未成熟树突状细胞诱导大鼠免疫低反应性

目的观察供者来源的未成熟树突状细胞(imDCs)联合骨髓移植(BMT)对大鼠移植肾的保护作用,并探讨其机制.方法DA(RT1a)大鼠为供者,Lewis(RT11)大鼠为受者,Wistar大鼠为无关第三品系.将实验动物随机分为5组,每组8只,进行不同的预处理后进行肾移植.(1)阴性对照组受者不接受任何预处理;(2)imDCs诱导组受者术前7d经尾静脉注射经60Co照射(30 Gy)灭活的、供者来源的未成熟树突状细胞2×107/只;(3)BMT诱导组受者术前4 d经尾静脉注射供者来源的新鲜骨髓细胞2×108/只;(4)imDCs+BMT联合诱导组受者术前7 d经尾静脉注射经60Co照射(30 Gy)灭活的、供者来源的未成熟树突状细胞2×107/只,术前4 d经尾静脉注射供者来源的新鲜骨髓细胞2×108/只;(5)第三品系组预处理与imDCs+BMT联合诱导组相同,但供者肾脏来自Wistar大鼠.术后进行单向混合淋巴细胞反应(MLR);白细胞介素2(IL-2)逆转实验;体内细胞转移实验(DTH);流式细胞仪检测RT1a阳性细胞百分率.结果各组大鼠肾移植后平均存活时间分别为阴性对照组(7.12±1.25)d;imDCs诱导组(24.38±3.20)d;BMT诱导组(7.87±2.10)d;第三品系组(6.63±1.06)d;而imDCs+BMT联合诱导组延长到(80.75±16.88)d;后者与上述4组比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).免疫耐受的大鼠脾细胞增殖程度(SI值,3.41)明显低于对照组(7.56),P＜0.01;转移耐受的Lewis大鼠(FI值,0.55)明显低于对照大鼠(0.93),P＜0.01;在免疫耐受的受者体内检测到RT1a阳性细胞.结论术前输注供者来源的未成熟树突状细胞联合骨髓移植,可成功诱导受者产生免疫耐受,显著延长肾移植大鼠的存活时间.可能机制为特异性T细胞克隆无能、T细胞的负向免疫调节以及嵌合体的形成.     

不成熟树突状细胞体外诱导T细胞表达转录因子Foxp3

目的探讨不成熟树突状细胞（imDCs）能否在体外诱导T细胞高表达转录因子Foxp3。方法体外无菌培养BALB／c小鼠骨髓来源的不成熟树突状细胞，并通过脂多糖（LPS）刺激诱导其分化为成熟树突状细胞（mDCs）。在96孔细胞培养板中分别以不成熟树突状细胞（imDCs）2×10^4／孔和成熟树突状细胞（mDCs）2×10^4／孔与C57BL／6小鼠的脾淋巴细胞以1：5、1：10、1：50、1：100的比例共同培养6d。流式细胞术检测混合培养6d后的淋巴细胞CD4、CD25及转录因子Foxp3的表达。结果imDCs及mDCs和淋巴细胞混合培养6d后，淋巴细胞表面CD25的表达水平较正常淋巴细胞明显升高（P〈0．05）；mDCs与淋巴细胞混和培养6d后，淋巴细胞表达Foxp3的水平与正常淋巴细胞差异无统计学意义（P〉0．05），而用imDCs诱导则可使淋巴细胞表达Foxp3显著升高（P〈0．05）。结论imDCs可以在体外诱导T细胞上调转录因子Foxp3的表达。     

维持树突状细胞未成熟状态诱导同种异体组织移植免疫耐受的研究进展

组织器官移植受到全世界的关注及医学领域的高度重视,得到了蓬勃发展,挽救了不少的疑难病患者的生命,但是移植后长期服用非特异性免疫抑制剂所带来的全身致死性的毒副作用问题至今仍未能解决,妨碍着组织器官移植的存活质量.控制移植排斥最理想的方法是诱导特异性免疫耐受.现今,全球学者都正在致力于解决特异性免疫耐受新策略这一世界性难题.近年研究发现末成熟树突状细胞(imDCs)对诱导免疫耐受发挥着重要的作用,本文就imDCs在诱导组织器官移植特异性免疫耐受防治排斥反应的主要进展综述如下.     

