CD4+CD25+调节性T细胞与GVHD

源于胸腺的表达转录因子Foxp3的CD4＋CD25＋调节性T细胞具有免疫调节功能,在外周免疫耐受中有重要作用,可控制异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）的移植物抗宿主病（GVHD）,而不影响移植物抗白血病作用（GVL）,许多移植模型和临床试验均在探索中。植入CD4＋CD25＋调节性T细胞后所获得的抗GVHD作用的动物移植模型及早期HSCT临床研究结果表明,CD4＋CD25＋调节性T细胞输注将能极大改变allo—HSCT的现状。     

脓毒症小鼠CD4~+ CD25~+ Foxp3~+T细胞变化及其意义

目的观察脓毒症小鼠血中CD4+CD25+Foxp3+T细胞的变化特点,探讨它与脓毒症病程发展间的关系。方法选择清洁级KM雄性小鼠,用盲肠结扎穿孔术(CLP)制作脓毒症小鼠模型(CLP组),分别于2h、6h、12h、24h、48h、72h采血处死12只,并留取远端回肠HE染色光镜检查;流式细胞仪检测血中CD4+CD25+Foxp3+T细胞计数及其占CD4+T细胞的百分比,ELISA法测定细胞因子TNF-α、IL-6、IL-10的表达水平,全自动生化分析仪检测AST、ALT、BUN、Cr等肝肾功能生化指标。以假手术组(Control组)作为对照,标本采集时间点、检测方法同CLP组。结果 CLP组血CD4+CD25+Foxp3+T细胞占CD4+T细胞百分比持续增高,12h后即高于假手术组,随病程进展增高更为显著(P<0.01)。CLP2h后TNF-α水平升高即超过假手术组(P<0.01),12h到达顶峰,随后开始下降,但至CLP后72h仍高于假手术组;IL-6水平于CLP后6h出现快速升高,12h达到峰值,与假手术组相比增幅有统计学差异(P<0.01),随后下降,72h与假手术组比较无统计学差异(P>0.05);CLP2h后IL-10水平即已高于假手术组(P<0.01),12h出现快速上升改变,并持续攀升,至72h未见下降拐点。CLP后ALT、AST升高早于BUN、Cr,前者术后24h明显升高,增幅大于假手术组(P<0.01),而后者术后48h明显升高,增幅大于假手术组(P<0.01),随着时间的延长,ALT、AST、BUN、Cr均进一步升高,假手术组指标则回落到基线水平。结论 CLP小鼠模型CD4+CD25+Foxp3+T细胞比例增加与脓毒症严重程度成正比,这种变化可能是机体逃避过度的炎症反应引发严重的组织器官损伤的自身调节反应,但有一定限度,调控Treg或将为脓毒症免疫调节治疗提供新的思路。     

CD4+CD25+调节性T细胞及其与GVHD的关联性

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞是一群表型和功能特异的T细胞亚群，具有免疫无能和免疫抑制两大特性，通过细胞直接接触或分泌抑制性细胞因子发挥对CD4^＋CD25^＋T细胞的抑制作用。GVHD是异基因造血干细胞移植最严重的并发症之一，近来有关CD4^＋CD25^＋调节性T细胞与GVHD关联性的研究得出了两种截然相反的结论，即该类细胞可有效防治GVHD的发生及该类细胞与GVHD的发生率成正比。这一研究结果的明确将为GVHD的临床治疗提供新的思路。本文就CD4^＋CD25^＋调节性T细胞及其免疫表型、特性、免疫调节作用机制及CD4^＋CD25^＋T细胞与GVHD的关联性的一些新的研究进展作一综述。     

