中波紫外线诱导小鼠表皮细胞Bax和Bcl-2的表达

[目的]探讨中波紫外线(UVB)对正常小鼠表皮细胞凋亡及凋亡相关基因Bax和Bcl-2的调控。[方法]将正常ICR小鼠随机分为对照组(假照射组)、500J/m2、1000J/m2、1500J/m2、2000J/m2紫外线照射后2h组(每组10只小鼠)。1500J/m2紫外线照射后4h组、8h组、12h组、24h组、48h组、72h组(每组10只小鼠)。采用链霉菌亲生物素蛋白-过氧化物酶标免疫组织化学法(streptavidin-peroxidase,SP)染色检测凋亡相关基因Bax和Bcl-2的蛋白表达。[结果]小鼠皮肤用不同剂量紫外线照射2h后Bax的表达,随紫外线剂量增大而变大,Bcl-2表达减小,呈剂量依赖性。用1500J/m2紫外线照射小鼠后12hBax表达达到高峰,Bcl-2表达减弱;24h后Bax表达开始减弱,而Bcl-2则开始表达,72h恢复正常,Bax和Bcl-2的表达与紫外线照射后时间有关。[结论]中波紫外线照射小鼠皮肤后,Bax表达上调,Bcl-2表达下调,促进小鼠紫外线损伤的表皮细胞凋亡。     

UVB照射角质形成细胞对DNA甲基转移酶1表达的影响

目的观察中波紫外线(UVB)照射下的角质形成细胞(Ha Ca T细胞)中DNA甲基转移酶1(DNMT1)的表达情况。方法体外培养人永生化Ha Ca T细胞,分别用0 m J/cm2、10 m J/cm2、20 m J/cm2、40 m J/cm2 UVB照射,24 h后收集细胞采用Western blot方法测定细胞中DNMT1的蛋白水平。结果 UVB照射的Ha Ca T细胞内的DNMT1蛋白表达水平明显高于未照射细胞(P<0.05)。结论 UVB照射Ha Ca T细胞会导致DMNT1表达增加,在皮肤光老化可能起重要作用。     

中波紫外线对人永生化表皮细胞损伤作用

目的探讨中波紫外线(UVB)对人永生化表皮(Ha Ca T)细胞的损伤作用,为紫外线损伤防护提供技术支持。方法取体外培养Ha Ca T细胞,用0(对照组)、10、30、60 m J/cm2剂量的UVB照射后继续培养12 h,以流式细胞术检测细胞凋亡率,用彗星实验(单细胞凝胶电泳)检测细胞DNA损伤情况。结果对照组、10、30、60 m J/cm2紫外线照射组Ha Ca T细胞早期凋亡率分别为(1.2±0.14)%、(2.23±0.37)%、(4.13±0.29)%、(5.97±0.17)%,晚期凋亡率分别为(2±0.13)%、(7.63±0.52)%、(23.36±0.98)%、(40.46±1.39)%,与对照组比较,UVB照射组Ha Ca T细胞早期、晚期凋亡率明显增加,差异有统计学意义(P0.05);对照组、10、30、60 m J/cm2紫外线照射组Ha Ca T细胞DNA尾矩分别为(0.13±0.25)、(21.78±2.31)、(53.48±5.66)、(79.16±7.47),Olive尾矩分别为(0.32±0.47)、(16.17±1.96)、(36.43±2.89)、(51.71±1.87),与对照组比较,UVB照射组Ha Ca T细胞DNA尾矩、Olive尾矩明显延长,差异有统计学意义(P0.05)。结论 UVB照射可使Ha Ca T细胞DNA产生损伤,诱发细胞凋亡,细胞DNA损伤可能是某些高原罕见病的发病原因之一。     

