逆转灵—套式聚合酶链反应检测丙型肝炎病毒RNA

采用逆转录－套式聚合酶链反应检测２８０例疑为ＨＣＶ感染的病人血清，并同时做抗－ＨＣＶ－ＩｇＧ检测。结果５１例ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性，其中２６例抗ＨＣＶ－ＩｇＧ阳性；在２５４例抗ＨＣＶ－ＩｇＧ阴性血清中有２５例ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性。     

肝组织HCV—NS3抗原与HCV感染血清不同模式的关系及临床意义

采用逆转录套式聚合酶链反应（ＲＴ－ｎｅｓｔｅｄ ＰＣＲ）和ＥＬＩＳＡ方法检测血清ＨＣＶ ＲＮＡ、抗－ＨＣＶ，采用鼠单克隆抗体ＰＡＰ方法检测肝组织内ＨＣＶ－ＮＳ３抗原。结果发现被检测的４５例丙型肝炎患者随着病情加重和病程延长，血清抗－ＨＣＶ和ＨＣＶ ＲＮＡ及肝组织ＨＣＶ－ＮＳ３抗原阳性率逐步增高；某些患者抗－ＨＣＶ和ＨＣＶ ＲＮＡ阳性结果不一致；血清ＨＣＶ ＲＮＡ阳性肝组织ＨＣＶ－ＮＳ３阳性率明显同     

逆转录聚合酶链反应检测血清中丙型肝炎病毒RNA

本文用本所自己合成的引物，对３０份怀疑ＨＣＶ感染血清进行ＨＣＶＲＮＡＲＴ－ＰＣＲ检测。该３０份血清中，２２份抗－ＨＣＶ阳性，其中１８份ＨＣＶＲＮＡ为阳性，８份抗－ＨＣＶ阴性血清及怀疑阳性血清中，２份ＨＶＣＲＮＡ为阳性。结果提示，抗－ＨＣＶ抗体试剂盒用于检测急性ＨＣＶ感染有其不足之处，结合ＰＣＲ检测ＨＣＶＲＮＡ的方法可提高急性ＨＣＶ感染的检出率。     

复合PCR检测乙型肝炎和丙型肝炎病毒

设计了ＨＢＶ和ＨＣＶ各一对引物，建立了复合ＰＣＲ，并对临床标本进行检测，５例ＨＢｓＡｇ和ＨＣＶ抗体均阳性者，其ＨＢＶ－ＤＮＡ和ＨＣＶ－ＲＮＡ均阳性；２０例单ＨＢｓＡｇ阳性标本，１１例单ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性，５例ＨＢＶ－ＤＮＡ和ＨＣＶ－ＲＮＡ均阳性；２０份单ＨＣＶ抗体阳性者，ＨＣＶ－ＲＮＡ均阳性，３例合并ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性；１０例慢性ＮＡＮＢ抗ＨＣＶ阴性肝炎标本８份ＨＣＶ－ＲＮＡ，１例ＨＢＶ－ＤＮＡ和     

TthDNA聚合酶在丙型肝炎病毒RNA检测中的应用

用ＴｔｈＤＮＡ聚合酶行逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）扩增丙型肝炎病毒（ＨＶＣ）５′端非编码序列，对２６２例肝炎患者血清进行ＨＣＶＲＮＡ测定，结果ＨＣＶＲＮＡ阳性者５３例，阳性率２０．２％，凡阳性者用酶联免疫吸附法测其抗ＨＣＶＩｇＧ，其中３０例测到抗ＨＣＶ，阳性重叠率５６％（３０／５３）；ＨＣＶ ＲＮＡ阳性中的１５例同时用成髓细胞瘤病毒酶行传统逆转录－套式聚合酶链反应检测对照，１４例阳性，符合率     

TthDNA聚合酶在丙型肝炎病毒RNA检测中的应用

用ＴｔｈＤＮＡ聚合酶行逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）扩增丙型肝炎病毒（ＨＶＣ）５’端非编码序列，对２６２例肝炎患者血清进行ＨＣＶＲＮＡ测定，结果ＨＣＶＲＮＡ阳性者５３例，阳性率２０．２％。凡阳性者用酶联免疫吸附法测其抗ＨＣＶＩｇＧ，其中３０例测到抗ＨＣＶ，阳性重叠率５６％（３０／５３）；ＨＣＶＲＮＡ阳性中的１５例同时用成髓细胞瘤病毒酶行传统逆转录。套式聚合酶链反应检测对照，１４例阳性，符合率达９３．３％（１４／１５）。ＴｔｈＤＮＡ聚合酶用于ＲＴ－ＰＣＲ检测ＨＣＶＲＮＡ５’端非编码序列片段具有敏感性高、特异性强、稳定性好的优点。     

