肝豆灵对高铜负荷大鼠空间学习记忆能力及神经干细胞ROS水平的影响

目的:观察肝豆灵对高铜负荷大鼠空间学习记忆能力及胎鼠神经干细胞(neural stem cell,NSC)活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平的影响。方法:75只SD大鼠适应性喂养7d,随机分为对照组,模型组,肝豆灵处理高、中、低剂量组,肝豆灵处理组分别给予1.92 g/kg/d、0.96 g/kg/d、0.48 g/kg/d药物血清灌胃,对照组以等体积纯净水灌胃,7d后观察SD大鼠在T臂迷宫试验中空间学习记忆能力的变化。于无菌条件下取孕14d ICR小鼠胎鼠海马组织,分为对照组、高铜模型组和高、中、低剂量肝豆灵片处理组,对照组在液体培养基中加入10%的SD大鼠空白血清,模型组用含10%的SD大鼠空白血清铜负荷培养基培养,肝豆灵低、中、高剂量组予以3种不同剂量配制的10%的肝豆灵药物血清铜负荷培养基培养,以流氏细胞仪检测神经干细胞ROS水平。结果:行为学试验,模型组和小剂量治疗组的进入电刺激区的时间明显降低,经过药物治疗后,进入电刺激区的时间(S)明显增加。ROS水平检测,模型组高于对照组(P<0.01),肝豆灵组低于模型组(P<0.05),高于正常组(P<0.05)。结论:化痰祛瘀方肝豆灵可降低神经干细胞中ROS的水平并改善高铜负荷大鼠空间学习记忆能力。     

甘草提取物对小鼠肝脏核因子E2相关因子2及其下游基因表达的影响

目的 考察甘草提取物对核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路及其下游基因尿苷二磷酸葡糖醛酸转移酶1A1(UGT1A1)、γ谷氨酰半胱胺酸合成酶(γGCS)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)和多药耐药相关蛋白2(MRP2)的影响。方法 12只小鼠随机分为对照组和甘草提取物组(150 mg·kg-1)。给药后24 h处死取肝组织,采用qRT-PCR技术检测小鼠肝中Nrf2、UGT1A1、γGCS、MRP1和MRP2 mRNA的表达;Western blot技术测定Nrf2蛋白的表达。结果 与对照组比较,甘草提取物显著诱导了小鼠肝脏中Nrf2 mRNA和蛋白的表达,同时Nrf2下游基因UGT1A1、γGCS、MRP1和MRP2 mRNA的表达也显著提高(均P < 0.05)。结论 甘草提取物诱导了小鼠肝脏中II相解毒酶UGT1A1、γGCS及转运体MRP1、MRP2,其机制可能与上调Nrf2转录因子的表达,激活Nrf2细胞信号转导通路有关。     

肝豆灵对肝豆状核变性TX小鼠ERK信号通路及空间学习记忆的影响

目的观察化痰祛瘀方肝豆灵对肝豆状核变性TX模型小鼠学习记忆及ERK信号调节通路的影响。方法将小鼠分为正常对照组、模型组、二巯丁二酸组、肝豆灵组、肝豆灵+二巯丁二酸组,每组20只,选用具有化痰祛瘀功效的肝豆灵片,运用免疫印迹法和Morris水迷宫实验观察肝豆灵对肝豆状核变性模型小鼠学习记忆及细胞外信号调节激酶(extracellular-signal-responsive kinase,ERK)信号通路的影响。结果与模型对照组比较,化痰祛瘀方肝豆灵能促进肝豆状核变性病模型小鼠ERK1/2磷酸化水平(P0.001),缩短找到水下平台的潜伏期(P0.05),延长在水下平台的停留时间(P0.05),肝豆灵+二巯丁二酸效果优于单用肝豆灵(P0.01、0.001)。结论化痰祛瘀方肝豆灵可能通过促进肝豆状核变性模型小鼠鼠ERK1/2磷酸化水平而改善空间记忆功能。     