慢性牙周炎患者外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞表达

目的探讨外周血单个核细胞CD4~+CD25~+调节性T细胞(Tregulatory, Treg)在慢性牙周炎患者中的表达。方法慢性牙周炎患者40例,其中轻中度组22例和重度组18例;同期31例牙周健康者为对照组。采用流式细胞术检测3组CD4~+CD25~+CD127~(low/-)Treg、CD4~+CD25~+FoxP3~+Treg表达;采用ELISA法测定3组血浆转化生长因子-β(transforming grow factor-β, TGF-β)水平;Pearson法分析CD4~+CD25~+CD127~(low/-)Treg与CD4~+CD25~+FoxP3~+Treg,CD4~+CD25~+CD127~(low/-)Treg、CD4~+CD25~+FoxP3~+Treg与牙周袋探诊深度的相关性。结果轻中度组、重度组CD4~+CD25~+FoxP3~+Treg[(2.88±1.50)%、(2.52±1.03)%]、CD4~+CD25~+CD127~(low/-)Treg表达[(4.42±1.49)%、(3.85±1.02)%]、血浆TGF-β水平[(1 054.18±370.35)、(1 003.78±398.76)ng/L]低于对照组[(3.57±1.11)%、(6.27±1.67)%、(1 296.60±303.17)ng/L](P0.05),轻中度组与重度组比较差异无统计学意义(P0.05);Pearson线性相关分析结果显示,CD4~+CD25~+FoxP3~+Treg与CD4~+CD25~+CD127~(low/-)Treg表达呈正相关(r=0.776,P0.001),CD4~+CD25~+FoxP3~+Treg、CD4~+CD25~+CD127~(low/-)Treg均与牙周袋探诊深度呈负相关(r=-0.333,P=0.005;r=-0.551,P0.001)。结论慢性牙周炎CD4~+CD25~+Treg介导的免疫应答减弱,可能促进疾病的发生、发展。     

致敏小鼠CD4~+ CD25~+调节性T细胞磁珠分选及体外扩增

本研究探讨致敏小鼠CD4+ CD25+调节性T细胞的分选及体外扩增。流式细胞术检测致敏小鼠及正常小鼠体内CD4+ CD25+ Treg细胞水平,免疫磁珠分选方法从小鼠脾细胞中分选出CD4+T细胞、CD4+ CD25+ Treg细胞和CD4+ CD25-T细胞,负载抗CD3/CD28单克隆抗体MACSiBead联合IL-2共同刺激CD4+ CD25+ Treg细胞进行体外扩增培养,用0.4%台盼蓝染色并计数检测细胞的活性,流式细胞术检测分选后细胞纯度、主要表面标记及Foxp3基因的表达。结果表明:致敏小鼠体内CD4+ CD25+ Treg水平较正常小鼠升高(P<0.05)。分选出CD4+ CD25+ Treg细胞纯度平均达到87%,细胞活性大于97%,高表达Foxp3基因。体外扩增2周后细胞数扩增倍数能够达到42倍,CD4+ CD25+ Treg细胞所占比例为85.32%,Foxp3表达由(76.92±1.72)%稍下降至(75.33±2.11)%(P>0.05)。结论:免疫磁珠分选法能够分选出高纯度的CD4+ CD25+ Treg细胞,该分选方法不影响分选靶细胞的细胞活力;体外成功扩增了CD4+ CD25+ Treg细胞,扩增后的CD4+ CD25+ Treg细胞表面标记及Foxp3基因表达无明显改变。     

高危患者通过去除移植骨髓中的CD4~+及CD8~+淋巴细胞预防GVHD

本文分析了从1994年3月至1997年7月,30例具有GVHD高危因素的患者,接受HLA半相合、CD~+4淋巴细胞、CD8~+细胞含量调整至1×10~6/kg的异基因骨髓移植的临床结果。该研究的目的是为了评估这种去除部分T细胞的方法与GVHD的发生率、移植成功率及复发率的关系。 材料及方法 24例患者接受HLA相合的同胞供者的骨髓,其余6例HLA相合的无关供髓(MVD),所有患者均因至少下列一项指标被认为具有发生GVHD的高危因素:(1)患者年龄>35岁;(2)供者年龄>35岁;(3)供者多产;(4)无关供者。为了评估两种方案在预防GVHD中所起的作用,将患者随机分为两组,一     

