自由基在大鼠全脑缺血再灌流损伤中作用机理及保精增智…

本文采用大鼠４血管关闭方法制作了全脑血再灌流模型，于再灌流后２４ｈ取双侧海马，分别采用Ｐｒｏｇａｌｌｏｌ－ＮＢＴ和改良的ＴＢＡ法测定了ＳＯＤ活性和ＬＰＯ含量，结果ＳＯＤ明显低于对照组而ＬＰＯ明显高于对照组（Ｐ〈０．０１）。同时观察了一种亲的中药方剂－保精增智液对自由基的拮抗作用，实验证明该药造模后给药效果不明显（Ｐ〉０．０５），造模前给药可使ＬＰＯ下降及ＳＯＤ上升，与对照组比较差异显著（Ｐ〈０．０     

东菱克栓酶对全脑缺血再灌流损伤脑保护作用的实验研究

本文采用Ｐｕｌｌｓｉｎｅｌｌｉ的４ＶＯ方法制作了大鼠全脑缺血再灌流动动物模型，采用ＴＢＡ法、ＤＴＮＢ直接法测定全脑缺血１０ｍｉｎ再灌流后４８ｈ海马区的过氧化脂质（ＬＰＯ）和谷光甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）含量变化，计量病理和电子显微镜观察病理变化及东菱精纯克栓酶对其含量变化和病理改变的影响。结果显示：（１）东菱克栓酶可降低海马区ＬＰＯ含量（Ｐ〈０．０１），使ＧＳＨ－Ｐｘ活性上升（Ｐ〈０．０１）。     

实验性迟发性脑血管痉挛时痉挛动脉的自由基代谢

为探讨蛛网膜下腔出血（ＳＡＨ）后迟发性脑血管痉挛（ＤＣＶＳ）时痉挛动脉的自由基代谢变化。通过了对ＤＣＶＳ时痉挛动脉的自由基含量、自由基清除酶超氧化物岐化酶（Ｃｕ－ＺｎＳＯＤ）与过氧化氢酶（Ｃａｔ）活性以及自由基代谢产物脂质过氧化物（ＬＰＯ）含量的测定。结果显示：（１）痉挛动脉的自由基含量比对照组明显升高（Ｐ＜０．０１）；（２）Ｃｕ－ＺｎＳＯＤ活性明显降低（Ｐ＜０．０５），Ｃａｔ活性明显升高（Ｐ＜０．０１）；（３）ＬＰＯ含量明显升高（Ｐ＜０．０１）。本实验结果证实ＳＡＨ后ＤＣＶＳ时痉挛动脉存在自由基的代谢紊乱，自由基介导的病理作用可能在ＤＣＶＳ发病机理中起重要作用。     

脑梗塞患者血清中LPO,SOD水平与巴曲酶的影响

本文应用硫代巴比妥酸显色比色法和邻苯三酚自氧法测定８７例脑梗塞患者血清中ＬＰ０、ＳＯＤ含量，随机分组分别用巴曲酶和低分子右旋糖酐＋丹参治疗，并测定治疗后血清中ＬＰＯ、ＳＯＤ含量，研究证明脑梗塞患者血清中ＬＰＯ显著高于非脑血管病及健康对照者（Ｐ＜０．０１），而ＳＯＤ显著低于非脑血管病及健康对照者（Ｐ＜０．０１）。巴曲酶治疗后血清中ＬＰＯ明显低于治疗前（Ｐ＜０．０１），ＳＯＤ高于治疗前（Ｐ＜０．０５），而对照组无差异（Ｐ＞０．０５）。提示巴曲酶可抑制脑梗塞患者血清中ＬＰＯ产生，提高ＳＯＤ活性，具有保护神经细胞作用。     

自由基清除剂对糖尿病模型大鼠神经组织中自由基代谢影响的实验研究

本文分别测定了正常对照组、糖尿病模型组，用不同剂量超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）治疗糖尿病模型大鼠坐骨神经组织中总ＳＯＤ（Ｔ－ＳＯＤ）、铜锌ＳＯＤ（Ｃｕ－Ｚｎ－ＳＯＤ）、过氧化脂质（ＬＰＯ）、丙二醛（ＭＤＡ）水平。结果：糖尿病大鼠神经组织中ＬＰＯ、ＭＤＡ高于正常对照组；Ｔ－ＳＯＤ、Ｃｕ－Ｚｎ－ＳＯＤ水平则低于对照组（Ｐ＜０．０１）。大剂量ＳＯＤ比小剂量ＳＯＤ提高Ｔ－ＳＯＤ、Ｃｕ－Ｚｎ－ＳＯＤ，降低ＬＰＯ、ＭＤＡ作用明显。提示糖尿病神经组织中自由基代谢异常是导致糖尿病神经病的原因之一，而外源性ＳＯＤ对糖尿病神经组织中自由基有清除作用。     

