不同干燥方法对岩黄连中脱氢卡维汀及总生物碱含量的影响

目的:研究探讨不同干燥方法对岩黄连药材不同部位(根、茎、叶、花序)中主要有效成分脱氢卡维汀及其总生物碱含量的影响.方法:对不同干燥方法所得岩黄连药材不同部位中脱氢卡维汀(HPLC法)和总生物碱(紫外分光光度法)的含量进行测定和统计分析.结果:与传统干燥方法(阴干、晒干、60℃烘干)相比,常温真空干燥法和真空冷冻干燥法所得岩黄连药材中脱氢卡维汀含量相对较低,而阴干法所得药材中脱氢卡维汀的含量较高,其中根和花序中脱氢卡维汀含量最高,分别为冻干法所得药材的相应部位中含量的3.4倍和2.2倍.不同干燥方法对药材各部位中总生物碱含量的影响与对脱氢卡维汀含量的影响基本一致.结论:岩黄连采收后,干燥方法对所得干燥药材中脱氢卡维汀及总生物碱的含量有较大影响,以阴干法所得药材中二者的含量最高.     

峨眉黄连与三角叶黄连不同居群盐酸小檗碱和盐酸巴马汀的含量测定

通过峨眉黄连、三角叶黄连不同海拔高度的居群中小檗碱类生物碱含量的比较,拟证实生态环境和栽培管理对其药材质量影响较大;黄连药材种质资源不同,质量存在较大的差异,峨眉黄连根、根茎、叶的小檗碱含量均较高,间接说明古代雅连药材质量优于其它黄连(同在野生状态下)与基源种质有关。     

峨眉黄连根茎生物量积累及生物碱类成分的动态变化研究

目的探索四川峨眉地区黄连根茎生物量及生物碱类成分的动态变化规律,确定最佳采收期,为黄连药材GAP规范化种植和质量控制提供理论依据。方法以峨眉黄连GAP基地为观测对象定点采样,采用称重法测定黄连根茎生物量,采用PR-HPLC法对基地不同生长年限、不同采收季节黄连根茎中各生物碱的含量进行测定。结果随着黄连生长年限的增加,根茎干重在不断增加,2~3年是根茎重量大幅度提高期。在一年中根茎干重和生物碱含量随季节和生育期的不同有较大起伏,3~4月花期结实期根茎折干率最低,生物碱含量也降低,10~12月根茎坚实、折干率高,生物碱含量也相对较高。结论四川峨眉地区黄连在移栽后4~5年的10月~12月间采收较为合适,为黄连药材GAP规范化种植提供了理论依据。     

组培和野生茅苍术药材挥发油成分的比较

目的:对组培茅苍术和野生茅苍术的根茎中所含挥发油的化学成分进行比较,从而初步评价通过组织培养技术所得茅苍术的品质.方法:采用水蒸气提取法提取药材挥发油,利用GC-MS联用技术进行分析.结果:从组培茅苍术和野生茅苍术的根茎中分别鉴定出30个相同的化合物,其中组培茅苍术的根茎中所含的β-桉叶醇、苍术醇、苍术素的相对含量高于野生品.结论:两者的挥发油所含成分没有显著性差异.     

湖北贝母有效部位提取工艺的研究

目的优选湖北贝母有效部位即总生物碱的最佳提取工艺。方法采用正交实验设计,测定不同提取条件所得总生物碱的含量及收率,结合各实验样品药理效应强弱的评价,优选出湖北贝母有效部位的最佳提取工艺。结果当提取条件为以50%EtOH提取3次,1 h/次,4倍体积/次时,湖北贝母有效部位总生物碱的收率最高,其镇咳和平喘的综合药效最强,经过稳定性验证后,将该工艺确定为湖北贝母有效部位的最佳提取工艺。结论该研究以化学指标和药效指标相结合的方法来优选湖北贝母有效部位的最佳提取工艺,相对单纯化学指标来说更为科学和可信,可以有效防止以单纯化学指标优选出的工艺与药理效应不一致时的偏差,使优选出的工艺真正为活性导向下药材有效部位的最佳提取工艺。     