CD4~+ CD25~+调节性T细胞与自身免疫性甲状腺炎

调节性T细胞主要在机体免疫系统中发挥负向调节作用,既能抑制不恰当的免疫反应,又能限定免疫应答的范围、程度及作用时间,对效应细胞的增殖、免疫活性的发挥起抑制作用.近年来,CD4~+ CD25~+调节性T细胞在自身免疫性甲状腺疚病中的作用日益引起人们的关注,动物实验和人体研究发现CD4~+ CD25~+调节性T细胞数目和功能的异常与自身免疫性甲状腺炎(autoimmune thyroiditis,AIT)的关系密切,可能在AIT的发病机制中发挥关键作用.综述如下.     

CD4~+CD25~+Foxp3~+T细胞与肿瘤及器官移植研究进展

<正>CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞是新近发现的一种抑制机体疾病的一种调节性T细胞。CD4+CD25+调节性T细胞可以调节机体T细胞稳态,抑制机体免疫耐受、肿瘤增殖和转移、控制感染及移植免疫耐受等作用,是肿瘤进展和转移的重要标志。转录因子叉头(Foxp3+)的表达在CD4+CD25+调节性T细胞的发育、成熟及发挥抑制功能过程中起重要作用,是其重要的标志物。CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞在各     

中西医结合治疗对免疫低下肺炎小鼠CD4~+CD25~+调节性T细胞的影响

目的建立免疫功能低下小鼠肺炎克雷伯菌肺炎的模型,观察中西医结合治疗对于此种肺炎的CD4+CD25+调节性T细胞表达的影响。方法采用腹腔注射环磷酰胺的方法建立免疫功能低下的小鼠模型,通过鼻腔滴种肺炎克雷伯菌液制作肺炎模型,用流氏细胞学技术检测各组小鼠给药前、给药后12 h,给药后24 h,给药后36 h小鼠外周血CD4+T细胞表面Foxp3阳性表达率和CD4+Foxp3+T细胞CD25表达强度。结果各组各时间点的小鼠外周血CD4+Foxp3+T细胞CD25表达强度较正常小鼠显著升高(P<0.05),CD4+T细胞表面Foxp3阳性表达率较正常小鼠明显降低(P<0.05)。给药后12 h,中西医治疗组小鼠外周血的CD4+Foxp3+T细胞CD25表达强度较模型组显著下降(P<0.05),CD4+T细胞表面Foxp3阳性表达率较对照组、单纯西药组及单纯中药组显著升高(P<0.05)。结论①应用环磷酰胺后,小鼠外周血CD4+Foxp3+T细胞CD25表达强度显著升高,CD4+T细胞表面Foxp3阳性表达率明显降低。②中西医结合治疗在免疫功能抑制小鼠肺炎感染模型中可能具有"双向调节免疫"功能的作用,即一方面维持CD4+T细胞Foxp3阳性表达率,提高机体抗感染能力,同时维持了机体免疫耐受的状态。③中西药结合治疗有改善免疫功能低下感染生存率的趋势。     

人CD4~+FOXP3~+T细胞的异质性研究进展

CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)是一群具有免疫调节功能的细胞,对维持自身免疫耐受和免疫自稳必不可少,FOXP3特异性表达于Treg细胞,是Treg细胞发育、活化、发挥功能的关键。目前,CD4+FOXP3+T淋巴细胞常被用来定义Treg细胞进行科学研究,而最近研究表明,人CD4+FOXP3+T淋巴细胞存在表型和功能上的异质性,这其中包括具有免疫抑制功能的CD4+FOXP3+Treg,还包含没有抑制功能的其它类型T细胞,而这些不同功能的细胞亚群可以通过表型的差异加以区分。本文就近年来关于CD4+FOXP3+T细胞亚群表型特征和功能的异质性研究作一综述。     

