抗人巨细胞病毒人单克隆抗体

异源移植、免疫损害患者以及早产儿体内原发性人类巨细胞病毒(HCMV)感染是一个重要的问题。用高滴度抗HCMV 抗体的γ球蛋白制剂预防性治疗已有报导,而含高滴度抗HCMV 抗体的γ球蛋白制剂受限,且可能输入某些感染因子.为此作者用血清阳性人的B 细胞与鼠-人骨髓瘤SBC-H20细胞系进行电场诱导融合术,产生人抗HCMV 抗体方法。一、细胞分离与激活:经Ficoll—Hypaque 密度梯度离心分离脾和周围血中淋巴细胞,采用标准玫瑰花环试验分离T、B 细胞.浓缩后的B 细胞被EBV 或PWM 和HCMV 抗原激潘。用EBV 激活时,     

方为人所用 方为人所宜

<正>1辨体用方的理论基础1.1辨体施方,以人为本,是重要的防治原则清·徐灵胎根据临床治疗的得失,深刻指出:"天下有同此一病,而治此则效,治彼则不效。且不唯无效,而反有大害者,何也?则以病同而人异也。"故治病     

剑不如人 剑法不能不如人

在上大学时．我下定决心。准备用攒了整整一年的津贴买台照相机。这对于酷爱摄影的我来说，一直是一个长期的梦想——尽管当时我连光圈、快门的关系还没有搞清楚。     

阳春人

家门外，有一块空地，别人买去建房却迟迟不见动工的地基，大约三四分宽的样子，斜斜的一个懒坡，一绺土松质沃的荒种的蔬菜园。冬去，春来了。熙阳暖着，细雨润着，没人监管的荒园，野菜野草野花争先恐后地长满了，欣欣然。     

半身人

周一往往是医院最忙碌的一天。许多病患挨过了病痛难耐的双休,就是为了能在门诊找个经验丰富一点的专科医生和专家来就诊。很     

中国人和俄罗斯人肺炎发病率对比

目的通过同一地区、同一单位中国人和俄罗斯人肺炎发病率的统计，揭示肺炎的发生是否与人种有关。方法 统计同一单位、同一生活区的中国人群和俄罗斯人群肺炎发病情况，并按居住时间长短分别统计。将统计结果按同一种族不同居住时间、同一居住时间不同种族发病情况进行对比并进行卡方检验，了解是否存在差异。结果中国人居住1a以上与居住1a以下发病率不同，但没有显统计学意义；俄罗斯人居住1a以上比居住1a以下发病率低，P＜0．05，但校正P＞0．05；居住1a以下中，俄罗斯人肺炎发病率明显比中国人高，P＜0．05，但居住时间在1a以上的人群中，俄罗斯人发病率虽比中国人高，但检验结果P＞0．05，没有显统计学意义。结论肺炎的发病情况与人种没有明确关系，但与到达一个新地方的时问长短有关。     

埃博拉致2240人感染1229人死亡

<正>新浪网2014-08-21:世界卫生组织19日称,埃博拉病毒已在全球范围内造成1229人死亡,仅在3天内就造成84人死亡。在3天内,受感染的病例增加113例,使得总数达到2240人。其中,利比里亚是疫情蔓延最快的国家,新近增加48个感染病例,与53例死亡病例,使得该国受感染病例达到834人,其中466人死亡。世界卫生组织呼吁受埃博拉疫情影响的国家立即在其所有出境机构设置检验部门,让所有出境人员接受检查。经确认,除几内亚、利比里亚、尼日利亚和塞拉利昂之外,全球其他地方并未出现埃博拉病例。继     

逆转录病毒载体介导Neo~R基因转入正常人造血祖细胞

本文应用逆转录病毒载体介导基因转移法将含有新霉素抗性(neo~R)基因的双拷贝逆转录病毒载体pN2A转入正常人造血祖细胞。应用Ficoll分层液(比重1.064)富集人造血干、祖细胞,预培养后与已经照射的生产重组病毒包装细胞株共同培养24小时,经含G418(1000μg/ml)体外半固体培养,可见具有抗性的CFU-GM集落生长。应用PCR方法检测转染细胞中neo~R基因的转移和表达,在生产逆转录病毒的辅助细胞株PA317/N2及体外液体培养的骨髓细胞中均可扩增出neo~R基因的DNA片段,进一步证实了neo~R基因在正常人造血干、祖细胞的有效转移和表达。     