早发型和晚发型子痫前期自噬与凋亡水平差异及相互关系研究

目的探讨早发型子痫前期(early-onset preeclampsia, EOPE)和晚发型子痫前期(late-onset preeclampsia, LOPE)胎盘组织中自噬和凋亡水平的差异,利用人绒毛膜滋养层细胞株HTR 8/SVneo缺氧模型探讨自噬与凋亡的关系,为解释子痫前期(preeclampsia, PE)的发病机制提供新的思路。方法选取2018年1～6月上海交通大学医学院附属国际和平妇幼保健院产科剖宫产分娩孕妇26例的临床资料。按照PE发生程度分为EOPE组10例,LOPE组6例,正常孕妇组10例。通过透射电镜观察EOPE组、LOPE组和正常孕妇组胎盘组织滋养层细胞中的自噬溶酶体;采用实时荧光定量多聚核苷酸链式反应和免疫印迹方法检测EOPE组、LOPE组和正常孕妇组胎盘组织中自噬相关基因(LC 3和Beclin-1)、抗凋亡基因Bcl-2和促凋亡基因Bax mRNA和蛋白水平的表达;利用HTR 8/SVneo缺氧模型,检测LC 3、Beclin-1、Bcl-2和Bax mRNA水平的表达。结果与正常孕妇组胎盘组织相比,EOPE组自噬溶酶体含量降低,LC 3、Beclin-1和Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平降低,Bax表达升高,差异均有统计学意义(P0.05)。LOPE组自噬溶酶体含量增加并且出现凋亡细胞,LC 3、Beclin-1和Bax表达均升高,Bcl-2表达降低,差异均有统计学意义(P0.05)。缺氧模型中,与正常HTR 8/SVneo细胞相比,缺氧12 h组LC 3和Beclin-1 mRNA表达水平均升高,Bcl-2和Bax mRNA表达水平均降低,差异有统计学意义(P0.05),抑制自噬活性后,Bax mRNA表达水平显著升高,差异有统计学意义(P0.05);24 h和48 h组LC 3、Beclin-1、Bcl-2和Bax的mRNA表达均降低,差异有统计学意义(P0.05);72 h组LC 3、Beclin-1和Bax表达均升高,Bcl-2表达降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论 EOPE组胎盘滋养层细胞中自噬活性受损,凋亡水平增加;而LOPE组中自噬和凋亡水平均增加;短期缺氧激活滋养层细胞自噬,凋亡降低,抑制自噬凋亡增加;长期缺氧引发过度自噬和凋亡。     

p53对低剂量UVB诱导的MEF细胞辐射损伤中miR-365表达的影响

目的探讨低剂量中波紫外线UVB造成MEF损伤过程中,p53对MEF细胞miR-365表达的影响。方法以MEF细胞为研究对象,分为野生型小鼠胚胎成纤维细胞组(MEFP53+/+组),p53缺失的小鼠胚胎成纤维细胞组(MEFP53-/-组),CCK-8法检测低剂量UVB(30 J/m2)照射后3、6、12、18、24 h细胞增殖情况,流式细胞术分析细胞周期G2/M期比例变化,蛋白质印迹法检测两种细胞p53蛋白表达量,实时荧光定量PCR检测miR-365的表达。结果 UVB照射后两组细胞存活率存下降;而两组细胞在12、18、24、36 h的存活率相比差异有统计学意义(t值分别为2.4、3.1、3.2、2.8,P值均0.05);MEFP53+/+细胞在照射后6、12、18、24 h的G2/M期细胞比例上升,与0 h组相比差异均有统计学意义(t值分别为2.1、2.3、2.5、2.8,P值均0.05);p53在MEFP53-/-细胞中几乎不表达;UVB照射后,MEFP53-/-细胞中miR-365的mRNA在6、12、18、24、36 h显著下降(t值分别为2.0、3.2、3.3、2.9、2.8, P值均0.05),而MEFP53+/+细胞中只有18 h显著下降(t=4.2,P0.05)。12、18、24、36 h四个时间点,两组细胞之间miR-365差异有统计学意义(t值分别为2.2、2.6、2.4、2.3,P值均0.05)。结论 p53可能通过调控miR-365参与低剂量UVB引起的MEF细胞G2/M期阻滞。     

