CD44基因沉默对K562/A02细胞逆转耐药及生物学活性的研究

本研究旨在探讨CD44基因表达抑制对白血病多药耐药细胞株K562/A02耐药性及生物学活性的影响。根据CD44基因表达序列设计有效的RNA干扰片段,将其插入质粒表达载体中,获得针对CD44mRNA的特异性siRNA真核质粒(pGCsiRNA-CD44),转染K562/A02细胞。用实时荧光定量RT-PCR检测K562/A02细胞CD44、mdr-1和bcl-2mRNA的表达;用MTT法检测阿霉素对K562/A02细胞的半数抑制浓度(IC50);流式细胞术(FACS)检测细胞周期;Hochest33258染色荧光显微镜观察细胞凋亡的形态学变化。结果表明:针对CD44基因的siRNA真核质粒可有效沉默K562/A02细胞的CD44基因:与对照组相比,转染了4条pGCsiRNA-CD44质粒的K562/A02细胞CD44表达均明显受抑,以转染了siCD44-1的细胞中抑制最强。转染pGCsiRNA-CD44质粒48小时后,K562/A02细胞CD44mRNA表达水平下降64.1%(p0.05),同时mdr-1与bcl-2mRNA的表达量较对照组分别下降了25.6%与50.8%;K562/A02细胞IC50为(17.97±1.61)μg/ml,无义序列质粒转染后阿霉素对K562/A02细胞的IC50为(16.95±1.72)μg/ml,pGCsiRNA-CD44转染后IC50明显降低为(8.77±1.63)μg/ml(p0.01)。转染48小时后,G0/G1期细胞比例提高了10.7%;细胞出现核固缩、核边集、凋亡小体等改变。结论:特异性CD44siRNA可显著抑制K562/A02细胞CD44基因的表达,抑制细胞增殖,诱导其凋亡,并有效逆转K562/A02细胞的多药耐药性。     

生长抑制因子4基因表达对K562细胞生长的影响

目的 研究生长抑制因子4（ING4）基因表达对K562细胞增殖的影响。方法 将经过定点突变技术人源化改造的ING4（鼠→人）生长抑制因子4基因酶切并连接到pAdTrack-CMV转移质粒上，然后与腺病毒质粒pAdEasy-1共转化BJ5183细菌，获得重组腺病毒质粒pAdEasy-1-pAdTrack—CMV—hING4，将它转染QBI-293A细胞后收获重组腺病毒Ad—hING4（以下简称为Ad-ING4）。将Ad-ING4感染K562细胞，光学显微镜下观察病毒感染前后细胞形态的变化，免疫细胞化学分析凋亡因子的改变，激光扫描共聚焦显微镜观察K562细胞的凋亡，流式细胞术（FCM）检测细胞凋亡率。结果 成功构建了人ING4腺病毒质粒，获得高滴度的重组腺病毒Ad-ING4，用它感染K562细胞72h后，FCM法测定细胞凋亡率为19．7％，与空病毒对照组相比差异有统计学意义（P〈0．01），ING4基因能下调K562细胞bcl-2的表达并上调bax的表达，多种方法检测结果表明ING4基因能抑制K562细胞生长，诱导凋亡。结论 重组腺病毒Ad—ING4可以显著抑制K562细胞的生长。     

YB-1蛋白对白血病细胞K562/A02生物学行为的影响

本研究探讨YB-1基因表达下调后对白血病细胞K562/A02生物学行为的影响及其机制。采用脂质体介导的方法将已构建的人YB-1基因特异性shRNA及随机片段HK的真核表达载体转染进白血病细胞K562/A02中,RT-PCR和免疫印迹反应检测YB-1 mRNA和蛋白表达量的改变;采用MTT法和细胞周期测定分析对白血病细胞增殖的影响;用AnnexinⅤ检测白血病细胞的凋亡程度;采用MTT法检测细胞IC50值变化;RT-PCR和流式细胞术检测基因转染前后细胞中的MDR1 mRNA和P-gp表达的变化。结果表明,阳性转染的3组细胞YB-1基因和蛋白的表达量明显低于随机片段组和未转染细胞;生长曲线提示阳性转染组细胞生长缓慢,细胞周期动力学分析显示阳性转染组G1期细胞增多,G2期与S期细胞显著减少;在小剂量As2O3作用下,阳性转染组细胞的凋亡数量明显高于对照组细胞;阳性转染细胞的阿霉素IC50明显低于随机片段组和阴性对照组;阳性转染细胞MDR1 mRNA水平明显降低,P-gp的峰值较对照组明显左移。结论:YB-1特异性shRNA能有效降低白血病细胞中YB-1的表达,减慢细胞生长,增加白血病细胞对化疗药物的敏感性,加速细胞凋亡。     