CD4+CD25+Foxp3+T调节细胞与小鼠异基因造血干细胞移植GVHD相关性研究

目的探讨CD4 CD25 foxp3 调节性T细胞与小鼠GVHD发生的相关性。方法取8～10周龄的SPF级CB6F1小鼠(H-2b/d,♀)30只,随机分为正常对照组、同基因移植组和GVHD组,每组10只,正常对照组不接受照射和移植,同基因移植组小鼠照射后接受CB6F1小鼠骨髓细胞(1×107)和脾细胞(3×107),GVHD组小鼠照射后接受C57BL/6(H-2b,♂)小鼠骨髓细胞(1×107)和脾细胞(3×107)。在发生GVHD的时间点检测3组小鼠脾细胞CD4 CD25 T细胞和foxp3 mRNA的表达。结果正常对照组、同基因移植组和GVHD组小鼠脾细胞中CD4 CD25 T细胞的比例分别为(8.47±1.03)%、(15.40±0.80)%和(24.03±0.85)%,均有显著性差异(P<0.01)。GVHD组小鼠脾细胞foxp3 mRNA的表达水平明显低于正常对照组和同基因移植组,有显著性差异(P<0.001)。结论CD4 CD25 foxp3 调节性T细胞与小鼠GVHD发生呈负相关,发生GVHD时小鼠脾细胞中CD4 CD25 foxp3 调节性T细胞明显减低。     

幽门螺杆菌感染者的CD4~+和CD8~+T细胞反应

幽门螺杆菌 (Ｈ ｐｙｌｏｒｉ)感染与慢性活动性胃炎、十二指肠溃疡和原发性胃淋巴瘤密切相关。感染导致淋巴细胞和粒细胞密集浸润到胃粘膜 ,形成肉眼可见的胃炎。很多由Ｈ ｐｙｌｏｒｉ产生的抗原如空泡细胞毒素 (ＶａｃＡ)、脂多糖 (ＬＰＳ)和尿素酶可加速炎症和上皮的破坏。但大部分Ｈ ｐｙｌｏｒｉ感染者可无任何症状和溃疡。在决定Ｈ ｐｙｌｏｒｉ感染后果上机体因素有根本的重要性。Ｔ细胞产生的细胞因子可能是决定Ｈ ｐｙｌｏｒｉ感染结果的宿主因素。为了解Ｈ ｐｙｌｏｒｉ感染者抗原特异Ｔ细胞的反应 ,对Ｈ ｐｙｌｏｒｉ感染的十二…     

过敏性紫癜患儿外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞的表达

目的:探讨过敏性紫癜(schonlein-henoch purpura,HSP)患儿外周血CD4+CD25+调节性T细胞的表达及其意义。方法:采用免疫荧光抗体标记法及流式细胞仪对20例HSP患儿和20例健康儿童、20例呼吸道感染患儿、20例幼年特发性关节炎患儿外周血CD4+CD25+调节性T细胞比率进行检测。结果:HSP患儿外周血CD4+CD25+T细胞的百分率显著低于健康儿童和呼吸道感染患儿(P<0.05),而与幼年特发性关节炎患儿相当。结论:外周血CD4+CD25+调节性T细胞参与了HSP的发病。     

