2017-2019年广州市禽类市场H9N2禽流感病毒全基因组遗传进化特征分析

目的对H9N2禽流感病毒分离株进行全基因进化特征分析,为禽流感的防控提供研究数据。方法对24株2017-2019年广州市禽类市场H9N2禽流感毒株进行测序,通过生物信息学软件,分析全基因组遗传进化特点。结果24株H9N2病毒核苷酸同源性为86.20%~100.00%,核苷酸进化距离为0.00~1.54,其中HA基因的核苷酸和氨基酸进化距离变化最大,其次为PB2基因。遗传进化分析显示,所有毒株各基因在系统发生树上聚为一簇,属于G57基因型。分子特征分析显示,所有毒株属于低致病性禽流感病毒,在HA蛋白受体结合位点均发生Q226L突变,提示H9N2更容易识别人源受体。在HA-N166D、PB2-L89V/292V、PB1-I368V、L473V、PA-K356R、S409N、M1-N30D、T215A、NS1-P42S等致病性相关位点上,大部分毒株发生致病性增强突变。耐药性上,所有毒株对神经氨酸酶抑制剂敏感,对烷胺类药物耐药。结论2017-2019年期间广州市禽类市场H9N2禽流感病毒为G57基因型,该基因型病毒普遍发生与人受体结合能力增强的稳定变异,且大部分毒株发生致病性增强的突变,需加强监测。     

禽流感病毒H5N1对卫生工作人员的危险

2003年7月以来,东南亚许多国家发生了高致病性禽流感疫情暴发,包括越南、泰国、印度尼西亚、柬埔寨、老挝、韩国、日本、马来西亚和中国。2006年2月8日,非洲尼日利亚北部也出现了 H5N1禽流感疫情。自1997年发生高致病性禽流感病毒 H5N1感染人以来,以往的禽流感病毒     

1例感染H3N8禽流感病毒危重患儿的集束化管理

总结1例感染H3N8禽流感病毒危重患儿的集束化管理要点：组建多学科救治团队、合理调配护理人力、严格执行标准预防、密切接触者健康管理、给予动态病情监测、抗凝管理、间歇俯卧位通气、限制性液体策略等护理方案。静脉-静脉体外膜肺氧合(VV-ECMO)模式支持23 d后患儿感染指标逐渐好转,肺部炎症减轻,顺利撤离体外膜肺氧合(ECMO)支持。     

人感染H5N1型高致病性禽流感的 临床特征分析

目的 认识人禽流感的临床特征,为人感染H5N1型高致病性禽流感的症状监测和疾病监测的完善提供循证依据。方法 以规定检索词在常用中、英文数据库中检索并严格按照纳入排除标准纳入文献。将纳入文献的研究病例汇集后分析其症状、体征、常见实验室检查、影像学改变及其并发症等临床特征发生的概率。结果 经过严格筛选共纳入文献32篇,其中中文文献11篇,英文文献21篇,汇集研究病例236例。质量评价得分中位数为31分,53.1%的文献质量评价得分30分。人禽流感的症状及体征主要为发热(体温38 ℃)、咳嗽、呼吸频率增快和呼吸困难,实验室检查主要为外周血白细胞数和淋巴细胞绝对数的减少,影像学改变以浸润、实变等肺炎改变为主,重症人禽流感患者最易出现的并发症为急性呼吸窘迫综合征。结论 加强临床医生对人禽流感患者非呼吸系统的临床表现的认识,可提高对禽流感病例早期筛查的准确性。     

用液相芯片方法检测禽流感病毒H5N1亚型的研究

目的基于液相芯片（MASA）技术建立一种对H5N1亚型禽流感病毒进行快速检测的新方法。方法对GenBank上已有H5和N1核酸片段进行比对分析,设计简并引物和探针,将合成的探针与荧光编码微球进行偶联,建立检测方法。利用该方法检测H5N1亚型禽流感病毒和其他常见亚型（H1N1、H2N2、H3N2、H9N2）的标本。结果利用该方法能够特异性地检测出H5N1标本,检测信号具有较高荧光强度,对其他亚型标本的检测则为阴性结果。该方法对H5NI亚型RNA的最低检出量为10pg。结论利用液相芯片技术研制的H5N1亚型禽流感病毒检测方法能够用于禽流感病毒H5N1亚型的快速、灵敏、特异性检测及鉴定。     

H5N1亚型禽流感病毒NS1蛋白研究进展

禽流感（avian influenza ,AI） 为A型流感病毒（avian influenza virus ,AIV）引起的禽类流行性感冒.根据是否引起流感及症状的不同,通常将禽流感分为高致病性（highly pathogenic avian influenza,HPAI）、低致病性（low pathogenic avian influenza,LPAI） 和非致病性禽流感（no pathogenic avian influenza,NPAI）.     