带有lac Z基因标志的大鼠粒细胞白血病细胞在微量残留白血病研究中的应用

采用带有外源性β－半乳糖苷酶（ｌａｃＺ）基因标志的大鼠粒细胞白血病细胞ＬＴ１２ｎｌ接种ＢＮ大鼠，９天后给予大剂量环磷酰胺治疗，诱导出微小残留白血病状态。通过对骨髓细胞的ｘ－ｇａｌ染色和白血病细胞集落培养，发现化疗早期虽有白血病细胞存在，但无增殖能力，是一种非功能性细胞，其中的绝大多数很快死亡；随病程的发展，白血病细胞的增殖能力逐渐增强。病理形态学动态观察发现白血病的复发由白血病细胞灶起始，其大小和分布不匀。     

重组人p53腺病毒注射液联合泰索帝对人肺腺癌细胞生长的抑制作用

目的探讨基因治疗药物重组人p53腺病毒注射液(Ad-p53)联合化疗药物泰索帝(多西紫杉醇,Docetaxel)对人肺腺癌GLC-82(含突变型p53基因)及A549(含野生型p53基因)细胞的增殖抑制、凋亡诱导作用。方法将重组腺病毒载体所携带的野生型p53基因导入人肺腺癌细胞株GLC-82及A549,并联合应用化疗药物多西紫杉醇,通过Western blot法分析外源野生型p53基因在细胞内的表达,MTT法和流式细胞术观察对细胞生长抑制及细胞周期、凋亡的影响。结果通过West-ern blot证实了外源p53基因能在GLC-82及A549细胞中高效表达。MTT法观察到Ad-p53对肺癌细胞的抑制作用呈时间依赖性、剂量依赖性效应,100 MOI的Ad-p53与Docetaxel 5 mg/L联合应用后72 h,对A549细胞生长的抑制率达(51.96±0.76)%,单用的抑制率分别为(23.44±0.54)%、(40.53±1.37)%;对GLC-82细胞生长的抑制率达(62.42±1.43)%,单用的抑制率分别为(41.51±0.59)%、(48.39±0.88)%。流式细胞术检测结果显示,Ad-p53与Docetaxel联合应用能使细胞阻滞于G0~G1期,S期细胞比例明显减少,引起的A549细胞凋亡率为(23.35±0.64)%,单用的凋亡率分别为(15.35±1.31)%、(0.93±0.35)%;GLC-82细胞凋亡率为(47.73±1.17)%,单用的凋亡率分别为(20.88±0.71)%、(1.16±0.52)%。结论Ad-p53与化疗药物Docetaxel联用能显著协同抑制肺腺癌细胞的生长,增加化疗敏感性。     

建立鲍曼不动杆菌生物膜合成相关基因信息分析及PCR检测方法

目的建立鲍曼不动杆菌生物膜合成相关基因物信息分析及PCR检测方法。方法用DNASTAR软件进行核苷酸多重序列比对和基因扩增技术,对某株(ATCC 19606)鲍曼不动杆菌全长生物膜合成基因片段进行扩增和测序,并通过其他菌株检测进行验证。结果鲍曼不动杆菌不同株中均存在与某株的生物膜合成基因高度同源的序列,相似度均达到97%以上。该生物膜合成基因蛋白中存在两个跨膜区,含有与生物膜形成相关的超家族保守功能结构域。所克隆的生物膜合成基因核苷酸和氨基酸序列相似性都为100%。所建立的基于生物膜合成相关基因PCR仅对鲍曼不动杆菌DNA模板呈阳性扩增结果,其检测灵敏度可达10 cfu/m l。对临床分离菌株的检测与临床生化鉴定结果一致。结论鲍曼不动杆菌生物膜合成相关基因存在于各株鲍曼不动杆菌中,其编码蛋白为膜蛋白与生物膜形成有密切关系。所建立的基于鲍曼不动杆菌生物膜合成基因PCR具有特异、敏感、稳定等优点,可用于临床实验室鲍曼不动杆菌感染的快速诊断以及各种医疗器械带菌状况的检测。     

条带杂交mRNA定量分析及其在血栓调节蛋白基因表达研究中的应用

含血栓调节蛋白cDNA的质粒转染大肠杆菌,经扩增、酶切、凝胶电泳纯化,获得长度为3.7kb的血栓调节蛋白cDNA,后者用随机引物法标记~(32)P,制成血栓调节蛋白的基因探针。将该探针与血栓调节蛋白mRNA进行条带杂交后,分别用β-液闪仪和放射自显影及密度扫描仪作定量分析。用本法研究了血管内皮细胞中血栓调节蛋白基因表达及血小板血栓调节蛋白mRNA的含量。     