霉酚酸酯对未成熟树突状细胞抗原递呈功能的影响

目的研究霉酚酸酯(MMF)在体外对小鼠未成熟树突状细胞抗原递呈功能的影响。方法在骨髓来源未成熟树突状细胞的培养过程中加入MMF，表型鉴定之后，做抗原递呈功能分析，观察抗原特异性增殖反应、混合淋巴细胞反应以及T淋巴细胞抗原特异性低反应性。结果以MMF处理的未成熟树突状细胞向T淋巴细胞递呈可溶性抗原的能力减弱，在同基因型的树突状细胞和T淋巴细胞接触条件下不能刺激致敏T淋巴细胞的有效增殖；MMF处理的树突状细胞在体外的同种混合淋巴细胞培养反应中能够维持树突状细胞于未成熟状态，不能充分活化CD4^ T淋巴细胞和诱发TH1反应，诱导了T淋巴细胞对同种抗原的低反应性；MMF处理的树突状细胞诱导的T淋巴细胞低反应性具有同种抗原特异性。结论在体外培养过程中给予MMF干预能够降低未成熟树突状细胞的抗原递呈能力，增强同种未成熟树突状细胞的免疫耐受诱导作用。     

白细胞介素-10诱导的大鼠树突状细胞体外免疫功能的研究

目的　研究白细胞介素 10 (IL 10 )诱导的大鼠未成熟树突状细胞 (imDCs)体外诱导免疫耐受的可行性。方法　在经典诱导方案的基础上 ,应用IL 10 ( 10 μg/L)抑制大鼠骨髓来源DCs的成熟 (IL 10组 ,10例 ) ,并设对照组 (IL 4组 ,10例 )。培养期间观察DCs形态 ,检测DCs表型、摄取抗原能力、体外免疫功能及培养上清细胞因子水平。结果　与IL 4组比较 ,IL 10组DCs细胞表面CD80 、CD86及OX6低度表达 ( 2 5 .3 %、42 .4%、3 2 .3 % ) ,吞噬能力较强 ( 81.9) ,刺激同种异体淋巴细胞增殖能力下降 ,该淋巴细胞具有抗原特异性低反应性 ;培养上清中IL 12水平 ( 4 0 6.5pg/L)及初次MLR培养上清IL 2水平 ( 2 45 .4ng/L)均较低 ,差异有非常显著性 (P <0 .0 1)。 结论　IL 10作用的大鼠imDCs具有诱导免疫耐受的应用价值。     

树突状细胞在系统性红斑狼疮发病中的作用

系统性红斑狼疮是一种遗传性复杂性自身免疫疾病,表现出树突状细胞(DEs)、T淋巴细胞和B淋巴细胞的功能异常.DCs是免疫反应和免疫耐受的调控者,骨髓树突状细胞和淋巴树突状细胞的异常能够通过一系列机制和促炎途径打破免疫耐受,引发自身免疫反应,在其他因素如病原体感染的作用妹下,自身免疫反应又能得以维持和放大,不断地引起机体的免疫损伤,参与系统性红斑狼疮的发生.     

活化的肝星状细胞促进调节性T细胞的表达

目的 越来越多的研究证实,活化的肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)具有免疫抑制功能.本研究观察了HSCs对T细胞介导的适应性免疫应答的影响及其与调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)的关系.方法 分离培养小鼠HSCs,运用混合淋巴细胞反应(mixed lymphocyte reaction,MLR),体外观察活化的HSCs对T细胞增殖和Treg细胞的影响.结果 活化的HSCs能导致树突状细胞(dendritic cells,DCs)介导的适应性免疫应答中T细胞的低反应性:抑制T细胞的增殖,同时诱导Treg细胞的表达.结论 活化的HSCs能通过促进Treg细胞表达而诱导适应性免疫应答中T细胞的活化无能,促进免疫耐受.     

转化生长因子betal修饰供体树突状细胞对大鼠肾脏移植物存活的影响

目的:观察转化生长因子(TGF)betal修饰供体树突状细胞的输注对大鼠肾脏移植物存活的影响,以及诱导大鼠产生抗原特异性免疫耐受的情况,并探讨其机制.方法:通过逆转录病毒载体,将TGF betal基因转染体外培养的供体树突状细胞,术前输注给肾移植受体,用RT-PCR和免疫荧光观察目的基因的表达,用3HTdR观察供体树突状细胞对受体T细胞的激活,观察移植物存活情况.结果:输注转基因供者树突状细胞的肾移植受体大鼠,移植物存活时间比对照组明显延长(P≤0.05).3H TdR观察供体树突状细胞对受体T细胞的激活显示树突状细胞对受体淋巴细胞的激活明显比对照组减弱(P≤0.01).结论:TGF betal的供者树突状细胞的输注可以明显延长大鼠肾脏移植物存活,并且抑制了转基因的树突状细胞对受体T细胞的激活.     