UVB:辐射对人角质形成细胞HaCaT的DNA损伤及其机制

目的研究不同剂量UVB辐射对人角质形成细胞HaCaT DNA损伤的影响及机制。方法采用紫外辐照装置照射人角质形成细胞Ha Ca T建立急性紫外辐射细胞模型;MTT法检测不同剂量紫外辐射对细胞存活的影响;免疫荧光和流式细胞术分别检测细胞核内磷酸化γH2AX焦点形成及蛋白表达水平;Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒检测不同剂量不同时间照射后早期细胞凋亡百分数;免疫印迹法分别检测Caspase-3活化水平。结果 UVB辐射可抑制HaCaT细胞的存活,有一定的量效关系;相对较大剂量的UVB辐射可观察到明显的焦点形成;UVB照射后各剂量点磷酸化γH2AX的表达均明显高于未照射的对照组;UVB辐射可通过Caspase-3活化诱导细胞发生早期凋亡,照射后20 h,早期凋亡细胞百分数明显增加,特别是在UVB相对较大剂量范围内更明显,并有随照射剂量增高而增加的趋势。结论 UVB辐射可通过诱导DNA双链断裂抑制人HaCaT细胞存活,并通过激活Caspase-3而诱导细胞凋亡,细胞凋亡延迟,可能导致细胞更易于发生突变进而形成皮肤肿瘤。     

N-乙酰半胱氨酸抑制亚砷酸钠诱导心肌细胞凋亡和自噬作用的研究

目的:探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)抑制亚砷酸钠诱导H9C2细胞凋亡和自噬作用及机制。方法:用亚砷酸钠诱导H9C2细胞构建凋亡和自噬模型。采用CCK-8比色法检测细胞的存活率,Hoechst 33258核染色法观察凋亡细胞的形态和数量改变.双氯荧光素染色法检测细胞内活性氧(ROS)水平,Western Blot法测定蛋白P53、Bcl-2、Bax及LC3的表达水平,以及磷酸化ERK1/2蛋白及ERK1/2蛋白总量的表达水平。结果:与对照组相比,15μM亚砷酸钠处理的H9C2细胞存活率显著降低.细胞内ROS水平明显增加.凋亡细胞数量明显增多,自噬标志蛋白LC3-Ⅱ与LC3-Ⅰ比值明显增大(P0.01)。1 mM NAC预处理后显著减少H9C2细胞内ROS的生成和促凋亡蛋白P53和Bax的表达,诱导抗凋亡蛋白Bcl-2表达升高,同时降低自噬相关蛋白LC3-Ⅱ与LC3-Ⅰ的比值。亚砷酸钠处理诱导ERK1/2蛋白磷酸化(P0.01),而NAC和亚砷酸钠共处理抑制了ERK1/2蛋白的磷酸化。结论:亚砷酸钠降低H9C2细胞的存活率,增加细胞内ROS的生成,诱导细胞凋亡和自噬。NAC通过降低H9C2细胞内的ROS水平和抑制ERK1/2蛋白的磷酸化拮抗亚砷酸钠诱导的细胞凋亡和自噬。     

亚砷酸钠对人正常肝细胞凋亡及Bax和Bcl-2 mRNA和蛋白表达的影响

目的探讨亚砷酸钠对人正常肝(L-02)细胞凋亡及Bax、Bcl-2 m RNA和蛋白表达的影响。方法将L-02肝细胞分别暴露于含0(对照)、50、100、150μmol/L亚砷酸钠的培养基中暴露24 h。采用MTT法检测L-02肝细胞的存活率,采用流式细胞术检测L-02肝细胞凋亡率,采用RT-PCR的方法检测Bax、Bcl-2 m RNA相对表达情况,采用Westernblotting方法检测L-02肝细胞中Bax、Bcl-2蛋白的表达情况。结果与对照组相比,各浓度亚砷酸钠染毒组L-02细胞的存活率均较低,凋亡率均较高,差异均有统计学意义(P0.05);且随着亚砷酸钠染毒浓度的升高,L-02细胞的存活率呈下降趋势,而凋亡率上升趋势。与对照组相比,各浓度亚砷酸钠染毒组L-02细胞中Bcl-2、Bax m RNA和蛋白的表达水平均较高,100μmol/L亚砷酸钠染毒组Bcl-2 m RNA/Bax m RNA值也较高,而150μmol/L亚砷酸钠染毒组Bcl-2 m RNA/Bax m RNA值及50、150μmol/L亚砷酸钠染毒组Bcl-2蛋白/Bax蛋白值均较低,差异均有统计学意义(P0.05)。结论亚砷酸钠可抑制L-02肝细胞的生长,诱导细胞凋亡的发生;其机制可能与Bcl-2家族的激活有关。     