保精增智液对大鼠迟发性神经元坏死海马CA_1区光镜和电镜改变的影响

本研究采用Ｗｉｓｔａｒ大鼠４血管关闭法制成全脑缺血１０ｍｉｎ再灌流动物模型造成迟发性神经元坏死（ＤＮＤ），分别观察了海马ＣＡ１区再灌流后３ｄ和５ｄ的普通病理和超微结构改变，同时观察了中药保精增智液对ＤＮＤ的保护作用，结果显示再灌流３ｄ时电镜下ＣＡ１区神经元内亚细胞结构改变明显，５ｄ时光镜下出现明显的神经元脱失，造模前８ｄ给药组可明显改善再灌流３ｄ时的亚细胞结构的改变，使５ｄ时神经细胞存活数上升（１８１．６±１５．１个／ｍｍ，对照组４１．４±４．０，Ｐ＜０．０１）。该药对大鼠短暂全脑缺血再灌流造成的ＤＮＤ有保护作用。     

海风藤、氟桂嗪和绞股蓝皂甙对犬脑干缺血保护作用的对比研究

结扎犬脑基底动脉后６ｈ，发现脑干听觉诱发电位ＢＡＥＰ，各波的峰潜伏期（ＰＬ）及峰间期（ＩＰＬ）明显延长（Ｐ＜０．０１）；脑干神经元形态结构发生缺血性改变（光镜及电镜），脑干组织ＰＬＡ２活性升高５．８倍（Ｐ＜０．０１），超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性降低５８．８％（Ｐ＜０．０１）。海风藤３００ｍｇ·ｋｇ－１、氟桂嗪１ｍｐ·ｋｇ－１、绞股蓝皂甙１５０ｍｇ·ｋｇ－１，分别于结扎脑基底动脉前３ｈ经十二指肠造瘘管给药，皆能缩短ＰＬ及ⅠＰＬ的延长（Ｐ＜０．０１），明显减轻神经元形态结构的缺血性改变，三者作用相当。与缺血组相比较，三药分别使ＰＬＡ２活性降低８０．２％。７４．２％和７２．４％（Ｐ＜０．０１），使ＳＯＤ活性升高２．１、１．９５和１．８４倍（Ｐ＜０．０１）。上述结果提示三药抗脑缺血损伤的作用与其降低ＰＬＡ２活性和增强ＳＯＤ活性有关。     

载脂蛋白E与脑动脉硬化症

本文观察７８例脑动脉硬化症患者与对照组４４例，对其血清载脂蛋白Ｅ（ＡＰＯＥ）和高密度脂蛋白（ＨＤＬ－Ｃ）、低密度脂蛋白（ＬＤＬ－Ｃ）、胆固醇（ＴＣ）、甘油三脂（ＴＧ）、载脂蛋白ＡＩ（ＡＰＯＡＩ）、载脂蛋白Ｂ（１００）（ＡＰＯＢ（１００））进行含量测定，并将ＡＰＯＥ与ＨＤＬ－Ｃ、ＬＤＬ－Ｃ、ＴＣ、ＴＧ、ＡＰＯＡＩ、ＡＰＯＢ（１００）逐一进行相关比较，结果发现：脑动脉硬化症病人（ＣＡＳ）血清ＡＰＯＥ、ＬＤＬ－Ｃ、ＴＣ、ＴＧ、ＡＰＯＢ（１００）明显高于正常对照组（Ｐ＜０．０１），ＨＤＬ－Ｃ显著低于正常对照组（Ｐ＜０．０１），ＡＰＯＡＩ无明显变化（Ｐ＞０．０５），且ＡＰＯＥ与ＨＤＬ－Ｃ呈负相关；与ＬＤＬ－Ｃ、ＴＣ、ＴＧ、ＡＰＯＢ（１００）呈正相关；与ＡＰＯＡＩ无直线相关关系。提示ＡＰＯＥ可做为诊断脑动脉硬化症的重要指标。     

