氟化钠对乳鼠成骨细胞c—fos,c—jun基因表达及细胞增殖？…

目的 探讨氟对钠（ＮａＦ）对离体成骨细胞ｃ－Ｆｏｓ、ｃ－Ｊｕｎ基因表达的调控及细胞增殖的影响。方法 采用新生大鼠头盖骨分离成骨细胞,在不同浓度ＮａＦ（１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ、１０＾－４ｍｏｌ／Ｌ、１０＾－３ｍｏｌ／Ｌ）中进行培养,用四甲基偶氮唑蓝比色法检测细胞增殖,用免疫组化ＳＰ法结合计算机图像处理系统检测ＮａＦ诱导的ｃ－Ｆｏｓ、ｃ－Ｊｕｎ表达。结果 实验表明ＮａＦ可刺激成骨细胞增殖,并诱导成骨细胞     

核转录因子c—fos和c—jun在新生鼠缺血缺氧脑细胞中的表达

目的 探讨新生鼠缺氧缺血性脑损伤中ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｊｕｎ表达的意义。方法 Ｗｉｓｔａｒ大鼠２４只分为２组,实验组１８只,对照组６只,制备脑缺氧缺血动物模型,用ＲＴ－ＰＣＲ和斑点杂交方法检测新生鼠缺氧缺血性脑损伤后ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｊｕｎ在神经细胞中的表达。结果 ２组ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｊｕｎ的表达在不同时间段差异均有显著性（Ｐ〈０．００１）,其中７２ｈ组和９６ｈ组的表达均比２４ｈ高;缺氧缺血后２４～９６ｈ,ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｊｕｎ在躯体感觉皮质区,海马回ＣＡ３区和基底节区表达比对照组高,２组比较差异有显著性（Ｐ〈０．００１）;２组ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｊｕｎ的表达在不同脑区差异也有显著性（Ｐ〈０．００１）,海马区与基度节区大于皮质区。结论 ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｊｕｎ的表达增加不仅是脑缺氧缺血的结果,而且可能参与了对神经细胞损害过     

HSP70高表达对K562细胞化疗敏感性研究

目的：研究化学因素引起的热应激蛋白70（HSP70）升高对K562细胞化疗药物体外敏感性的影响。方法：用氯化镉诱导K562细胞使其HSP70高表达，在高表达细胞中分别加入甲氨蝶呤（MTX）、丝裂霉素C（Mitomycin C）、顺氯氨铂（PDD）、平阳霉素（Bleomycin）等4种化疗药物，药物浓度以临床一次用量的1／250为中剂量，中剂量的1／10、10倍分别为低剂量和高剂量，作用16h后用MTT比色法检测细胞活力；HSP70用RT－PCR检测。结果：氯化镉可诱导细胞HSP70高表达，其中作用4h后表达最高；HSP70高表达可以降低细胞对化疗药物的敏感性，HSP70表达水平越高，细胞对化疗药物的敏感性越低。结论：非热诱导的HSP70高表达可以降低肿瘤细胞对化疗药物的敏感性，其结果与热诱导的作用相似。     

003 有机磷农药对星形胶质细胞的影响

有机磷农药是我国生产和使用最多的农药，对神经的损伤是有机磷农药中毒患者致死的主要原因。研究表明星形胶质细胞可能是有机磷农药除乙酰胆碱酯酶之外的作用靶点。有机磷农药能够激活星形胶质细胞，反应性胶质化在有机磷农药的神经毒性中具有两面性，研究者们更倾向于认为它对有机磷农药神经毒性的保护作用。     

某健胎中药致畸作用及对HSP70表达的影响

目的　保证新药某健胎中药 (PAKRQAB)的临床用药安全 ,评价其毒理学和分子生物学效应。方法　设 3个剂量组 :6 0、12和 2 4g (kg·d) ,最高剂量相当于临床拟用量的 80倍 ,另设溶剂对照组和阳性对照组。于孕期 6～ 15d经口给予受试物 ,第 2 0天检查对孕鼠和胎鼠的毒性和致畸性 ,并用WesternBlot方法测定孕鼠和胎鼠肝组织HSP70水平。结果　 3个健胎液剂量组均未诱发畸形 ,但高剂量组妊娠率下降 ,与阴性对照组比较差异有显著性 (P <0 0 5 )。孕鼠各剂量组HSP70表达与阴性对照组比较有不同程度的降低 ,对胎鼠HSP70表达影响不明显 ,孕鼠表达量较胎鼠高。结论　该健胎中药无致畸性 ,无母体毒性及发育毒性 ,但对高剂量组孕鼠妊娠率可能产生一定的影响     

