内陆嗜人按蚊与海岛嗜人按蚊幼虫对盐水耐受性比较

目的了解内陆嗜人按蚊与海岛嗜人按蚊对盐水的耐受能力有无差异。方法将四川、辽宁嗜人按蚊和珠海横琴岛嗜人按蚊幼虫分别放入6个不同浓度的盐水中孵化，观测不同浓度盐水中蚊卵孵化率及幼虫发育情况。结果3种嗜人按蚊在不同浓度盐水中均可孵化；随着盐浓度的增高，幼虫死亡率上升，蛹化率下降；1％以下盐浓度3种嗜人按蚊幼虫均可发育至蛹期，并能正常羽化为成蚊；按蚊在1．5％盐浓度水体中均不能由卵发育至成蚊。结论海岛嗜人按蚊与内陆嗜人按蚊幼虫对盐的耐受性无差别，都能适应一定盐度和对盐的耐受程度，其幼虫均具有较强的渗透调节机制和适应能力。     

豫南罗索线虫感染按蚊和脉毛蚊的实验研究

脉毛蚊属的银带脉毛蚊对豫南罗索线虫很敏感,在蚊幼虫与寄生前期线幼虫之比为1:1时,感染率高达94.9％。受试的8种按蚊对豫南罗索线虫敏感度有很大差异,在蚊幼虫与线幼虫之比为1:5时,大劣按蚊的感染率高达89.7％,斯氏按蚊和多斑按蚊的感染率分别为44.4％和31.3％,但线幼虫在大劣按蚊体内有88.8％发生黑化死亡,在多斑按蚊体内有发育迟缓现象。其余5种按蚊对此线虫均不敏感。     

球型芽孢杆菌2362株对两种按蚊幼虫杀伤效果的比较研究

摘要：目的了解球形芽孢杆菌2362株（Bs）对大劣按蚊及斯氏按蚊幼虫的毒力作用,为生物杀虫剂的使用提供科学依据。方法利用Probitan~ysis方法在实验室对球型芽孢杆菌2362株杀伤大劣按蚊和斯氏按蚊幼虫的效果进行了生物测定,并对两种按蚊的敏感性进行了比较研究。结果球形芽孢杆菌2362株对大劣按蚊幼虫48h和72h的LC50值为（0．0151±0．0029）m朗和（O．0110±0．0014）m胡,LC95值为（O．0960±O．0099）mg／1和（O．0529±0．0193）ml;对斯氏按蚊Hot株幼虫48h和72h的LC值为（O．0184±0．0015）mg／l和（0．0162±0．0014）mg／1,LC95值为（0．0850±0．0219）mg／1和（0．0620±0．0114）rag／1。结论球形芽孢杆菌2362株对大劣按蚊和斯氏按蚊均有较好的杀伤效果,大劣按蚊对Bs的敏感性似较斯氏按蚊幼虫略高,且作用持续时间也稍长。     

珠海横琴岛嗜人按蚊盐水耐受性试验

目的 了解横琴岛嗜人按蚊盐水耐受特性。方法 将蚊卵分别放人不同盐度的水中孵化；观察不同盐度水中卵的孵化率、幼虫成活率及成蛹情况。结果 26‰以下盐水中生长的嗜人按蚊与蒸馏水中的无明显差异；10‰盐水中仍有部分的幼虫可以发育成蛹；一、二龄期的幼虫能适应不同盐度，但三、四龄期的幼虫在10‰和15‰的盐水中出现大量死亡。结论 珠海横琴岛嗜人按蚊有一定的盐水耐受力。     

海南省大劣按蚊实验室自然交配的驯化研究

目的 建立实验室大劣按蚊自然交配繁殖种群,为同类研究提供依据。方法 将野外捕捉并在实验室人工交配繁殖至第61代的大劣按蚊,按不同雌雄比例先后顺序置于大、中、小三种不同型号的蚊笼中喂养、驯化、观察产卵情况并计算产卵数和孵化率。结果 在大、中、小蚊笼内的分别驯化至第15、10和18代时成蚊卵的孵化率各达到82％、83．4％和80．7％,成功建立小蚊笼自然交配的大劣按蚊种群。结论 经实验室驯化的大劣按蚊能够自然交配、产卵、繁殖,有助于建立实验室自然种群。     