H5N1亚型禽流感病毒抗原成份免疫活性的分析研究

目的 分离H5N1亚型禽流感病毒抗原成份并分析其免疫活性.方法 本研究采用SDS-PAGE和Western-blot这两种方法对H5N1亚型禽流感病毒的抗原成份进行分离分析.结果 我们发现该病毒主要有14种多肽成份,其中有有11种蛋白组成成份被禽流感多克隆阳性血清特异性识别,经免疫酶联反应后,在醋酸纤维膜上可以清晰看到棕色的条带.结论 在14种H5N1亚型禽流感病毒蛋白中有11条具有抗原性和免疫活性.     

2014年浙江省丽水市人感染H7N9禽流感病毒分离株基因特征分析

目的 测定浙江省丽水市1株H7N9禽流感病毒8个基因序列,从分子水平分析其基因特征和遗传变异特点。方法 对人感染H7N9禽流感确诊病例标本在P3实验室进行犬肾传代细胞培养;反转录-聚合酶链反应扩增病毒8个RNA片段后测定基因序列;通过生物信息学软件将8个序列与GISAID和GenBank数据库下载的序列进行多重比对和匹配,发现基因特征,分析病毒关键位点的分子变异情况,最大似然法绘制系统进化树用于基因进化分析。结果 从病例标本中分离到病毒:A/Zhejiang/LS01/2014(H7N9),测序获得8个基因核苷酸全序列。HA裂解位点只包含2个碱性氨基酸,HA蛋白受体结合关键氨基酸位点发生A134T、G186V和Q226L变异;在PB2蛋白上发现E627K突变;M2蛋白上发现耐药位点S31N。LS01株HA基因与A/chicken/Zhejiang/DTID-ZJU01/2013(H7N9)的同源性最高(98.90%),NA基因与A/chicken/Changzhou/C08/2013(H9N9)的同源性最高(98.60%),LS01株其他6个编码内部蛋白的基因均与禽源H9N2株高度同源(99.10%~99.89%)。LS01株HA和NA基因与沪苏浙一带流行的H7N9禽流感病毒株位于同一亚分支,有着直接的进化关系,在相近地域有进化关系较近的禽类流感病毒存在。结论 A/Zhejiang/LS01/2014(H7N9)株8个基因序列均符合禽源H7N9亚型禽流感病毒特征,其病原基因均为禽类来源。HA裂解位点具有低致病性禽流感病毒基因特点,Q226L和E627K位点发生变异可能与其对人具有高致病力相关。     

有效预防人间禽流感(H5N1)的疫苗的研制

WHO在1999年发布的流感大流行应急预案中制定了一系列当人类感染了以前从未在人间传播过的流感亚型得到确认后所应采取的步骤,其中一项步骤就涉及到了开展疫苗生产所需的研究。 作为一项预防措施,WHO正在执行相关的程序,以尽快生产出能够预防在越南发现的禽流感(H5N1)病毒的新     

2014－2017年广州市禽类市场外环境H7N9禽流感病毒监测与遗传进化分析

目的 对广州市禽类市场外环境H7N9禽流感病毒流行情况和基因进化特点进行监测分析,为人感染H7N9禽流感防控提供研究数据。 方法 采集2014 — 2017年广州市禽类市场外环境标本,采用实时荧光定量RT-PCR方法检测H7N9禽流感病毒并绘制血凝素（HA）基因遗传进化树,分析H7N9禽流感病毒流行特点和基因进化特点。 结果 2014 — 2017年累计检测外环境标本28 252份,检出H7N9阳性标本888份,阳性率为3.14%。 检出率2015年最低,2014年最高,分别为1.60%和3.89%。2 — 5月出现H7N9禽流感病毒流行高峰,4月检出率最高为13.00%。 测序分析结果显示,HA基因核苷酸同源性为88.6% ~ 100%,氨基酸同源性为92.0% ~ 100%。 裂解位点分析发现,2017年外环境开始出现高致病性H7N9病毒。 进化分析发现,HA基因呈现多进化分支特点。 结论 2014 — 2017年广州市禽类市场外环境H7N9禽流感病毒持续存在且病毒变异较快,呈现基因多样性。 2017年外环境已发现高致病性H7N9病毒,近年病毒HA基因归属于华南分支,呈现本土化,同时监测到来源于野鸟的另一独立分支的病毒存在,提示加强本地区野鸟H7N9禽流感病毒监测的必要性。      

