Wilson病ATP7B基因启动子区的研究

目的 检测肝豆状核变性（Wilson disease，WD）ATP7B基因启动子区的DNA序列，分析其结构，发现存在的突变，通过报告基因瞬时表达研究突变对启动子功能的影响。方法 检测36个WD家系71名成员（其中48例WD患者）及20名正常人的基因组DNA序列并进行分析。对发现的突变，进行荧光素酶报告基因瞬时表达研究。结果 （1）在正常对照、患者一级亲属和WD患者的启动子区-190、-78和＋260位（转录起始点为＋1）均发现存在单个碱基的不同；（2）在48例病人中发现3例存在-183位C→T突变，其中2例为纯合突变，另1例为杂合突变，在正常对照、患者一级亲属中未发现此改变；（3）通过荧光素酶报告基因瞬时表达研究，发现-183位C→T突变不影响ATP7B基因启动子的功能。结论 本研究在ATP7B基因启动子区未发现存在致病突变，提示ATP7B基因启动子区存在致病突变在中国人群中是不常见的。     

Wilson病的基因及细胞移植治疗的研究进展

Wilson病(WD)是一种常染色体隐性遗传性铜代谢障碍性疾病,ATP7B基因突变是该病的根本病因。基因及细胞治疗是最可能从根本治愈本病,最具前景的治疗途径。目前,国内外的基础研究主要是以质粒、腺病毒、慢病毒等为载体介导基因治疗。细胞移植的方法有肝细胞移植、胎儿肝祖细胞移植、骨髓干细胞移植、胚胎干细胞移植。本文就以上方法的基础研究以及对促进干细胞向肝细胞方向分化的因素作一综述。各种基因及细胞移植技术均能达到一定的治疗动物模型作用,但仍存在许多不足之处。促进干细胞向肝细胞方向分化的肝细胞核因子是重要的研究方向之一。     

外伤与肝豆状核变性：附28例报告

２８例有外伤史的肝豆状核变性（ＨＬＤ）中，１７例症状前期的ＨＬＤ在外伤后显化，其中于外伤后１月内发病者约７０％；８例于外伤后４天原有脑症状急剧加重，３例在外伤后因立即予以强力驱铜治疗，病情未加重。不论外伤部位和程度如何都可使脑症状显化或加重。因此，ＨＬＤ应尽量避免各种外伤，一旦发生外伤需及时予以强力驱铜治疗。     

Wilson病基因全长外显子的突变检测和分析

目的 研究报道Wilson病（WD）基因7种新突变和5种多态,结合前期在部分外显子发现并报道的突变和多态现象,进一步分析WD基因全长外显子的突变特征,以期对中国人WD基因的突变状况有一个完整的认识。方法 研究对象包括60名无亲缘关系的正常对照和84例分别来自65个家系的WD患者。抽取上述研究对象为外周静脉血,用盐析法或过柱法抽提基因组DNA。用聚合酶链反应方法分别扩增全部的21个外显子顺序,以单链构象多态分析及DNA测序方法,检测上述研究对象的基因突变和多态。结果 共检测到18种突变和17种多成,包括7种突变和5种新多态。其中Arg778Leu和Thr935Met为基因突变热点,突变频率分别高达37．7％和10．0％,其余突变的频率均低于4．0％。此次研究还发现曾作为突变形式加以报道的IIe48Thr应考虑为一种多态现象。结论 我国WD基因突变是是少数几个热点突变和广泛存在的罕见突变为特征。     

Wilson氏病多器官的病理和超微病理学研究

本文对1例HLD死者进行了病理和电镜研究。肉眼可见结节性肝硬化,脾肿大,脑萎缩和豆状核软化灶等。光镜显示坏死后性肝硬化,可见铜离子在肝细胞及其周围沉积;在基底节区可见散在的神经细胞变性,继发性的神经胶质增生,并可找到Alzheimer Ⅱ型细胞。对5种器官(肝、肾、脑、脾和皮肤)进行电镜观察,在肝、肾、皮肤组织均可见散在的高电子密度物质沉积。本研究是国内首次对HLD进行多器官的超微病理学观察,它对促进本病的研究具有重要意义。     

肝豆状核变性所致精神障碍1例

患者女性,24岁。因情绪不稳、言行紊乱、失眠20d来院就诊。20d前无明显诱因出现精神异常,情绪不稳,经常无故哭泣,烦躁易怒,有时打人,乱摔东西。行为怪异,双手不自主抖动,经常发呆、自言自语,有时无故发笑。夜问睡眠差。生活懒散,个人卫生需人提醒。有时感心慌不适。     

肝豆状核变性伴强迫症状1例

报道1例肝豆状核变性(HLD)伴强迫症状者。     

老年首次发病肝豆状核变性所致精神障碍1例

<正>1病例患者女,68岁,已婚,固镇县石湖乡刘园村人。首次入院,其子供史,欠详。此次因"阵发性少语,纳差3~4个月"入院。患者于3~4个月之前因胃部不适在当地医院住院时,发现两名认识的人因病去世后,急起出现精神异常,表现少语,不动,有时固定某种姿势不动,保持很长时间,并称自己不能动了,要求家人搬动,呈阵发性,缓解后基本好如常人,其间因目睹别人办丧事等原因多次复发,家人在当地医     

多位点连锁分析检测Wilson病基因携带者及症状前患者

应用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交技术，以ＷＮＤ位点两侧的四个ＤＮＡ多态标记－Ｄ１３Ｓ１、Ｄ１３Ｓ３１、Ｄ１３Ｓ２６对１０个Ｗｉｌｓｏｎ病家系的５４名个体进行多位点限制性片断长度多态性（ＲＦＬＰ）连锁分析，检出２例症状前患者，１１例肯定携带者及５名正常纯合子，证实它们用于Ｗｉｌｓｏｎ病的症状前诊断及杂合子筛选是有效可靠的。     