黄连干浸膏的制备工艺研究

黄连为毛莨科植物黄连 (ＣｏｐｔｉｓＣｈｉｎｅｎｓｉｓＦｒａｎｃｈ)的干燥根茎 ,具有清热燥湿、泻火解毒之功效。黄连主要有效成分是以盐酸小檗碱为代表的生物碱。黄连生物碱均为季铵碱 ,水溶性大。本文设计以水为溶剂的提取方法 ,以小檗碱的百分含量及浸膏得率为指标 ,采用正交试验法对提取工艺进行优选 ,选择最佳提取条件 ,旨在增加药材的利用率及有效成份的浸出。1　材料与仪器黄连购自武昌区药材公司 ;盐酸小檗碱对照品由中国药品生物制品检定所提供 ;岛津 -ＣＳ90 0 0薄层扫描仪 ;硅胶Ｇ为青岛海洋化工厂出品 ;羧甲基纤维素钠系上海…     

黄芪蛋白提取方法的比较

目的:应用蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)技术筛选建立黄芪蛋白质指纹图谱及蛋白提取方法。方法:采用8种提取方法(稀释4倍的浓缩胶缓冲液,双蒸水,Tris-HCl法,柠檬酸盐法,PVP buffer,改良饱和酚法,TCA-丙酮法,植物蛋白提取试剂盒)提取黄芪药材的水溶性蛋白质,根据PAGE谱带的多少和清晰度优选建立黄芪药材蛋白质指纹图谱的蛋白提取条件。结果:植物蛋白质提取液、稀释4倍的浓缩胶缓冲液和Tris-HCl缓冲液提取的蛋白含量较高,但杂质较多,条带拖尾,部分特征峰不能得到有效分离。TCA-丙酮法、改良饱和酚法、柠檬酸盐缓冲液和PVP buffer提取的蛋白含量较低,谱带数目较少,辨识度低。以双蒸水为提取溶剂时可辨识谱带数目最多,清晰度较好,电泳指纹图谱中各峰的分离度较高。结论:双蒸水直接提取法更适用于建立黄芪药材的蛋白质指纹图谱。     

灯台七总皂苷提取工艺优化及其抗肿瘤活性研究

目的:探索灯台七总皂苷提取工艺优化及其抗肿瘤活性研究。方法:采用响应面优化法优化灯台七中总皂苷的提取工艺;使用最佳的提取工艺提取、比较了陕西地区10批不同产地灯台七茎叶与根茎总皂苷含量差异;使用MTT法分别对不同产地灯台七总皂苷进行了抗肿瘤活性测试。结果:最佳工艺条件为提取时间60min、提取次数3次、乙醇浓度65%、液料比6∶1。总皂苷含量:茎叶根茎;抗肿瘤活性测试发现不同来源灯台七总皂苷均有非常好的抑制SW620、HT-29生长的作用;同时MTT实验表明,70%醇部位的皂苷对SW620、HT-29细胞的生长抑制作用最强。结论:该工艺条件可为灯台七总皂苷的工业生产提供依据。     

甘草总黄酮和总皂苷成分的提取工艺及其含量分析

目的:优化甘草中总黄酮和总皂苷成分的提取工艺,并比较在不同品种和不同产地野生甘草药材中的含量差异。方法:紫外分光光度计测定甘草总黄酮和总皂苷的含量,采用正交试验法,考察乙醇浓度、固液比、氨水浓度及超声温度对其提取率的影响,优选出能同时提取两类成分的合适工艺。结果:最佳提取工艺为乙醇浓度80%,固液比1∶20,氨水浓度0.3%及超声温度40℃;不同来源甘草药材的总黄酮和总皂苷含量差异较大。结论:优选的条件可靠,重现性好,适合甘草总黄酮和总皂苷的同时提取;测定甘草总黄酮和总皂苷含量能有效评价甘草药材质量。     

不同产地和不同部位的壁虎药材蛋白质比较研究

目的:为中药壁虎质量标准的制订与资源开发提供科学的实验依据及可靠的实验方法.方法:提取不同产地的无蹼壁虎药材不同部位(壁虎体与壁虎尾)的水溶性蛋白质,并对其进行含量测定和聚丙烯酰胺凝胶电泳,比较壁虎药材蛋白质含量和组成的产地差异和部位差异.结果:不同产地壁虎药材的蛋白质含量不同,同一产地壁虎药材的不同部位蛋白质含量也存在差异.蛋白质电泳图谱显示,除共有条带外,同一提取部位的蛋白条带的分布位置和数量随产地存在一定差异.结论:考马斯亮蓝染色法简便、快速,标准曲线线性关系良好,可以用来进行蛋白质含量的测定.聚丙烯酰胺凝胶电泳实验快速、准确、重复性好,得到的蛋白质电泳指纹图谱可作为壁虎药材质量评价和资源开发的重要依据之一.     