血透患者检测抗HCV IgM的临床意义

为探讨丙型肝炎ＩｇＭ抗体测定在血液透析患者中的临床意义,采秀间接ＥＬＩＳＡ法检测抗ＨＣＶ ＩｇＭ。同时采用ＥＬＩＳＡ测抗ＨＣＶ ＩｇＧ,ＲＴ－ＰＣＲ法测ＨＣＶ ＲＮＡ,并进行比较。结果示６２例血液透析病人中,抗ＨＣＶ ＩｇＭ阳性２７例（４３．６％）,抗ＨＣＶ ＩｇＧ阳性２９例（４６．８％）,ＨＣＶ ＲＮＡ阳性３４例（５４．８％）,任一项阳性３７例（５９．７％）;抗ＨＣＶ ＩｇＭ与ＨＣＶ ＲＮＡ检测     

干扰素治疗前丙肝患者血清及外周血单个核细胞中HCV—RNA的检测

本文采用ＲＴ－ＰＣＲ方法对２６例干扰素治疗前丙肝患者血清ＨＣＶ－ＲＮＡ进行检测，并对１４例血清ＨＣＶ－ＲＮＡ阴性的标本进行外周血单个核细胞中ＨＣＶ－ＲＮＡ进行检测，发现２６例血清标本中ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性率为２６．９％，而１４例血清ＨＣＶ－ＲＮＡ阴性标本，其ＰＢＭＣ中ＨＣＶ－ＲＮＡ有３例阳性，阳性率为２１．１％。因此，ＰＢＭＣ中ＨＣＶ－ＲＮＡ是丙肝病毒血症的又一个诊断指标，是否可作为干扰素疗效判断的     

丙型肝炎病毒RNA非结构区套式聚合酶链反应

目的探讨不同引物对ＨＣＶＲＮＡ检出率的影响，建立敏感的ＮＳ５区基因扩增技术。方法选择不同引物，采用非结构５（ＮＳ５）区套式聚合酶链反应（ＰＣＲ）及联合式「ＨＣＶ非编码区（５ＮＣＲ）与ＮＳ５联合」技术检测１０例抗ＨＣＶ阳性献赠及３７例输血后丙型肝炎患 血清ＨＣＸＶＲＮＡ。结果 １０例抗ＨＣＶ阳性一献血员应用联合式ＰＣＲ，以ＮＳ５－３＋ＮＳ５－４、ＳＦ２＋ＮＳ５－４、Ｋ１＋ＮＳ５－４、ＮＳ５－１＋ＮＳ     

丙型肝炎病毒RNA非结构区套式聚合酶链反应

目的探讨不同引物对ＨＣＶＲＮＡ检出率的影响，立敏感的ＮＳ５区基因扩增技术。方法选择不同引物，采用非结构５（ＮＳ５）区套式聚合酶链反应（ＰＣＲ）及联合式［ＨＣ非编码区（５′ＮＣＲ）与ＮＳ５联合］ＰＣＲ技术检测１０例抗ＨＣＶ阳性献血员及３７例输血后丙型肝患者的血清ＨＣＶＲＮＡ。结果１０例抗ＨＣＶ阳性献血员应用联合式ＰＣＲ，以ＮＳ５－３＋ＮＳ５－４、ＳＦ２＋ＮＳ５－４、Ｋ１＋ＮＳ５－４、ＮＳ５－１＋ＮＳ５－４引物及套式ＮＳ５－１＋ＮＳ５－４引物扩增时，其ＲＮＡ检出率分别为５／１０、６／１０、７／１０、８／１０和９／１０；而３７例输血后丙型肝炎患者中３５例ＲＮＡ阳性，检出率为９５％，其中１８例１ｂ型和１９例２ａ型样品的检出率分别为１００％和８９％。结论ＨＣＶＮＳ５区的ＲＮＡ检出率与引物的选择有关     

