病变.结论:该方法手术操作简单、直观,简化了显微外科技术的设备要求,建立了大鼠慢性移植肾肾病模型.  相似文献   

7.
大鼠同种异体原位肾移植动物模型的建立   总被引:3,自引:1,他引:2  
目的建立稳定的大鼠原位同种异体肾移植动物模型,为开展器官移植的实验研究提供依据。方法使用SD大鼠作为供受体,取供体左侧肾脏于灌注修整后,原位的移植至受体左侧肾窝,肾动脉采用端端吻合法,静脉则采用简化的端端吻合方式,输尿管则采用带部分膀胱瓣于受体膀胱吻合,受体右肾使用体外延迟结扎,从而复制出大鼠肾移植的动物模型。结果共行大鼠肾移植45对,模型成功率85%,整个手术时间平均(140±28)min,其中肾动脉吻合平均(10±3)min,供肾热缺血时间约3min。简化的肾静脉吻合平均(21±3)min,与传统吻合方法比较明显缩短了吻合时间(t=4.43,P<0.05)。结论该法有效地建立起大鼠原位肾移植模型,且并发症发生少,动物成活率高,简单实用。简化的静脉吻合方法有效的减少了静脉吻合时间。  相似文献   

8.
一种改良大鼠异体肾移植模型的建立   总被引:8,自引:6,他引:2  
目的:为开展器官移植的实验研究,建立大鼠异体肾移植模型。方法:用SD大鼠作为供体和受体,采用原位低温灌注,原位修剪,移植肾放置左侧,血管直接吻合,输尿管带膀胱瓣与膀胱吻合。结果:经过60次的实验,克服了移植物灌注、血管吻合、膀胱吻合等技术难关,建立了稳定实用的肾移植动物模型。手术成功率为80%左右。结论:此模型可以在一般的实验室条件下开展。有较高的成功率,符合肾移植实验研究的需要。  相似文献   

9.
大鼠异体肾移植动物模型的建立   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的:建立稳定的大鼠异体肾移植模型,为开展肾移植研究奠定良好的实验基础。方法:采用Wistar和SD大鼠,血管吻合采用供受体腹主动脉和下腔静脉端侧连续缝合,尿路重建采用供受体输尿管端端吻合,建立大鼠异体肾移植模型,观察和比较同系移植组与异系移植组大鼠间异体肾移植后的存活情况及术后并发症和肾脏免疫病理损害情况,并对模型制备作出客观评价。结果:手术总时间平均为(108±15)min,手术成功率为83.33%(25/30)。同系移植组大鼠平均存活时间(9.1±0.8)d。异系移植组大鼠平均生存时间为(6.27±0.3)d,术后第3天有明显的病理损害。结论:此模型有较高的成功率,并发症发生率低,符合肾移植实验研究的需要。  相似文献   

10.
目的 采用端端吻合技术建立稳定的SD-Wistar大鼠肾移植模型。方法 SPF级雄性SD及Wistar大鼠各60只,供体采用SD大鼠,受体采用Wistar大鼠,取左肾作为供肾,受体切除左肾进行原位肾移植,并保留自身右肾,供体肾动脉、肾静脉及输尿管均与受体Wistar大鼠进行端端吻合,管腔均采用间断缝合。结果 本实验每例SD-Wistar肾移植模型总手术时间约为105.54±20.63min,血管吻合时间约为20.42±5.81min,输尿管吻合时间约为5.21±2.42min。移植肾的热缺血时间约为11.24±3.52s,冷缺血时间约为40.35±8.52min。本组共进行SD-Wistar肾移植模型60例,术中发现肾动脉血栓形成2例;术后24h内死亡1例,成功率达95.00%。结论 采用端端吻合技术可成功建立SD-Wistar大鼠肾移植模型。  相似文献   