青蒿琥酯对食蟹猴疟原虫在按蚊体内发育的影响

目的 观察青蒿琥酯(Artesunste)对食蟹猴疟原虫在大劣按蚊体内发育的影响。方法 受疟原虫感染实验猴在肌注和静注青蒿琥酯各60mg之前、之后0h、2h各感染一批大劣按蚊；另取部分药前感染的大劣按蚊在感染后第3天和10．5天吸药血，另设一对照组吸正常猴血。各组实验蚊均在感染后第9天解剖蚊胃和第13天解剖涎腺，观察疟原虫在蚊体内发育情况。结果 药前组和药后0h组的蚊胃及唾腺感染阳性率均为100％，两组蚊胃卵囊平均密度、卵囊平均大小、子孢子平均感染度都无显性差异(P＞0．5)；药前组和药后2h组蚊胃卵囊平均密度有显性差异(P＜0．5)；大劣按蚊感染后第3天和10．5天吸药血组和吸正常血组，蚊胃卵囊平均密度、卵囊大小、子孢子平均感染度都无显性差异(P＞0．1，P＞0．5)。结论 青蒿琥酯对食蟹猴疟原虫在蚊体内的配子生殖、孢子增殖及子孢子进入唾腺无直接的抑制作用。     

大网孔药帘毒杀大劣按蚊的实验室观察

用溴氰菊酯25mga．i／m2和二氯苯醚菊酯500mga．i／m2浸泡两种孔形的棉纺纱大网孔窗帘布．方形孔径为4×4mm和4×7mm，圆形孔径为4×5mm。药帘横贴在试验笼的通道笼与诱饵笼之间，然后放进实验室饲养的大劣按蚊，观察其行为反应和药效作用。结果，两种药浸泡帘布后30－385天12次试验，大劣按蚊平均死亡率为94％以上，最后一次试验死亡率为84％以上。大劣按蚊吸血率对照笼为75％，实验笼溴氰菊酯为5．5％，二氯苯醚菊酯为9．4％。校正防止吸血率分别为92．8％和88．0％（P＞0．05）。两种孔形的帘布浸药后对大劣按蚊均具良好的防护作用，可在现场应用。     

海南省疟疾暴发点与高发病村庄媒介按蚊调查

目的：了解目前我省疟疾暴发点与高发病村介媒介按蚊种群密度与分布及其生态习性。方法：采用人诱与牛诱半通宵捕蚊法调查。结果：在山林区高发病村庄,捕获大劣按蚊和微小按蚊点,分别占捕蚊点的４２．９％和５７．１％;在平原丘陵区暴发点,均捕获微小按蚊,无捕获大劣按蚊。其中人诱捕大劣按蚊、微小按蚊、中华按蚊和吉甫按蚊数,分别占捕蚊总数的９．９％、６．９％、５４．５％和２．０％;牛诱捕获上述４种按蚊却分别占捕蚊总     

大劣按蚊实验室养殖的研究

大劣按蚊(Anopheles dirus)是东南亚及我国海南岛等山林地区的重要传疟媒介,是我国传疟媒介按蚊中,自然感染率最高的一种。它的自然子孢子率很高。在海南岛的自然感染率(平均从2.2％～6.1％)。国外报导的自然感染率(0.7％～8.7%。)云南亦属疟疾流行区。为了了解大劣按蚊在云南疟疾流行所起的作用,1981年先后三次从四川医学院及广西医学院引进该蚊种进行了大劣按蚊实验室品系的驯化和养殖工作,以备做云南省疟原虫的感染试验。观察疟原虫在按蚊体内发育的生物学研究。     

AdPPO4基因部分序列的cDNA克隆与序列分析

目的克隆大劣按蚊(An dirus)前酚氧化酶(prophenoloxidase,PPO)基因部分序列.方法根据已报道的多种昆虫以及冈比亚按蚊PPO基因编码的保守氨基酸序列设计简并引物,以大劣按蚊幼虫总RNA为模板进行RT-PCR扩增,目的片段经TA克隆后测定其核苷酸序列,然后进行序列查询与比对.结果从大劣按蚊幼虫中获得的PPO4基因(AdPPO4)部分序列长597 bp,编码199个氨基酸;AdPPO4与冈比亚按蚊PPO4基因的核酸和氨基酸序列同源性分别达84%和90%.结论从大劣按蚊幼虫中成功地克隆出了AdPPO4基因的部分序列,与冈比亚按蚊PPO4基因具有很高的同源性.     

