胃癌腹膜微转移的临床研究

目的:研究胃癌患者腹膜微转移的相关因素及临床意义,为临床手术切除范围探寻理论依据.方法:应用CK19和CK20免疫组织化学方法,检测62例胃癌患者横结肠系膜前叶、胰腺被膜、网膜囊后壁和盆底腹膜组织,并与HE染色及腹腔灌洗液细胞学检查对比.结果:62例胃癌患者的腹膜组织常规病理HE染色均未见癌细胞,免疫组织化学证实腹膜微转移阳性率为43.55%(27/62),远高于腹腔灌洗液癌细胞的14.52%(9/62).胃癌腹膜微转移与肿瘤的大小、浸润深度、临床分期、淋巴结转移有关(P<0.05),而与肿瘤的部位、患者年龄、性别无关(P>0.05).结论:用免疫组化方法检测胃癌腹膜微转移,可为胃癌根治术术式的选择和术后综合治疗提供可靠依据.对于进展期胃癌患者,应常规腹膜取材检测微转移,多点取材有助于提高微转移检出率.     

胃癌腹腔微转移检测及其临床意义

摘要：目的 探讨胃癌检测胃癌腹腔微转移的作用及临床意义。方法 选择 50例术前及术中检查均未发现腹膜转移的胃癌病例, 术中行道格拉斯窝处的腹膜活检并行HE常规染色和CK 20免疫组化染色检查，同时用RT PCR方法检测胃癌腹腔冲洗液中CK 20 mRNA的表达。结果 全部患者道格拉斯窝活检腹膜HE染色均为阴性。CK 20免疫组化检查的阳性率为24.0％（12/50）；RT PCR检测腹腔冲洗液中CK 20 mRNA的阳性率为36.0％（18/50）；CK 20免疫组化检查阳性的12例患者腹腔冲洗液中CK 20 mRNA检查均为阳性。CK 20 mRNA阳性率与胃癌浸润深度、组织学类型和淋巴结转移数目有关(P<0.05)。CK 20 mRNA阳性和阴性胃癌患者3年生存率分别为22.2％和62.5％(P<0.01)。结论 术前检查或术中探查未发现腹膜转移的胃癌患者,可行腹腔冲洗液RT PCR检查以发现有无腹腔微转移，该项检查可为胃癌正确分期、腹腔内辅助化疗及预后判断提供证据。     

胃癌患者腹液中CK20 mRNA检测的临床意义

目的 探讨胃癌患者腹液中CK20 mRNA检测的临床意义.方法 用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应检测49例胃癌患者腹水或腹腔冲洗液CK20 mRNA的表达情况并以同期10例行非肿瘤手术患者作为对照,结合临床病理资料及随访结果进行分析.结果 腹水CK20 mRNA阳性率50.00%,腹腔冲洗液CK20 mRNA阳性率35.90%,两者差异无统计学意义(P＞0.05).胃癌组CK20 mRNA表达总阳性率38.78%,对照组均无阳性表达(P＜0.05).胃癌组CK20 mRNA检测阳性率显著高于病理细胞学检查阳性率(10.20%)(P＜0.05);CK20mRNA表达与有无淋巴结转移及肿瘤浸润深度相关(均P＜0.05),与组织分化程度无关(P＞0.05).CK20 mRNA阳性表达者的平均生存时间较阴性者显著缩短(20.95个月vs.33.24个月)(P＜0.01).结论 胃癌患者腹水或腹腔冲洗液中CK20 mRNA检测,可早期诊断腹腔微转移,有助于判断预后,指导治疗.     

胃癌腹腔微转移的研究及其临床意义

目的运用细胞学及RT-PCR方法检测胃癌患者术中腹腔冲洗液和腹膜组织,以探讨这些方法对预测胃癌腹腔微转移的意义.方法收集3 8例胃癌和5例胃良性病变患者的术中腹腔冲洗液,并同时切除少量大网膜、腹膜作为对照.用RT-PCR方法测定冲洗液中游离细胞的CEAmRNA表达,同时作冲洗液细胞学检查（PLC）.结果腹腔冲洗液和腹膜组织中的CEA mRNA的阳性率分别为36.8%（14/38）和39.5%（15/38）,皆高于腹腔冲洗液PLC的26.3%（10/38）.CEA mRNA的阳性率与肿瘤的分化程度、浸润深度、淋巴结转移、浆膜侵犯深度有关.结论CEART-PCR方法对于检测腹腔微量游离癌细胞较PLC有更高的灵敏度和特异性,是一种检测胃癌腹腔微转移的有效方法.     

