急性白血病免疫表型及伴髓系/淋系抗原表达的比较

目的:探讨急性白血痛(acute leukemia,AL)免疫表型,比较伴髓系或淋系抗原表达的AL患者临床表现及各抗体表达比例.方法:采用形态学分型,流式细胞术检测白血病细胞免疫类型,对53例初诊AL患者进行检测,比较My+ALL和My-ALL及Ly-AML和Ly+AML患者临床表现及各抗体表达比例.结果:初诊AL患者中,ALL患者Hb、WBC及PLT结果在三者中最好,临床症状以发热居首位,其次为肝、脾、淋巴结肿大.5例混合细胞白血病(HAL),3例误诊为AML,2例误诊为ALL,FAB与免疫分型的相符率为90.57%;28例AML中CD33、CD13和CD15的表达最为常见,阳性率分别为100%,92.86%和78.57%;20例ALL中,13例B-ALL患者均表达CD19,7例T-ALL患者均表达CD2,干/祖细胞CD38、CD34和HLA-DR在AML的阳性率分别为92.86%,85.71%,78.57%;B-ALL中分别为84.62%,53.85%,53.85%,在T-ALL中分别为57.14%,28.57%和28.57%;ALL中伴髓系抗原表达(My+-ALL)占25.0%(5/20),主要表达的髓系抗原为CD13、CD15,AML中伴淋系抗原表达(Ly+-AML)占21.43%(6/28),主要表达的淋系抗原为CD7.My+ALL和My-ALL其临床表现及抗体表达比例差异无显著性,而Ly-AML和Ly+AML患者,CD4、CD7和CD38表达差异有极为显著性(P＜0.01),CD10、CD19、CD22和HLA-DR差异有显著性(P＜0.05).结论:CD33、CD19和CD2敏感性高,可作为AL免疫分型的首选单克隆抗体;Ly-AML和Lv+AML患者其临床表现及抗体袁达不同,结合免疫类型可以弥补FAB方法的不足,提高AL的分型准确性,尤其对于HAL等特殊类型的AL更有价值.     

多参数流式细胞术检测儿童急性B淋巴细胞白血病免疫表型与预后分析

目的探讨儿童急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)的免疫表型特征及其在疾病预后判断中的价值。方法采用多参数流式细胞术对120例B-ALL患儿进行免疫表型检测,并进行跟踪随访,分析免疫表型与预后的关系。结果B-ALL患儿CD19(100.0%)、CD10(95.8%)、TdT(94.2%)、CyCD79a(91.7%)、CD9(81.7%)、CD22(80.8%)、CD58(64.2%)的阳性率均较高;不同B-ALL亚型患儿CD22、CD9、CyCD79a、TdT阳性率差异均无统计学意义(P0.05),CD58阳性率差异有统计学意义(P0.05)。120例B-ALL患儿中有87例(72.5%)表达髓系相关抗原;干/祖细胞系相关抗原CD34(79.2%)、CD38(90.0%)、HLA-DR(99.2%)、CD123(60.0%)在B-ALL患儿中阳性率较高;不同B-ALL亚型患儿髓系及干/祖细胞系相关抗原阳性率差异无统计学意义(P0.05)。不同B-ALL亚型患儿疗效比较,差异无统计学意义(P0.05);髓系相关抗原阳性患儿完全缓解(CR)率为65.5%,低于髓系相关抗原阴性患儿(84.8%),差异有统计学意义(P0.05);CD34阳性患儿CR率为65.3%,低于CD34阴性患儿(92.0%),差异有统计学意义(P0.05)。结论 B-ALL各亚型间免疫表型存在差异,免疫表型分析有助于B-ALL的诊断和预后判断。     

CD200和调节性T细胞的相关性在多发性骨髓瘤预后分层中的意义

目的:观察多发性骨髓瘤(MM)患者CD200和调节性T细胞(Treg)表达的相关性,探讨其在MM预后分层中的意义。方法:应用流式细胞术检测78例MM初诊患者骨髓血中CD200和其它免疫表型(CD38,CD138,CD56,CD19,CD20,CD117,胞浆轻链Kappa和Lambda)表达,以及外周血Treg的比例;分别检测患者血清血红蛋白(Hb)、血清β2微球蛋白(β2-MG)和乳酸脱氢酶(LDH)的浓度;通过国际分期系统(ISS)和细胞遗传学特征进行预后分层;分析MM患者表达CD200与Treg细胞的相关性,比较不同表达相关性患者的预后差异。结果:78例初诊患者表达CD200~+率为71.79%(56/78),在年龄和性别分布上CD200阳性组和阴性组之间的差异无明显统计学意义。在其他抗原表达上,CD200~+组CD117的表达显著高于CD200~-组(P=0.032),CD20、CD56和CD19的表达两组间无明显统计学差别。CD200~+组Hb量明显低于CD200-组(P=0.035),血清β2-MG水平显著高于CD200~-组(P=0.013),血清LDH水平两组间差异无明显统计学意义。CD200~+组中ISS分期Ⅰ期患者占58.62%(17/29),Ⅱ期患者占75%(30/40),Ⅲ期占100%(9/9),随着CD200表达强度增加,预后分层危险度上升(P=0),CD200表达越强,预后越差;Treg细胞CD200~+组显著高于CD200~-组(P=0.043),Treg含量与CD200表达程度呈正相关(r=0.743,P=0.044)。CD200-组患者总生存率(OS)显著高于CD200~+组(P=0.036),疾病无进展生存率(PFS)稍高于CD200~+组,但两组间差异无统计学意义。结论:MM患者CD200表达和Treg含量之间有显著正相关性,是MM预后不良的重要因素以及临床判断疗效的可靠指标。     