11.
目的探讨抗淋巴细胞血清(ALS)联合他克莫司(FK506)在诱导大鼠肾脏移植免疫耐受中的作用。方法以SD大鼠作为供体,Wistar大鼠作为受体,建立大鼠肾移植模型。对照组(A组)仅行肾移植,术前术后未予免疫干预;ALS组(B组)术后当天腹腔注射ALS,连续应用至术后第10天;FK506组(C组)术后当天开始应用FK506,连续应用至术后第10天;联合组(D组)联合应用ALS与FK506。术后观测各组受者存活时间、移植肾功能、移植肾血供、免疫耐受状态等。结果D组平均存活时间为(37.0±5.3)d,与A组(7.4±1.6)d、B组(16.3±4.7)d及C组(17.5±5.3)d比较,差异均有统计学意义(P〈0.05);手术后1周检查A组移植肾血供差,平均肾血管阻力指数0.80±0.06;B组和C组移植肾血供良好,平均阻力指数分别为0.62±0.07、0.63±0.08;D组移植肾血供良好,术后1周与术后20d平均阻力指数分别为0.61±0.04、0.62±0.03;D组与A组相比较差异有统计学意义(P〈0.05)。结论ALS联合FK506能够延长受者存活时间和促进免疫耐受的诱导。  相似文献   

12.
目的:探讨丹红注射液对大鼠移植肾缺血再灌注损伤和细胞间粘附分子I(ICAM-1)表达的影响.方法:建立近交系雄性SD大鼠同基因原位肾移植模型.共设4个实验组,假手术组,移植缺血再灌注组,丹红注射液预防组,丹红注射液治疗组.检测术后24 h各组大鼠的移植肾尿素氮(Blood urea nitrogen,Bun)和肌酐(Serum creatinine,Cr)变化,采用免疫组化法检测ICAM-l表达,HE染色光镜下观察肾组织损伤的病理改变,并进行Paller氏评分.结果:与假手术组比较,移植缺血再灌注组肾小管细胞ICAM-1阳性表达增强(P<0.01),Paller氏评分增加(P<0.01),肾小管上皮细胞肿胀、变性和坏死程度严重,ICAM-l表达量与肾小管评分呈正相关(P<0.01);与移植缺血再灌注组及治疗组比较,丹红预处理组肾小管细胞ICAM-I阳性表达下降(P<0.01),Puller氏评分降低(P<0.01),肾小管上皮细胞肿胀、变性和坏死程度较轻.结论:丹红注射液可能通过下调ICAM-1表达.减轻炎症反应对移植肾的损伤.  相似文献   

13.
青藤碱对大鼠肾移植急性排斥反应的抑制作用   总被引:7,自引:1,他引:6  
目的探讨青藤碱免疫抑制作用,为其在器官移植免疫抑制治疗上的应用提供实验依据.方法建立48个大鼠原位肾移植急性排斥反应模型(Wistar-SD)分为四组:分别于腹腔注射生理盐水(1 ml/(kg.d))、青藤碱(30 mg/(dg.d))、环孢菌素A(2.5 mg/(kg.d))、青藤碱(30mg/(kg.d)) 环孢菌素A(2.5 mg/(kg.d)),每组12例,随机抽取6例观察受者存活时间,另6例于术后第六天处死,取腔静脉血测尿素氮及肌酐,取移植肾组织标本病检.分析青藤碱协同环孢菌素A对大鼠肾移植受者存活时间、肾功能指标BUN、Cr以及对移植肾组织病理变化的影响.结果青藤碱[30mg/(kg·d)]可延长受体鼠存活时间至(9.67±0.52)d,与环孢菌素A[2.5mg/(kg·d)]联用后可明显延长受体鼠存活时间至18天以上(25.00±4.65)d;青藤碱对移植肾的功能表现出保护作用并改善移植肾组织的病理变化.结论青藤碱对大鼠肾移植的急性排斥反应起到一定的抑制作用,并与亚治疗剂量的环孢菌素A产生协同作用,青藤碱是一种从自然药物中提取的具有开发前景的免疫抑制药物.  相似文献   