短波紫外线诱导V79细胞凋亡模型的建立

目的探讨短波紫外线(UVC)诱导V79细胞凋亡的最佳暴露剂量并建立细胞凋亡模型。方法处于对数生长期的V79细胞,以4.5 mJ/cm~2强度UVC分别照射0、10、20、30、60、90 s,对应的照射剂量分别为0(对照)、45、90、135、270、405mJ/cm~2。采用MTT法检测细胞存活率,采用流式细胞仪检测细胞凋亡和坏死情况及细胞内活性氧(ROS)的水平。结果与对照组比较,各剂量UVC暴露组V79细胞的存活率均较低,差异有统计学意义(P0.05);且随着UVC暴露剂量的升高,V79细胞的存活率呈下降趋势。当UVC暴露剂量为90 mJ/cm~2时,V79细胞的存活率为(50.4±5.7)%。与对照组比较,各剂量UVC暴露组V79细胞的凋亡率均较高,差异有统计学意义(P0.05);而坏死率无明显改变。且随着UVC暴露剂量的升高,V79细胞的凋亡率呈上升趋势。与对照组比较,各剂量UVC暴露组V79细胞内ROS的水平均较高,差异有统计学意义(P0.05);且随着UVC暴露剂量的升高,V79细胞内ROS的水平呈上升趋势。结论 UVC诱导V79细胞凋亡的最佳暴露剂量为90 mJ/cm~2。     

组织蛋白酶B对凋亡诱导配体诱导胃腺癌细胞凋亡作用机理研究

目的探讨组织蛋白酶B(Cathepsin B)对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand,TRAIL)诱导的胃腺癌细胞凋亡的影响,并探讨其作用机理。方法应用RT-PCR法检测人胃腺癌细胞株SGC-7901的TRAILR的表达;用不同浓度TRAIL和CathepsinB特异性抑制剂CA-074(Me)作用于SGC-7901细胞24 h,检测细胞凋亡率和线粒体跨膜电位改变;用不同浓度TRAIL及TRAIL联合CA-074(Me)处理SGC-7901细胞24 h,用Western Blotting法检测细胞Cathepsin B、Bcl-2和caspase-3蛋白的表达变化。结果 SGC-7901细胞仅表达死亡受体DR4(TRAIL-R1)、DR5(TRAIL-R2)。随着TRAIL浓度增高(0mg/L、100 mg/L、400 mg/L),细胞凋亡率增加,差异有统计学意义(P0.05);与TRAIL+CA-074(Me)组比较,仅用TRAIL组凋亡率更高,差异有统计学意义(P0.05);不同浓度TRAIL作用SGC-7901细胞24 h的Bcl-2蛋白表达无影响,加入CA-074(Me)后,Bcl-2蛋白表达增加,差异有统计学意义(P0.05);与0 mg/L比较,100 mg/L和400 mg/L TRAIL作用SGC-7901细胞24 h后Cathepsin B、caspase-3蛋白表达均有增加,差异有统计学意义(P0.05)。结论组织蛋白酶B在TRAIL诱导SGC-7901细胞凋亡中具有促进作用,其机理可能是TRAIL通过DR4、DR5增加细胞内Cathepsin B、caspase-3、Bcl-2蛋白的表达。     