疟疾媒介嗜人按蚊对溴氰菊酯的抗药性潜力

目的：研究应用溴氰菊酯浸泡蚊帐时疟疾媒介嗜人按蚊对杀虫剂产生抗药性的潜力，方法：交配后3－5d龄的的雌性嗜人按蚊通过溴氰菊酯药帐吸豚鼠血，控制蚊虫48h死亡率于50％左右，存活蚊产卵并按常规方法饲养传代，连续选育18代，每两对幼虫及成蚊进行敏感度测定，求出幼虫半数致死浓度（LC50）、成蚊半数击倒时间（KT50）、成半数致死时间（LT50），并计算各自的抗性指数。结果：选育过程中按蚊幼虫抗性指数均小于2．0，成蚊抗性指数也小于2．0，结论：模拟溴氰菊酯浸泡蚊帐条件下嗜人按蚊对溴氰菊酯产生抗药性的潜力小，提示局部选择性应用菊酯杀虫可能对媒介按蚊的抗性抗压力较小，可延长菊酯杀虫剂使用寿命。     

大劣按蚊卵黄蛋白原cDNA的克隆及转录水平研究

目的克隆大劣按蚊卵黄蛋白原c DNA,进行序列分析,并研究该基因在不同蚊期的转录水平变化。方法首先提取大劣按蚊总RNA,反转录成c DNA;然后设计昆虫卵黄蛋白原简并引物,以该c DNA为模板进行PCR扩增和测序,对所获取的序列进行生物信息学分析;最后利用实时荧光定量PCR方法检测卵黄蛋白原基因在蚊卵、幼虫、蛹和成蚊各时期的转录水平变化。结果 PCR成功扩增出了清晰的单一目的条带,经测序为一段1 071 bp的序列,BLAST比对分析显示该序列与浅色按蚊、库态按蚊和斯氏按蚊的卵黄蛋白基因同源性高达90%,与冈比亚按蚊、微小按蚊和美彩按蚊的同源性达89%。对大劣按蚊各时期卵黄蛋白原转录水平的研究结果显示,4 d龄按蚊卵黄蛋白原m RNA水平是3 d龄按蚊的15.2倍,而吸血后卵黄蛋白原m RNA水平高效上调,是未吸血组的955.7倍(P0.01);吸血组6 d龄按蚊卵黄蛋白原m RNA表达较吸血组4 d龄按蚊骤降(下降近1 870倍),而与未吸血组6 d龄按蚊相比,差异无统计学意义。结论本研究成功地克隆了大劣按蚊卵黄蛋白原基因的c DNA;大劣按蚊血餐后24 h卵黄蛋白原基因高效表达,提示卵黄蛋白原基因可能参与了大劣按蚊蚊卵的发育。     

罗葵地区大劣按蚊成蚊调查

大劣按蚊是海南省山林及山麓地区的主要传疟媒介，１９９１年６月－１９９２年６月，连续１３个月在保葶县罗葵地区什故村对大劣按蚊成蚊进行了调查，发现当地大劣按蚊构成比为６０％（２０７／３４５），４、５、６、７、８月份均有，５月为密度高峰；平均密度为２．４只／人工小时；半通宵观察平均叮人率为２．９６；经产蚊比率为０．６４６，日存活率为０．８８；预期寿命为７．８天；恶性疟原虫孢子增殖需要１１．３天；传染性蚊     

爱克宁微胶囊剂对大劣按蚊毒效的试验观察

为了考核爱克宁微胶囊剂浸泡蚊帐对海南传疟媒介大劣按蚊的毒力大小．我们在实验室进行了药效测定。现将结果报告如下。1．材料与方法1．1试验材料1．1．1试验药物：爱克宁（ICON）10％微胶囊剂，由捷利康中国有限公司提供。澳佩菊酯（Deltamethrin）2．5％乳油．由海南力力达农药厂提供。1．1．2试虫；大劣按蚊（AnophelesDirus）为本所养蚊室饲养的未吸血羽化3～5日龄雌成蚊。1．2试验方法将杀虫剂按一定倍数稀释后．浸泡用棉蚊帐有制成的蚊笼，凉干后进行试验。爱克宁浸泡两个蚊笼，有效成份分别为：15mg／m2、20mg／m2。为了便于比较…     

嗜人按蚊种群饲养及标本保存方法对总RNA提取影响的研究

目的 建立适合嗜人按蚊小型种群饲养方法，探讨按蚊标本不同保存方法对总RNA提取的影响，为进行相关性研究提供高质量总RNA标本提供依据。方法 拟合嗜人按蚊的生长习性，在实验室采用多种针对措施以提高按蚊的孵化率、幼虫生存率、蛹化率和羽化率；采用总RNA变性胶凝胶电泳分析乙醚麻醉和低温速冻法对总RNA降解的影响。结果在非专业饲养室中采用简便低廉的改良方法大大提高了嗜人按蚊的孵化率、幼虫生存率、蛹化率和羽化率。低温速冻法较传统的乙醚麻醉法更好得避免了标本RNA的过多降解。结论建立了一种低成本、高成功率的嗜人按蚊饲养方法和一种低降解、安全简便的差异分析用嗜人按蚊标本的保存方法。     