从腹腔游离癌细胞中分离胃癌干细胞的可行性及其意义

目的:探讨从腹腔游离癌细胞中分离胃癌干细胞的可行性及其意义。方法:随机选择35例胃癌患者,术中发现有腹膜转移5例,无腹膜转移30例。用流式细胞仪检测腹腔灌洗液中CD44和CK20的表达,并比较有、无腹膜转移两组之间差别是否有差异。结果:⑴有、无腹膜转移组之间腹腔游离癌细胞中CD44+CK20+差异有统计学意义(P=0.009);⑵CD44在胃癌组织中的阳性表达率为36.8%,胃癌组织中CD44阳性表达率与浆膜浸润、淋巴结转移等病理因素有关;该两因素分组间差异有统计学意义(P=0.000)。结论:从胃癌腹腔灌洗液游离癌细胞中分离胃癌干细胞是可行的,这种可行性为人胃癌干细胞的分离提供了新的思路,为制定胃癌腹膜转移的靶向治疗提供了一定的实验基础。     

胃癌胰腺被膜及横结肠系膜前叶转移规律及其临床意义

目的探讨胃癌胰腺被膜及横结肠系膜前叶转移规律,指导腹腔镜胃癌根治术胰腺被膜及横结肠系膜前叶切除的合理性。方法回顾分析2007年1月至2008年7月收治的83例行胃癌根治术清扫胰腺被膜患者的临床资料,利用免疫组化及聚合酶链式反应（PCR）等方法对各期胃癌胰腺被膜转移进行相关性分析。结果细胞角蛋白20（CK20）、癌胚抗原（CEA）检测阳性率分别为24.1%（20/83）、26.5%（22/83）,CK20 mRNA、CEA mRNA阳性率分别为50.6%（42/83）、38.6%（32/83）。胃癌胰腺被膜癌转移与肿瘤的浸润深度、病理分型、临床分期、淋巴结转移有关（P〈0.05）,而与患者的年龄、性别无关（P〉0.05）。结论在胃癌根治术中可以选择性清扫胰腺被膜,为腹腔镜胃癌根治术进行选择性清扫胰腺被膜提供了依据。     

MUC1 mRNA和CK19 mRNA在胃癌淋巴结表达的意义

目的 探讨胃癌淋巴结微转移的基因诊断方法,分析CK19 mRNA、MUC1 mRNA作为胃癌微转移检测分子标志物的可行性。方法 应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测52例胃癌462枚常规病理阴性淋巴结中黏蛋白1（MUC1）mRNA、细胞角蛋白19（CK19）mRNA表达;对照组为4例胃良性病变患者的38枚淋巴结。结果 胃良性病变患者38枚淋巴结中CK19 mRNA和MUC1 mRNA表达均为阴性;CK19、MUC1 mRNA在胃癌患者462枚常规病理阴性的淋巴结中223枚（48.3%）阳性表达,其中180枚（39.0%）淋巴结CK19 mRNA阳性表达,136枚（29.4%）MUC1 mRNA阳性表达,CK19 mRNA和MUC1 mRNA均为阳性者有125枚（27.0%）。不同组织类型淋巴结CK19、MUC1 mRNA阳性率差异无显著性（P〉0.05）,不同肿瘤浸润层次、原发肿瘤大小、肿瘤位置的阳性率差异有显著性（P〈0.05）。结论 MUC1、CK19基因均可作为RT-PCR法检测胃癌患者淋巴结微转移的分子标志物。     

胃癌术中腹腔游离癌细胞检测方法的对比研究

目的探讨检测腹腔游离癌细胞的方法及临床意义。方法应用细胞学检查(PLC)、流式细胞术(FCM)、实时荧光定量RT-PCR分别检测50例胃癌患者术中腹腔冲洗液(腹水)中游离癌细胞、CK20蛋白和CK20mRNA表达阳性率,比较三种方法对腹腔游离癌细胞检测的敏感度。结果 50例胃癌患者腹腔冲洗液(腹水)中,PLC检测腹腔游离癌细胞阳性率为20.0%(10/50),FCM检测CK20蛋白表达阳性率为36.0%(18/50),实时荧光定量RT-PCR检测CK20mRNA表达阳性率为58.0%(29/50);实时荧光定量RT-PCR检测腹腔冲洗液(腹水)中CK20mRNA表达阳性率高于FCM检测CK20蛋白表达阳性率及PLC检测腹腔游离癌细胞阳性率(P0.05或P0.001);FCM检测腹腔冲洗液(腹水)中CK20蛋白表达阳性率与PLC检测游离癌细胞阳性率相比较,差异无统计学意义(P0.05)。腹腔冲洗液(腹水)中检测CK20mRNA表达阳性率与肿瘤浸润深度、分化程度、TNM分期和淋巴结转移有关(P0.05)。结论实时荧光定量RT-PCR检测CK20mRNA表达是检测腹腔游离癌细胞的有效方法。     