野生与栽培毛喉鞘蕊花组织显微特征的比较研究

目的:从组织显微特征上比较野生与栽培毛喉鞘蕊花的差异,为毛喉鞘蕊花药材资源的开发利用提供依据。方法:采用组织形态学方法,比较野生与栽培毛喉鞘蕊花根茎部分的组织结构差异。结果:野生毛喉鞘蕊花通常在根茎部位具有较多贮水薄壁组织,导致根茎有明显膨大;而栽培品种的根茎无明显膨大。结论:野生与栽培毛喉鞘蕊花根茎的组织特征有明显区别;区别二者,为制定该药材质量标准,研究和利用该药材资源提供了参考。     

姜黄素不同提取方法比较研究

目的对5种提取姜黄素的不同方法进行比较。方法以各法提取所得的姜黄素含量与得膏率作为评价指标，优选姜黄素的提取工艺。结果80℃乙醇温浸提取姜黄素所得的含量最高，为姜黄素的优选提取工艺。结论该法提取姜黄素含量高，操作简单，稳定可行。     

不同采收期金银花的产地加工方法考察

目的:对不同采收时期金银花的最佳产地加工方法的研究。方法:以绿原酸、木犀草苷含量综合评分、指纹图谱为指标,对不同采收期、不同产地加工方式的样品进行测定和比较。结果:三青期、大白期采收样品梯度烘干法所得药材综合评分最高,二白期采收样品直接烘干法所得药材综合评分最高,三青期、大白期采收样品梯度烘干法所得药材与二白期采收样品直接烘干法所得药材指纹图谱相似度均0.9,且相似度、主要特征峰峰面积无显著差异。结论:三青期、大白期采收的药材最佳产地加工方法为梯度烘干法,二白期采收的样品最佳产地加工方法为直接烘干法,各采收期采用最佳产地加工方法加工,所得金银花药材质量无显著性差异。     

华重楼皂苷类成分的动态分布规律对药材质量的影响

目的研究华重楼皂苷类成分及药材生物量积累速度的时间、空间分布规律(随植株生长年限、采挖季节的变化规律及在不同部位的积累特征),明确最佳种植年限、采收季节、入药部位。方法建立了基于高效液相色谱法-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)同时测定华重楼6种皂苷(重楼皂苷I、II、VI、VII、V、H)量的方法以检测皂苷量的变化;采用烘干法测定药材折干率以指示生物量积累速度。结果华重楼根茎折干率同生长年限呈正相关,8年生最高;随着采收月份呈波浪式,6月和1月为波峰;总皂苷构成以重楼皂苷VII、H为主,总皂苷量随着生长年限呈"V"字型,2年和8年为顶点;随着采收季节呈波浪式,3月和11月为波峰;植株不同部位的总皂苷分布差异明显,茎叶总皂苷量根茎尖段总皂苷量根茎中段总皂苷量≈根茎尾段总皂苷量,其中重楼皂苷VII的分布从茎叶向根茎尾端呈明显下降趋势,而重楼皂苷H则呈显著上升趋势。结论生长年限、采收季节、植株部位对华重楼皂苷的累积有明显影响,人工栽培华重楼最佳种植年限为8年、最佳采收季节为11月;仅采用根茎尾段入药会降低商品药材质量;重楼皂苷VII可能同华重楼的萌芽和茎叶生长有关;茎叶可作为获取重楼皂苷的重要资源,对于扩大药源,提高资源利用效率有重要意义。     

积雪草总皂苷闪式提取（STE）工艺研究

目的：研究和优选积雪草中活性成分积雪草总皂苷的提取和纯化工艺。方法：以积雪草总皂苷的含量为测定指标,采用分光光度法测定和比较不同的提取和纯化方法所得积雪草总皂苷的含量。结果：以积雪草总皂苷含量为考察指标,优选出积雪草最佳提取工艺为75％乙醇,闪式提取法提取3次,每次5min。结论：闪式提取法得到的总皂苷的含量最高。     