H6亚型禽流感病毒概述

2013年5月,台湾报道了首例人感染H6N1禽流感病毒病例,该病例也是人感染H6亚型禽流感的直接证据。研究发现,该病毒由在台湾家禽中流行的不同基因谱系的H6N1病毒重配而成,HA蛋白受体结合位点的一些重要氨基酸发生了突变,这些突变可能会增加病毒与人源受体的结合能力并增强该病毒对哺乳动物的致病性。本研究从病原学、流行病学、受体结合蛋白结构等方面对H6亚型禽流感病毒的特征进行了总结和分析,对于H6亚型禽流感的预警和防控工作具有一定的参考意义。     

2例人感染高致病性禽流感诊治经过及文献复习

目的 探索H5N1型人感染高致病性禽流感病例的临床特征及诊治经验.方法 对本院收治的2例H5N1型人感染高致病性禽流感病例的相关资料进行回顾性分析.结果 2例患者均有病死禽接触史,病情进展迅速,较早发生急性呼吸窘迫综合征,治疗上采取以机械通气为主的综合性措施,1例死亡,1例治愈. 结论早期有效的诊治是降低高致病性禽流感病死率的关键.     

人高致病性H5N1亚型禽流感一例临床报告

目的探讨人感染高致病性H5N1亚型禽流感的临床特征及防治手段。方法对确诊的一例人感染高致病性H5N1亚型禽流感的临床资料进行回顾性分析。结果患者为16岁男性,发病前无明确病、死禽接触史,发病后,病变由右下肺片状影迅速蔓延至双肺,且并发纵隔、皮下气肿,发病第5天出现急性呼吸窘迫综合征（ARDS）,治疗上采用以机械通气为主的综合治疗措施。发病第6天,中国疾病预防控制中心对患者咽试子标本采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）、实时荧光定量PCR（Real—time PCR）方法检测,提示A／H5／N1病毒核酸呈阳性并分离出禽流感（H5N1）病毒。从发病至死亡约10d。结论人感染高致病性亚型H5N1禽流感是一种致命的传染病,如病变广泛,出现ARDS,预后不佳。     

9例人感染H7N9禽流感病例流行病学特征分析

目的 分析浙江省温州市人感染H7N9禽流感病例流行病学特征,研究其流行特点、规律以及危险因素。方法 收集2015年1-4月确诊病例的流行病学以及活禽市场外环境标本结果等资料。结果 H7N9禽流感病例男3 例, 女6例;发病以高年龄为主(中位数为51岁);主要集中在瑞安市;职业以家务和个体经营户为主;发病主要集中在春节活禽交易频繁期间;病例以发热为主要首发症状,病情进展迅速;治愈组比死亡组更早地就诊、确诊和使用达菲。所有病例均有活禽或农贸市场暴露史;可疑暴露农贸市场外环境样本H7亚型禽流感病毒阳性率39.88%,可疑暴露非农贸市场外环境样本阳性率0,H7亚型禽流感病毒来源活禽交易的农贸市场可能性较高;病例可疑暴露农贸市场外环境样本阳性率较非可疑暴露农贸市场高,差异有统计学意义(2=40.34,P 0.05)。农贸市场外环境H7阳性率不同月份有差异,1-3月H7阳性率较高;随着温度的上升,病毒含量下降,4月外环境H7阳性率较低,差异有统计学意义(2=27.33, P 0.05)。温州市采取主要区域活禽市场暂停交易后,没有报告新发病例,农贸市场外环境标本H7阳性持续下降。结论 人感染H7N9禽流感患者病情进展迅速,在发病早期及时就诊、确诊和治疗,预后良好;活禽交易的农贸市场的禽类暴露是感染的危险因素;活禽市场采取休市措施能明显控制疫情发展;病例在人群中散发为主,暂无充分证据支持病毒的人与人传播。     