14.
目的 探讨肾移植术后首剂治疗剂量他克莫司(FK506)对大鼠肾脏组织和肾脏细胞超微结构的影响,以及地尔硫革(Dil)对FK506肾毒性的防治作用.方法 按公式将肾移植术后FK506、环孢素A(CsA)和Dil的首剂治疗剂最换算成大鼠的治疗剂量.SD大鼠2,4只随机分成对照组、CsA组(25 mg·kg-1·d-1)、FK506组(0.8 mg·kg-1·d-1)和FK506+Dil组(0.8 mg·kg-1·d1及8 mg·kg-1·d-1),用药4周后建立起各组大鼠肾毒性模型.观察各组大鼠的肾功能指标、肾组织的病理改变(HE染色、PAS染色和MASSON染色)、电子显微镜下肾脏细胞内超微结构的改变.结果 CsA组与FKS06组出现明显的血肌酐上升(36.0±2.6)、(34.2±4.5)μmol/L,对照组为(29.2±3.4)μmol/L;肌酐清除率下降(0.63±0.45)、(0.58±0.39)ml·min-1·100 g-1,而对照组、FK506+Dil组为(1.55±0.91)、(1.02±0.62)ml·min-1·100 g-1.两组均可观察到明显的肾小管细胞浊肿及空泡变性,并且出现不同程度的肾内小动脉玻璃样变、肾小管间质纤维化、肾小球足细胞融合、肾小管上皮细胞线粒体肿胀空泡化等病变.FK506+Dil组上述各项指标的变化有所减轻或接近正常.结论 肾移植术后首剂治疗剂量FK506与CsA一样,均可引起大鼠肾脏组织和肾脏细胞超微结构出现病理改变.地尔硫革可以减轻FK506对肾脏组织和细胞的病理损害.  相似文献   

15.
目的:观察小剂量FK506作用下同种脾组织移植对大鼠肝移植术后免疫耐受的影响,探讨其可能的机制.方法:实验分5组(每组大鼠8只),同种肝移植组(A组)以纯系雄性Lewis大鼠为供体、雌性BN大鼠为受体进行同种原位肝移植;同种肝移植 小剂量FK506治疗组(B组)于肝移植术后口服途径给予小剂量FK506(0.25 mg/kg);同种肝脾联合移植组(C组)于肝移植同时移植供体脾脏;同种肝脾联合移植 小剂量FK506治疗组(D组)于肝脾联合移植后口服途径给予小剂量FK506;异体脾组织移植组(E组)于同种原位肝移植同时移植第三品系大鼠脾脏组织,术后进行小剂量FK506治疗.观察各组的存活期,并分析受体脾脏T淋巴细胞对同种抗原的反应性、嵌合体的形成情况以及肝脏病理变化.结果:与其他各组相比,C组大鼠的存活期明显延长;其受体T细胞同种抗原反应性明显降低;受体脾脏中供体阳性细胞明显升高(P<0.01),且在60 d后受体脾脏中供体阳性细胞仍然较高;肝脏病理分析也未见明显排斥反应.结论:小剂量FK506作用下同种脾脏移植能明显诱导受体大鼠原位肝移植术后嵌合体的形成,降低受体T细胞对同种抗原的反应性,促进免疫耐受.  相似文献   