有机磷农药对星形胶质细胞的影响

有机磷农药是我国生产和使用最多的农药,对神经的损伤是有机磷农药中毒患者致死的主要原因。研究表明星形胶质细胞可能是有机磷农药除乙酰胆碱酯酶之外的作用靶点。有机磷农药能够激活星形胶质细胞,反应性胶质化在有机磷农药的神经毒性中具有两面性,研究者们更倾向于认为它对有机磷农药神经毒性的保护作用。     

乐果对U87细胞HSP70表达及AChE活性的影响

[目的]研究乐果对神经胶质瘤细胞U87热应激蛋白70 (HSP70 )表达的影响规律,比较HSP70与乙酰胆碱酯酶(AChE)对乐果的敏感性。[方法]以不同浓度乐果(10 0、10、1、0 .1、0 .0 1、0 μmol/L)对体外培养的U87细胞分别进行2、4、8、16和2 4h染毒,再分别用Western blot法和DTNB法检测各组细胞HSP70表达和AChE活性的变化,比较这两个指标变化的幅度以及引起此变化所需乐果浓度和染毒时间的差异。[结果]乐果染毒2h即可引起HSP70表达的显著增高(P <0 .0 1) ,这一变化在染毒4h时出现于各剂量组,并可持续至染毒16h。在染毒2h和4h ,HSP70表达的变化与乐果剂量之间存在相关关系(Pearson相关系数分别为0 .916和0 .989,P <0 .0 1)。AChE活性的显著降低出现在染毒4h ,且仅出现在剂量较高的3个组,变化幅度也较小。[结论]乐果可以在相对较短时间内以较低剂量引起U87细胞HSP70表达的显著变化,并存在一定的剂量 反应关系。HSP70比AChE对乐果更为敏感。     

OK—432联合IL—2对C57BL／6小鼠Lewis肺癌的抑制作用及c—fos蛋白的表达

目的：研究OK－432与IL－2抑制近交系小鼠C57BL／6Lewis肺癌（LLC）的生长及c-os蛋白的表达,方法：以C57BL／6荷瘤LLC小鼠为模型,观察OK－432联合IL－2对肿瘤发生、生长、转移的影响,体内对肿瘤细胞的作用及用抗鼠c-fos单克隆抗体进行SABC免疫组化技术半定量测定c-fos肺癌原发灶中的表达,结果二者联用对肿瘤体积和重量的抑制作用明显增强（P＜0．01）增强抑瘤率（P＜0．05）,肺转移灶数目明显减少,电镜下显示肿瘤灶中出现许多凋亡细胞,瘤细胞核染色质浓集成块,在核膜内呈新月形或环形排列,核膜清楚,瘤细胞内质网扩张,线粒体肿胀。c-fos在联合用药组与对照组比较明显减少（P＜0．01）。结论OK－432与IL－2有明显的协同抗肿瘤活性,其杀瘤过程主要为对瘤细胞的直接或间接攻周,和促进体内对多种反应细胞的相互作用,部分原因可能阻抑c-fos癌基因的表达,提示OK－432联合IL－2可为临床治疗癌症患者一种有效的生物治疗方法。     

