小白菊内酯对小鼠利尿作用的研究

目的：探讨小白菊内酯对小鼠的利尿作用。方法：采用代谢笼法测定小白菊内酯对小鼠的利尿作用,采用全自动生化仪测定小鼠尿液中离子的浓度。结果：小白菊内酯高剂量组和中剂量组小鼠的排尿量增加,与空白组比较有显著差异（P〈0.05）,阳性对照最的排尿量最大,与高剂量组比较没有明显差异（P〉0.05）;小白菊内酯三个剂量组,均能显著增加小鼠尿中Na＋、K＋、Cl-离子的排泄。结论：小白菊内酯具有很强的利尿作用。     

小白菊内酯抑制紫杉醇诱导的肿瘤细胞凋亡

目的　探讨NF κB在紫杉醇诱导肿瘤细胞凋亡中的作用及小白菊内酯对紫杉醇诱导凋亡的影响。方法　以人乳癌BCap37细胞和人表皮KB细胞为研究对象 ,用 5,1 0和 2 0 μmol·L-1 小白菊内酯预处理细胞 ,以DNA凋亡梯状条带、DNA含量、MTT、细胞甩片及电泳迁移率变动分析 (EMSA)法检测它对紫杉醇诱导细胞凋亡的影响并探索其作用靶点。结果　通过检测DNA凋亡梯状条带、DNA含量和细胞生存率 ,2 0μmol·L-1 小白菊内酯能显著抑制紫杉醇所诱导的BCap37和KB细胞凋亡 ,但不影响紫杉醇诱导肿瘤细胞G2 /M期阻滞。EMSA实验表明小白菊内酯能抑制紫杉醇诱导激活NF κB。结论　小白菊内酯通过抑制NF κB的激活来抑制紫杉醇所诱导的肿瘤细胞凋亡 ,而紫杉醇诱导肿瘤细胞凋亡的过程可能与G2 /M期阻滞无关     

小白菊内酯及其类似物的药理学研究进展

小白菊内酯(parthenolide)是从木兰科观光木属植物观光木(Tsoongiodendron odorum Chun)、菊科植物野甘菊(7anacetum parthenium)中提取分离出来的倍半萜烯内酯化合物,作为草药曾被广泛用于治疗多种炎性疾病,包括发热、偏头痛和关节炎等,其作用温和,不良反应小。近年来研究发现小白菊     

小白菊内酯对结肠癌细胞凋亡的影响及其机制研究

目的观察小白菊内酯（PN）对结肠癌HT-29细胞凋亡的影响并分析其可能机制。方法不同浓度PN作用于结肠癌HT-29细胞,以流式细胞仪（FCM）检测细胞凋亡;Western Blot法检测核转录因子（NF）-B亚单位pso、环氧化酶（cox-2）蛋白表达的改变;ELISA法测定前列腺素E2（PGE2）浓度。结果PN能诱导结肠癌细胞的凋亡,且随PN浓度的增加,结肠癌HT-29细胞的凋亡率增加;而NF-κB亚单位p50、COX-2蛋白表达减少,同时PGE2浓度降低。结论PN可诱导结肠癌HT-29细胞凋亡,其机制可能与其能下调NF-κB、COX-2蛋白表达并减少PGE2生成有关。     

ROS在小白菊内酯诱导MM细胞凋亡中的作用

目的研究倍半萜内酯小白菊内酯(parthenolide,PL)对多发性骨髓瘤原代细胞和细胞株诱导的凋亡作用及其机制。方法以多发性骨髓瘤原代细胞及细胞株为研究对象,利用台盼蓝染色检测细胞存活率,用DAPI染色法检测细胞凋亡率,流式细胞仪检测反应氧(ROS)和线粒体膜电位水平变化。结果2.5μmol.L-1PL引起多发性骨髓瘤(multi-ple myeloma,MM)细胞明显凋亡及线粒体膜电位下降,而正常淋巴细胞在同等条件下不受影响。用2.5μmol.L-1PL作用10 h后,KMM-1和MM1S细胞ROS水平明显增加。用自由基清除剂L-N-乙酰半胱氨酸(L-NAC)预处理可抑制ROS的产生,对两种细胞存活率、凋亡率无影响。用还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶抑制剂二亚苯基烟碱氯化物(diphenylene iodonium chloride,DPI)预处理KMM-1和MM1S,可明显抑制PL介导的ROS的产生,并对两种细胞凋亡率无影响。结论PL诱导多发性骨髓瘤细胞凋亡,而正常淋巴细胞在同等条件下不受影响。PL的凋亡活性是通过引起MM细胞氧化应激而介导的,并进一步推测NADPH氧化活性与PL介导的MM细胞ROS的产生相关。     