大鼠脑缺血再灌注海马区血小板活化因子和过氧化脂质的改变及药物影响

目的观察缺血性大鼠脑海马区血小板活化因子（ＰＡＦ）和过氧化脂质（ＬＰＯ）含量的改变及兆科蝮蛇抗栓酶的影响。方法用４ＶＯ大鼠脑缺血模型，用放免分析法和ＴＢＡ法测定ＰＡＦ及ＬＰＯ含量。结果缺血２０ｍｉｎ再灌注６０ｍｉｎ脑海马中ＰＡＦ及ＬＰＯ含量明显高于正常对照组（Ｐ＜０．０１），但造模前用兆科蝮蛇抗栓酶预处理动物，能够显著抑制缺血再灌注脑海马区ＰＡＦ及ＬＰＯ含量的升高。结论ＰＡＦ参与了脑缺血再灌注损伤，与ＬＰＯ生成密切相关，兆科蝮蛇抗栓酶对脑缺血再灌注损伤有保护作用。     

内皮素和自由基在脑缺血中的相互作用

本文在建立兔ＭＣＡＯ模型的基础上，用放免法测脑组织和血浆中内皮素（ＥＴ）的含量，同时用ＴＢＡ法测定脑组织中过氧化脂质（ＬＰＯ）含量。兔３６只，随机分三组，对照组（假手术），脑缺血后４ｈ，２４ｈ组，每组１２只。结果发现脑缺血后ＥＴ和ＬＰＯ之间呈明显的正相关（Ｐ＜０．００１），且随缺血后时间的延长而递增（Ｐ＜０．０１），用相关回归分析发现，脑组织ＥＴ和ＬＰＯ均显著高于对照组（Ｐ＜０．０５），结果说明脑     

鼠脑缺血性损伤早期海马区PAF和LPO含量的动态观察及其意义

目的：运用脑缺血再灌注模型,探索血小板活化因子及自由基在缺血性脑损伤中的地位及意义,方法：分别应用放免法及ＴＢＡ法法测定大鼠海马组织中ＰＡＦ与ＬＰＯ含量。结果：缺血２０ｍｉｎ后灌注０ｍｉｎ组及６０ｍｉｎ组ＰＡＦ含量均显著高于手术对照组,而再灌注２４０ｍｉｎ组与假手术对照组比较已无显著差异。相应ＬＰＯ含量早期随再灌注时间延长逐渐升高。结论：ＰＡＦ可能主要能与脑缺血再灌注缺血期的病理损伤机制,而自由基     

高颅压后兔大脑中动脉血流速度对脑自由基和病理形态的影响

应用经颅多普勒(TCD)超声技术,观察了30只兔急性颅内压增高(AIIP)后大脑中动脉血流速度(FVmca)变化引起兔脑组织自由基反应及对兔脑病理形态的影响。结果发现,兔AIIP后FVmca频谱中舒张期流速(Vd)降为零后不同时间,自由基反应和病理形态变化也不同。Vd为零持续6小时,脑匀浆超氧化物歧化酶(SOD)和脂质过氧化物(LPO)变化不大;光镜下形态学未见明显改变。持续12小时,SOD下降,LPO升高;细胞及血管周围间隙扩大。持续13～24小时,SOD下降和LPO升高显著;可见脑实质内出血,锥体细胞核固缩,胶质细胞增生等。说明AIIP后造成的脑不完全缺血时间愈长,自由基反应强度愈烈,病理改变愈多。提示TCD可用于估价脑损害的程度。     

脑缺血再灌注后脑组织c—fos基因表达与东菱克栓酶的影响

本实验采用线栓法制成大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,用地高辛精标记的c—fos探针进行原位杂交。结果示缺血再灌注组栓塞侧皮层及海马c—fos基因表达显著增多,图像分析灰阶值为118.6±5.1,对侧为159.6±3.1(P<0.001),东菱克栓酶组栓塞侧皮层及海马c—fos基因表达亦增多,灰阶为131.0±4.5,对侧为164.6±4.0(P<0.001)。克栓酶组与缺血再灌注组比较,栓塞侧东菱克栓酶组c—fos基因表达显示低于缺血再灌组(P<0.05),而两组栓塞对侧比较无显著差异。本实验表明,脑缺血再灌注后脑组织的c—fos基因表达显著增多,东菱克栓酶能抑制缺血后c—fos基因的表达,这可能是其治疗缺血性脑血管病的机理之一。     