阿德福韦酯对慢性乙型肝炎患者CD4~+ CD25~+调节性T细胞表达水平的影响

目的:观察阿德福韦酯对慢性乙型肝炎(慢乙肝)患者血清CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+regulatory T cells,CD4+CD25+Treg)表达水平的影响,揭示CD4+CD25+Treg在慢乙肝患者免疫发病机制中的作用,及阿德福韦酯治疗对机体的免疫调节机制的临床价值。方法:采用流式细胞术对66例慢乙肝患者(HBeAg阳性慢乙肝患者36例,HBeAg阴性慢乙肝患者30例)阿德福韦酯治疗前和治疗12、24、36及48周外周血CD4+CD25+Treg进行检测。同时采用实时荧光聚合酶链反应(PCR)检测相应时间点的血清HBVDNA。结果:外周血清CD4+CD25+Treg治疗前为(4.05±2.39)%,明显高于正常对照组的(2.26±1.42)%(P<0.01);治疗后CD4+CD25+Treg为(2.38±1.75)%,明显低于治疗前(P<0.01),与正常对照组相当(P>0.05)。CD4+CD25+Treg水平与病毒定量呈正相关。结论:阿德福韦酯抗病毒治疗后能使病毒载量下降,导致CD4+CD25+Treg下降,使免疫功能恢复。     

不同树突状细胞对CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞体外扩增的影响

目的利用不同种类树突状细胞(dendritic cells,DC)体外扩增获得表型和功能稳定的CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Treg)。方法免疫磁珠法(MACS)分离Balb/c小鼠CD4+CD25+调节性T细胞,利用与调节性T细胞同基因或异基因成熟DC、未成熟DC和调节性DC刺激其扩增,流式细胞术测定其纯度和表型。以CD4+CD25-T细胞作为反应细胞,验证扩增前后Treg细胞的免疫抑制功能。结果MACS分离的CD4+CD25+调节性T细胞纯度达到(95.38±1.82)%,同基因和异基因DC都能有效刺激Treg细胞体外扩增,其中同基因成熟DC扩增效果最为明显。而且同基因成熟DC扩增后CD4+CD25+调节性T细胞纯度达到(94.16±1.88)%,而且高表达Foxp3分子。当CD4+CD25+调节性T细胞与效应T细胞比例为1∶1时,能够有效的抑制效应T细胞的增殖,而且,同基因成熟DC扩增的CD4+CD25+调节性T细胞的抑制效果比新分离的Treg效果更好。结论同基因成熟DC能够体外扩增表型和功能稳定的Treg细胞。     

CD4+ CD25+调节性T细胞

机体的免疫系统维持着对感染性抗原的反应和自身耐受的平衡,而对自身抗原产生免疫耐受则是防止发生自身免疫病的关键。阴性选择中的克隆清除、免疫无能和克隆忽略被认为是控制自身反应性T细胞的主要机制。近些年随着研究的深入,CD4^＋ CD25^＋调节性T细胞（Treg细胞）在维持自身耐受中的作用得到进一步的认识。     

CD3~+CD4~+、CD3~+CD8~+T细胞在IgA肾病患者外周血的表达及临床意义

正IgA肾病(immunoglobin A nephropathy)是最常见的原发性肾小球肾炎~([1]),也是导致终末期肾衰竭最常见的原因之一~([2])。IgA肾病的病因未明,被认为多种免疫细胞及相关因子参与了其发病机制~([3])。T细胞亚群主要包括CD3~+CD8~+的细胞毒性T细胞(cytotoxic T cells,Tc)和CD3~+CD4~+的辅助性T细胞(hel[per T cells,Th)等4],CD4~+T细胞和     