PDTC抑制TGF-β1对肺纤维化模型大鼠肺成纤维细胞的诱导作用

目的:通过核因子-κB(NF-κB)抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC),观察NF-κB在转化生长因子(TGF-β1)诱导肺成纤维细胞表达结缔组织生长因子(CTGF)及向肌成纤维细胞(MF)分化中的作用。方法:一次性气管内滴注博莱霉素-A5复制肺纤维化模型,取肺组织培养肺成纤维细胞,细胞分为Sham组、TGF-β1组、PDTC TGF-β1组和PDTC组。采用免疫细胞化学技术、流式细胞术检测PDTC对TGF-β1诱导的成纤维细胞表达α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和CTGF的影响。结果:TGF-β1组和Sham组比较,肺成纤维细胞表达CTGF和α-SMA明显增加,PDTC TGF-β1组肺成纤维细胞表达CTGF和α-SMA低于TGF-β1组,单独PDTC对肺成纤维细胞无影响。结论:NF-κB促进TGF-β1诱导肺纤维化模型大鼠肺成纤维细胞表达CTGF及肺成纤维细胞向MF分化。     

蓝萼甲素下调GSK3β/β-catenin信号通路抑制TGF-β1诱导的肺成纤维细胞转化

本研究探讨了蓝萼甲素抑制转化生长因子-β1 (transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导的肺成纤维细胞向肺肌成纤维细胞转化的作用及其分子机制.应用Western blot法、细胞免疫荧光法、胶原胶收缩法等检测蓝萼甲素抑制TGF-β1诱导的肺成纤维细胞转化指标的变化情况;应用Weste...     

小白菊内酯对多发性骨髓瘤细胞表面抗原的影响及其生长抑制作用

目的探讨小白菊内酯(parthenolide,PTL)对多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)细胞表面抗原的影响,以期了解其抗MM效应的机制.方法体外培养人MM细胞系PRMI8266,在不同浓度的PTL作用不同时间后,以荧光抗体标记流式细胞仪检测药物作用前后细胞表面抗原的变化,同时以四甲基偶氮唑蓝法及Annexin V和PI双染色流式细胞仪检测细胞生长及凋亡.结果MM细胞表面强表达CD38、CD45、CD49e、MPC-1、CD56,但CD19的表达存在异质性,表达率为(45±3.5)%,提示该细胞系由CD56+CD19+和CD56+CD19-两群细胞组成.2～10μmol·L-1的PTL处理MM细胞48 h后,CD38、CD45、CD49e、MPC-1及CD56的表达无明显变化,而CD56+CD19+和CD56+CD19-两群细胞的比例明显改变,且CD56+CD19+细胞的比率呈浓度依赖性增大.同时,细胞生长受到明显抑制、凋亡率增加,也呈现时间和浓度依赖性.结论PTL能明显增加MM细胞系PRMI8266中CD56+CD19+细胞的比率,抑制MM细胞体外生长及诱导凋亡.作为新的具有抗MM效应的中药有效活性成分,其作用机制为诱导CD56+CD19-MM细胞CD19抗原表达还是直接诱导CD56+CD19-MM细胞的凋亡,值得深入研究.     

小白菊内酯对结肠癌细胞凋亡的影响及其机制研究

Objective To investigate the effect of parthenolide (PN) on human colon cancer cells in vitro and its mechanism. Methods Human colon cancer cell line HT-29 was cultured and treated with PN at the concentra-tions of 10 ,50 ,100 ,200,500 ,1 000 μmol/L for 48 hours. Then the apoptosis was detected by flow cytometry. The ex-pression of NF-Κb p50 and COX-2 proteins were analyzed by Western blot and the concentration of PGE2 was meas-ured with ELISA kits. Results PN significantly induced cell apoptosis after 48 h in a dose-dependent manner. The expression of NF-Κb p50 and COX-2 proteins were down-regulated by the PN, and the concentrations of PGE2 were al-so declined. Conclusion PN can induce apoptosis of the human colon cancer cells. And the process may be carried out through the way of "NF-Κb→COX-2→PGE2".     

TGF-β_1诱导肺切片纤维化模型的建立

目的建立转化生长因子β1(transforming growth fac-tor-β1,TGF-β1)诱导肺切片纤维化模型,为肺纤维化病理机制和治疗药物的研究提供实验基础。方法0·4%的琼脂糖充盈肺组织,切片,于肺切片培养的1、3、5、7、9d以LDH漏出值和MTT比色法观察肺切片存活情况。以羟脯氨酸(HYP)为指标从时效和量效两个方面确定TGF-β1诱导肺切片纤维化的亚适时间点和亚适剂量。肺组织进行HE和Masson染色以确定肺纤维化是否形成。结果在本实验条件下,培养的肺切片可存活9d。通过HYP和组织学检查确定TGF-β1诱导肺切片纤维化的亚适时间点和亚适剂量分别为7d和2·5μg·L-1。另外,氢化可的松对TGF-β1诱导肺切片纤维化无明显影响。结论TGF-β1(2·5μg·L-1,×7d)可诱导肺切片纤维化,氢化可的松对此无明显影响。     

雪莲对百草枯诱导的大鼠肺纤维化的干预作用

肺间质纤维化发病率逐年上升,以进行性呼吸困难为主要表现.通常首选激素治疗,但副作用大,效果欠佳,雪莲注射液证实有抗脂质过氧化作用[1],本研究探讨雪莲对百草枯诱导的大鼠肺纤维化模型的干预作用及其可能的机制.     