CK19表达及其在结肠癌淋巴结微转移诊断中的应用

目的：研究用免疫组化方法检测CK19及其在结肠癌淋巴结微转移诊断中的应用与临床病理意义。方法：取材于50例结肠癌病人肿瘤组织及癌周淋巴结255枚，同时进行HE染色组织学检查和抗角蛋白19抗体的免疫组化检测。结果：50例结肠癌组织中CK19表达均为阳性。255枚淋巴结用HE染色检查阳性者56枚(22．0％)，皆同时表达CK19阳性；另20枚淋巴结HE染色阴性，而CK19表达阳性。50例中有12例淋巴结中发现微转移，其中6例常规组织学检查属淋巴结转移阴性而免疫组化染色诊断表现为转移阳性。占常规病理检查淋巴结转移阴性者的21．4％(6／28)。随着肿瘤分期增加,淋巴结CK19表达阳性率亦增加。CK19表达阳性者预后较阴性者为差。结论：CK19免疫组化法是检测结肠癌淋巴结微转移的敏感而便捷的方法，而检测结肠癌微转移有助于判断肿瘤进展程度与预后。特别对在筛选组织学检查淋巴结阴性但存在微转移的病人有实用价值。     

定量RT-PCR检测结肠癌患者门静脉血CK20 mRNA的表达

目的 检测结肠癌患者门静脉血中细胞角蛋白20（CK20）mRNA的表达水平,并探讨其临床价值。方法 采用实时荧光定量RT-PCR检测31例病理学确诊的结肠癌患者门静脉血和20例健康对照者外周血CK20mRNA的表达水平。结果 结肠癌患者中CK20mRNA阳性率为25.81%,而对照组阳性率为5%,两者相比差异有统计学意义（P〈0.025）。随着临床分期的具体化,患者门静脉血中CK20mRNA表达率随之提高,但各分期间阳性率相比无显著统计学意义（P〉0.05）。DukesLC期与D期患者中〉10拷贝/ml者高于A期与B期患者。结论 术中检测结肠癌患者门静脉血CK20mRNA表达水平,对判断肝脏微转移有一定的提示意义。     

流式细胞技术检测乳腺癌骨髓微转移

目的 检测原发性乳腺癌骨髓微转移状况,探讨其与临床病理学指标的关系.方法 选取可手术乳腺癌病例82例,术前未经化疗及放疗,抽取骨髓液,应用流式细胞技术,检测骨髓有核细胞中CK18、CK19 阳性细胞表达率.结果 82例乳腺癌患者骨髓标本中,23例经流式细胞技术检测到CK18+、CK19+/CD45-细胞.乳腺癌骨髓微转移的阳性率为28.05%.骨髓微转移的阳性率随临床分期、组织学分级的增加而增高,随激素受体蛋白表达增强而降低.结论 原发性乳腺癌可以发生微转移,骨髓微转移与某些临床病理指标有关.     

细胞角蛋白7、18、19在壶腹周围癌淋巴结微转移灶的检测及临床意义

目的探讨细胞角蛋白对壶腹周围癌淋巴结微转移的检出率,并分析淋巴结微转移与临床预后的关系,为提高临床综合疗效提供理论依据。方法应用细胞角蛋白(CK7、CK18、CK19)单克隆抗体,对45例壶腹周围癌根治术后经病理常规HE染色阴性的186枚淋巴结进行免疫组织化学技术(S P法)检测,结合随访资料进行临床预后分析。结果45例壶腹周围癌根治术后HE染色阴性的186枚周围淋巴结中,有9例(20%、9/45)34枚(18.3%、34/186)淋巴结中检出微小转移灶。免疫组化诊断微转移阳性组和阴性组的1年复发率分别是88.9%(8/9)和16.7%(6/36),两组间有显著性差异(P<0.05)。不同单克隆抗体(CK7、CK18、CK19)检测发现,CK19在壶腹周围癌186枚淋巴结的检出率高达15.6%(29/186),CK19与壶腹周围癌淋巴结微转移关系密切(P<0.05)。结论对常规病理检查阴性的壶腹周围癌淋巴结进行CK7、CK18、CK19检测有助于发现微转移灶,为提高淋巴结微转移诊断的准确性、判断临床分期、估计预后及选择辅助治疗提供理论依据。CK系列单抗联合检测可提高淋巴结微转移阳性检出率。     