加味四逆散对血吸虫病小鼠肝纤维化相关因子表达的影响

目的观察加味四逆散对血吸虫病肝纤维化小鼠透明质酸（HA）、血清III型前胶原（PcIII）、羟脯氨酸（Hyp）及转化生长因子-β。（TGF—β1）mRNA表达的影响。方法NIH小鼠经皮肤人工感染血吸虫尾蚴后随机分为4纽：模型组（B组）、吡喹酮组（C组）、吡喹酮＋加味四逆散组（D组）、吡喹酮＋秋水仙碱组（E组）,同时设正常对照组（A组）。病理观察小鼠肝组织,于肝纤维化形成后第21日开始灌服相应药物及生理盐水,C、D、E组在第45日时予以吡喹酮一次性灌胃进行杀虫,第78日小鼠心脏采血用放免法测定血清PC III和HA含量,取肝组织匀浆测定Hyp含量;RT—PCR检测TGF—β1 mRNA的表达。结果HA水平D组高于A组,低于B、C、E组（P〈0．01,P〈0．05）;PC III水平D组低于B、C、E组（P〈0．05）;Hyp水平D组高于A组,低于B、C、E组（P〈0．05）;TGF-β1 mRNA表达D组低于B、C、E组（P〈0．05）。结论加味四逆散联合吡喹酮能有效改善血吸虫病小鼠肝纤维化,降低TGF-β1 mRNA的表达。     

肝豆灵片对硫酸铜模拟铜负荷诱导TX小鼠原代肝细胞凋亡的影响

目的探讨肝豆灵片对硫酸铜模拟铜负荷诱导TX小鼠原代肝细胞凋亡的影响。方法 DL小鼠原代肝细胞中加入铜负荷,作为正常组; TX小鼠原代肝细胞中加入铜负荷,作为对照组;TX小鼠原代肝细胞铜负荷中加入0.60、1.20、2.40 g/kg肝豆灵片,分别作为肝豆灵片低、中、高剂量组;TX小鼠原代肝细胞铜负荷中加入Salubrinal,作为Salubrinal组,各组培养原代肝细胞24 h后,流式细胞仪检测肝细胞凋亡,Western Blot法检测PERK、p-eIF2a蛋白表达,Real-timePCR法检测CHOP mRNA水平。结果与对照组比较,肝豆灵片组显著抑制原代肝细胞凋亡及PERK、p-eIF2a蛋白表达(P<0.05,P<0.01),显著降低CHOP mRNA水平(P<0.05,P<0.01),并均呈剂量依赖性。结论肝豆灵片可抑制硫酸铜模拟铜负荷诱导TX小鼠原代肝细胞凋亡,其机制可能与它干预内质网应激PERK/eIF2a凋亡信号通路有关。     

基于调控核因子E2相关因子2探讨蟾酥对脑缺血再灌注损伤小鼠星形胶质细胞的影响

目的 研究蟾酥预处理通过调控星形胶质细胞核因子E2相关因子2(Nrf2)表达对脑缺血再灌注损伤小鼠的保护作用。方法 将60只C57小鼠随机分为假手术组、模型组和蟾酥注射液低、中、高剂量组,每组12只。模型组采用线栓法制备脑缺血再灌注模型;假手术组血管分离后不插入线栓,结扎消毒后缝合皮下组织及皮肤即可,其余操作同模型组;蟾酥注射液低、中、高剂量组分别于缺血前30 min经腹腔注射蟾酥注射液1.6、3.2、6.4 mL/kg,其余操作同模型组。再灌注后24 h,采用Longa’s评分法评定各组小鼠神经功能。再灌注后72 h以2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法检测小鼠脑梗死体积百分比,蛋白免疫印迹法检测小鼠脑组织胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和Nrf2蛋白表达水平,免疫荧光法检测小鼠脑组织GFAP和Nrf2阳性表达数。结果 与假手术组比较,模型组小鼠Longa’s评分、脑梗死体积百分比、GFAP蛋白表达和阳性细胞数均显著提高(P<0.05),Nrf2蛋白表达和阳性细胞数均降低(P<0.05);与模型组比较,蟾酥注射液低、中、高剂量组小鼠Longa’s评分、脑梗死体积百分比...     