TGF-β/Smad信号转导通路与肝纤维化研究进展

肝纤维化是慢性肝病向肝硬化发展的中间过程,以胶原蛋白为主的细胞外基质（extracellular matrix,ECM）合成与降解失衡,导致过多的胶原在肝内沉积,是多条细胞信号转导通路和一系列细胞信息分子网络共同控制的结果。转化生长因子β（TGF-β）是肝纤维化病变过程中最关键的细胞因子之一。其中TGF-β/Smad信号转导通路是TGF-β信号转导调节肝星状细胞（HSC）活化促进ECM生成的主要途径。本文就TGF-β/Smad信号转导通路在肝纤维化过程中的作用及其研究进展予以综述。     

肾纤维化相关信号通路研究进展

肾纤维化是一种慢性进行性纤维化疾病,是许多慢性肾脏疾病发展过程中的必经阶段。肾纤维化的发病机制目前尚不明确,其主要特征为肾组织损伤、炎症、细胞外基质沉积和肾小管上皮细胞-间充质转化。几种信号通路在肾纤维化的发生发展中发挥着重要的作用,其中TGF-β/Smad、Wnt/β-catenin和Hedgehog等信号通路与肾纤维化密切相关。对这3种信号通路进行综述,旨在为肾纤维化相关研究提供参考。     

一种新型的截短型转化生长因子-βⅡ型受体的构建

目的设计并构建一种新型的截短型转化生长因子-βⅡ受体(tTGF-βRⅡ)。方法 RT-PCR方法扩增TGF-βⅠ的CDS序列、tTGF-βRⅡ,并将其分别克隆至pGBKT7和pGADT7载体中。利用酵母双杂交和GST-pulldown试验检测tTGF-βRⅡ与TGF-βⅠ间的相互作用。人工合成该tTGF-βRⅡ多肽。结果成功地设计并克隆了一种新的tTGF-βRⅡ,其可以与配体TGF-βⅠ结合。结论制备的tTGF-βRⅡ可以作为TGF-βRⅡ的拮抗剂,竞争性的与TGF-βⅠ结合,为瘢痕治疗奠定了基础。     

TGF-β/Smads信号通路在心肌纤维化发生和治疗中应用前景的研究进展

心肌纤维化(MF)是多种心脏疾病发展到一定阶段的共同病理改变,是心肌重构的主要表现之一。这种病理变化存在于多种心血管疾病中,与心律失常、心力衰竭等疾病密切相关。转化生长因子-β(TGF-β)在MF的发生和发展中起着重要作用。TGF-β/Smads信号通路是TGF-β发挥生物学作用的主要通路,其分子组成与分子调节复杂,现将它在MF发生和治疗中应用前景作一综述。     

人组织激肽释放酶过表达对病毒性心肌炎小鼠心肌纤维化的抑制作用

目的：探讨过表达人组织激肽释放酶对病毒性心肌炎（VMC）小鼠心肌纤维化的影响。方法：24只4周龄BALb/c雄性小鼠，随机分为正常对照组（Sham组）、模型组（Model组）、病毒性心肌炎+hKLK1基因载体组（EZ.hKLK1组）、病毒性心肌炎+空载体组（EZ.null组）。采用腹腔注射柯萨奇B3病毒液构建VMC模型，通过尾静脉注射高表达人组织激肽释放酶的慢病毒颗粒（pEZ-Lv105-hKLK1）。第30天，心脏超声检测心功能后，断颈处死小鼠，计算心脏体重比，心肌胶原含量以及Ⅰ型和Ⅲ型胶原比值，Western blot法测定hKLK1、TGF-β₁蛋白的表达。结果：与Sham组相比，Model组心脏指数、左心室舒张末期内径（LVEDd）、左心室收缩末期内径（LVEDs）、心肌胶原含量、Ⅰ/Ⅲ胶原比值、TGF-β₁的表达均显著升高（P<0.05），左心室缩短分数（FS）和射血分数（EF）显著降低（P<0.05），提示造模成功；与Model组相比，EZ.hKLK1组KLK1的表达显著升高（P<0.05），同时心脏指数、LVEDd、LVEDs、心肌胶原含量、Ⅰ/Ⅲ胶原比值、TGF-β₁的表达均显著降低（P<0.05），FS和EF显著升高（P<0.05），而EZ.null组差异无显著性（P>0.05）。结论：KLK1可通过调节TGF-β₁的表达而发挥抑制VMC小鼠心肌纤维化的作用。     