CK20和CK5免疫组化结果作为上尿路上皮癌分子识别标记及在评估患者预后中的作用

目的探讨CK20和CK5在上尿路上皮癌(UTUC)患者组织中的表达情况,分析其与患者临床病理特点的关系及其预测预后的价值。方法选取2013年7月至2017年7月在榆林市第一医院泌尿外科住院治疗的UTUC患者106例,采用免疫组化(IHC)法检测UTUC患者组织中CK20和CK5的表达情况。分析CK20、CK5与UTUC患者临床病理特点之间的关系;采用Kaplan-Meier生存曲线分析UTUC患者术后生存情况;Cox比例风险回归模型分析CK20和CK5对UTUC患者预后的影响。结果106例患者中CK20(+)/CK5(+)组患者pTa/pT1比例及低级别比例显著高于CK20(-)/CK5(+)组、CK20(+)/CK5(-)组和CK20(-)/CK5(-)组(P<0.05)。免疫组化结果表明CK5和CK20均阳性表达于细胞质,在上皮癌组织中的表达显著高于正常尿路上皮组织(P<0.05)。CK20(+)/CK5(-)组患者2、4、6年期生存率均显著低于其他3组,差异有统计学意义(P<0.05)。Cox比例风险回归模型分析显示CK20(+)/CK5(-)、肿瘤分期、微转移是影响UTUC患者预后的重要危险因素。结论CK20和CK5均是评估UTUC预后的独立分子标记物,当CK20(+)、CK5(-)时,患者术后生存情况较差、易发生转移,可作为评价UTUC患者预后的重要指标。     

膀胱癌CK20及Ki-67的表达及相关性

目的 探讨角蛋白20(CK20)和Ki-67在膀胱癌中的表达与膀胱癌的侵袭、转移及预后的关系.方法 用免疫组织化学SP法检测154例膀胱癌组织中CK20和Ki-67的表达.结果 CK20在103例肿瘤组织中有表达,阳性率为66.9%.CK20的表达和膀胱癌的T分期及远处转移呈正相关(P<0.05).Ki-67在126例肿瘤组织中有阳性表达,阳性率为81.8%.Ki-67在膀胱癌组织的表达与肿瘤病理分级、T分期、远处转移呈正相关(P<0.05).Spearman等级相关分析表明两者明显相关(P<0.05).结论 CK20及Ki-67可能参与了膀胱癌的侵袭与转移,CK20与Ki-67可作为预后判断因子,结合病理分级和临床分期分析能提高对膀胱癌患者预后判断的准确性.     

膀胱癌CK20及Ki-67的表达及相关性

目的 探讨角蛋白20(CK20)和Ki-67在膀胱癌中的表达与膀胱癌的侵袭、转移及预后的关系.方法 用免疫组织化学SP法检测154例膀胱癌组织中CK20和Ki-67的表达.结果 CK20在103例肿瘤组织中有表达,阳性率为66.9%.CK20的表达和膀胱癌的T分期及远处转移呈正相关(P<0.05).Ki-67在126例肿瘤组织中有阳性表达,阳性率为81.8%.Ki-67在膀胱癌组织的表达与肿瘤病理分级、T分期、远处转移呈正相关(P<0.05).Spearman等级相关分析表明两者明显相关(P<0.05).结论 CK20及Ki-67可能参与了膀胱癌的侵袭与转移,CK20与Ki-67可作为预后判断因子,结合病理分级和临床分期分析能提高对膀胱癌患者预后判断的准确性.     

膀胱癌CK20及Ki-67的表达及相关性

目的 探讨角蛋白20(CK20)和Ki-67在膀胱癌中的表达与膀胱癌的侵袭、转移及预后的关系.方法 用免疫组织化学SP法检测154例膀胱癌组织中CK20和Ki-67的表达.结果 CK20在103例肿瘤组织中有表达,阳性率为66.9%.CK20的表达和膀胱癌的T分期及远处转移呈正相关(P<0.05).Ki-67在126例肿瘤组织中有阳性表达,阳性率为81.8%.Ki-67在膀胱癌组织的表达与肿瘤病理分级、T分期、远处转移呈正相关(P<0.05).Spearman等级相关分析表明两者明显相关(P<0.05).结论 CK20及Ki-67可能参与了膀胱癌的侵袭与转移,CK20与Ki-67可作为预后判断因子,结合病理分级和临床分期分析能提高对膀胱癌患者预后判断的准确性.     

