混合培养自体与异体表皮细胞的移植方法

将2．7－二氧二氢荧光深外标记L－929小鼠成纤维细胞膜表面．用ACAS570测定细胞内自由基的含量，以对钛涂层317L不锈钢材料的细胞毒性进行实验研究．结果：钛涂层317L不锈钢材料和纯钛材料接触培养的L－929小鼠成纤维细胞内荧光含量较低，显示细胞内自由基含量较低，317L不锈钢材料组的荧光含量较高，与前两组比较均有显著性差异（P＜0.01）．上述结果表明钛涂层317L不锈钢材料的细胞毒性远低于317L不锈钢材料．与纯钛材料相似，作为口腔种植材料是安全的．     

评价细胞毒性方法的探讨

目的:探讨评价细胞毒性的方法.方法:分别采用MTT法、MTS法和传统的血球计数法比较医用高分子材料的浸提液对小鼠成纤维细胞(L-929)相对增殖率的影响.结果:采用3种测定方法测定此类医用高分子材料,均呈现出高的细胞相对增殖率,其细胞毒性为1级,即无细胞毒性.结论:在常规细胞毒性测试法的基础上采用MTT法和MTS法,能更快捷准确地测定细胞的增殖反应.MTS法与MTT法相比较,其灵敏度更高,操作更简便.     

高密度壳聚糖对L-929细胞的毒性研究

目的:研究高密度壳聚糖(high density chitosan,HDC)对小鼠L-929细胞的毒性,以期为其临床安全应用提供依据.方法:观察不同浓度HDC浸提液对体外培养L-929细胞形态的影响,四甲基偶氮唑蓝(methlthiazolyl tetrazolium,MTT)实验评价HDC对L-929细胞生长和增殖的影响,流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测HDC浸提液对L-929细胞凋亡的影响,单细胞凝胶电泳(single cell gel electrophoresis,SCGE)检测不同浓度HDC浸提液对培养的L-929细胞DNA分子损伤的影响.结果:HDC浸提液对体外培养的L-929细胞形态无明显影响,对细胞生长和增殖无明显抑制作用,不同浓度材料浸提液的细胞毒性均为0-1级;FCM示凋亡率随浸提液浓度升高而升高,但不明显;SCGE结果显示HDC对L-929细胞的DNA无明显损伤作用.结论:HDC具有良好的细胞相容性和分子相容性,可为临床的安全应用提供依据.     

PBS/PLA共混材料的制备及其细胞相容性研究

目的 本论文对聚丁二酸丁二醇酯/聚乳酸(PBS/PLA)合金作为胸骨固定材料的细胞相容性和细胞毒性进行了深入地研究.方法 首先采用CCK-8试剂盒表征PBS/PLA合金浸提液对L929细胞生长增殖的影响;其次将细胞直接种于PBS/PLA材料的表面评价该合金与L929细胞的相容性情况;最后利用PE,PVC作为对照材料,评价合金对细胞的毒性级别.结果 和结论PBS/PLA合金对于L929细胞具有良好的细胞相容性且无明显细胞毒性,在其表面的繁殖塑料甚至优于医用聚乙烯材料.证明PBS/PLA合金能够作为胸骨捆扎固定材料.     

义齿抗菌性能的研究现状

目的 通过载银纳米二氧化钛义齿基托材料体外细胞毒性的测定,初步评价载银纳米二氧化钛的生物安全性.方法 采用噻唑蓝(MTT)比色法检测载银纳米二氧化钛义齿基托材料(载银纳米二氧化钛浓度30 g/L)100%、50%浸提液培养小鼠成纤维细胞L-929细胞2、4、7 d后吸光度值(OD值),并计算细胞相对增殖率,以6级毒性分类法评级,采用单因素方差分析法对各实验组及对照组的OD值进行统计学分析,显微镜观察细胞的生长状况.结果 实验组各观察期L-929细胞生长良好,形态正常;载银纳米二氧化钛抗菌剂(<30 g/L)的义齿基托的细胞毒级别为0级.结论 载银纳米二氧化钛抗菌剂的义齿基托无细胞毒性.     

颜面赝复体粘接剂的体外细胞毒性

目的:利用体外细胞培养技术,对有机硅改性聚丙烯酸酯类颜面赝复体粘接剂-1(FPSA-1)的细胞毒性进行评价.方法: 采用MTT法评价FPSA-1的细胞毒性.利用体外培养的小鼠肺成纤维细胞(L-929),在培养液中分别添加500,750 mL/L FPSA-1浸提液,于加样后2,4,7 d用MTT法显色,用多道扫描酶标仪测A490nm值,计算相对增殖率,对FPSA-1的细胞毒性进行评价.结果: 随着时间推移,不同浓度的FPSA-1浸提液对L-929细胞增殖均无明显作用(P>0.05),各浓度FPSA-1浸提液加样后2,4,7 d之间差异无统计学意义(P>0.05),提示L-929细胞增殖与浸提液浓度无明显相关性,FPSA-1的细胞毒性分级为1级.结论: FPSA-1无明显细胞毒性,具有良好细胞相容性,是一种有发展前景的颜面赝复体粘接材料.     