逆转录PCR检测急性白血病患者血清中丙型肝炎病毒的研究

应用逆转录多聚酶链反应和酶联免疫吸附试验方法检测１８例经多次输血并有肝功能改变的急性白血病患者血清中丙型肝炎毒基因和抗丙型肝炎病毒抗体。ＨＣＶ ＲＮＡ阳性率７７．８；抗－ＨＣＶ阳性６６．１％；单项或两项阳性者１６例，联合判定ＨＣＶ感染率８８．９％。ＲＴ ＰＣＲ检出ＨＣＶ ＲＮＡ时间早于抗－ＨＣＶ阳转时间，而且敏感性高于后者，是一种早期，灵敏及特异的ＨＣＶ感染诊断方法。     

不同血清学标志血清中HBV DNA和HCV RNA的分析研究

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测４８１例乙肝血清学五项指标至少一项阳性血清中ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ，结果显示ＨＢＶＤＮＡ的检出率为９１．５％，ＨＣＶＲＮＡ的检出率为１５．４％，并提示（１）当乙肝患者血清中抗ＨＢｅ阳性甚至抗ＨＢｓ阳性时，仍有相当部分的ＨＢＶ存在且仍在复制；（２）ＨＢＶ和ＨＣＶ感染可相互增加其易感性；ＨＢｓＡｇ阳性与否与抗ＨＣＶ可能有一定关系；（３）ＰＣＲ检测ＨＢＶＤＮＡ、ＨＣＶＲＮＡ具有较高的敏感性。     

输血及血制品者丙型肝炎病毒感染调查

对深圳九龙海关职员有输血或血制品史者６６铭及对照组１４７名调查其ＨＣＶ感染情况。结果：输血组抗ＨＣＶ组性率为９．１％，明显高于抽样组的０．７％。输血组中以血浆者抗－ＨＣＶ检出最高，传播风险较大。丙种球蛋白及补血康输入者抗－ＨＣＶ阴性。抗－ＨＣＶ检出阳性者中ＡＬＴ升高者ＨＣＶＲＮＡ均阳性，提示ＨＣＶＲＮＡ水平与活动性肝损害相关。     

逆转录套式ＰＣＲ检测丙型肝炎病毒感染者ＨＣＶ ＲＮＡ

目的　探讨人血清和外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ与血清ＩｇＧ和ＩｇＭ抗体联合检测对丙型肝炎的诊断价值。方法对以ＥＬＩＳＡ方法检测所得的４６例ＨＣＶ—ＩｇＧ阳性的标本用逆转录套式聚合酶锭反应（ＲＴ—ＮｅｓｔｅｄＰＣＲ）检测血清和ＰＢＭＣ中ＨＣＶＲＮＡ，同时用ＥＬＩＳＡ方法检测血清中ＨＣＶ—ＩｇＭ。结果血清中有１７例ＨＣＶ　ＲＮＡ阳性和６例ＨＣＶ—ＩｇＭ阳性，而ＰＢＭＣ中有１９例ＨＣＶＲＮＡ阳性。结论血清中ＨＣＶ—ＩｇＭ可作为丙型肝炎的初筛诊断，ＨＣＶ—ＩｇＭ可作为ＨＣＶ近期感染的指标，但二者均不能准确反映病毒在体内的存在情况，而套式ＰＣＲ方法检测ＨＣＶＲＮＡ可直接反映ＨＣＶ在体内的活动情况，其中ＰＢＭＣ中检测ＨＣＶＲＮＡ的阳性率高于血清，提示ＨＣＶ可能在ＰＢＭＣ中潜伏乃至复制。     

静注免疫球蛋白与丙型肝炎病毒传播的安全性研究

笔者就输注国产ＩＶＩＧ后传播ＨＣＶ的危险性作了研究。２９名有ＩＶＩＧ应用指针的病儿，输注经加热法灭活病毒的ＩＶＩＧ后１周、２周、１月，抗－ＨＣＶ阳性率分别为８３．３％、４５．５％、４．６％，３个月后全部转阴，显示抗－ＨＣＶ随输注ＩＶＩＧ后时间延长而转阴。随机抽取１１名输注ＩＶＩＧ后抗－ＨＣＶ阳性病儿的２４份系列血标本，用ｎｅｓｔ－ＰＣＲ检测ＨＣＶ－ＲＮＡ，无阳性发现。检则１０份ＩＶＩＧ中抗－ＨＣＶ均阳性，抗－ＨＣＶ滴度１∶１６，抽取６份ＩＶＩＧ，ＨＣＶ－ＲＮＡ阴性。经３个月～１年观察，所有病例无肝炎的临床症状和体征，结果支持：用于本研究的国产ＩＶＩＧ输注可被动输入抗－ＨＣＶ，但不传播ＨＣＶ。     