腹腔渗液CK20 mRNA检测对指导结直肠癌腹腔化疗的意义

目的　研究腹腔渗液CK2 0mRNA的表达对指导结直肠癌腹腔转移化疗意义。方法　采用逆转录 -聚合酶链反应 (RT -PCR)技术 ,对 5 0例结直肠癌进行腹腔渗液CK2 0mRNA测定。结果腹腔渗液CK2 0mRNA阳性表达与腹腔转移之间存在着显著相关性。结论　检测腹腔渗液中的CK2 0mRNA对于预测结直肠癌腹腔转移和指导术后治疗具有重要参考价值     

CK19评估肝细胞肝癌淋巴结转移预后的价值

目的：探讨伴淋巴结转移（lymph node metastasis,LNM）的肝细胞肝癌（hepatocellular carcinoma,HCC）的病理分类及临床治疗意义。方法：应用组织芯片和免疫组化等方法,分析HCC组织中胆管细胞表型指标CK19的表达情况及其与临床病理因素、LNM发生及总体预后的关系。结果：47例伴LNM的HCC癌组织中,CK19表达显著高于125例不伴LNM的HCC癌组织,分别为27.7%和5.6%（P〈0.001）。Logistic回归分析发现CK19和LCSGJ（LiverCancerStudyGroupofJapan）肿瘤分期均是影响LNM发生的独立危险因素（OR：5.106,95%CI：1.789～14.568,P=0.002;OR：2.293,95%CI：1.474～3.566,P〈0.001）。CK19阳性和阴性表达组病人的中位生存期分别为7.7个月和21.7个月（P=0.013）,生存分析发现CK19是影响伴LNM的HCC病人总体生存率的独立危险因素。结论：CK19表达和LCSGJ肿瘤分期是HCC病人出现LNM的独立危险因素,CK19表达是影响伴LNM的HCC病人术后总体生存的独立危险因素。伴LNM的HCC可分为不同病理类型及预后的伴肝内胆管细胞癌（intrahepatic cholangiocarcinoma,ICC）分化特征的HCC（CK19阳性）和高肿瘤分期的HCC（CK19阴性）,此分类可指导临床治疗。     

门静脉血CEA—mRNA、CK20-mRNA动态检测对早期诊断结直肠癌肝转移的意义

目的动态检测结直肠癌患者门静脉血CK20mRNA、CEAmRNA的表达情况，探讨其对早期诊断结直肠癌肝转移的临床意义。方法40例结直肠癌患者随机分为两组（各20例），实验组术中留置门静脉埋植式给药装置（implantable drug delivery system，IDDS），术后常规随访加用荧光定量RT—PCR方法动态检测门静脉血CK20mRNA、CEAmRNA的表达情况；对照组常规术后随访。结果两组病例术后发生肝转移的时间和比例无显著性差异，发生肝转移的病例中，在影像学检查检出病灶的同时，几乎均有外周血CEA的增高，3例未发生肝转移的病例也可见外周血CEA的增高，实验组发生肝转移的病例则在影像学检查检出病灶之前3-9月即有门静脉血CK20mRNA、CEAmRNA的表达阳性。结论门静脉血CEA—mRNA、CK20-mRNA动态检测比外周血CAE检测和影像学检查更敏感、特异性更高，是早期诊断结直肠癌肝转移的有效方法。     

RT-PCR 检测门静脉血CK20 mRNA对诊断结肠癌肝脏微转移的意义

目的:探讨结肠癌患者门静脉血CK20 mRNA的检测对肝脏微转移的诊断价值。方法:采用RT-PCR技术检测31例结肠癌患者门静脉血中CK20 mRNA。结果:全组检出CK20 mRNA阳性率为25.81%，随访时间平均（18.5±10.6）个月（6～32个月）。1例术中发现肝转移且门静脉血CK20为阳性; 术时未见肝脏转移而门静脉血CK20阳性的7例中3例术后（6～15个月）出现肝转移（42.85%）; 术时未见肝转移且门静脉血CK20阴性的23例，2例出现肝转移（8.69%）。结论:结肠癌术中门静脉血CK20 mRNA的检测对于患者的预后和指导治疗有参考价值。