SARI基因过表达对K562细胞系生物学影响的研究

目的:通过构建SARI慢病毒表达载体,探讨SARI基因过表达对K562细胞生物学功能的影响。方法:采用RT-PCR方法获得目的基因并重组p LOV.CMV.GFP质粒,构建pLOV.CMV.GFP-SARI表达载体。通过测序鉴定、病毒包装和滴度测定后,获得阳性病毒颗粒,并以病毒颗粒感染K562细胞系。采用Q-PCR及Western blot方法验证感染后K562细胞SARI基因转录和蛋白水平的表达情况,同时采用CCK-8法检测K562细胞的增殖情况,以流式细胞术分析细胞凋亡和细胞周期变化。结果:利用RT-PCR方法获得SARI基因并成功构建了含SARI基因的慢病毒表达载体,从分子及蛋白水平验证了其在感染后K562细胞中的高表达;与空白组和感染空载体的Mock组相比,过表达SARI载体组的细胞增殖显著受抑、细胞凋亡率增加,而细胞周期无显著变化。结论:SARI基因过表达可抑制K562细胞的增殖并促进其凋亡,提示诱导SARI基因过表达可能对于抑制CML发生发展具有重要的作用。     

艰难梭菌毒素A对K562细胞生长增殖的影响

本研究探讨艰难梭菌毒素A(Tcd A)对人慢性髓系白血病(CML)细胞株K562生长增殖的影响及其机制。采用四氮唑蓝比色法(MTT法)观察Tcd A对K562细胞增殖的抑制作用;流式细胞术分析细胞周期及线粒体膜电位的变化;免疫细胞化学法观察细胞色素C蛋白的表达水平;DNA凝胶电泳技术检测细胞凋亡。结果表明,不同浓度的Tcd A明显抑制K562细胞增殖,呈一定的时间和浓度依赖性;流式细胞仪检测显示,细胞阻滞于G0/G1期,并出现凋亡峰,细胞内细胞色素C蛋白含量增高;DNA凝胶电泳出现片段化的梯形带。结论:Tcd A可以抑制K562细胞的生长增殖,并诱导其凋亡,其机制可能与线粒体膜电位降低,基质中释放出致凋亡活性物质细胞色素C有关。     

靶向沉默Eps8基因对人慢性髓系白血病K562细胞生物学活性的影响及其分子机制的探讨

目的:探索靶向沉默Eps8(表皮生长因子受体通路底物8)基因对人慢性髓系白血病K562细胞生物学活性的影响及其可能的分子机制。方法:采用慢病毒介导RNA干扰技术靶向沉默K562细胞中Eps8基因。实验分组为:空白对照(blank control)组、Eps8-shRNA靶向沉默(K562-shRNA)组和阴性对照(K562-NC)组。在荧光显微镜下观察转染效率;应用RT-PCR法和Western blot法分别从mRNA转录水平和蛋白水平验证Eps8基因沉默效率;台盼蓝拒染法和MTT法检测细胞体外增殖能力变化;流式细胞术检测细胞凋亡率变化;甲基纤维素克隆形成实验验证细胞集落形成能力;Western blot法检测沉默Eps8基因后AKT/mTOR及其下游信号通路磷酸化蛋白的表达情况。结果:成功建立稳定低表达Eps8的K562细胞株(K562-shRNA)和阴性对照细胞株(K562-NC)。与空白对照组和K562-NC组相比,沉默Eps8基因后K562-shRNA组细胞Eps8转录和蛋白表达水平均显著降低(P0.01);体外培养48 h后,K562-shRNA组细胞增殖能力明显下降(P0.05);K562-shRNA组细胞凋亡率为(5.81±0.39)%,空白对照组和K562-NC组细胞凋亡率分别为(1.02±0.70)%和(1.19±0.15)%,提示K562-shRNA组细胞凋亡率与空白对照组和K562-NC组之间有显著性差异(P0.05),而空白对照组和K562-NC组之间没有显著性差异(P0.05);体外甲基纤维素半固体培养10 d后,K562-shRNA组细胞集落形成能力与空白对照组和K562-NC组相比有显著性差异(P0.05)。沉默Eps8基因可下调K562细胞p-AKT(308)和p-AKT(473)的表达(P0.05),而t-AKT表达水平没有明显变化。另外,沉默Eps8基因可下调AKT下游的pmTOR和p-PRAS40蛋白的表达(P0.05),而总mTOR和总PRAS40的表达水平没有明显变化。结论:利用慢病毒介导的RNA干扰技术靶向沉默Eps8基因能够抑制K562细胞增殖,促进其凋亡,其作用机制可能与AKT/mTOR及其下游信号通路下调有关。     

