液相色谱-质谱联用测定大鼠血浆中芍药内酯苷及其药动学研究

 目的建立大鼠血浆中芍药内酯苷的HPLC-MS/MS定量分析方法,并用于大鼠体内芍药内酯苷药动学研究。方法血浆样品采用固相萃取预处理。色谱柱为Symmetry C₁₈(4.6mm×50mm,3.5μm),流动相为乙腈-0.05%甲酸溶液(25∶75)。采用三重四极杆质谱仪进行多反应监测方式(MRM),电喷雾离子源。对所建方法进行了较全面的验证。考察了3种剂量芍药内酯苷给与大鼠后的药动学特征。结果所建方法灵敏、重现性良好。芍药内酯苷在体内吸收迅速,消除也较快。经统计学检验表明,在给定的3个剂量范围内,芍药内酯苷具有线性动力学特征。结论建立的方法可用于芍药内酯苷的药动学研究。     

UPLC-MS-MS同时测定比格犬血浆中阿魏酸、香草酸、芍药苷和芍药内酯苷的含量及其药动学研究

目的: 建立利用超高效液相质谱联用色谱(UPLC-MS-MS)同时测定比格犬血浆中阿魏酸、香草酸、芍药苷和芍药内酯苷的分析方法,并研究比格犬灌胃当归-白芍药对提取物后以上4种成分的药动学特征。 方法: 采集比格犬灌胃当归-白芍药对提取物后不同时间点的血浆样本,甲醇沉淀蛋白,色谱采用Waters BEH C₁₈反相柱,流动相为水(含0.1%的甲酸)-乙腈梯度洗脱,采用电喷雾离子化三重四极杆串联质谱,以多反应监测(MRM)方式进行检测。正离子条件下用于定量分析的离子对分别为m/z 195.3~144.5(阿魏酸)、m/z169.0~92.9 (香草酸)、m/z481.3~197.1(芍药内酯苷),负离子条件下用于定量分析的离子对为m/z525.4~449.2 (芍药苷)。DAS 2.0软件计算主要药动学参数。 结果: 阿魏酸、香草酸、芍药苷和芍药内酯苷分别在1.13~1 089,1.23~1 080,0.82~787.5,0.36~337.5 μg·L^-1线性关系良好,样品提取回收率、精密度、准确度及稳定性等均符合要求。阿魏酸和香草酸2种酚酸类成分在比格犬体内吸收均较迅速,阿魏酸消除较快,香草酸消除相对较慢;芍药苷和芍药内酯苷2种单萜苷类成分药动学特征相似,在比格犬体内吸收和消除均较慢。 结论: UPLC-MS-MS法选择性好、灵敏度高、专属性强,可用于当归-白芍药对中主要化学成分的体内药动学研究,为当归-白芍配伍研究提供一定科学依据。     

HPLC-MS/MS测定大鼠血浆中的芍药苷及其药动学研究

目的：建立HPLC-MS／MS分析方法测定大鼠血浆中的芍药苷含量，并用于研究当归对赤芍主要有效成分芍药苷的药动学影响。方法：质谱检测方式一：多反应离子监测，选择监测的离子为m／z450～m／z327（芍药苷）和m／z388～m／z225（栀子苷）。大鼠分别灌胃赤芍煎液和赤芍及当归煎液，芍药苷剂量均为294．78mg·kg^-1。HPLC-MS／MS法测定芍药苷的血药浓度，并计算芍药苷药动学参数。结果：单独服用赤芍煎液时芍药苷的主要药动学参数分别为Cmax（1．55±0．53）mg·L^-1，Tmax（0．9±0．3）h，t1/2（1．51±0．63）h，MRT（3．08±0．74）h，AUC0→T（4．68±0．85）mg·h^-1·L^-1。同时服用当归煎液和赤芍煎液时芍药苷的Cmax，Tmax，t1/2,MRT，AUC0→T，分别为（0．93±0．42）mg·L^-1。，（1．5±0．8）h，（3．08±1．79）h，（5．19±1．95）h，（3．36±0．56）mg·h-1·L^-1。两组药动学参数中，MRT，Cmax和AUC0→T具有显著性差异（P〈0．05）。结论：当归能显著影响赤芍主要有效成分芍药苷的药动学。     