胶质瘤干细胞疫苗治疗恶性脑胶质瘤

利用自体树突状细胞(DC)诱导特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)抗肿瘤的主动免疫治疗方法 前景广阔[1].我们以胶质瘤干细胞抗原负载树突状细胞(DC),诱导特异性T细胞,并检测其对胶质瘤细胞杀伤能力,探讨其作用机制.     

树突状细胞和CD4+CD25+调节性T细胞在免疫耐受中的作用及关系

诱导免疫耐受具有高效、低毒、经济等优点,在器官移植中有着极其重要的意义.在建立免疫耐受中,树突状细胞(DC)起到克隆清除、克隆无能、表达T细胞抑制因子、选择性激活辅助T细胞和诱导调节性T细胞尤其是CD4+CD25+调节性T细胞的产生等作用.而CD4+CD25+调节性T细胞主要以DC为作用靶点,影响其分化成熟,抑制DC向...     

调节性B淋巴细胞在免疫耐受中作用的研究进展

虽然免疫抑制剂能够改善肾移植受者的早期预后,但移植物的远期存活率并未得到明显提高,移植物10年存活率仅有50％.免疫抑制剂的不良反应是导致移植物功能丧失及受者死亡的重要因素.因此,诱导受者对供者特异性的免疫耐受是解决这些问题的根本途径.近几年来虽然诱导免疫耐受的临床工作已取得了较大的进展,部分移植中心已成功诱导受者对移植物的免疫耐受[1-2],但对于免疫耐受诱导方案并无共识,且诱导成功率并不高.这主要是由于免疫耐受形成机制复杂,不仅涉及中枢免疫耐受的形成,且外周免疫耐受对于耐受状态长期维持可能更为重要.大量研究提示,调节性T淋巴细胞(Treg细胞)可以通过与其他免疫细胞间接触、分泌调节性细胞因子等途径参与外周免疫耐受的形成[3],但针对获得性免疫的另一类重要细胞——B淋巴细胞在免疫耐受中作用的研究则较少.最新研究提示,B淋巴细胞不仅具有介导体液免疫排斥反应的正向免疫促进作用,还可能存在具有与Treg细胞类似的负性免疫调节作用的调节性B淋巴细胞(Breg细胞).这些发现为完善免疫耐受形成机制,进而制定有效的临床免疫耐受诱导方案奠定了基础.本文就Breg细胞在免疫耐受中作用的研究进展作如下综述.     

调节性树突状细胞与移植免疫耐受的研究进展

树突状细胞(DC)具有其他细胞所没有的形态特点和运动功能,体内分布十分广泛,是专职的骨髓来源抗原提呈细胞(APC).它们是体内惟一的既能迅速启动免疫应答又能有效刺激再次应答的APC.新的研究显示,DC是一群异源性、异质性的细胞群体,不但能激活初始T淋巴细胞,促进免疫应答,而且在诱导免疫耐受方面也具有重要作用[1].     

调节性树突状细胞与移植免疫耐受的研究进展

树突状细胞(DC)具有其他细胞所没有的形态特点和运动功能,体内分布十分广泛,是专职的骨髓来源抗原提呈细胞(APC).它们是体内惟一的既能迅速启动免疫应答又能有效刺激再次应答的APC.新的研究显示,DC是一群异源性、异质性的细胞群体,不但能激活初始T淋巴细胞,促进免疫应答,而且在诱导免疫耐受方面也具有重要作用[1].     

调节性树突状细胞与移植免疫耐受的研究进展

树突状细胞(DC)具有其他细胞所没有的形态特点和运动功能,体内分布十分广泛,是专职的骨髓来源抗原提呈细胞(APC).它们是体内惟一的既能迅速启动免疫应答又能有效刺激再次应答的APC.新的研究显示,DC是一群异源性、异质性的细胞群体,不但能激活初始T淋巴细胞,促进免疫应答,而且在诱导免疫耐受方面也具有重要作用[1].     

耐受性树突状细胞和调节性T细胞相互作用研究进展

树突状细胞(DCs)是体内最重要的抗原递呈细胞(APC),其最重要的特点就是能够刺激初始型T细胞增殖,是机体免疫系统反应的启动者,在免疫应答过程中起着重要的作用,同时DCs在诱导免疫耐受中起重要作用,是诱导外周免疫耐受的调控点[1].而近年来在免疫学领域的另一研究热点则是对调节性T细胞(Tr)的研究.Tr细胞是外周免疫耐受新的重要作用机制,它可通过细胞接触或者抑制性细胞因子作用于APCs或效应性T细胞,从而发挥调节效应.越来越多的研究结果证实DCs与Tr细胞在人类免疫调节过程中存在着紧密联系.现介绍DCs与Tr在免疫调节中的相互作用的进展.     