自然界中华按蚊种群定量研究及工具创新

目的：在自然界内对中华按蚊进行定量研究。方法：采用定量研究的方法和自制的工具。结果：求出各项参数值如下：孵化率为69．5294％，雌蚊和雄蚊存活率分别为54．03％和6．17％，发育历期为13．7417 d，雌蚊和雄蚊预期寿命分别为2．1430 d和0．7147 d。结论：自然界内中华按蚊具有极大的传疟能力。     

大劣按蚊成蚊cDNA文库的构建与质量鉴定

目的　构建大劣按蚊成蚊cDNA文库 ,为进一步筛选、克隆按蚊免疫及疟原虫发育相关基因奠定基础。方法　分离大劣按蚊成蚊mRNA ,用Stratagene公司的ZAPExpress文库构建试剂盒构建cDNA文库并鉴定其质量。结果　所建文库滴度达 2 1× 10 6pfu/ml,重组效率达 98%以上 ,插入片段长度平均为 1kb以上。结论　采用ZAPExpress文库构建试剂盒可以成功构建出较高质量的大劣按蚊成蚊cDNA文库     

约氏疟原虫感染诱导大劣按蚊AdSP1 和AdSP3的转录

目的观察丝氨酸蛋白酶AdSP1 和AdSP3在大劣按蚊主要组织中的表达,分析血餐和约氏疟原虫感染对大劣按蚊血细胞AdSP1 和AdSP3转录的影响.方法离心收集血细胞,解剖分离大劣按蚊蚊胃和唾液腺,提取相应的总RNA,RT-PCR扩增;然后将同批3～5 d龄大劣按蚊分为正常组(N)、吸正常血组(B)和感染约氏疟原虫组(I),分别在血餐后1、2、3、4、7 d和11 d,收集3组各50只雌大劣按蚊血细胞和提取总RNA,以Ads7为内参照,进行半定量RT-PCR分析.结果丝氨酸蛋白酶AdSP1 和AdSP3在大劣按蚊血细胞和唾液腺中表达,不在蚊胃表达;吸血和约氏疟原虫感染后,大劣按蚊血细胞中AdSP1 和AdSP3的转录上调,尤以约氏疟原虫黑化期间明显.结论 AdSP1和AdSP3可能参与大劣按蚊对约氏疟原虫的黑化反应,并可能是大劣按蚊的PPAE.     

甲脒硫磷对蚊虫药效的评试

甲脒硫磷对大劣按蚊、致乏库蚊和白纹伊蚊幼虫的LC50分别是0.01326PPm,0.01333PPm和0.01045PPm。对致乏库蚊和白纹伊蚊成蚊的LT50分别是27.75min和8.8min,(浓度为1.785微克/厘米~2);对大劣按蚊的LT50是8.8min(浓度为5.35微克/厘米~2)。在砖墙石灰批面结构的房屋作滞留喷洒试验,对致乏库蚊的残效期20天左右;在上述房屋内作空间触杀试验,残效期50天左右。现场使用半滞效式超低容量喷雾防制白纹伊蚊,喷雾量300g(主药)/公顷,喷洒后40天内成蚊密度平均下降93.6％。效果十分显著,值得在现场进一步扩大试验。     

吸血和约氏疟原虫感染对大劣按蚊血细胞中rpS7转录的影响

目的　观察血餐和约氏疟原虫感染对大劣按蚊血细胞中核糖体蛋白S7(Ribosomalprotein ,rpS7)转录的影响。方法　同批 3～ 5d龄大劣按蚊分为正常组 (N)、吸正常血组 (B)和感染约氏疟原虫组 (I) ,分别在血餐后 1、2、3、7d ,离心法同时收集 3组各 5 0只雌大劣按蚊血细胞总RNA ,所有样品进行RT PCR后 ,各吸取 10ulPCR产物进行琼脂糖凝胶电泳 ,凝胶图像分析系统扫描并读取数据 ,并对所得数据进行统计学分析。结果　 3组大劣按蚊血细胞rpS7mRNA的RT PCR扩增产物量无显著差异 (P >0 0 5 )。结论　类似于人类和小鼠 β actin ,以及冈比亚按蚊rpS7,大劣按蚊血细胞rpS7可作为从分子水平研究大劣按蚊抗约氏疟原虫感染防御相关因子的内参照