阴道超声对人早孕绒毛细胞形态学及HSP70的影响

目的 研究阴道超声照射后对胚胎绒毛形态学及HSP70的影响,并评估其安全性.方法 选择2011年3月至2012年3月本院妇产科门诊早孕计划外妊娠自愿终止妊娠者40例,未接受阴道超声照射的健康早孕妇女10例为对照组,研究组(30例)根据超声后行人流的时间随机分为3组,24、72h及7d流产组.应用探头频率7.5MHz的阴道超声持续照射孕囊20min,于照射后24、72h和7d取绒毛,对照组为经腹部超声照射,持续时间不超过1min后取绒毛,采用免疫组织化学半定量检测HSP70水平表达情况,并在光镜下观察绒毛组织的形态学变化.结果 研究组中24h组和72h组血清HSP70表达水平高于对照组(P＜0.01),24h组血清HSP70表达水平高于72h组(P＜0.01)而7d组血清HSP70表达水平与对照组相近似(P＞0.05).提示照射后24h HSP70表达水平最高,此后逐渐下降,在第7天恢复正常.形态学观察发现照射后24h绒毛受损最为严重,随时间的延长绒毛组织受损程度逐日减轻,于第7天恢复正常.结论 阴道超声照射致绒毛组织的损伤是可逆的,数日后绒毛组织可恢复正常,临床上使用阴道超声检查是安全的.     

职业紧张对燃煤电厂作业人群HSP70表达水平的影响

目的检测不同职业紧张水平燃煤电厂作业人员血清中热休克蛋白70(HSP70)表达水平,探索职业紧张生理学评价指标。方法采用职业紧张量表(OSI-R)对燃煤电厂作业人员进行问卷调查,按职业紧张水平分为高、中、低水平组,并随机抽取各水平组生产人员和后勤行政管理人员各30例,测定其血清中HSP70表达水平。结果 OSI-R量表各问卷及各项目的克伦巴赫α系数均大于0.70;HSP70表达水平与PSQ得分呈正相关(P<0.05),而与ORQ和PRQ得分无明显相关性(P>0.05);作业人群、生产人员、后勤行政管理人员的各职业紧张水平组间HSP70表达水平逐级降低,差异均有统计学意义(P<0.05);生产人员的HSP70水平高于后勤行政管理人员,差异有统计学意义(P<0.05)。结论血清中HSP70表达水平可作为燃煤电厂作业人群进行职业紧张评价的重要参考指标。 更多还原     

Survivin siRNA、HSP70双基因转染对乳腺癌细胞株MCF7 survivin及HSP70表达的影响

目的探讨survivin siRNA、HSP70双基因转染对乳腺癌细胞株MCF7survivin、HSP70表达的影响。方法常规培养乳腺癌细胞株MCF7,将已构建的真核表达载体(pIRES2-EGFP-survivin siRNA、pIRES2-EGFP-HSP70)用脂质体介导转染MCF7细胞,利用倒置荧光显微镜观察转染后的细胞,通过western-blot、RT-PCR检测转染后细胞中HSP70蛋白、survivin蛋白及survivinmRNA表达的变化。结果转染空载体与转染真核表达载体的乳腺癌细胞株MCF7于倒置荧光显微镜下可见绿色荧光,证实转染成功。转染真核表达载体的MCF7细胞与转染空载体的MCF7细胞和未转染的MCF7细胞相比,survivin mRNA和survivin蛋白表达水平降低,而HSP70蛋白表达升高。结论 survivin siRNA能有效抑制MCF7细胞内源survivin基因的表达,HSP70能上调MCF7细胞HSP70蛋白的表达,为进一步深入研究survivin siRNA、HSP70双基因对乳腺癌细胞株MCF7生物学特性的影响奠定实验基础。     

黄磷染毒对小鼠肝脏HSP70表达及NO的影响

[目的]观察黄磷染毒对小鼠HSP70表达及NO的影响，以探讨黄磷的毒作用机制，寻求黄磷中毒早期健康效应的生物标志物。[方法]通过对小鼠黄磷急性和亚急性毒理实验，应用生物化学和分子生物学的技术，选取176只健康雄性昆明种小鼠，体重18—22g，检测黄磷染毒对HSP70、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)等指标的影响。染毒时，急性剂量．效应关系研究取小鼠32只，随机分成4组，低、中、高剂量组的染磷量分别为3、6、9mg／kg体重、对照组给予等量的花生油，腹腔注射染毒48h。时间--效应关系研究取小鼠64只，随机分成8组，实验组以9mg／kg体重的剂量一次性腹腔注射染毒，分别于染毒O、12、24、48h后断头处死小鼠，各组配以相应的对照组。亚急性毒理实验取小鼠80只，随机分成以下10组：O、1、2、3、4周时问组，以1．5mg／kg体重的剂量隔日腹腔注射染毒，每组配以相应的对照组。[结果]随染磷剂量的增高和染磷时间的延长，小鼠肝匀浆HSP70的表达也逐渐升高，急性染磷的HSP70表达升高比亚急性染磷明显；小鼠肝匀浆NOS活性和NO含量逐渐升高，并呈现良好的剂量--反应关系和时间--效应关系。[结论]在黄磷染毒过程中，HSP70对细胞起着很重要的保护作用。提示NOS和NO有可能作为黄磷中毒早期健康效应的生物标志物。     