肝豆灵片对Wilson病模型TX小鼠血管损伤因子及ICAM-1、VCAM-1表达的影响

目的探讨肝豆灵片(GDL)对Wilson病模型TX小鼠血管损伤因子、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)及血管细胞黏附分子(VCAM-1)表达的影响。方法将40只TX小鼠采用随机数字表法分为模型组,GDL高、中、低剂量组,青霉胺组,每组8只。另选取8只正常的DL小鼠作为对照组。对照组及模型组小鼠灌胃生理盐水,肝豆灵各剂量组及青霉胺组灌胃对应剂量肝豆灵及青霉胺。各组均连续灌胃4周。ELISA法检测血浆同型半胱氨酸(Hcy)、血管假血友病因子(vWF)、血栓调节蛋白(TM)、血管内皮细胞蛋白C受体(EPCR),HE染色、透射电镜观察大脑中动脉区域脑组织中内皮血管形态学变化,免疫组织化学观察大脑中动脉区域脑组织中内皮血管ICAM-1、VCAM-1表达变化。结果与对照组比较,模型组Hcy、vWF、TM、EPCR水平升高(P<0.01),ICAM-1、VCAM-1表达明显增高(P<0.01)。与模型组比较,青霉胺组Hcy、vWF、TM、EPCR水平变化差异无统计学意义(P>0.05),GDL高、中剂量组Hcy、vWF、TM、EPCR数值降低(P<0.05,P<0.01),GDL低剂量组Hcy水平下降(P<0.01);同时GDL高、中、低剂量组和青霉胺组ICAM-1、VCAM-1表达减少(P<0.05,P<0.01)。与青霉胺组比较,GDL高、中剂量组Hcy、TM、EPCR数值降低(P<0.01,P<0.05),GDL高剂量组vWF水平下降(P<0.05);同时GDL高、中量组ICAM-1、VCAM-1表达减少(P<0.05,P<0.01)。与对照组比较,模型组小鼠存在血管损伤变化,各用药组血管损伤较模型组轻。结论 WD动物模型TX小鼠存在血管损伤,肝豆灵具有一定的血管保护作用,可以减轻血管内皮损伤。     

肝豆灵对肝豆状核变性门脉血流动力学的影响

目的：研究肝豆灵联合DMPS治疗肝豆状核变性患者门脉血流动力学指标PVFV、SVFV的影响.方法：41例患者随机分为2组：DMPS组（A组）、肝豆灵组（B组）,A组予以二巯基丙磺酸钠治疗,B组予以二巯基丙磺酸钠联合肝豆灵治疗,分别观察治疗前后门脉血流动力学指标PVFV、SVFV及肝功能部分指标,24h尿排铜,药物常见不良反应等方面的变化情况.结果：治疗后PVFV水平均显著下降,以B组下降最为明显（P＜0.01）,SVFV水平2组下降均明显（P＜0.01）;治疗后2组24h尿铜量均有显著增加（P＜0.01）,且B组＞A组;2组不良反应发生率分别为40％,30％.结论：肝豆灵联合DMPS治疗能较好改善HLD患者门脉血流动力学异常,增加24h尿排铜量,不良反应较少,相对安全.     