白血病K562、K562/A02细胞中mthfr、dpyd基因单核苷酸多态性的检测

本研究旨在检测白血病细胞株及其耐药株中两种药物代谢相关基因的单核苷酸多态性。培养白血病细胞株K562及其耐药株K562/A02,采用QIAamp DNA Blood Minikit试剂盒提取基因组DNA,设计引物,应用PCR技术扩增相应目的片段;采用基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术检测mthfr基因rs1801131、rs1801133、rs2274976及dpyd基因rs1801159、rs1801160、rs17376848的单核苷酸多态性。结果表明,在K562和K562/A02两种细胞中,mthfr基因rs1801131基因型均为CA、rs1801133均为CC、rs2274976均为GG;dpyd基因rs1801159基因型均为GG、rs1801160均为GG、rs17376848均为AA。结论:mthfr、dpyd基因上述位点在K562和K562/A02两种细胞中基因表达无差别。     

某些中药对K562/A02细胞Mdr1基因及其表达产物的影响

本研究探讨中药复方当归注射液、马钱子碱、麻黄碱、士的宁对人红白血病多药耐药细胞株K562／A02Mdr1基因及其表达产物P—gP的影响。采用噻唑蓝（MTT）法、台盼蓝拒染法检测上述药物的细胞毒作用；采用半定量RT—PCR和Western blot分别检测上述4种中药在非细胞毒浓度（IC10）作用下对K562／A02细胞Mdr1基因及P—gP表达的影响。结果表明：复方当归注射液、马钱子碱、麻黄碱作用后，K562／A02细胞中Mdr1基因及P—gP表达降低（p〈0．01），其中马钱子碱组的作用最为显著；而士的宁作用后K562／A02细胞Mdr1基因及P—gP表达无明显变化。结论：复方当归注射液、马钱子碱、麻黄碱能部分逆转K562／A02细胞的耐药性，其作用机制主要与下调K562／A02细胞Mdr1 mRNA的表达而导致细胞膜上P—gP的表达量减少有关。     

携带人OCT4A基因的慢病毒载体的构建及其稳定转染K562白血病细胞株的建立

本研究旨在构建共表达人OCT4A与绿色荧光蛋白（GFP）慢病毒载体pLVX-OCT4A-ZsGreen1,并通过感染获得稳定表达重组质粒的白血病K562细胞系,观察OCT4A在其中的表达。根据Gen Bank数据库提供的OCT4A mRNA序列,合成编码mRNA基因的特异性引物序列,通过RT-PCR技术扩增出OCT4A全长片段,克隆至pCR-Blunt载体。将OCT4A DNA片段酶切回收后克隆至经EcoR1酶切线性化的慢病毒载体pLVX-IRES-ZsGreen1,构建pLVX-OCT4A-ZsGreen1慢病毒重组质粒,利用测序鉴定所构建的重组载体是否正确。经三质粒包装系统包装后获得高滴度慢病毒颗粒并感染人白血病细胞系K562,通过流式细胞仪分选获得稳定表达的白血病细胞系,应用Real-time PCR和Western blot方法分别检测稳定转染细胞系的OCT4A mRNA和OCT4A蛋白表达。应用CCK-8法和平板细胞克隆形成试验测定OCT4A对K562细胞增殖能力的影响。结果表明,经限制性内切酶检测及基因测序证实成功构建了携带OCT4A基因的重组慢病毒;包装病毒颗粒超速离心后病毒滴度达（1.43±0.25）×10^8U/ml;病毒感染K562细胞后经流式细胞仪分选获得GFP＋细胞,实时定量PCR及Western blot证实病毒感染后OCT4A基因及蛋白的表达可有效上调;CCK-8法及平板集落形成试验显示病毒感染的K562细胞体外增殖活性明显升高,与对照组相比均有统计学差异（P〈0.05）。结论：成功构建了表达OCT4A基因的慢病毒载体,并且获得可稳定上调OCT4A表达的K562细胞株。     