调节性树突状细胞与移植免疫耐受的研究进展

树突状细胞(DC)具有其他细胞所没有的形态特点和运动功能,体内分布十分广泛,是专职的骨髓来源抗原提呈细胞(APC).它们是体内惟一的既能迅速启动免疫应答又能有效刺激再次应答的APC.新的研究显示,DC是一群异源性、异质性的细胞群体,不但能激活初始T淋巴细胞,促进免疫应答,而且在诱导免疫耐受方面也具有重要作用[1].     

转化生长因子beta1修饰供体树突状细胞对大鼠肾脏移植物存活的影响

目的:观察转化生长因子(TGF)beta1修饰供体树突状细胞的输注对大鼠肾脏移植物存活的影响,以及诱导大鼠产生抗原特异性免疫耐受的情况,并探讨其机制。方法:通过逆转录病毒载体,将TGFbeta1基因转染体外培养的供体树突状细胞,术前输注给肾移植受体,用RTPCR和免疫荧光观察目的基因的表达,用3HTdR观察供体树突状细胞对受体T细胞的激活,观察移植物存活情况。结果:输注转基因供者树突状细胞的肾移植受体大鼠,移植物存活时间比对照组明显延长(P≤0.05)。3HTdR观察供体树突状细胞对受体T细胞的激活显示树突状细胞对受体淋巴细胞的激活明显比对照组减弱(P≤0.01)。结论:TGFbeta1的供者树突状细胞的输注可以明显延长大鼠肾脏移植物存活,并且抑制了转基因的树突状细胞对受体T细胞的激活。     

调节性免疫细胞在移植领域的临床转化研究

近年来,调节性T淋巴细胞在器官移植领域的基础研究和临床应用取得了许多突破性进展,激发了人们对更多的调节性免疫细胞的极大兴趣.回顾近期的研究,我们提出在体内多种调节性免疫细胞及其表达的免疫相关分子的相互作用所构成的调节性免疫细胞网络是免疫调控与诱导移植免疫耐受的细胞学基础[1].调节性T淋巴细胞(regulatory T cells,Treg细胞)、调节性B淋巴细胞(regulatory B cell,Breg细胞)、调节性树突状细胞(regulatory DC,DCreg细胞)、调节性自然杀伤细胞(regulatory natural kill cell,NKreg细胞)、调节性巨噬细胞(regulatory macrophages)、髓系抑制细胞和间充质干细胞之间存在着广泛的联系,在自身免疫性疾病和移植后排斥反应的发生及发展过程中发挥负性调控作用.本文对多种调节性免疫细胞在移植领域的研究及临床转化的进展情况做一简单的回顾.     

树突状细胞研究新进展

树突状细胞(dendritic cell DC)作为体内功能最强的专职抗原提呈细胞(antigen presenting cells,APC),能有效地诱导T细胞的免疫应答.不仅在抗肿瘤中起着重要的作用;而且还在机体的免疫耐受中发挥着双重免疫调节的功能.随着近年不断的深入研究,人们认识到树突状细胞免疫功能的变化,与其所处的分化阶段和微环境密切相关.本文就树突状细胞的生物学特性及功能的研究作一综述.     

近交系大鼠肝移植自发免疫耐受模型的建立及其CD8+CD28-T细胞的作用

目的建立近交系大鼠原位肝移植自发免疫耐受模型,并研究CD8+CD28- T细胞在自发免疫耐受形成中的作用.方法双袖套法建立原位肝移植模型;流式细胞技术检测CD8+CD28- T抑制细胞含量变化;利用补体细胞毒和免疫磁珠方法分离CD8+CD28- T细胞,通过体外混合淋巴细胞反应验证其抑制功能.结果我们成功建立了BN(供体)LEW(受体)原位肝移植自发免疫耐受模型,并发现自发免疫耐受模型大鼠脾脏CD8+CD28- T细胞含量(23.7%±7.2%)显著高于正常大鼠(5.4%±1.5%)和急性排斥组大鼠(6.0%±1.3%),而且,分离纯化后的自发免疫耐受组大鼠脾脏CD8+CD28- T细胞可以抑制混合淋巴细胞反应的增殖,但急性排斥组大鼠脾脏CD8+CD28- T细胞无抑制功能.结论 BN(供体)LEW(受体)原位肝移植模型为自发免疫耐受;脾脏CD8+CD28- T细胞作为一种T抑制细胞,在自发免疫耐受的形成过程中具有重要作用.