小儿术后多模式镇痛效果及其对外周血HSP70表达的影响

目的验证小儿术后多模式镇痛效果及其对小儿外周血HSP70表达的影响,为小儿术后镇痛提供一个安全、有效的方案。方法选择术后小儿60例,年龄3～12岁,ASAⅠ～Ⅱ。随机分为多模式术后镇痛组(M组,n=30)和不镇痛组(C组,n=30)。分别于麻醉前(T0)、术后拔管后即刻(T1)、术后48h(T2)各时间点抽测外周血中HSP70的含量,并观察有无不良反应发生。结果 2组麻醉前(T0)、术后拔管后即刻(T1)HSP70含量无显著差异(P>O.05);术后48h(T2)M组明显低于C组,差异有统计学意义(P<0.05)。M组术后躁动明显少于C组差异有统计学意义(P<0.05);其余反应无明显差异(P>O.05)。结论小儿术后多模式镇痛效果良好,为小儿术后镇痛的安全、有效的方案。     

有机磷农药诱导细胞凋亡的研究进展

有机磷化合物(OPs)目前在农业上广泛使用,这些化学物质被大量排入环境,对环境产生了直接的影响[1].而且OPs还可通过食物链富集作用进入生物体,对生物体产生更为严重的后果.     

镉对大鼠肝细胞原癌基因c-fos、c-jun表达的影响

应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ斑点杂交方法研究氯化镉对大鼠肝细胞原癌基因ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｊｕｎ表达的影响。结果表明,５、１０和２０μｍｏｌ／ｋｇ氯化镉腹腔一次注射后,大鼠肝细胞ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｊｕｎ ｍＲＮＡ较对照组明显增多。结果提示,氯化镉可经引起大鼠在体肝细胞原癌基因ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｊｕｎ表达过强。     

紫外线C对A549细胞HSPs表达的影响

[目的]研究紫外线C(UVC)对热休克蛋白(heat shock proteins,HSP)27、70及90的影响。[方法]用紫外线不同照射剂量(0、10、20、40、80J/m2)来照射A549细胞株,用Western-blot检测HSP27、HSP70、HSP90的表达水平。[结果]随着UVC剂量的升高,HSP70和HSP27的表达水平先升高,达到一个高峰后又降低。HSP27表达在20J/m2时达到高峰,HSP70表达在40J/m2时达到高峰,HSP90各剂量的UVC照射下,未见显著性变化。与对照组(0J/m2)相比,在10J/m2时,HSP27和HSP70表达增加(P<0.05);在20J/m2时,HSP27表达显著增加(P<0.01),HSP70表达也继续增加(P<0.05);在40J/m2时,HSP27表达开始下降,但与对照组相比差异没有显著性(P>0.05),HSP70表达仍显著增加,与对照组相比差异有显著性(P<0.01)。在80J/m2时,HSP27表达与对照组和40J/m2组相比,差异无显著性(P>0.05),HSP70表达下降,但仍高于对照组(P<0.05)。在10、20、40和80J/m2的UVC照射下,HSP90表达变化均未见显著性差异(P>0.05)。[结论]随着UVC剂量的升高,HSP70和HSP27的表达水平先升高,达到一个高峰后又降低。HSP27,HSP70能被一定剂量范围的UVC照射所诱导,高剂量UVC照射时HSP27、HSP70的表达被抑制,但HSP90表达未发现能被诱导。     