姜黄素对高糖诱导的INS-1细胞凋亡的影响

目的观察姜黄素对高糖诱导的INS-1胰岛β细胞凋亡的作用,探讨其抗糖尿病作用的可能机制。方法流式细胞术检测细胞凋亡情况;透射电子显微镜观察INS-1细胞的形态学变化;采用激光共聚焦和流式细胞术检测INS-1细胞线粒体膜电位的变化;用Western blotting法检测Bcl-2、Bax蛋白的表达量。结果姜黄素浓度为10μmol/L抗凋亡作用效果最为明显(P0.05)。与正常组相比,模型组INS-1细胞凋亡率明显升高(P0.05),形态发生改变,线粒体膜电位降低,Bcl-2蛋白表达明显降低(P0.05),Bax蛋白表达明显升高(P0.05),Bcl-2/Bax比值降低。与模型组比较,姜黄素改善凋亡的INS-1细胞的形态,提高线粒体膜电位,降低Bax蛋白表达(P0.05),增加Bcl-2蛋白表达(P0.05),Bcl-2/Bax比值升高。结论姜黄素改善高糖诱导的INS-1细胞凋亡状态,其抗凋亡机制与线粒体途径有关。     

氢醌对人白血病细胞凋亡及相关蛋白Bcl-2、Bax及Caspase-3表达的影响

目的 研究氢醌对白血病细胞株U937细胞凋亡及相关蛋白Bcl-2、Bax及Caspase-3表达的影响。方法 用不同浓度的氢醌处理U937细胞24 h、48 h后,采用MTT法来检测细胞增殖抑制率;经瑞-吉染色后,观察细胞形态变化;采用流式细胞仪检测细胞凋亡;采用免疫印迹法检测Bcl-2、Bax及Caspase-3蛋白表达。结果 (1)U937细胞的增殖抑制率随氢醌作用时间及浓度的增加而增加,呈时间-剂量依赖性(P<0.05);(2)氢醌作用后,部分细胞体积增大,胞浆中有空泡,胞核发生畸形;(3)流式细胞术结果显示,细胞凋亡率随着氢醌作用时间及浓度的增加而增加,呈时间-剂量依赖性(P<0.05);(4)免疫印迹结果显示,与空白组相比较,染毒48h时,细胞Bax蛋白的表达量增加(P<0.05),而Bcl-2蛋白表达量减少(P<0.05),Bcl-2/Bax比值下降(P<0.05),染毒24 h时,细胞Caspase-3蛋白的表达量增加(P<0.05);与染毒24 h各组相比较,染毒48 h时细胞Caspase-3蛋白的表达量随时间延长呈增加趋势(P<0.05)。结论 氢醌可以诱导U937细胞凋亡,其机制可能与调控凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及Caspase-3的表达有关。     

硒对镉诱导的雄性SD大鼠肝细胞c-myc和p53蛋白表达及细胞凋亡的影响

目的 探讨不同剂量亚硒酸钠对氯化镉诱导的雄性SD大鼠肝细胞的凋亡率、c-Myc和P53蛋白表达的影响.方法 将65只健康SPF级SD雄性大鼠随机分为13组,分别设对照(生理盐水)组、氯化镉(5.0、10.0、20.0 μmol/kg)组及亚硒酸钠(2.5、5.0、10.0 μmol/kg)+氯化镉(5.0、10.0、20.0 μmol/kg)联合作用组,每组5只.氯化镉采用一次性腹腔注射染毒,亚硒酸钠采用一次性灌胃染毒.染毒后48 h,用流式细胞仪检测细胞凋亡率,免疫组化法测定c-Myc和P53蛋白的表达量.结果 与相同剂量氯化镉组相比,亚硒酸钠剂量为2.5 μmol/kg时,全部联合作用组的大鼠肝细胞凋亡率、c-Myc和P53蛋白表达均降低(P＜0.05或P＜0.01);而亚硒酸钠剂量为5.0、10.0 μmol/kg时,部分联合作用组的大鼠肝细胞凋亡率、c-Myc和P53蛋白表达降低(P＜0.05或P＜0.01).大鼠细胞凋亡率与c-Myc、P53蛋白表达量均呈正相关(P＜0.01).结论 2.5 μmol/kg的亚硒酸钠对氯化镉所诱导的大鼠肝细胞的凋亡及c-Myc和P53蛋白表达的升高具有一定的拮抗作用.     