蛇六谷石油醚提取物对K562细胞生物学特性的影响及其机制

目的:探讨蛇六谷石油醚提取物(SLG)抑制白血病K562细胞增殖、促进凋亡和诱导分化的作用.方法:SLG处理K562细胞,同时加入ERK信号通路阻滞剂PD98059.采用MTT检测细胞活力,采用流式细胞术检测细胞调亡率及分化相关抗原表达阳性的细胞比例,采用Western blot检测ERK1/2和p-ERK1/2的蛋白...     

苦参碱对K562细胞Cgi-100基因表达和细胞增殖的影响

本研究了解功能未知的cgi-100基因在苦参碱作用人白血病K562细胞中的表达情况，并探讨其对K562细胞生长的影响。应用RT—PCR检测苦参碱作用前后K562细胞中cgi-100基因的表达情况；构建pIRES2-EGFP／cgi-100真核表达质粒，用脂质体法转染至K562细胞中；RT—PCR检测在重组细胞中目的基因cgi-100的表达状况，并采用台盼蓝染色法观察细胞生长趋势，电镜观察细胞形态学改变，流式细胞术检测细胞周期的变化，观察cgi-100基因过表达对K562细胞增殖的影响。结果表明，在苦参碱作用K562细胞后cgi-100基因表达下调；重组K562细胞中cgi-100基因过表达，且常染色质增加，异染色质减少，细胞增殖旺盛，S期细胞增多，增殖速度高于对照组。结论：不同浓度不同作用时间下苦参碱能使K562细胞中cgi-100基因表达下降；cgi-100基因过表达能使K562细胞增殖加速、细胞幼稚程度增加。     

不同冻存复苏条件影响K562细胞的生物学特性

目的:观察不同冻存复苏条件对白血病K562细胞株生物学特性的影响,并优化培养条件与方法。方法:实验于2006-02/2006-04在吉林医药学院临床检验实验室进行。①将欲冷冻保存的细胞调整到良好的生长状态,即对数生长期。将细胞分成密度相同的4个组。离心收集后分别加入冻存保护液二甲基亚砜,其终浓度依次为5%、10%、15%、20%分装于冻存管。冻存15d后,每组取出1支复苏并接种于细胞培养板培养。培养12h后吸取少量实验细胞,加入等体积的0.1%台盼蓝染液,5min后在血球计数板上计数,被染成深蓝色的细胞为死细胞;染色很淡、边缘光滑且胞体透明的细胞为活细胞。每个标本计数500个细胞,计数2次取平均值,计算细胞的复苏率。②选择冻存条件和冻存细胞密度相同的2支冻存细胞,采用2种不同的方法进行复苏。第1组:立即将冻存管置37℃水浴中,待融化后1000r/min离心5min,吸去上清液,加入含10%小牛血清的RPMI-1640培养基,混匀后接种于细胞培养板继续培养。第2组:将冻存细胞于40℃水浴中迅速溶解后转入37℃水浴箱,融化后离心、加培养基等操作同第1组。复苏细胞培养12h后采用台盼蓝染色计算细胞的平均存活率。③用无血清RPMI-1640培养基制备3×104/mL的K562细胞悬液接种于细胞培养板中,每孔1mL,然后分别加入5%、10%、12%、15%、20%的灭活小牛血清,每种血清浓度设置4个试验孔并于培养12,24,36,48,60,72,84,96h后每种浓度各取1孔计数细胞量,绘制细胞生长曲线。结果:①5%、15%、20%二甲基亚砜组冻存K562细胞复苏率分别与10%二甲基亚砜组比较,差异显著(86.70%,82.03%,63.09%,88.13%,P均<0.01)。②传统37℃水浴方法复苏后的细胞平均存活率,与40℃溶解后37℃恒温方法比较,差异非常显著[(69.13±1.01)%,(87.50±2.24)%,P<0.01]。③在5%血清含量培养基中,K562细胞基本不生长,且有逐渐死亡的趋势;在10%血清含量培养基中K562细胞生长趋势明显,但生长速度相对较慢;在12%、15%、20%血清含量培养基中K562细胞生长迅速,但3种血清浓度之间细胞生长趋势无明显差异。结论:以10%二甲基亚砜作为K562细胞冻存保护剂并采用改良复苏方法可使细胞保持最佳生物学特性,12%血清为K562细胞常规培养的最适浓度。     