大鼠血浆中芍药内酯苷、咖啡酸及绿原酸类浓度的UPLC-MS法同时测定及其药动学研究

目的建立UPLC-MS法同时测定大鼠静脉注射辛芍提取物后血浆中芍药内酯苷、咖啡酸、绿原酸、隐绿原酸、新绿原酸5种成分的分析方法,并计算5种成分在大鼠体内的药动学参数。方法色谱采用Waters BEH C18(2.1 mm×50mm,1.7μm)柱,流动相为0.1%甲酸乙腈-0.1%甲酸水梯度洗脱,质谱采用电喷雾电离源(ESI),扫描方式为选择性离子监测(SIR)。结果 5种成分在大鼠血浆中线性关系良好,提取回收率在95.1%~98.5%之间,日内、日间精密度、准确度和稳定性良好。各检测成分的曲线下面积[AUC(0~140 min)],表观分布容积(Vl),分布半衰期(t1/2α),消除半衰期(t1/2β)分别为53.71~867.55(mg/L·min),3.27~103.62 L/kg,15.15~24.08 min和23.79~35.96 min,结果表明辛芍提取物在体内吸收较为良好、分布较为广泛,且分布消除均较迅速。结论该方法可特异、快速、准确、灵敏地同时测定芍药内酯苷等5种成分在大鼠体内的经时血药浓度。     

HPLC-MS/MS测定大鼠血浆中的芍药苷及 其药动学研究

目的：建立HPLC-MS/MS分析方法测定大鼠血浆中的芍药苷含量，并用于研究当归对赤芍主要有效成分芍药苷的药动学影响。方法：质谱检测方式：多反应离子监测，选择监测的离子为m/z 450~m/z 327 (芍药苷) 和m/z 388~m/z 225(栀子苷)。大鼠分别灌胃赤芍煎液和赤芍及当归煎液，芍药苷剂量均为294.78 mg·kg-1。HPLC-MS/MS法测定芍药苷的血药浓度，并计算芍药苷药动学参数。结果：单独服用赤芍煎液时芍药苷的主要药动学参数分别为Cmax(1.55±0.53) mg·L-1，Tmax(0.9±0.3) h，t1/2(1.51±0.63) h，MRT(3.08±0.74) h，AUC0→τ(4.68±0.85) mg·h-1·L-1。同时服用当归煎液和赤芍煎液时芍药苷的Cmax，Tmax，t1/2，MRT，AUC0→τ分别为(0.93±0.42) mg·L-1，(1.5±0.8) h，(3.08±1.79) h，(5.19±1.95) h，(3.36±0.56) mg·h-1·L-1。两组药动学参数中，MRT，Cmax和AUC0→τ具有显著性差异(P<0.05)。结论：当归能显著影响赤芍主要有效成分芍药苷的药动学。     

白芍中芍药苷的含量测定及白芍提取物的抗氧化作用研究

目的测定白芍中芍药苷的含量,考察白芍提取物的体外抗氧化活性。方法采用超声提取和回流提取两种方法提取白芍中的芍药苷,用HPLC法测定芍药苷含量,Hypersil C18色谱柱(4.6mm×200mm,5μm);流动相:甲醇-0.02mol/L磷酸二氢钠(25:75);检测波长为230nm,采用Fention法研究白芍提取物对羟自由基的清除能力。结果超声及回流提取芍药苷含量分别为3.62%及3.61%;超声提取物及回流提取物清除羟自由基的IC50分别为0.060 5mg·mL-1及0.038 8mg·mL-1.结论两种方法提取白芍中芍药苷含量无显著性差异,白芍提取物有一定的体外抗氧化能力。     

白芍颗粒饮片中芍药苷的含量测定

目的:应用高效液相色谱法测定白芍颗粒饮片中芍药苷的含量。方法:色谱柱为Alltech色谱柱(4.6mm×150mm,5um),流动相为甲醇-磷酸二氢钾-醋酸-异丙醇(67∶173∶4∶4),检测波长为230nm,流速为1.0ml.min-1,柱温:30℃。结果:芍药苷在0.093~0.589μg范围内进样量与峰面积呈良好线性关系(r=0.9997);平均加样回收率为98.17%,RSD=0.57%(n=5)。结论:该方法测定结果准确、灵敏、重现性好。     

一测多评法测定白芍中芍药苷与芍药内酯苷的含量

目的:建立白芍中芍药苷和芍药内酯苷的一测多评含量测定方法.方法:采用HPLC和UPLC法,以芍药苷为内标物,建立其与芍药内酯苷的相对校正因子,并进行含量测定,实现一测多评.同时采用外标法测定16批白芍中芍药苷、芍药内酯苷的含量,验证一测多评法的准确性.结果:建立的校正因子重现性良好,采用校正因子计算的含量值与外标法实测值之间无显著差异.结论:在对照品缺乏的情况下,以外标法测定芍药苷,利用相对校正因子实现对芍药内酯苷的含量测定是可行的.     