肝豆灵对铜负荷大鼠肝纤维化血清代谢组学的影响

目的探讨肝豆灵治疗肝豆状核变性(WD)肝纤维化的可能作用机制。方法 75只Wistar大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、肝豆灵组、肝豆灵加青霉胺组、青霉胺组,每组15只。除空白对照组外,其余各组复制铜负荷大鼠模型共12周,从第7周开始肝豆灵组给予肝豆灵0.486g/(kg·d),青霉胺组给予青霉胺0.09g/(kg·d),肝豆灵加青霉胺组给予以肝豆灵和青霉胺联合灌胃,剂量同上。各组均每日灌胃1次,共6周。第13周实验结束后,各组大鼠留取血清标本,运用代谢组学技术检测各组肝纤维化小分子代谢标志物的变化。结果肝豆灵能明显提高铜负荷大鼠血浆亮氨酸、异亮氨酸、胆碱、葡萄糖、3-羟基丁酸的含量,能降低糖蛋白、脂质、乳酸盐、丙酮酸盐的含量。结论肝豆灵对铜负荷大鼠小分子代谢物有明显的调节效应,对代谢异常的修复作用可能是治疗WD肝纤维化的作用机理之一。     

山楂乙醇提取物对肝癌细胞HepG2凋亡及相关因子表达的影响

目的:探讨山楂提取物体外对肝癌细胞株HepG2凋亡的影响。方法:山楂乙醇提取,并采用不同质量浓度(0.1,0.2,0.4,0.8 g·L-1)山楂提取物处理HepG2细胞24,48,72 h。四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法检测提取物对肝癌细胞活力的影响;流式细胞术检测提取物处理细胞48 h后的凋亡率;实时定量荧光PCR(real-time PCR)检测半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3),B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)基因表达;免疫印迹法(Western blot)检测激活型Caspase-3(CleavedCaspase-3),Bcl-2,Bax蛋白表达。结果:山楂提取物对HepG2细胞的活力有显著抑制作用(P0.05),并以浓度及时间依赖的形式诱导细胞凋亡。山楂提取物可以显著促进Bax和Cleaved-Caspase-3基因和蛋白表达,抑制Bcl-2基因和蛋白表达。结论:山楂提取物抑制肝癌细胞HepG2的增殖,促进其发生凋亡,与Bax和Cleaved-Caspase-3的表达增加,Bcl-2/Bax降低有关。     

针刺对更年期脑缺血大鼠E2水平及Bcl-2表达的影响

目的:研究针刺对更年期脑缺血大鼠E2水平及Bcl-2表达的影响.方法:选用自然更年期雌性SD大鼠,采用右侧大脑中动脉阻塞(MCAO)模型建立不同时间点脑缺血动物模型,电针刺治疗后,用放免法检测血清E2水平,免疫组化检测脑组织Bcl-2表达.结果:针刺可以提高不同时间点更年期脑缺血模型大鼠血清E2水平,上调Bcl-2表达.结论:针刺可能通过提高更年期脑缺血模型大鼠血清E2水平,影响Bcl-2表达.     

当归多糖对小鼠骨骼肌卫星细胞增殖及干细胞因子受体蛋白表达的影响

目的观察在体外造血微环境中,当归多糖(angelica polysaccharides,APS)对不同培养条件下乳鼠骨骼肌卫星细胞(muscle satellite cells,MSCs)增殖及干细胞因子受体蛋白(c-kit)表达的影响。方法原代培养MSC,5天后采用结蛋白(desmin)免疫细胞化学鉴定;细胞随机分为8组,即空白对照组,骨髓基质细胞培养上清组,加入含100、200、300μg/mLAPS的DMEM/F12培养基实验组及经100、200、300μg/mLAPS干预后骨髓基质细胞条件培养基组,采用MTT法检测各组细胞的增殖活性及对细胞进行c-kit免疫细胞化学染色。结果分离培养的MSCs呈desmin染色阳性;MTT法检测发现各条件培养基实验组MSCs增殖显著;c-kit免疫强阳性反应存在于条件培养基培养的各组MSCs中,c-kit主要表达于细胞质。结论经APS干预的骨髓基质细胞条件培养基可以有效改变MSCs的生长特性,明显促进MSCs增殖及c-kit的表达,c-kit在MSCs增殖过程中可能起某种调节作用。     

大黄牡丹汤联合柳氮磺胺吡啶肠溶片对溃疡性结肠炎小鼠氧化应激及Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1-核因子E2相关因子2信号通路的影响

目的 通过观察大黄牡丹汤联合柳氮磺胺吡啶肠溶片对溃疡性结肠炎(UC)小鼠氧化应激及Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1-核因子E2相关因子2(Keap1-Nrf2)信号通路的影响,探讨其作用机制.方法 将50只雄性BALB/c小鼠按照随机数字表法分为空白组、模型组、西药组、中药组及中西药组,每组10只.除空白组外,其余各组...     