氨茶碱对白血病K562细胞凋亡的影响

目的：探讨氨茶碱对慢性粒细胞白血病细胞系（K562细胞株）凋亡的影响。方法：取对数生长期的K562细胞加入250．0mg／L的氨茶碱共同培养，对照组不加氨茶碱，72h后收集细胞进行检测：采用吖啶橙染色，荧光显微镜观察细胞凋亡，流式细胞术（FCM）检测细胞周期。结果：吖啶橙染色出现明显凋亡形态学改变，细胞周期分析显示氨茶碱处理组S期细胞比率明显增高，提示S期阻滞。结论：氨茶碱可将K562细胞阻滞于S期，并诱导凋亡。     

不同冻存复苏条件影响K562细胞的生物学特性

目的：观察不同冻存复苏条件对白血病K562细胞株生物学特性的影响，并优化培养条件与方法。 方法：实验于2006-02／2006—04在吉林医药学院临床检验实验室进行。①将欲冷冻保存的细胞调整到良好的生长状态，即对数生长期。将细胞分成密度相同的4个组。离心收集后分别加入冻存保护液二甲基亚砜，其终浓度依次为5％、10％、15％、20％分装于冻存管。冻存15d后，每组取出1支复苏并接种于细胞培养板培养。培养12h后吸取少量实验细胞，加入等体积的0．1％台盼蓝染液，5min后在血球计数板上计数，被染成深蓝色的细胞为死细胞；染色很淡、边缘光滑且胞体透明的细胞为活细胞。每个标本计数500个细胞，计数2次取平均值，计算细胞的复苏率。②选择冻存条件和冻存细胞密度相同的2支冻存细胞，采用2种不同的方法进行复苏。第1组：立即将冻存管置37℃水浴中，待融化后1000r／min离心5min，吸去上清液，加入含10％小牛血清的RPMI～1640培养基，混匀后接种于细胞培养板继续培养。第2组：将冻存细胞于40℃水浴中迅速溶解后转入37℃水浴箱，融化后离心、加培养基等操作同第1组。复苏细胞培养12h后采用台盼蓝染色计算细胞的平均存活率。③用无血清RPMI-1640培养基制备3×10^4／mL的K562细胞悬液接种于细胞培养板中，每孔1mL，然后分别加入5％、10％、12％、15％、20％的灭活小牛血清，每种血清浓度设置4个试验孔并于培养12，24，36，48，60，72，84，96h后每种浓度各取1孔计数细胞量，绘制细胞生长曲线。 结果：①5％、15％、20％二甲基亚砜组冻存K562细胞复苏率分别与10％二甲基亚砜组比较，差异显著（86．70％，82．03％，63．09％，88．13％，P均〈0．01）。②传统37℃水浴方法复苏后的细胞平均存活率。与40屯溶解后37℃恒温方法比较，差异非常显?     

雷帕霉素对K562细胞溶酶体的影响

<正>雷帕霉素(RAPA)是一种大环内酯类免疫抑制剂,具有抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡、抑制侵袭、抑制血管生成等作用。RAPA常应用于肝移植[1]、肾移植、骨髓移植后。其主要作用机制是与免疫亲和蛋白(FKBP12)结合形成RAPA-FKBP12复合物,作用于哺乳动物细胞的雷帕霉素靶点(mTOR),从而阻断其下游分子而促进细胞凋亡、抑制蛋白合成而达到免疫抑制和抗肿瘤作用。溶酶体     

柔红霉素对K562细胞凋亡的影响

目的 研究柔红霉素(DNR)对白血病K562细胞细胞凋亡的影响.方法 对数生长期K562细胞随机分A、B两组,A组(对照组):加RPMI-1640培养液;B组 (DNR组):分别加DNR0.2、2、20 μmol/L分别作用1 、2 、6 、24 h后,用流式细胞检测术检测K562细胞的凋亡率.结果 在没有药物的作用下,K562细胞存在自然凋亡.DNR组: 0.2 μmol/L分别作用1、2、6、24 h,细胞凋亡率与对照组相比差异均无统计学意义(P>0.05);2 μmol/L作用于K562细胞1 h,与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05);作用2、6、24 h,与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.01);20 μmol/L作用1、2、6、24 h,与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.01).结论 DNR能促进K562细胞凋亡,并存在剂量、时间依赖性.     