脑缺血再灌注后脑组织c-fos基因表达与丹参的影响

采用线栓法制成大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型，用地高辛精标记ｃ－ｆｏｓ探针进行原位杂交。结果示缺血再灌注鼠栓塞侧皮层及海马ｃ－ｆｏｓ基因表达显著增多，图像分析灰阶值为１１８．６±５．１，对侧为１５９．６±３．１（Ｐ＜０．００１）。丹参组栓塞侧皮层及海马ｃ－ｆｏｓ基因表达亦增多，灰阶为１３５．００±２．０５，对侧为１６７．００±２．００（Ｐ＜０．００１）。丹参组与缺血再灌注组比较，栓塞侧丹参组ｃ－ｆｏｓ基因表达显著低于缺血再灌组（Ｐ＜０．０５），而两组栓塞对侧比较无显著差异。本实验表明，脑缺血再灌注后脑组织ｃ－ｆｏｓ基因表达显著增多，丹参能部分抑制缺血后ｃ－ｆｏｓ基因的表达，这可能是其治疗缺血性脑血管病的机理之一。     

Effects of transection of cervical sympathetic trunk on cerebral infarct volume and oxygen free radical levels in rats with focal cerebral ischemia/reperfusion injury

BACKGROUND: Stellate ganglion block (SGB) plays a protective role on the brain, but the precise mechanism of action is not clear.OBJECTIVE: To simulate SGB by transection of the cervical sympathetic trunk (TCST) and to investigate the TCST effects on changes in cerebral infarct volume and oxygen free radical levels in rats with focal cerebral ischemia/reperfusion injury.DESIGN, TIME AND SETTING: A complete randomized control animal experiment was performed at the Institute of Neurological Diseases of Taihe Hospital, Yunyang Medical College from February to December 2005.MATERIALS: A total of 101 healthy Wistar rats, weighing 280-320g, of both genders, aged 17-18 weeks, were used in this study. 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC) was purchased from Changsha Hongyuan Biological Company. Superoxide dismutase (SOD), malondialdehyde (MDA) and nitric oxide (NO) assay kits were provided by Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute.METHODS: Rats were randomly divided into a TCST group, a model group and a sham operation group. Successful models were included in the final analysis, with at least 20 rats in each group. After TCST, rat models of focal cerebral ischemia/reperfusion injury were established in the TCST group by receiving middle cerebral artery occlusion (MCAO) by the intraluminal suture method for 2 hours, followed by 24 hours of reperfusion. Rat models of focal cerebral ischemia/reperfusion injury were made in the model group. Rats in the sham operation group underwent experimental procedures as for the model group, threading depth of 10mm, and middle cerebral artery was not ligated.MAIN OUTCOME MEASURES: Brain tissue sections of ten rats from each group were used to measure cerebral infarct volume by TTC staining. Brain tissue homogenate of another ten rats from each group was used to detect SOD activities, MDA contents and NO levels. Rat neurological function was assessed by neurobehavioral measures.RESULTS: Cerebral infarct volume was bigger in the model group than in the TCST group (P<0.05). Twenty four hours after cerebral ischemia/reperfusion, SOD activities were lower, whereas MDA contents and NO levels were higher in the TCST and model groups, compared with the sham operation group (P<0.05 or P<0.01). Compared with the model group, SOD activities were higher, whereas MDA contents and NO levels were lower in the TCST group (P<0.05).CONCLUSION: After TCST, cerebral infarct volume is reduced, SOD activities are increased, and MDA contents and NO levels are decreased compared to the model group in rats with focal cerebral ischemia/reperfusion injury. These changes may be associated with TCST.     

缺血后处理对大鼠脑缺血/再灌注后海马CA_1区神经元凋亡及β淀粉样蛋白1-40表达的影响

目的探讨缺血后处理(ischemic postconditioning,IP)对脑缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)后大鼠海马CA1区神经元凋亡及β淀粉样蛋白1-40(β-Amyloid Prote in 1-40,Aβ1-40)表达的影响。方法40只雄性SD大鼠随机分为假手术(SH)组、I/R组、IP组。用线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血模型,脑缺血60m in后进行不同时间点的缺血后处理,恢复再灌注24h后行神经行为学评分(NDS),检测神经元凋亡及Aβ1-40的表达。结果与I/R组比较,IP组显著改善NDS(P<0.01),显著减少海马CA1区神经元凋亡(P<0.01)及Aβ1-40表达水平(P<0.01)。Aβ1-40的表达与细胞凋亡呈正相关(r=0.845,P<0.01)。结论缺血后处理可通过抗细胞凋亡机制减轻脑缺血/再灌注损伤。缺血/再灌注后Aβ1-40表达上调,缺血后处理可减少缺血/再灌注后Aβ1-40表达。Aβ1-40可能参与缺血后处理抗细胞凋亡的脑保护机制。     