西黄丸对乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤组织凋亡及相关因子表达的影响

目的:探讨西黄丸对乳腺癌细胞株MDA-MB-435移植瘤小鼠肿瘤生长及肿瘤组织凋亡的影响.方法:裸鼠皮下注射人乳腺癌细胞株MDA-MB-435建立肿瘤模型,35只荷瘤小鼠随机分为模型组、环磷酰胺组、西黄丸高剂量组、西黄丸中剂量组、西黄丸低剂量组,连续给药3周后脱颈椎处死,进行瘤体直径、瘤质量及脾脏指数的测定;采用HE染...     

大枣对酒精性肝病小鼠肝组织CYP2E1和TNF-α表达的影响

目的观察大枣预处理对酒精性肝病小鼠血清AST、ALT,肝组织病理及肝组织细胞色素P4502e1（cytochrome P4502e1, CYP2E1）和肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α, TNF-α）表达的影响。方法88只昆明种小鼠随机分成空白对照组（简称对照组,28只）、模型组（32只）和大枣治疗组（简称治疗组,28只）,模型组和治疗组采用酒精灌胃的方法复制动物模型,对照组应用蒸馏水代替。4周时治疗组灌胃大枣提取物,其余组均灌胃等量蒸馏水。共计12周。观察应用大枣后,酒精性肝病小鼠血清AST、ALT,肝组织病理及肝组织CYP2E1和TNF-α的表达。结果与模型组比较,治疗组血清AST、ALT水平下降,肝组织病理改善,肝组织CYP2E1和TNF-α表达下降,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论大枣对酒精性肝病有一定疗效。     

白藜芦醇对抑郁小鼠mir-155相关炎症因子表达的影响

目的:观察白藜芦醇(Res)对抑郁小鼠脑组织mir-155相关炎症因子表达的影响。方法:采用慢性不可预见轻度应激方法建立抑郁小鼠模型。将抑郁小鼠随机分为模型组、Res(20、40 mg/kg)组和氟西汀组,每组8只。观察抑郁小鼠糖水消耗指数、强迫游泳不动时间和新奇摄食时间,实时定量PCR检测脑组织mir-155相关炎症因子TNF-α(肿瘤坏死因子)、IL-6(白细胞介素-6)和吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO) m RNA表达水平;免疫印迹法分析TNF-α、细胞因子信号抑制物1(SOCS1)和IDO蛋白的表达水平。结果:Res能够升高抑郁小鼠糖水消耗指数、缩短强迫游泳不动时间和新奇摄食时间,下调脑组织mir-155、TNF、IL-6和IDO表达,上调SOCS1表达。结论:Res能够改善抑郁小鼠行为学异常,其作用机制与抑制mir-155参与的中枢炎症有关。     