c-myb基因反义寡核苷酸对K562细胞作用的研究

为研究慢性髓细胞白血病(ＣＭＬ)反义核酸的治疗效果,我们以ＣＭＬ细胞株Ｋ562为实验对象,研究ｃｍｙｂ基因硫代磷酸反义寡聚脱氧核苷酸对Ｋ562细胞的作用,现将结果报告如下。材料和方法1　细胞株　Ｋ562细胞由福建省医学科学研究所提供。培养条件:含体积分数为15%灭活胎牛血清(Ｇｉｂｃｏ)及50ＩＵ/ｍｌ青霉素、50μｇ/ｍｌ链霉素的ＲＰＭＩ1640完全培养液(ｐＨ72～74),置37℃、体积分数为5%ＣＯ2、完全饱和湿度培养箱中培养。2　反义寡核苷酸的合成　反义寡聚脱氧核苷酸是由本所合成,为防核酸酶降解,采用二硫化四乙基秋兰姆(ｔｅｔｒａｅ…     

MAP4K4沉默表达对结肠癌细胞生物学特性的影响

目的 分析沉默丝裂原活化蛋白激酶-激酶激酶4(MAP4K4)对结肠癌细胞生物学行为的影响。方法脂质体siRNA干扰技术转染人结肠癌细胞SW620细胞株,按转染情况分为MAP4K4干扰组(转染MAP4K4-siRNA 1. 5m L)、空载体组(转染无关siRNA 1. 5 m L)、空白对照组(不予细胞转染处理)。分别采用逆转录-聚合酶链反应(RTPCR)和蛋白印迹法(WB)测定各组MAP4K4 mRNA及蛋白表达,并检测各组SW620细胞增殖、侵袭及细胞凋亡情况。结果 ①空载体组与MAP4K4干扰组MAP4K4 mRNA、蛋白浓度低于空白对照组(P 0. 05),MAP4K4干扰组MAP4K4mRNA、蛋白浓度低于空载体组(P 0. 05);②MAP4K4干扰组不同时间增殖活性均低于空载体组和空白对照组(P 0. 05);③MAP4K4干扰组穿膜细胞比率低于空载组和空白对照组(P 0. 05),空载体组穿膜细胞比率低于空白对照组(P 0. 05);④MAP4K4干扰组细胞凋亡率高于空载组和空白对照组(P 0. 05),空载体组细胞凋亡率高于空白对照组(P 0. 05)。结论 siRNA干扰技术沉默结肠癌细胞MAP4K4表达可降低结肠癌细胞增殖及侵袭能力,促进癌细胞凋亡,或可能为结肠癌防治的新靶点。     

K562细胞及其耐药细胞株K562/A02细胞白血病耐药相关microRNA筛选

目的 通过检测慢性粒细胞白血病急变细胞系K562及其阿霉素耐药株K562/A02的微小RNA(microRNA、miR)表达差异,探讨microRNA与白血病化疗耐药的关系.方法 MTT法检测K562/A02及其亲本细胞系K562的耐药性能;流式细胞术检测K562与K562/A02细胞的P-gp表达;运用microRNA芯片技术筛查K562与K562/A02细胞之间差异表达的microRNA,随后用实时荧光定量RT-PCR方法进一步证实.结果 阿霉素耐药株K562/A02相对于其亲本细胞系K562对阿霉素的耐药倍数为180倍;K562细胞P-gp的表达率为0.2%,K562/A02细胞P-gp的表达率为86%;microRNA芯片结果显示K562/A02与K562细胞之间有22种microRNA表达存在显著的差异(P<0.01),表达差异在2倍以上的有9种,其中miR-221、miR-155、miR-451在K562/A02细胞表达上调,而miR-98、miR-181a、let-7f、miR-424、let-7g和miR-563则表达下调.实时荧光定量RT-PCR进一步证实了上述结果,并显示miR-451、miR-155、miR-221、let-7f、miR-424在两种细胞中表达差异显著.结论 K562/A02与K562细胞存在microRNA表达差异,其中miR-451、miR-155和miR-221在K562/A02中表达显著上调,而let-7f、miR-424则显著下调,提示microRNA可能参与白血病耐药形成,差异表达的microRNA可能为逆转白血病耐药提供新的作用靶点.