胸腺瘤细胞中PCNA、HSP70的表达水平的研究及意义

目的研究PCNA、HSP70在胸腺瘤细胞及正常胸腺组织中的表达水平及其临床意义。方法用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶染色法(S-P法)检测20例恶性胸腺瘤、18例良性胸腺瘤及12例正常胸腺组织细胞中PCNA、HSP70蛋白的表达水平。结果20例恶性胸腺瘤中PCNA、HSP70蛋白阳性表达分别为80.0%(1620)、75.0%(1520);18例良性胸腺瘤中PCNA、HSP70蛋白阳性表达分别为38.9%(718)、27.8%(518);12例正常胸腺组织细胞中分别为8.3%(112)、0(012),PCNA蛋白及HSP70蛋白的表达在良、恶性胸腺瘤和正常胸腺组织三者之间差异都有显著性(P<0.001),且在良、恶性胸腺瘤之间相比差异也均有显著性(P<0.05)。但良性胸腺瘤和正常胸腺组织相比,PCNA及HSP70蛋白的表达差异均无显著性(P>0.05)。结论通过检测HSP70与PCNA在胸腺瘤的表达水平,可以判断胸腺瘤的良、恶性,为术后进一步治疗提供了有价值的参考指标。     

氯化甲基汞对大鼠脑神经细胞c-fos表达的影响

目的通过体内与体外实验相结合的方法研究氯化甲基汞(MMC)对脑神经细胞c-fos表达的影响,探讨甲基汞所致脑发育损伤的机制.方法体外实验中,应用免疫细胞化学方法观察MMC对培养神经元c-fos表达的影响.体内实验中,Wistar妊娠大鼠于妊娠7～10d连续灌胃,每日给予MMC4mg/kg.取出生后第1、3、5、7、10和15d仔鼠大脑组织制备常规组织切片.采用免疫组织化学方法检测c-fos表达.结果体外培养的神经元中加入0.3μmol/LMMC持续作用后,神经元中c-Fos阳性细胞率在0.5h开始增多,并随时间的延长而增加.培养神经元接触MMC10min和2、6h组,细胞阳性率分别为(6.97±2.86)%、(66.86±5.32)%、(64.49±3.09)%.体内实验中,对照组和实验组中仔鼠大脑皮层中c-Fos蛋白阳性细胞率随发育时间延长逐渐减少,但实验组均高于相应对照组,实验组第1、3天组c-Fos阳性率分别为(47.01±3.79)%和(46.71±1.96)%,与对照组的(35.86±3.04)%和(33.35±1.06)%相比,差异有非常显著性.结论MMC可诱导脑神经细胞c-fos的过表达,这可能是MMC所致脑发育损伤的机制之一.     

不同强度噪声对豚鼠耳蜗HSP70表达特点的影响

[目的 ]观察无损伤的中等强度的习服声刺激后耳蜗中热应激蛋白 (heatshockprotein ,HSP)的表达特点。 [方法 ]习服组先接受 10d每天 6h习服声暴露 ;对照组静置饲养 10d ;习服 +高噪声暴露组先接受 10d每天 6h习服声暴露 ,休息 2d后 ,再暴露于高强度噪声 2h ;高噪声暴露组直接暴露于高强度噪声 2h。然后以免疫组织化学方法结合图像分析技术检测各组动物耳蜗HSP70表达情况。 [结果 ]习服组耳蜗中HSP70 (积分光密度为 2 2 .99,平均光密度为 0 .2 8)明显高于对照组 (积分光密度为 6.77,平均光密度为 0 .11) (P <0 .0 5 ) ;习服 +高噪声组明显低于高噪声暴露组 (P <0 .0 5 ) ,两组积分光密度分别为 2 0 .0 6和 43 .14 ,平均光度分别为 0 .3 0和 0 .40。 [结论 ]用无损伤的中等强度习服声诱导耳蜗中HSP70的表达高于正常状态时的表达而低于高强度噪声刺激时的表达 ,但习服过程诱导产生的HSP70却对听觉系统提供了一定的保护作用     

BALB／c—3T3细胞的体外微核试验

利用已建立的ＢＡＬＢ／ｃ－３Ｔ３哺乳类细胞株，对苯并（ａ）芘、环磷酰胺、２－氨基蒽、２－硝基芴、亚硝化煤尘提取物和纸烟烟雾凝聚物，用微核试验作了遗传毒性的测试。结果表明：ＢＡＬＢ／ｃ－３Ｔ３细胞能活化某些前诱变物和前致癌物。看业ＢＡＬＢ／ｃ－３Ｔ３细胞微核试验，不需加外源性活化系统，作为体外遗传毒性测试系统十分有用。