白芍不同炮制品中芍药苷含量测定

目的 :对白芍几种不同炮制品中芍药苷的含量进行测定 ,为今后合理制定其炮制工艺提供依据。方法 :采用双波长薄层扫描法进行测定。结果 :芍药苷的含量 :生品>麸制品>酒麸制品>炒制品>盐制品>酒制品>醋制品>土制品>煨制品>焦制品>制炭品。结论 :白芍经炮制后芍药苷含量均下降 ,但降低幅度不一 ,原因有待进一步研究     

归芍浓缩丸中芍药内酯苷和芍药苷的含量测定

目的建立归芍浓缩丸中芍药内酯苷和芍药苷的含量测定方法。方法采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法测定归芍浓缩丸中芍药内酯苷和芍药苷的含量。色谱条件:用C18分析柱,以乙腈-0.05%冰醋酸溶液(17∶83)为流动相,检测波长为230 nm,进样量为20μl。结果高效液相色谱法测定芍药内酯苷在0.67~2.02μg范围内线性关系良好(r=0.999 8),平均回收率为100.5%,RSD=0.29%(n=7);芍药苷在0.41~1.63μg范围内线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率为101.2%,RSD0.37%(n=7)。结论该方法简便快速、精密度高、准确度好,可作为该制剂的质量控制方法。     

大鼠含药血清中芍药苷的含量测定

目的:建立大鼠含药血清中芍药苷的含量测定方法.方法:采用HPLC测定血府逐瘀胶囊中芍药苷含量,HPLC-MS-MS测定血清中芍药苷含量.结果:血府逐瘀胶囊中芍药苷含量1.68 mg/粒,符合2010年版《中国药典》规定;血清中芍药苷质量浓度在4.57 ～ 585 μg· L-1线性关系良好,r=0.998 3,高、中、低质量浓度的绝对回收率101.7％～115.5％.结论:HPLC-MS-MS测定大鼠含药血清中芍药苷含量的方法稳定、重复性好,可作为血府逐瘀胶囊在大鼠血清中质量控制方法.     

苯甲酰芍药苷在大鼠体内的药动学研究

目的:以健康大鼠为药动学研究模型探究苯甲酰芍药苷静注或灌胃给药的代谢差异。方法:大鼠灌胃或静脉注射苯甲酰芍药苷后,采用高效液相色谱分析方法分别测定血浆中苯甲酰芍药苷的浓度并计算出药动学参数,研究并比较苯甲酰芍药苷两种给药途径下的药动学。结果:苯甲酰芍药苷峰面积和浓度之间线性关系良好(r20.99),提取回收率在92.3%～103.4%之间,精密度、准确度和基质效应均符合相关指导原则。苯甲酰芍药苷口服的生物利用度只有1.67%。结论:苯甲酰芍药苷口服吸收不佳,宜开发为静脉注射给药的新药。     

市售白芍饮片二氧化硫和芍药苷含量测定

目的对市售白芍饮片种二氧化硫和芍药苷含量进行检测,分析硫熏现状。方法采用优化的酸碱滴定法测定白芍二氧化硫残留值;采用HPLC法,优化流动相条件测定芍药苷含量。结果 5批饮片二氧化硫残留及芍药苷含量不符合《中国药典》2015年版规定,不合格率为25%。结论市售品不合格率高,有关部门需加强监管。     

HPLC法测定白芍总苷胶囊中芍药内酯苷、芍药苷和苯甲酰芍药苷

目的建立HPLC对白芍总苷胶囊中芍药内酯苷、芍药苷和苯甲酰芍药苷同时定量的分析方法。方法采用HPLC法。色谱柱Zorbax SB-C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相A为乙腈,B为0.015%磷酸溶液,梯度洗脱程序为0min(8%A),5min(12%A),20min(20%A),25min(20%A);35min(45%A),40min(45%A);检测波长230nm;柱温30℃。结果芍药内酯苷、芍药苷和苯甲酰芍药苷质量浓度与峰面积均呈良好的线性关系。平均回收率芍药内酯苷为96.99%,RSD为0.56%;芍药苷为103.6%,RSD为0.77%;苯甲酰芍药苷为104.2%,RSD为1.35%(n=5)。结论该方法分离度好,简便易行,具有良好的重现性,可用于白芍总苷胶囊中芍药内酯苷、芍药苷和苯甲酰芍药苷的同时测定。     