GVHD靶器官中浸润CD3~+T细胞动态变化与组织损伤关系

目的:探讨T细胞在小鼠异基因造血干细胞移植术后急性移植物抗宿主病(aGVHD)靶器官中的浸润及其变化趋势,并研究其与靶组织病理损伤和a GVHD进展的相关性。方法:以8-10周龄雄性C57BL/6(H-2K~b)小鼠为供鼠,获取骨髓细胞、脾单个核细胞,将10-12周龄雄性BALB/c(H-2K~d)小鼠经7.5 Gy全身照射后作为受鼠进行移植。受鼠随机分为异基因骨髓移植(BMT)组和异基因骨髓移植联合脾细胞输注诱导aGVHD(BMT+T)组。移植后每天观察小鼠状态,动态检测各组小鼠体重变化及临床评分;HE染色观察aGVHD靶器官的病理学改变,并做病理评分;免疫组织化学方法动态检测移植后d 7、14、28、40、47靶器官中CD3+T细胞的数量并做数据统计。结果:与BMT组相比,BMT+T组小鼠a GVHD靶器官肝脏、肺以及各段肠道中浸润T细胞数量自移植后d 7开始升高。移植后d 14、28、40、47 BMT+T组小鼠靶组织中浸润的CD3+T细胞较BMT组明显增高(P0.05)。GVHD小鼠的靶器官病理评分和临床评分均明显升高(P0.05)。肝脏中浸润T细胞数量与病理损伤呈正相关,肠道中浸润CD3+T细胞数量与aGVHD临床病理评分亦呈正相关。结论:CD3+T细胞迁移至aGVHD靶组织介导靶器官的病理损伤,T细胞浸润数量是评价aGVHD严重程度的重要指标。     

卵巢癌患者外周血CD4~+ CD25~+调节性T细胞的检测及其临床意义

目的探讨卵巢癌患者CD4+CD25+调节性T细胞的比例变化及其可能的机制。方法利用流式细胞仪检测20例卵巢癌患者外周血淋巴细胞(peripheral blood lymphocytes,PBLs)、肿瘤浸润淋巴细胞(tumor infiltrating lymphocytes,TILs)及肿瘤相关淋巴细胞(tumor associated lymphocytes,TALs)中CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Tcells,Tregs)所占的比例。10例健康人外周血PBLs中Tregs所占的比例。同时检测卵巢癌患者CD4+外周血淋巴细胞中CD69+细胞的比例。健康人PBLs在含有卵巢癌细胞株SKOV3培养上清的RPMI1640培养液(有或没有血清植物血凝素)中培养72小时后,检测Tregs所占的比例。结果卵巢癌患者外周血淋巴细胞中CD4+CD25+调节性T细胞所占比例与健康人相比明显增加.卵巢癌患者外周血肿瘤浸润淋巴细胞中CD4+CD25+调节性T细胞所占比例高于在外周血淋巴细胞和肿瘤相关淋巴细胞中的比例,但是没有统计学意义。卵巢癌患者CD4+外周血淋巴细胞中无CD69表达。结论卵巢癌患者外周血淋巴细胞中、肿瘤浸润淋巴细胞及肿瘤相关淋巴细胞中CD4+CD25+调节性T细胞所占的比例增加,这可能与卵巢癌细胞分泌的可溶性分子上调有关。     

慢性乙肝患者CD4~+ CD25~+ T细胞对外周血树突状细胞成熟的作用

目的探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者CD4+CD25+Treg细胞对外周血树突状细胞成熟的影响。方法对2013年6月至2013年12月就诊的15例CHB患者和18例健康对照各抽取外周血20 ml,分离外周血单个核细胞(PBMC),于体外培养获得树突状细胞(DC)及免疫磁珠分选获得CD4+CD25+Treg细胞;分别将CD4+CD25+Treg细胞和CD4+CD25-T细胞与DC共培养后采用流式细胞仪检测DC表面标志CD83、CD80、CD86、HLA-DR的表达。结果健康对照组,加入Treg后,相比于DC对照组及DC与CD4+CD25-T细胞共培养组,DC的CD83、CD80、CD86表达下降,差异有统计学意义。CHB患者组,加入Treg后,相比于DC对照组,DC的CD83、CD80、CD86表达下降,差异均有统计学意义;与DC和CD4+CD25-T细胞共培养组相比,Treg对DC的CD83、CD80表达抑制率较高,差异有统计学意义。CHB患者组的Treg对DC的CD83、CD80、CD86表达抑制率均高于健康对照组,差异均有统计学意义。结论 CHB患者外周血Treg细胞能够抑制DC的成熟,抑制效应强于健康对照。