系膜增生性肾小球肾炎患儿肾组织TGF-β1的表达与临床病理意义

目的探讨转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)蛋白在系膜增生性肾小球肾炎(MsPGN)肾组织中的表达及其临床意义。方法应用即用型免疫组化方法(Elivision二步法)检测MsPGN25例、微小病变(MCNS)10例、局灶性节段肾小球硬化(FSGS)8例、对照组5例,观察TGF-β1蛋白在系膜增生性肾小球肾炎患儿肾组织中的表达情况。结果 (1)在不同病理类型患儿肾小球上皮细胞及肾小管间质细胞均有不同程度的TGF-β1蛋白的阳性表达,TGF-β1的表达以FSGS为最强,其次为MsPGN、MCNS。与正常肾组织比较差异有统计学意义(P<0.001);(2)MsPGN组TGF-β1蛋白表达随着系膜增生程度明显增加(P<0.01);(3)MsPGN组随肾小管间质损伤和炎症细胞浸润程度及纤维化程度加重,TGF-β1蛋白表达明显增加(P<0.01);(4)MsPGN肾组织TGF-β1表达水平与蛋白尿严重程度相关。结论 MsPGN肾组织内TGF-β1的表达增强,并与肾脏病理损伤程度密切相关。     

不同剂量模式照射对大鼠放射性肺损伤的影响

目的建立不同剂量分割模式照射的放射性肺损伤动物模型,初步探讨不同剂量分割模式照射对放射性肺损伤的差异。方法 Wistar大鼠90只随机分为小分次照射组(2 Gy/次,每周照射5次,共15次)、大分次照射组(10 Gy/次,每周照射1次,共3次)和对照组(不照射),用60Co-γ射线对大鼠右肺进行照射,于照射后第1,3,5,10,24周末取大鼠静脉血,采用ELISA测定血清中转化生长因子β1(TGF-β1)和肿瘤坏死因子α(TNF-α),并于各时间点处死大鼠取肺组织,进行HE染色观察肺组织损伤的病理变化。结果大分次照射组大鼠血清中TGF-β1含量从放疗后第1周开始,迅速呈线性增长,到第10周时血清中TGF-β1含量达峰值,第5周到24周均维持在一较高水平;而血清中TNF-α含量变化呈抛物线型态,即放疗后血清中TNF-α含量从第1周较低水平迅速升高,到第10周时达到峰值,此后迅速下降;小分次照射组在不同时间段血清TGF-β1、TNF-α较对照组有所升高,但升高的幅度明显小于大分次照射组;大鼠肺组织受照射后经历了一个从急性放射性肺炎到慢性肺纤维化的病理损伤过程,无论是急性放射性炎症还是放射性纤维化小分次照射组均较大分次照射组明显轻微。结论在接受相同剂量照射时,小分次照射组血清中TGF-β1、TNF-α含量升高幅度明显低于大分次照射组,且大鼠肺组织病理损伤的程度明显较大分次照射组轻,因而小分次照射对晚反应组织具有良好的保护作用。     

碘化钾对实验性铅性肾病的保护作用及其对转化生长因子-β表达的影响

目的:观察碘化钾对铅性肾病的保护作用,并从蛋白质和分子水平观察其对转化生长因子-β(TGF-β)表达的影响。方法:SD大鼠48只(180~220 g)适应性饲养1周,随机分为两组,每组根据时间点的不同又分3个亚组。APb,BPb,CPb为染铅组,分别给予0.5%的醋酸铅喂饮1,2,3个月;AKI,BKI,CKI为碘化钾组,给予0.5%醋酸铅喂饮的同时予碘化钾(3 mg/100 g体重),用注射用水稀释灌胃每日1次,时间分别为1,2,3个月,所有实验组中大鼠每天的饮水量大致相同。实验结束时称体重、肾重;原子吸收光谱石墨炉法测量血铅、肾铅含量;用免疫组织化学的方法检测肾组织TGF-β蛋白的表达,用RT-PCR的方法检测肾组织TGF-βmRNA的表达。结果:实验到第3个月时,碘化钾组与染铅组比较体重差显著增高,肾重/体重比显著降低;血铅、肾铅含量显著降低;而实验前2个月无明显差别。肾组织TGF-β蛋白和mRNA的表达在两组中差异无显著性。结论:碘化钾能拮抗铅对大鼠生长发育的影响,并有驱铅的作用,但对TGF-β的影响不大。