冻干低pH静注免疫球蛋白传播丙型肝炎病毒危险性观察与探讨

通过对冻干低ｐＨ静注免疫球蛋白成品的检测和临床使用观察，发现对献血者进行抗－ＨＣＶ抗体筛选，可使成品抗－ＨＣＶ阳性率大幅度降低。由于筛选方法的限制和ＨＣＶ感染后空窗期的存在，合并后的原料血浆污染ＨＣＶ在所难免；冻干低ｐＨ静注免疫球蛋白成品无论其抗－ＨＣＶ是阴性还是阳性，ＰＣＲ检测ＨＣＶ－ＲＮＡ均为阴性的实验结果提示制备工艺过程可以去除ＨＣＶ。临床初步观察和回顾性调查中均未发现ＨＣＶ传播的迹象。     

207例乙肝患者血清HDV RNA和HBV DNA检测及其意义探讨

对２０７例急性，慢性，亚急重型乙型肝炎患者的外周血进行了丁肝病毒（ＨＤＶ）ＲＮＡ和乙肝病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ的检测，结果检出ＨＤＶＲＮＡ阳性２８例（１３．５％）。其中，在抗－ＨＢｅ阳性者和ＨＤＶＲＮＡ检出率较高，为１８．９％，ＨＢｅＡｇ阳性者中的ＨＤＶＲＮＡ检出率较低，为７．９％，在本文２８例ＨＤＶＲＮＡ阳性的患者中６例（２１．４％）检出ＨＢＶＤＮＡ；而在其余１７９例ＨＤＶＲＮＡ阴性病例中，则有６５     

RT-PCR技术检测抗-HCV阴性血液结果

ＨＣＶ感染人体到抗体转阳有一个较长的窗口期,期间用ＥＬＩＳＡ检测抗－ＨＣＶ总是阴性,这是导致现阶段临床输血传染ＨＣＶ主要原因。而ＨＣＶ感染后数天ＨＣＶ－ＲＮＡ的复制即在进行,引发病毒血症,早期常能检出阳性结果。为此本站自１９９５年３月起对经ＥＬＩＳＡ...     

改良二氧化硅吸附法检测丙型肝炎病毒核酸

建立了改良二氧化硅吸附法检测丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ的方法。将待检血清５０μｌ、二氧化硅悬液２０μｌ、裂解液３００μｌ（含硫氰酸胍、ＥＤＴＡ、ＴｒｉｔｏｎＸ—１００、Ｔｒｉｓ·Ｃｌ）混匀置室温６０分钟，病毒颗粒裂解释放的核酸吸附在二氧化硅颗粒上，经离心和双蒸水洗脱，所得ＨＣＶＲＮＡ模板以５＇ＮＣ区引物作套式聚合酶链反应扩增。使用该方法可检出１０μｌ血清中的ＨＣＶＲＮＡ。１１０份抗－ＨＣＶ阳性血清中ＨＣＶＲＮＡ的检出率为８２．７％。实验全过程约７小时，为丙型肝炎检测提供了快速、简便、灵敏的新方法。     

HCV基因型与HCV感染者ALT的关系

为探讨丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）与ＨＣＶ感染者血清丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ）的关系，本文应用ＨＣＶＮＳ５区逆转录－套式聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）对７９例抗－ＨＣＶ阳性者进行ＨＣＶＲＮＡ检测，同时用限制性内功酶法对ＨＣＶ进行基因分型。检出ＨＣＶＲＮＡ阳性者６９例，其中ＨＣＶⅡ型３０例，Ⅲ型２７例，Ⅱ／Ⅲ混合型１２例，ＨＣＶ不同的基因型在ＡＬＴ正常组和异常组中的分布有显著性差异（Ｐ＜０．０１），Ⅱ型和Ⅱ／Ⅲ混合型主要分布于ＡＬＴ异常组中，Ⅲ型主要分布于ＡＬＴ正常组中。提示Ⅱ型和Ⅱ／Ⅲ混合型很可能是导致ＡＬＴ异常的主要型别，应引起足够重视。