以VNTR多态性分析检测人类白血病RB基因的杂合子性缺失

对30个正常个体进行RB1.20 PCR-VNTR分析,其多态性为86.7％。28例白血病的VNTR多态性为64.3％,显著低于正常对照(P<0.05)。以各种不同类型白血病分组分析,发现其中急淋组仅为37.5％,显著低于正常(P<0.05),其它各型白血病与正常比较无显著差异(P>0.05)。进一步对24例急性白血病病例作发作期和完全缓解期的配对VNTR分析,发现其中1例急淋在完全缓解期是多态性,但发作期呈均一性。提示一些急淋病例有RB基因杂合子性缺失。RB基因功能失活在急淋的发病中可能也起一定的作用。     

以PCR－SSCP分析和核苷酸序列直接测定技术检测人类白血病p53基因点突变

以多聚酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）分析（技术研究）３６例不同类型的白血病ｐ５３抗癌基因点突变，结果在１４例淋巴细胞白血病中发现３例有ｐ５３基因片段的泳动变位。进一步对其中的１例急性淋巴细胞白血病进行核苷酸序列直接测定，显示在第７外显子的２５７位编码子核昔酸由ＣＴＧ突变为ＣＡＧ、氨基酸由天冬氨酸突变为缀氨酸。２２例髓系白血病未发现有ｐ５３基因的点突变。结果提示ｐ５３抗癌基因点突变导致功能失活在淋巴细胞白血病的发病中可能起一定的作用。     

偏头痛患者头痛缓解初期血中CGRP与SP含量观察

目的：观察偏头痛患者头痛缓解初期血中降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）与Ｐ物质（ＳＰ）含量的变化。方法：采用放射免疫的方法,对４９例头痛缓解初期无先兆偏头痛患者及２８例健康人血浆中ＣＧＲＰ与ＳＰ的含量进行了测定。结果：与正常对照组相比,偏头痛组的ＣＧＲＰ与ＳＰ含量降低,差异有显著性意义,其中以“尚余头部不适”组的降低尤为明显。结论：偏头痛的发病可能与感觉神经系统释放的ＣＧＲＰ和ＳＰ变化有关。     

HPV16 E6和E7基因序列多态性与宫颈癌临床病理特征相关性

目的探讨宫颈癌人乳头瘤病毒16型（HPV16）E6和E7转化基因序列多态性,及其与宫颈癌临床病理特征的相关性。方法从77例宫颈癌组织中筛选出51例HPV16阳性标本,扩增E6及E7基因,PCR产物进行序列测定。应用DNAStar生物软件进行核苷酸和氨基酸序列的分析。结果宫颈癌组织中HPV16 E6共测得6个突变位点,均为错义突变;最常见的突变位点为T178G/A（D29E）,突变频率为56.00%,T178G/A突变在不同分化程度、不同分期、不同肿瘤大小及有无淋巴结转移组的分布频率差异无显著性（P〉0.05）。宫颈癌组织中HPV16 E7共测得4个突变位点,2个为错义突变;最常见的突变位点为A647G（N29S）,突变频率为68.09%,A647G在中分化及低分化组的突变频率分别为56.67%、88.24%,两组间突变频率差异有显著性（χ2=4.98,P〈0.05）;A647G在不同分期、不同肿瘤大小、有无淋巴结转移组的分布频率差异无显著性（P〉0.05）。结论青岛地区HPV16 E6基因T178G/A突变与宫颈癌的发生发展无关,HPV16 E7基因A647G突变与宫颈癌的分化程度呈负相关,可以作为评估宫颈癌恶性程度的指标。     

抑癌基因LKB1在胃癌组织表达及意义

目的探讨抑癌基因LKB1在胃癌组织表达及意义。方法应用免疫组织化学方法检测60例胃腺癌组织（胃癌组）、16例正常胃黏膜组织（正常组）和21例癌旁胃黏膜组织（癌旁组）标本LKB1的表达,并分析其与肿瘤临床病理特征的关系。结果 LKB1正常组100.0%强阳性表达,癌旁组61.9%强阳性、38.1%弱阳性表达,胃癌组46.7%弱阳性表达,各组间比较差异有显著性（H=60.412,P〈0.001）。胃癌组LKB1阳性表达与pT分期及分化程度有关（χ2=9.386、4.275,P〈0.05）,与病人年龄、性别、大体分型、解剖位置及淋巴结有无转移无关（P〉0.05）。结论 LKB1基因表达与胃癌存在密切关联,检测其在胃癌组织或胃癌细胞中的表达,可为胃癌的诊断提供参考依据。