聚L-乳酸/聚L-乳酸接枝的羟基磷灰石复合材料的生物相容性

目的： 研究新型生物降解可吸收材料聚L-乳酸/聚L-乳酸接枝的羟基磷灰石复合物（PLLA/PLLA-gHAP）的生物相容性,为其应用提供生物学依据。方法： 将96孔板上培养的L929细胞分为PLLA/PLLA-gHAP组、PLLA组、阴性对照组（空白培养液）及阳性对照组（含苯酚培养液）4个组,不同组材料浸提液与细胞共培养24、48和72h,以MTT法检测材料对L929细胞活性的影响;将L929细胞接种于被覆PLLA/PLLA-gHAP材料的盖玻片表面上,于1、2和3 d用倒置显微镜观察细胞形态学改变;将PLLA/PLLA-gHAP材料浸提液对小鼠进行腹腔内注射,观察小鼠的急性毒性反应,计数鼠骨髓多染红细胞微核率以检测遗传毒性作用;将PLLA/PLLA-gHAP板植入兔皮下,于2周、3个月和6个月检测兔血液学指标改变,光镜观察植入物周围组织病理学变化。结果：PLLA/PLLA-gHAP材料浸提液对L929细胞的增殖率(RGR)和细胞毒性分级（CTS）的影响与阴性对照组比较差异无显著性（P>0.05）,细胞在材料表面生长良好;材料浸提液对小鼠无急性毒性及遗传毒性（微核率0.24%）;材料在动物体内埋植后,早期组织内有淋巴细胞、巨噬细胞浸润,纤维膜形成,6个月时纤维膜基本消失,炎症反应明显减轻。结论：PLLA/PLLA-gHAP材料具有良好的生物相容性。     

新型医用无镍不锈钢（BIOSSN4）的细胞毒性评价

目的：评价新型医用无镍不锈钢（BIOSSN4）的细胞毒性。方法：将BIOSSN4的浸提液与体外培养的小鼠成纤维细胞L929接触后,进行MTT实验来评定材料的细胞毒性,并与传统的医用316L不锈钢的生物学性能相比较。结果：BIOSSN4对细胞增殖的抑制作用小于316L不锈钢组,统计学分析结果显示：两种金属材料与阴性对照组的吸光度值之间的差异无统计学意义（P〉0.05）,与阳性对照组之间的吸光度值之间的差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：BIOSSN4无镍不锈钢具有微弱的细胞毒性,符合临床应用要求,为其应用提供了一定的生物学依据。     

纳米羟基磷灰石的分子生物相容性研究

目的 通过对纳米羟基磷灰石(nanosize-hydroxyapatite,nHA)的毒性检测,初步探讨生物材料分子生物相容性研究的必要性.方法 通过形态学观察、四甲基偶氮唑蓝(methl thiazolyl tetrazolium,MTT)实验及彗星电泳检测nHA的毒性.结果 倒置显微镜观察显示不同浓度的 nHA浸提液对体外培养细胞的形态无明显影响;MTT实验表明nHA对细胞生长和增殖无明显抑制作用,不同浓度浸提液的细胞毒性均为1级,无毒,与生长良好的L-929细胞形态观察结果相符合;彗星电泳结果显示随 nHA浸提液浓度和时间的递增彗星率逐渐增大.结论 nHA具有良好的细胞相容性,但对L-929细胞DNA可能有损伤作用,提示可能有遗传毒性作用,因此检测纳米材料分子生物相容性非常必要.     

口腔正畸用磁块镀氮化钛膜后细胞毒性研究

目的：评价正畸用磁块表面镀氮化钛膜后的细胞毒性。方法：选用L-929小鼠成纤维细胞，采用MTT比色法，以镀镍膜、未镀膜磁块的浸提液作为对照，对镀TiN膜磁块的浸提液进行体外细胞毒性研究。结果：在镀TiN膜磁块的浸提液中，L-929小鼠成纤维细胞的增殖率高于90％，所测试材料的浸体液无细胞毒性。结论：磁块表面镀TiN膜后，有良好的细胞相容性。     

具有控释性能的可注射牙槽骨修复材料中β-磷酸三钙的体外细胞毒性研究

目的 利用体外细胞培养技术,对具有控释性能的可注射牙槽骨修复材料中β-磷酸三钙的细胞毒性进行研究.方法 采用体外培养的小鼠成纤维细胞(L-929),在培养液中分别添加不同浓度的β-磷酸三钙浸提液(原液及2、4、8、16倍稀释液),于接种后 72 h 通过 MTT 法显色,在酶标仪 490 nm 波长处测定吸光度值,计算相对增殖率(RGR),对β-酸三钙的细胞毒性进行评价.结果 各组的 RGR 值均≥80%,各浓度组之间差异无显著性意义(P>0.05),提示L-929细胞增殖与β-磷酸三钙浸提液的浓度无明显相关,不同浓度浸提液的细胞毒性为0～1级.结论 具有控释性能的可注射牙槽骨修复材料中β-磷酸三钙对细胞的生长和增殖无明显抑制作用,无明显的细胞毒性.     