单唾液酸四已糖神经节苷脂在脑缺血再灌注损伤中作用的实验研究

目的：观察单唾液酸四已糖神经节苷胸（GM1）对脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法：采用四血管闭塞（4VO）全脑缺血再灌注动物模型，测定假手术组，缺血30min再灌注60minGM1；处理组（10mg／kg，缺血5min腹腔注射），缺血30min再灌注60min生理盐水（NS）处理组鼠脑海马组织兴奋性氨基酸（ExcitatoryAminoAcid，EAA），钙调素（Calmodulin，CaM），丙二醛（Malondiadehyde，MDA）的含量。结果：脑缺血再灌注组海马组织EAA含量显著性降低（P〈0．01），而CaM、MDA则显著性升高（P＜0．01），GM1处理组海马EAA、CaM、MDA含量同假术术组比较没有显著性差异（P＞0．05）。结论：GM1能阻抑脑缺血再灌注损伤中EAA的过度释放和／或重摄取障碍，细胞内外钙平衡紊乱，氧自由基产生过多等病理生理过程，发挥脑保护作用。     

神经节苷脂对大鼠脑缺血再灌注损伤的脑保护作用

目的探讨神经节苷脂对大鼠脑缺血再灌注损伤的脑保护作用。方法采用线栓法制作缺血再灌注大鼠模型,分别用神经节苷脂(治疗组)和生理盐水(对照组)腹腔注射。观察两组大鼠缺血90min、缺血90min再灌注24h的脑梗死面积、神经功能缺损程度、细胞凋亡数、细胞凋亡率。结果治疗组大鼠于相同时间点脑梗死面积较对照组明显减小,仅表现轻度的神经功能缺损,且神经细胞的凋亡数较对照组显著减少(均P<0.01)。结论神经节苷脂能明显减小大鼠实验性脑缺血的脑梗死面积,减轻脑缺血再灌注后神经功能缺损程度,显著减轻缺血区神经元损害,具有显著的脑保护作用。     

亚低温联合丁苯肽对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的 观察亚低温联合丁苯肽对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用.方法制备SD大鼠MCAO模型,梗死2 h后再灌注,并分为假手术组、模型组、丁苯肽组及亚低温联合丁苯肽组（联合组）,再灌注24 h后进行神经功能缺损评分检测脑组织超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）浓度、病理变化及大脑缺血面积并比较.结果 （1）丁苯肽组与联合组的神经功能缺损评分明显低于模型组,且联合组的神经功能缺损评分明显低于丁苯肽组（P＜0.01）.（2）与假手术组相比,模型组SOD活性降低,MDA含量增加（P＜0.01）;与模型组相比,丁苯肽组与联合组SOD活性增高,MDA含量降低（P＜0.01）,且联合组与丁苯肽组相比差异有统计学意义（P＜0.01）.（3）模型组、丁苯肽组及联合组病理学检查均较假手术组差,但联合组好于丁苯肽组好于模型组（P＜0.01）.（4）模型组、丁苯肽组及联合组脑缺血面积较假手术组增大,而联合组＜丁苯肽组＜模型组,差异均有统计学意义（P＜0.01）.结论 亚低温联合丁苯肽对脑缺血再灌注损伤有较好的保护作用.     

氯喹,SOD防治脑缺血再灌注损伤的实验研究

探讨氯喹、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）防治脑缺血再灌注损伤的效果。用４血管阻断法造成大鼠全脑缺血，３０ｍｉｎ后再恢复双侧颈总动脉血流３０ｍｉｎ，此时大鼠脑组织磷脂酶Ａ（ＰＬＡ）活性和内皮素（ＥＴ）、过氧化脂质（ＬＰＯ）含量显著增高，而ＳＯＤ活性和维生素Ｅ（ＶｉｔＥ）含量明显降低，大脑皮层神经细胞和血脑屏障明显损害。预防用氯喹或ＳＯＤ治疗，部分抑制了ＬＰＯ、ＥＴ含量的增高和ＳＯＤ活性下降，明显减轻脑神经细胞和血脑屏障损伤程度；但对ＶｉｔＥ含量都无明显影响。氯喹、ＳＯＤ对缺血再灌注脑损伤有一定的防治作用。