镉激活JNK/c-Jun信号通路诱导小鼠GC-2 spd精母细胞凋亡

目的探讨氯化镉对小鼠GC-2 spd精母细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法氯化镉(0、5、10μM)处理GC-2 spd细胞,流式细胞术检测细胞凋亡及活性氧(ROS)的水平;Western blot检测JNK/c-Jun信号通路调节蛋白和促凋亡因子Bax及抗凋亡因子Bcl-2的表达水平。结果与对照组相比,随着氯化镉浓度(5、10μM)升高,细胞凋亡率和ROS含量显著上升,且呈现剂量依赖性(P0.05);氯化镉处理组的细胞中c-Jun蛋白表达水平无显著差异(P0.05),但p-JNK及p-c-Jun蛋白水平明显增加(P0.05)。镉暴露导致Bax蛋白表达升高而Bcl-2蛋白表达降低(P0.05),引起细胞凋亡。结论镉通过增加ROS生成并调控JNK/c-Jun信号通路诱导GC-2 spd细胞凋亡。     

氟虫腈对PC12细胞凋亡及Bcl-2蛋白表达的影响

目的 研究氟虫腈对神经细胞凋亡的影响并初步探讨其神经毒作用机制.方法 设3.13×10~(-6)、1.25×10~(-5)、5.00×10~(-5)mol/L 3个氟虫腈染毒组和1个对照组,用荧光显微镜检测各组PC12细胞凋亡荧光强度并用流式细胞仪对凋亡率进行测定,并对3个染毒组Bcl-2蛋白表达进行荧光强度检测.结果 细胞凋亡荧光强度检测发现,3.13×10~(-6)mol/L染毒组细胞凋亡率为17.00%±0.57%,5.00×10~(-5)mol/L染毒组细胞坏死率为13.95%±1.95%,均明显高于对照组(分别为9.80%±0.30%、3.10%±0.40%),差异均有统计学意义(P<0.05).对Bcl-2蛋白表达含量进行定性检测,结果显示,3.13×10~(-6)mol/L染毒组Bcl-2蛋白表达明显低于对照组,其他染毒组Bcl-2蛋白表达与对照组比较无明显差异.结论 氟虫腈在较低剂量时可能是通过影响Bcl-2蛋白表达来诱导PCI2细胞凋亡,而在较高剂量时可能通过其他非细胞凋亡途径直接致细胞坏死发生.     

姜黄素对人甲状腺癌TPC-1细胞增殖、周期和凋亡的影响

目的探讨姜黄素对人甲状腺癌TPC-1细胞增殖、周期和凋亡的影响。方法取对数生长期TPC-1细胞, 加入0.0、7.5、15.0、22.5 μmol/L姜黄素培养48 h, 采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞增殖水平;流式细胞仪测定细胞周期和凋亡水平;蛋白质印迹(Western blot)法测定B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达水平。结果 7.5、15.0、22.5 μmol/L姜黄素组细胞增殖抑制率均高于0.0 μmol/L姜黄素组(均P < 0.05);G0/G1期比例均高于0.0 μmol/L姜黄素组, 而G2/M和S期比例均低于0.0 μmol/L姜黄素组(均P < 0.05);细胞凋亡率均高于0.0 μmol/L姜黄素组[(14.13 ± 0.57)%、(25.27 ± 0.62)%、(36.01 ± 0.84)%比(8.48 ± 0.43)%, 均P < 0.05];Bcl-2蛋白表达水平均低于0.0 μmol/L姜黄素组, 而Bax蛋白表达水平均高于0.0 μmol/L姜黄素组(均P < 0.05)。结论姜黄...     