正交试验法优选黄连中小檗碱提取工艺

目的优选黄连的提取工艺。方法以小檗碱提取率为考察指标,用高效液相色谱法进行含量测定。采用正交试验与比较试验相结合的方法,对提取工艺进行优选。结果提取次数对考察指标具有显著影响。结论确定黄连最佳提取工艺为：药材粉碎度10目,加60％乙醇回流提取3次,每次提取1h,加醇量为9、8、8倍。     

不同纯化方法对黄连解毒汤中盐酸小檗碱含量的影响

目的:比较了3种纯化方法对黄连解毒汤中盐酸小檗碱含量的影响,以优选出黄连解毒汤的水提取液的最佳纯化方法。方法:对黄连解毒汤的水提取液分别用醇沉、大孔树脂吸附和吸附澄清剂澄清3种方法纯化,并用HPLC法测定了所得提取物中盐酸小檗碱的含量,以此为指标对3种纯化方法进行了比较研究。结果:大孔树脂吸附法出膏率最低,醇沉法次之,吸附澄清法最高;盐酸小檗碱含量以大孔树脂吸附法最高,醇沉法次之,吸附澄清法最低。结论:大孔树脂吸附法为黄连解毒汤水提取液的最佳纯化方法。     

HPLC分析比较不同产地郁金姜黄素的化学组分

目的:对不同产地郁金炮制品及其生品、茎叶中姜黄素类成分含量上的差异进行比较分析,以期为浙产温郁金建立起科学合理的质量评价方法。方法:采用HPLC法测定不同产地郁金炮制品及其茎叶、生品中的姜黄素含量。结果:茎叶样品中四川产黄丝郁金的姜黄素含量最高,温郁金中含有的姜黄素量比黄丝郁金少得多;从部位来看,茎叶的姜黄素含量比块根要略高,而生品要比炮制品略高。结论:不同品种、产地及加工方法的郁金炮制品、生品及其茎叶中姜黄素含量存在较大的差异。经优选色谱条件建立的HPLC法可以简便、准确地测定姜黄素类成分含量,为控制和评价浙江道地药材温郁金的质量提供科学依据。     

洪雅黄连生物量动态变化及有效成分积累的研究

目的:研究四川洪雅地区黄连(味连)根茎生物量和有效成分积累的动态变化规律,为确定最佳采收期,实现洪雅地区黄连的GAP种植和质量控制提供理论依据.方法:定期定点采集三至五年生黄连样品,分析黄连根茎生物量变化,采用高效液相色谱法(HPLC)测定根茎药根碱、非洲防己碱、表小檗碱、黄连碱、巴马汀和小檗碱的含量.结果:随着黄连生长年限的增长,根茎生物量在不断增加,以四年生黄连根茎生物量增长较快,在10月份达到最高.黄连根茎中有效成分的积累有一定规律.四年生黄连的6种生物碱和总碱要高于三年和五年生黄连.不同月份间,四年生黄连根茎中非洲防己碱、表小檗碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱和总碱的含量无显著差异.结论:根据黄连根茎生物量变化及有效成分的积累动态规律,洪雅地区黄连的最佳采收期为10月份的四年生黄连根茎.     

珊瑚菜Gl4CL 基因克隆与生物信息学分析

目的：对动物药材DNA提取方法进行优化,利用优化方法提取市售动物药材DNA并进行DNA条形码鉴定。方法：基于SDS法DNA提取原理,比较裂解液中不同EDTA浓度（0.025、0.25、0.5 mol·L-1）、是否含NaCl和Triton X-100等因素对不同用药部位动物药材DNA提取质量的影响,筛选得到最佳裂解液配方;使用优化的裂解液配方提取121份市售动物药材DNA并进行基原物种鉴定。结果：裂解液配方为1 % SDS、0.03 mol·L-1 Tris-HCl、0.25 mol·L-1 EDTA、0.2 mol·L-1NaCl对不同用药部位动物药材DNA提取效果最佳,并可实现对蝉蜕等提取困难样本DNA的提取;利用优化裂解液提取的121份市售动物药材DNA满足中药材分子鉴定后续实验要求,所有市售动物药材均可准确鉴定到基原物种。结论：本研究优化的裂解液配方可用于除壳类、分泌物类、加工品外不同用药部位动物药材的DNA提取,为动物药材分子鉴定提供了技术支持。