16.
目的:探讨被转化生长因子β活化的长链非编码RNA(LncRNA-ATB)调节微小RNA(miRNA)-200c对肾移植大鼠移植后急性排斥反应(AR)和受体组织炎症反应的影响,分析肾移植AR潜在的分子机制,为临床诊断和治疗AR提供理论参考。方法:30只SD大鼠为供体,30只Wistar大鼠为受体,通过手术将供体肾脏移植到受体大鼠体内,建立肾移植AR模型,将建模成功大鼠(27只)随机分为模型组、LncRNA-ATB短发夹RNA(shRNA)组和LncRNA-ATB-NC组,每组9只。选取10只Wistar大鼠为假手术组。术后2 h,LncRNA-ATB-shRNA组和LncRNA-ATB-NC组大鼠按每只200 μL分别尾静脉注射含LncRNA-ATB-shRNA和LncRNA-ATB-NC的psiCHECK2基因重组质粒脂质体复合物,假手术组和模型组大鼠按每只200 μL尾静脉注射Opti-MEM培养基。干预7 d后,RT-PCR法检测各组大鼠外周血中LncRNA-ATB和miR-200c表达水平,全自动生化分析仪检测各组大鼠血肌酐(Scr)和血尿素氮(BUN)水平,酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组大鼠血清中白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素8(IL-8)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,苏木精-伊红(HE)染色法观察各组大鼠肾组织病理形态表现并对AR进行诊断分级和半定量评分,RT-PCR法和Western blotting法检测各组大鼠肾组织中Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)和核转录因子κB(NF-κB)mRNA及蛋白表达水平。结果:HE染色,与假手术组比较,模型组大鼠肾脏出现AR,表现为炎性细胞浸润、动脉炎症、间质细胞水肿和皮质出血等,LncRNA-ATB-NC组与模型组大鼠肾脏组织病理形态表现相似,LncRNA-ATB-shRNA组大鼠肾组织病理学形态表现较模型组和LncRNA-ATB-NC组均减轻。与假手术组比较,模型组、LncRNA-ATB-NC组和LncRNA-ATB-shRNA组大鼠外周血中LncRNA-ATB表达水平,血清中Scr、BUN、IL-6、IL-8和TNF-α水平,AR半定量评分,肾组织中TLR4、MyD88和NF-κB mRNA及蛋白表达水平均升高(P<0.05),外周血中miR-200c表达水平均降低(P<0.05);与模型组和LncRNA-ATB-NC组比较,LncRNA-ATB-shRNA组大鼠外周血中LncRNA-ATB表达水平,血清中Scr、BUN、IL-6、IL-8和TNF-α水平,AR半定量评分,肾组织中TLR4、MyD88和NF-κB mRNA及蛋白表达水平均降低(P<0.05),外周血中miR-200c表达水平升高(P<0.05);模型组与LncRNA-ATB-NC组大鼠外周血中LncRNA-ATB和miR-200c表达水平,血清中Scr、BUN、IL-6、IL-8和TNF-α水平,AR半定量评分,肾组织中TLR4、MyD88和NF-κB mRNA及蛋白表达水平比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:沉默LncRNA-ATB可以减轻肾移植大鼠移植后AR,抑制受体组织发生炎症反应,其机制可能是通过上调miR-200c,抑制TLR4、MyD88和NF-κB mRNA及蛋白表达而发挥炎症抑制作用。  相似文献   

17.
目的探讨应用小剂量低谷值浓度他克莫司(FK506)治疗终末期糖尿病肾病肾移植患者的疗效和安全性。方法选择因终末期糖尿病肾病行尸肾移植的患者64例,随机分成小剂量低谷值浓度FK506组33例和环孢霉素(CsA)组31例2组,术后根据血糖水平调整胰岛素用量。比较两组急性排斥反应发生率、血糖水平、胰岛素用量的变化及对血压、血脂代谢和肝功能的影响。结果FK506组1年人/肾存活率为96.97%/93.94%,CsA组为96.77%/90.32%。FK506组4例患者(12.12%)发生急性排斥反应,CsA组11例(35.48%)发生急性排斥反应,差异显著(P<0.05)。术后1个月内,FK506组胰岛素平均用量34.35 U/d,CsA组胰岛素平均用量28.15 U/d;术后1年,FK506组胰岛素平均用量14.09 U/d,CsA组胰岛素平均用量13.05 U/d,同期两组胰岛素用量无统计学差异(P>0.05)。FK506组中有21例(63.63%)患者需要降压治疗,5例(15.15%)患者需要降血脂治疗,3例(9.09%)患者出现肝功能损害,需要护肝治疗;CsA组有28例(90.32%)患者需要降压治疗(P<0.05),13例(41.94%)患者需要降血脂治疗(P<0.05),11例(35.48%)患者出现肝功能损害,需要护肝治疗(P<0.05), 均差异显著。结论终末期糖尿病肾病肾移植患者,小剂量低谷值浓度FK506疗效好,副作用小,对糖代谢的影响与CsA相近。  相似文献   