儿童Wilson’s病脑损伤的CT,MRI与临床研究

Wilson’s病（W．D），又称肝豆状核变性，为常染色体隐性遗传性铜代谢障碍疾病，可引起肝、肾、脑等器官严重广泛性损害[1]。本文对20例有或尚无神经症征的该病患儿进行脑CT、MRI检查并与临床对照分析，报告如下：临床资料1．一般资料：20例W．C患儿，男12例，女，8例，最小年龄2岁，最大年龄14岁，平均年龄9±4．6岁。发病至确诊时间平均为9．5±3．4月，其中最短10天，最长5年。临床诊断依据：裂隙灯下发现K—F环；血清铜氧化酶水平下降，平均为0．01±0．026光密度，（正常0．1～0．3光密度或20～60mg％）；血清铜水平增高＞60～16…     

应用限制性酶谱分析法快速检出Wilson病基因突变热点

目的建立Wilson病（WD）基因突变热点的快速检出方法,并探讨其在WD临床可疑患者诊断中的价值。方法PCR扩增我国WD基因的突变热区──第8号和12号外显子,分别以限制性内切酶MspI和TaiI消化扩增产物,2％琼脂糖凝胶电泳分离,得出相应限制性酶切图谱并进行分析。56例非同源家系的WD患者及60例正常对照进行了该项检测。其中44例同时进行这两个外显子的测序检测。结果37．5％（21／56）的WD患者在第8号外显子检测到Arg778Leu／Gln点突变,其中12例为纯合点突变,9例为杂合点突变,染色体突变频率为29．5％（33／112）。16．1％（9／56）的患者在第12号外显子检测到Thr935Met点突变,均为杂合点突变,染色体突变频率为8．0％（9／112）。结果与测序相符。结论采用限制性酶谱分析法可准确检出WD基因最常见的两个突变点,有助于对临床可疑患者进行诊断。并具有简便快速、结果清晰可靠、不需用同位素等优点,易于推广应用。     

以精神障碍为首发症状的肝豆状核变性1例

1病例 患者,男,15岁,学生。患者于2003年下半年始渐出现孤僻,懒散,发呆,记忆力下降,注意力不集中,厌学,尤其厌恶学习英语,称“英语是英国、美国的语言,美国侵略伊拉克是坏的,所以不要学英语”。按自己意愿画世界地图。逃课,学习成绩明显下降。于2004年11月以精神分裂症收入院。体检：四肢肌张力高,双侧戈登征阳性,右侧奥本汉姆征阳性。精神检查：意识清,接触被动,注意力不集中,     

以躁狂为首发症状的肝豆状核变性1例

1病例 患者男性,26岁,未婚,初中文化。病程11d。表现为兴奋、话多,说大话,发脾气,摔东西,花钱大方,热情,在家闲不住,不睡觉,未曾治疗。于7d前与人打架,收住我院。家族史、个人史、既往史无特殊。体格检查无异常。精神检查：意识清,接触主动,思维联想迅速,有夸大观念,自我感觉良好,情感高涨,易激惹,注意力不集中,意志活动增强,无自知力。辅助检查：血常规、肝功能、尿常规、脑电图、心电图均正常。人院诊断为：无精神病性症状的躁狂症。颅脑MRI：脑表面沟裂无明显增宽,双侧豆状核区呈长T1、T2异常信号影,Falir像上述病灶呈高信号影,脑室池系大小形态可,中线结构居中。     

胚肝细胞移植治疗Wilson病的初步研究

目的　探讨胚肝细胞脾内移植对TX小鼠铜代谢紊乱的改善情况。方法　组织块酶消化法分离培养DL小鼠胚肝细胞 ,以Hoechst3332 4进行荧光标记后作为供体对TX小鼠进行脾内移植 ,检测移植后TX小鼠的血清铜蓝蛋白和血清铜水平 ,并进行病理学检查。结果　移植后 2周内 ,TX小鼠的铜蓝蛋白由 9 0U/L逐渐上升至 14 5U/L、血清铜由 0 3mg/L上升至 0 6mg/L(P <0 0 5 ) ,受体肝组织内可见供体细胞定居并呈结节样增生。结论　胚肝细胞脾内移植后可在受体肝组织中定居增生 ,并有效改善TX小鼠的铜代谢障碍 ,为Wilson病的治疗提供了新的思路。     

Wilson病基因产物在人肝细胞内存在和定位的研究

目的证实Wilson病铜转运P型ATP酶(WD蛋白)在人肝内的存在,并初步研究其在肝细胞内的具体定位.方法应用Western-blot蛋白印迹技术对离体培养正常人肝细胞内蛋白进行分离;通过高浓度铜及P型ATP酶阻滞剂矾酸钠、激动剂长春新碱孵育培养,差速离心分离肝细胞胞浆、溶酶体、线粒体和微粒体,对各亚细胞铜含量分别对照分析.结果人肝细胞内分离出155 kDa的WD蛋白特异性条带;在人肝细胞质膜、微粒体内存在有铜转运P型ATP酶,其阻滞剂及激动剂对肝细胞铜转运有显著影响.结论证实正常人肝细胞存在WD蛋白,其存在部分可能在肝细胞质膜、内质网和高尔基器.     

儿童肝豆状核变性1例

1病例 患儿男,13岁.因缓起夜间睡眠差、心情烦躁6个月,言语欠清晰、偶流口水4个月入院.患儿自6个月前起难以入睡,心情紧张,无故发脾气.诊断儿童情绪障碍,给予帕罗西汀及小剂量舒必利治疗.