小鼠血浆中姜黄素的含量测定及药动学研究

 目的建立血浆中姜黄素含量测定的HPLC,并研究姜黄素静注后在小鼠体内的药动学行为。方法血浆样品用乙腈沉淀蛋白后,采用Lichrospher-C₁₈分析柱(4.6 mm×250 mm,5μm),柱温:30℃;流动相:甲醇-5%醋酸溶液(85∶15);流速:0.5 mL·min^-1;检测波长:420 nm。结果本法可将姜黄素与其他内源性干扰成分成功分离。在0.25～10.0 mg·L^-1内,测定方法具有良好的线性关系;萃取回收率为64.91%,加样回收率为93.10%;日内、日间精密度RSD均小于10%。小鼠静注姜黄素后药动学行为符合三室模型,主要药动学参数为:t_1/2pi 0.42 min,t_1/2α 16.2 min,t_1/2β 73.82 h,CL1.22 L·h^-1。结论所建立的姜黄素体内血药浓度测定方法可行,姜黄素静注后在小鼠体内分布消除迅速。     

LC-MS/MS同时检测大鼠血浆中芍药苷和芍药内酯苷的浓度及其药代动力学研究

目的:研究白芍中芍药苷和芍药内酯苷在大鼠体内的药代动力学。方法:应用高效液相色谱-串联质谱联用分析方法,测定大鼠灌胃给予白芍提取物后芍药苷和芍药内酯苷的时间-血药浓度,根据药-时曲线计算药代动力学参数。结果:芍药苷和芍药内酯苷线性范围分别为1.0~1000 ng·m L-1,2.0~2000 ng·m L-1,回收率均大于80%,日间RSD≤10%,日内RSD≤11%,RE在-4.9%~2.4%之间。芍药苷和芍药内酯苷药代动力学参数如下:Tmax为(0.89±0.27)、(0.97±0.37)h;t1/2为(1.97±0.63)、(2.25±0.59)h;Cmax为(301.3±96.8)、(122.9±42.2)μg·L-1。AUC0-t为(1495.1±521.2)、(688.5±222.9)μg·h·L-1;AUC0-∞为(1541.1±548.0)、(720.1±241.0)μg·h·L-1。结论:该法简便、灵敏、特异,适用于血浆中芍药苷和芍药内酯浓度的测定。白芍中芍药苷和芍药内酯苷在大鼠体内药代动力学行为均符合二室模型。     

白芍提取物中芍药苷及总皂苷的含量测定

目的：建立白芍提取物中芍药苷及总皂苷的含量测定方法。方法：采用HPLC法测定芍药苷的含量,以乙腈-0.05%磷酸（14：86）为流动相,检测波长为230nm;采用碱水解-HPLC法,以甲醇-0.05mol/L磷酸-异丙醇-冰乙酸（85：155：4：6）为流动相,检测波长为230nm,测定苯甲酸含量,计算出白芍总苷的含量。结果：芍药苷在进样量0.1～2μg（r=1.0000）范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率为99.86%,RSD为2.49%;苯甲酸在进样量0.2～4.0μg（r=0.9999）范闱内呈良好的线性关系,平均加样回收率为98.03%,RSD为1.23%。结论：白芍提取物中芍药苷的含量均大于15%,总皂苷的含量均大于60%。     

高效液相色谱法测定白芍及炒白芍浓缩颗粒中芍药苷含量

目的：探讨白芍及炒白芍浓缩颗粒质量，建立芍药苷的高效液相色谱法。方法：色谱条件为Ｃ－１８柱，以甲醇－０.05mol/L磷酸二氢钾－异丙醇－醋酸（６７：１７３：４：４）为流动相，流速 为０.8ml/min,检测波长为２３０nm。结果：平均回收率为９９.4%。ＰＳＤ为０.64%。结论：此方法简便、灵敏、准确、重现性好，其它组分测定无干扰，可用于质量控制。     

HPLC测定郁舒颗粒芍药内酯苷和芍药苷的含量

目的:建立测定郁舒颗粒中芍药内酯苷和芍药苷含量测定的方法。方法:采用高效液相色谱,以Agilent ZORBAX SB-C18(4.6×250mm,5μm)为分析柱,流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液梯度洗脱,流速1.0mL.min-1,检测波长:203nm,柱温:30℃。结果:芍药内酯苷与芍药苷分离度良好,且不受其它成分干扰;芍药内酯苷、芍药苷分别在0.240～0.900μg(r=0.9998,n=6),0.601～2.253μg(r=0.9993,n=6)范围内线性关系良好;方法的平均回收率都在95%～105%范围内,RSD均小于3.0%。结论:该方法简便、快速、重现性好、准确可靠,可用于郁舒颗粒中芍药内酯苷和芍药苷的含量测定。