浙江省德清县5例人感染H7N9禽流感病例流行特征分析

目的 对浙江省德清县2014年报告的5例人感染H7N9禽流感病例进行流行特征分析,为进一步科学防控人禽流感提供依据。方法 对确诊病例和病例的密切接触者进行个案调查,对病例的呼吸道标本进行人感染H7N9禽流感病毒核酸检测。结果 德清县共确诊人感染H7N9禽流感病例5例,无死亡病例。重症病例主要表现为重症肺炎;分布在2个乡镇;年龄中位数为62岁(39~62岁);2/5的病例有慢性基础性疾病;5例病例发病与活禽交易市场暴露有关,所有病例的密切接触者均无流感样症状,未发现人传人的证据。结论 早期发现和救治是提高患者预后的关键,对病例采取隔离治疗、密切接触者进行医学观察、疫点终末消毒、停止活禽交易等综合措施后,疫情得到有效控制。     

杭州市上城区8例人感染H7N9禽流感确诊病例流行病学分析

目的 进一步探索人感染H7N9禽流感流行病学特点,为今后及其他地区防控工作提供借鉴。 方法 对杭州市上城区8例人感染H7N9禽流感确诊病例进行流行病学分析。 结果 8例病例发病时间为2013年3月20日至4月16日,其中男性患者7例,年龄中位数为70.5岁,病例发病至就诊时间间隔中位数为2.5 d,流行病学调查发现8例病例均有活禽市场接触史,共追踪管理密切接触者187人,其中医务人员密切接触者133人,未发现二代感染者。 结论 城区老年男性是人感染H7N9禽流感感染的高发人群,该疾病尚不存在人际间传播可能。早发现、早报告、早诊断、早治疗,是有效防控、提高治愈率、降低病死率的关键。规范活禽交易是防控城区人感染H7N9禽流感的关键环节。规范医疗机构传染病预检分诊工作,提高医务人员标准防护意识,是防控工作重点。     

人感染高致病性H5N6禽流感病毒的分子生物学特征

目的分析2014-2015年3例新型人感染高致病性禽流感(HPAI)H5N6毒株的血凝素(HA)与神经氨酸酶(NA)基因序列,探讨该病毒的遗传变异及分子生物学特征。方法收集Gen Bank、全球共享禽流感数据倡议组织(GISAID)及浙江大学传染病诊治国家重点实验室提供的H5N6病毒基因序列,利用生物信息软件MEGA6.0及Net Nglyc服务器对基因序列进行遗传进化和分子变异特征分析。结果 3例感染HPAI-H5N6患者毒株的HA与NA氨基酸序列的同源性分别为96.5%~98.7%和90.1%~98.2%;HA氨基酸序列比对分析发现A/Guangzhou/39715/2014(H5N6)和A/Sichuan/26221/2014(H5N6)与A/duck/Eastern China/1111/2011(H5N2)同源性最近,分别为97.7%和98.5%;A/Yunnan/0127/2015(H5N6)与A/muscovy duck/Vietnam/LBM631/2014(H5N1)同源性最近(97.2%);NA氨基酸序列比对分析发现A/Guangzhou/39715/2014(H5N6)和A/Yunnan/0127/2015(H5N6)与A/swine/Guangdong/K6/2010(H6N6)同源性最近,分别为97.2%和97.6%,A/Sichuan/26221/2014(H5N6)与A/duck/Guangdong/S3073/2010(H6N6)同源性最近(97.4%);进化树分析显示3例患者毒株处于2个不同的分支;HA基因包含有S137A、T160A等突变,糖基化分析显示有6~7个N-糖基化位点。结论新型人感染HPAI-H5N6病毒是一种重组病毒,其HA基因来源于亚洲禽类H5亚型,NA基因来源于亚洲禽类H6N6;HA基因位点突变及N-糖基化改变可能有助于增强对人类的感染。     

一例人感染高致病性禽流感病毒(H5N1)的流行病学调查

目的通过对1例人感染高致病性禽流感病毒(H5N1)的调查分析,为制定人禽流感预防控制措施提供科学依据。方法采用流行病学调查、临床检查、血清学检查和 RT-PCR、 Real-time PCR 法进行分析和诊断。结果发现1例人感染高致病性禽流感病毒(H5N1),经救治无效因呼吸衰竭死亡。患者有明确的病、死禽接触史。采用隔离治疗、个人防护、医学观察、消毒等措施,疫情得到控制,未出现二代病例。结论需加强禽流感疫情监测,采取综合防控措施,预防疫情再次发生。