离子束辅助沉积氮化钛陶瓷薄膜的生物相容性研究

采用离子柬辅助沉积(Ion Beam Assisted Deposition)方法在医用不锈钢317L表面制备氮化钛(TiN)陶瓷薄膜。并利用AES和XRD表征了薄膜的成分和相组成。采用显微划痕仪检测了薄膜附着力。运用电化学腐蚀方法测试了薄膜在37C的Hank’s模拟体液中的耐腐蚀性能。并通过成纤维细胞、骨髓细胞体外培养方法考察了薄膜表面的细胞相容性。结果表明：沉积TiN薄膜后，材料表面结构和性能发生明显改变。在37C的Hank’s模拟体液中，TiN薄膜样品的稳定自腐蚀电位和孔蚀击穿电位均高于317L，表现出更好的耐全面腐蚀和孔蚀性能。且离子束辅助沉积制备的TiN薄膜无明显细胞毒性，比317L具有更好的细胞相容性，适当的微粗糙表面更有利于细胞的粘附生长。     

新型医用钛合金Ti-25Nb-10Ta-1Zr-0.2Fe的细胞毒性研究

目的:比较传统医用钛合金Ti-6Al-4VELI(TC4ELI)和Ti-6Al-4V(TC4)、纯钛(Ti)以及新型低模量无Al,V钛合金Ti-25Nb-10Ta-1Zr-0.2Fe(TNTZ)4种金属材料的细胞毒性。方法:采用4种合金的浸提液培养L929细胞,另设空白对照组和阳性对照组。倒置相差显微镜下观察细胞形态及数量,MTT法测定各组细胞培养1,3,5 d的吸光度值,并计算细胞的相对增殖率,判断细胞毒性的级别。流式细胞仪测定不同浸提液处理的L929细胞不同增殖周期时相的DNA百分含量,计算S期细胞比率。结果:TNTZ处理组细胞3个时间点的相对增殖率分别为(93.7±0.8)%,(100.6±0.4)%,(106.4±0.3)%;培养1 d时细胞毒性分级为1级,培养3,5 d细胞毒性均为0级;与TC4ELI,TC4,Ti的细胞毒性分级相同。流式结果显示4种材料处理细胞后细胞S期细胞比率大小为Ti>TNTZ>TC4>空白对照>TC4ELI,但差异无统计学意义(P>0.05),均不抑制细胞增殖。结论:TNTZ合金不影响L929细胞的形态和增殖,与其他3种金属的细胞毒性级别相同,均为0级,符合临床应用标准,人体应用具有安全性。     

磁性附着体中铁素体不锈钢引起小鼠成纤维细胞L929凋亡的研究

目的：研究磁性附着体中铁素体不锈钢材料引起的小鼠成纤维细胞L929凋亡情况，初步检测其生物相容性。方法：应用不同浓度的铁素体不锈钢材料浸提液处理L929细胞，流式细胞仪检测其凋亡率及细胞周期分期，透射电镜观察其凋亡形态。结果：随着浓度的增加，铁素体不锈钢材料引起的细胞凋亡率增加，但对细胞周期无特异性影响。结论：铁素体不锈钢材料符合临床应用的生物相容性要求，可应用于新型磁性附着体之中。     

不锈钢表面钽沉积生物相容性的研究

目的:验证医用不锈钢316表面钽沉积后生物相容性的变化。方法:在医用不锈钢316表面进行钽沉积,之后将大鼠骨髓基质干细胞分别植入钽沉积表面和316基底表面,分别进行X射线衍射检测材料表面钽沉积量、两种材料表面细胞形态观测、细胞黏附率检测、碱性磷酸酶活性检测。结果:经X射线衍射检测钽有效的沉积于医用不锈钢316表面;细胞于两种材料表面生长良好;24 h细胞黏附率钽沉积表面高于316不锈钢表面(P0.05);经过5 d连续细胞培养,钽沉积材料表面大鼠骨髓基质干细胞的活性高于316不锈钢材料表面(P0.05)。结论:316医用不锈钢经过钽沉积后其表面生物相容性高于其本来材料。     