肝豆灵对Wilson病tx-j小鼠肝损伤的保护作用及机制研究

目的 研究肝豆灵（GDL）对Wilson病tx-j小鼠肝损伤的保护作用及机制。方法 25只tx-j小鼠随机分为模型组、GDL高、中、低剂量组、青霉胺组,每组5只,另设正常组5只。采用HE及Masson染色观察小鼠肝脏病理学改变,用ELISA法检测定ALT、AST、ALB、TBIL、TP、MDA、SOD、GSHPx、TNF-α、IL-1β和IL-6的活性或含量。结果 与正常组相比,模型组小鼠肝脏切片观察到明显的炎性细胞浸润和纤维间隔形成,用药干预后肝脏病理程度较模型组明显恢复;与正常组相比,模型组ALT、AST、TBIL、TP、MDA、TNF-α、IL-1β和IL-6含量或活性均升高（P <0.01）,ALB、SOD、GSHPx活性或含量降低（P <0.01）;与模型组相比,GDL高、中、低剂量组及青霉胺组AST、ALT、TBIL、TP、MAD、TNF-α、IL-1β和IL-6含量或活性降低（P <0.05,P <0.01）,ALB、SOD、GSH-Px含量升高（P<0.05）。结论 GDL对tx-j小鼠肝损伤具有保护作用,其机制可能与抑制氧化应激和炎症反应...     

中药复方对血吸虫性肝纤维化小鼠肝组织MMP-2及TIMP-2表达的影响

目的:探讨中药复方对血吸虫性肝纤维化小鼠肝组织基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-,MMP-2)及基质金属蛋白酶的组织抑制因子-2(tissue Inhibitor of Matrix Metalloproteinase-2,TIMP-2)表达的影响。方法:将108只小鼠按照随机数字表法分为中药复方I组、中药复方J组、中药复方K组、中药复方L组、空白模型组及对照组,每组各18只。采用血吸虫尾蚴经皮感染小鼠腹部的方法将中药复方I组、中药复方J组、中药复方K组、中药复方L组、空白模型组小鼠制备肝纤维化模型。将基于毒、痰、瘀、虚四大证候要素进行组方的中药复方分别灌胃中药复方I组、中药复方J组、中药复方K组、中药复方L组小鼠,空白模型组与对照组灌胃生理盐水。HE染色后,光镜下观察小鼠肝脏病理切片肝纤维化程度; Masson染色后,采用SABC免疫组织化学技术半定量观察各组小鼠肝脏病理切片中肝组织表达MMP-2、TIMP-2的变化。结果:中药复方L组MMP-2表达最高,TIMP-2表达最低,与中药复方K组、中药复方J组、中药复方I组、空白模型组比较,差异均有统计学意义(P 0. 05)。病理结果显示,中药复方L组小鼠的肝脏纤维化程度最低,中药复方K组、中药复方J组、中药复方I组、空白模型组小鼠的肝脏纤维化程度依次加重。结论:血吸虫性肝纤维化小鼠具有毒、痰、瘀、虚的证候要素特点,中药复方能明显改善血吸虫性肝纤维化小鼠肝组织中MMP-2和TIMP-2的含量。     

玉屏风颗粒对哮喘小鼠Let-7a及相关因子表达的影响

目的 阐明玉屏风颗粒对哮喘小鼠Let-7a及相关细胞因子表达的影响,为治疗哮喘提供新的理论依据。方法 24只SPF级雌性小鼠随机分为对照组、哮喘组、玉屏风组,每组8只。除对照组外,其余3组制备哮喘模型。玉屏风组,第21天开始,每日玉屏风颗粒溶解后灌胃治疗。小鼠肺组织进行过碘酸-Schiff(PAS)染色,酶联免疫吸附剂测定（ELISA）法分析肺泡灌洗液中细胞因子的表达,逆转录酶聚合酶链反应（RT-PCR）检测小鼠肺组织中Let-7a的表达。结果 哮喘组小鼠肺组织中Let-7a表达显著低于对照组（P<0.05）,玉屏风组小鼠肺组织中Let-7a表达显著高于哮喘组,差异有统计学意义（P<0.05）。哮喘组小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中白细胞介素（IL）-4、IL-5、IL-13、IL-17表达显著高于玉屏风组及对照组（P<0.05）,哮喘组小鼠BALF中IL-10、干扰素（IFN）-γ表达显著低于玉屏风组及对照组（P<0.05）。结论 玉屏风颗粒可能通过升高哮喘小鼠Let-7a表达,调节哮喘小鼠体内炎症细胞因子表达,从而减轻哮喘炎症反应。