18.
目的 研究供体抗原特异性CD4 CD25 调节性T细胞(Treg)对肾移植后大鼠免疫状态的影响.方法 常规分离Lewis和F344大鼠脾脏淋巴细胞,然后将Lewis大鼠淋巴细胞负载F344大鼠抗原,然后从负载抗原后的Lewis大鼠淋巴细胞悬液中用MACS磁珠分选法分离纯化供体抗原特异性CD4 CD25 Treg细胞,并用流式检测分选Treg细胞纯度以及RT-PCR检测分选细胞的Foxp3基因表达.以F344、Lewis大鼠分别为供、受体建立同种异体肾移植动物模型,将供体抗原特异性Treg细胞经尾静脉注射入受者体内(治疗组,n=8),选取未注射组为对照组(n=8).于术前1d,术后15d检测移植后4组大鼠血清IL-10、IgG,并于术后15d MTT法检测受体脾细胞对供体抗原刺激的反应.结果 所分选之CD4 CD25 Treg细胞成功获得供体抗原特异性,对供体抗原的抑制率(IR)为85.4%,并检测到Foxp3表达.移植前治疗组和对照组大鼠血清中均无法检测到IL-10浓度.术后15d治疗组血清IL-10与对照组比较,明显增高(P<0.01).对照组在术后15d血清IgG浓度已经显著升高,较术前差异有统计学意义(P<0.05).而治疗组术后15d血清IgG浓度与术前相比有所降低,与术前相比差异无统计学意义(P》0.05),但与对照组相比较均差异有统计学意义(P<0.05).治疗组对供体脾细胞的刺激反应也明显低于Ⅰ组(P<0.01).结论 供体抗原特异性CD4 CD25 Treg细胞能显著促进体内IL-10的产生以及抑制免疫球蛋白IgG的产生,并且可特异性抑制受体对供体抗原的免疫反应.  相似文献   

19.
OBJECTIVE: To compare the efficacy and safety of tacrolimus (FK506)- versus cyclosporine (CsA)-based immunosuppression protocol in the treatment of patients with renal transplantation for diabetic end-stage renal disease. METHODS: A total of 64 patients with end-stage renal disease were randomized into FK506 (n=33) and CsA (n=31) group after cadaveric renal transplantation, the former group adopting small-dose FK506 therapy with low trough concentration, and the latter receiving CsA therapy. The dose of insulin was adjusted according to blood glucose level of the patients after the operation. The incidence of acute rejections, blood glucose level, the dose of insulin and changes in blood pressure, lipid metabolism and liver function were compared between the two groups. RESULTS: The 1-year patient/graft survival rates were 96.97%/93.94% in FK506 group and 96.77%/90.32% in CsA group. Four patients (12.12%) developed acute rejection in the FK506 group, while 11 (35.48%) did in the CsA group during the first year after the operation (P<0.05). The dose of the insulin of the FK506 group (34.35 U/d, 14.09 U/d) was not significantly different from that in the CsA group (28.15 U/d, 13.05 U/d) at the first month and 1 year after the operation (P>0.05). One year after the operation, 21 patients (63.63%) required anti-hypertension treatment, 5 (15.15%) needed anti-hyperlipidemia treatment and 3 (9.09%) had abnormal liver function in FK506 group, while in the CsA group, 28 patients (90.32%) needed anti-hypertension therapy, 13 (41.94%) received anti-hyperlipidemia treatment and 11 (35.48%) showed signs of abnormal liver function, with significant differences between the two groups. CONCLUSIONS: Small-dose FK506 therapy with low concentrations is effective in the postoperative management of patients with renal transplantation for diabetic end-stage renal disease, with only mild adverse effect. FK506 is comparable with CsA in terms of the effect on glucose metabolism of the patients.  相似文献   

20.
目的 探讨ICAM-1在大鼠胰腺移植缺血再灌注损伤中的作用。方法 将大鼠随机分为假手术组(对照组)和全胰十二指肠移植组。于再灌注后1h、3h、6h取血测定血清淀粉酶水平,并切取胰腺标本进行组织病理学观察及ICAM-1免疫组化染色。结果 (1)移植组胰腺组织损伤随再灌注时间的延长而加重,血淀粉酶升高,与中性粒细胞浸润直接相关;而对照组胰腺组织损伤不明显.血淀粉酶不升高。(2)移植组各时段ICAM-1均表达,且随再灌注时间的延长表达逐渐增加,对照组ICAM-1不表达。结论 中性粒细胞的活化以及释放出各种蛋白酶和活性因子.是导致胰腺移植缺血再灌注损伤的直接原因。ICAM-1参与胰腺移植缺血再灌注损伤的病理过程。  相似文献   

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