两种牙科金属材料细胞毒性及对L929细胞Bax和Bcl-2表达的比较

目的 :通过检测牙科常用金合金及镍铬合金的细胞毒性及两种金属材料浸提液对小鼠成纤维细胞L929凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2表达的影响,来研究金属离子与L929细胞凋亡的关系,探讨在分子水平上评价材料生物相容性的方法。方法:应用金合金(A组)及镍铬合金(B组)的浸提液培养小鼠成纤维细胞L929,以含10%胎牛血清的RPMI1640培养基做为阴性对照(C组),采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)评价2种金属材料的细胞毒性,采用免疫组化法及ELISA法(酶联免疫吸附实验)检测2种金属材料对L929细胞Bax和Bcl-2蛋白表达的影响。结果:2种材料的细胞毒性均为0级;镍铬合金组Bax/Bcl-2表达的比值高于阴性对照组及金合金组,差异有统计学意义。结论:镍铬合金浸提液可引起小鼠成纤维细胞L929凋亡相关蛋白Bax表达及Bax/Bcl-2比值增高,这一结果可能为将来在分子水平上建立评价生物材料生物相容性的方法提供新的思路。     

两种牙科材料对人胚胎干细胞来源成纤维细胞的细胞毒性研究

目的:观察口腔常用材料氢氧化钙(calcium hydroxide,CH)和复合树脂对人胚胎干细胞来源成纤维细胞(embryo body fibroblasts-H9,EBf-H9)、原代培养人牙髓细胞(human dental pulp cells,hDPCs)及小鼠成纤维细胞L929的细胞毒性,探讨使用EBf-H9评价牙科材料生物安全性的可行性。方法:诱导人胚胎干细胞(H9)分化为EBf-H9,原代培养hDPCs,并经免疫细胞化学染色鉴定。用细胞计试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)检测比较梯度浓度CH和复合树脂浸提液对EBf-H9、hDPCs和L929细胞的细胞毒性。结果:CH或复合树脂分别作用24 h和48 h(或72 h)之后,L929细胞的存活率显著低于EBf-H9和hDPCs(P<0.05),但EBf-H9和hDPCs的细胞存活率没有统计学差异(P>0.05)。结论:对于CH和复合树脂的毒性反应,L929细胞与hDPCs有较大差异,EBf-H9比L929细胞更接近hDPCs的反应,提示在牙科材料生物安全性评价中,人胚胎干细胞来源成纤维细胞具有替代现有细胞检测模型的潜力。     

胶原/聚乙烯醇凝胶的制备及生物相容性评价

目的:制备胶原/聚乙烯醇复合凝胶支架并初步评价其细胞相容性以及生物相容性。方法:胶原和聚乙烯醇在液态下混合,冷冻干燥后制备出胶原/聚乙烯醇复合凝胶支架,将L-929细胞接种在凝胶表面,在倒置相差显微镜下计数贴壁细胞数量并在电镜下观察细胞形态。以MTT法评价凝胶的细胞毒性并将凝胶种植在SD大鼠大腿肌肉中,在术后2、8、12周取材,通过大体标本以及组织学观察,评价材料的组织相容性。结果:L-929细胞接种后可黏附在胶原/聚乙烯醇复合凝胶支架表面,随时间延长,黏附细胞数目增多,不同材料表面黏附细胞数量具有显著性差异(P<0.01)。MTT法表明细胞毒性0～Ⅰ级,在材料植入肌肉后早期有炎性浸润及纤维包膜形成,随植入时间延长,炎性反应减轻,包膜变薄。结论:胶原/聚乙烯醇复合凝胶支架具有良好的细胞相容性和组织相容性。     

中药七叶一枝花类对L-929细胞的细胞毒活性研究

以L-929细胞(小鼠成纤维细胞)为实验用靶细胞观察七叶一枝花类中药的体外直接抑制肿瘤细胞的能力。结果表明,它对L-929细胞有很强的细胞毒活性,其活性随着浓度增大而     

镍铬合金的细胞毒性及对L929细胞Bax和Bcl-2表达的影响

目的 研究镍铬合金金属离子与L929细胞凋亡的关系,探讨在分子水平上评价材料生物相容性的方法. 方法 应用镍铬合金的浸提液培养小鼠成纤维细胞L929,以含10％胎牛血清的RPMI1640培养液做为阴性对照,采用MTT法(四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法)评价镍铬合金的细胞毒性,采用免疫组化法检测其对L929细胞Bax和Bcl-2蛋白表达的影响. 结果 镍铬合金的细胞毒性为0级;镍铬合金组Bax表达增高(t=2.841,P＜0.05);镍铬合金组Bax/Bcl-2表达的比值高于阴性对照组(t =5.365,P＜0.05). 结论 镍铬合金浸提液可引起小鼠成纤维细胞L929凋亡相关蛋白Bax表达增高,可能通过线粒体通路诱导细胞凋亡.