电离辐射联合自噬诱导剂或抑制剂对人宫颈癌Hela细胞的作用

目的 探讨电离辐射联合自噬抑制剂或诱导剂对人宫颈癌细胞株增殖的影响。方法 采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)和流式细胞术(FCM)检测经不同剂量(0、2、4、6、8和10 Gy)照射和6 Gy+自噬抑制剂三甲基腺嘌呤(3-MA)及6Gy+自噬诱导剂雷帕霉素(rapamycin)不同方法处理的人宫颈癌细胞存活和增殖情况,并分析其量效和时效关系。结果 随着照射剂量的增加(2、4、6、8和10 Gy)及时间的延长(24、48和72 h),宫颈癌细胞增殖的抑制作用组间比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。6 Gy+rapamycin处理对癌细胞增殖的抑制率低于单纯6Gy照射组(P<0.05),组间比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。6 Gy+3-MA处理对癌细胞增殖的抑制高于单纯6 Gy照射组(P<0.05),处理后24、48和72 h其抑制率组间比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论 在Hela细胞中电离辐射诱导自噬能够拮抗凋亡,电离辐射联合自噬诱导剂能够抑制Hela细胞凋亡,而电离辐射联合自噬抑制剂能够促进其凋亡。     

Nano-Se对镉致睾丸间质细胞凋亡保护作用的研究

目的探究纳米硒(nano-selenium,Nano-Se)通过调节Bax/Bcl-2比值对镉(cadmium,Cd)致小鼠睾丸间质细胞(TM3)凋亡的保护作用。方法试验分为5组,即对照组、镉染毒组、低剂量纳米硒组、中剂量纳米硒组和高剂量纳米硒组。其中镉染毒剂量为20μmol/L;纳米硒处理剂量分别为5、10和20μmol/L。采用CCK-8检测细胞活力,Hoechst染色检测凋亡,通过Western Blot检测Bax和Bcl-2蛋白的表达以及Bax/Bcl-2比值的变化情况。结果:与对照组相比,Cd能使TM3细胞形态改变,造成细胞损伤,导致细胞活力明显下降(P0.05),使Bax/Bcl-2比值明显升高(P0.05)诱发TM3细胞凋亡。而与Cd组相比,Nano-Se能够抑制Cd对TM3细胞的毒性作用,提高细胞活力(P0.05),降低Bax/Bcl-2比值(P0.05)和TM3细胞的凋亡水平。结论 Nano-Se对Cd致TM3细胞毒性损伤具有保护作用,可能降低TM3细胞中Bax/Bcl-2比值,从而抑制TM3细胞凋亡。[营养学报,2019,41(6):601-605]     

氯化甲基汞对NB4细胞凋亡率及Bcl-2和Bax表达水平的影响

目的 研究氯化甲基汞(MMC)对NB4细胞凋亡率及凋亡相关蛋白表达水平的影响.方法 NB4细胞经1.25、2.5、5、10和20 μmol/L MMC作用24 h,采用FITC- Annexin Ⅴ/PI双染法进行细胞凋亡率的检测;同时用Western Blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达.结果 NB4细胞接触不同剂量MMC 24 h,随着剂量增加凋亡率不断增加,2.50 μmol/L的细胞凋亡率[(20.87±3.70)%]与空白对照组[(11.86±3.77)%]比较差异有统计学意义(P＜0.05);且随着浓度增加Bcl-2表达水平逐渐下降,Bax表达水平不断增加.结论 MMC能促进NB4细胞凋亡,且呈剂量依赖性.     

铅抑制NF-kB、Bcl-2蛋白表达诱导人肾小管上皮细胞凋亡

目的 研究醋酸铅对人肾小管上皮细胞系HK-2细胞NFJeB、Bcl-2表达的影响及与细胞凋亡的关系.方法 体外培养HK-2细胞分为0、2.5、5、10、20 μmol/L醋酸铅组,分别染毒72 h,应用间接免疫荧光-流式细胞术检测HK-2细胞NF-kB、Bel-2蛋白表达的改变,用Annexin-V/PI双染法检测细胞凋亡.结果 随着染铅剂量增加HK-2细胞NF-KB、Bcl-2蛋白表达逐步降低,NF-kB与Bcl-2降低显著相关(r＝0.71,P＜0.01);细胞凋亡率随着铅剂量增加而增加,在5、10、20μmol/L铅组与对照组比较差别有统计学意义(P＜0.01);细胞凋亡率与NF-kB、BcI-2蛋白表达呈明显负相关(r＝-0.625,P＜0.01;r＝0.709,P＜0.01).结论 醋酸铅能下调HK-2细胞.NF-kB、Bcl-2基因的表达,这可能是其诱导HK-2细胞凋亡的途径之一.