CD56抗原与老年急性髓系白血病疗效及预后的相关性

目的探讨CD56抗原与老年急性髓系白血病患者疗效及预后的相关性。方法选取138例老年急性髓系白血病患者进行前瞻性研究,根据CD56抗原表达情况分为阳性组(74例)与阴性组(64例)。所有患者治疗方案均为蒽环类药物联合阿糖胞苷,比较阳性组与阴性组患者的完全缓解率、无病生存时间(DFS)、总生存时间(OS)、3年DFS率与3年OS率,对CD56抗原表达与患者DFS、OS进行相关性分析。结果阳性组与阴性组患者的完全缓解率分别为86.49%、93.75%,差异无统计学意义(χ~2=0.993,P=0.319)。阳性组DFS与OS分别为(1.64±0.57)年、(2.70±0.81)年,均短于阴性组(t=2.026,P=0.047;t=2.050,P=0.044),3年DFS率与OS率分别为22.22%、38.89%,均低于阴性组(χ~2=4.600,P=0.032;χ~2=4.848,P=0.028)。CD56抗原表达与DFS(r=0.425,P=0.002)、OS(r=0.557,P=0.000)均有显著正相关,与复发情况之间呈显著负相关(r=-0.756,P=0.001),阳性患者的复发风险更大。结论 CD56抗原表达与老年急性髓系白血病患者预后之间存在明显相关性,表现为CD56抗原阳性患者DFS与OS短于阴性患者,复发率更高。     

227例急性髓系白血病跨系抗原表达的临床特征及预后意义

目的:分析急性髓系白血病(AML)跨系抗原表达的临床特征及其预后意义,以便对此类患者进行预后分层,为建立个体化的治疗提供指导。方法:用流式细胞术对227例初发AML患者(M3除外)进行免疫分型,以CD7~-CD56~-CD19~-的AML为对照,比较CD7~+组、CD56~+组、CD19~+组及对照组间的临床特征、治疗反应和生存情况。结果:CD56~+AML、CD7~+AML和CD19~+AML检出率分别为15.9%、25.1%和11.0%。3个组的发病年龄,原始细胞比例,白细胞计数,血红蛋白含量,血小板计数,MDS继发的AML分布与对照组无统计学差异。CD56~+AML首次化疗后完全缓解(CR)率和累积CR率均低于对照组(20.0%vs 58.1%,P=0.0099;73.3%vs 87.5%,P=0.04),取得CR的中位时间长于对照组(118 d vs 46 d,P=0.04),无进展生存期(PFS)和总体生存期(OS)低于对照组(245 d vs 580 d,P=0.037;494 dvs 809 d,P=0.04)。CD19~+AML首次化疗后CR率、累积CR率均高于对照组(75.0%vs 58.1%,P=0.46;100%vs 87.5%,P=0.02),取得CR的中位时间明显少于对照组(28 d vs 46 d,P=0.02),PFS及OS较对照组有延长趋势(P=0.13;P=0.07),至末次随访中位PFS及OS尚未达到。CD7~+AML首次化疗后CR率、累积CR率、取得CR中位时间与对照组比较均未取得统计学差异(53.1%vs 58.1%,P=0.67;87.1%vs 87.5%,P=0.44;50 d vs 46 d,P=0.44),PFS和OS与对照组比也无差异。结论:CD56~+AML患者治疗反应差,诱导缓解后易复发,总体生存期短,应在治疗之初选择更强的化疗方案或联合多种治疗手段,并缩短该类患者的MRD检测周期,以期早期发现残留白血病细胞并早期干预。CD19~+AML患者治疗反应好,不易复发,总体生存期长,对此类患者应避免过度治疗。异常表达CD7抗原不是AML预后不良因素。     

B-ALL患儿VDLP化疗缓解后髓源抑制性细胞的水平变化及其与免疫系统的关系

目的:观察并研究外周血髓系来源的抑制性细胞在B系急性淋巴细胞白血病(B-ALL)患儿经长春地辛、柔红霉素、培门冬酶和强的松(Vindesine、Daunorubicin、Pegaspargase、Prednisone,VDLP)方案化疗缓解后的变化并分析其与免疫系统的可能关系。方法:选取我院2015年8月至2016年8月期间收治的30例经VDLP方案化疗后缓解的B-ALL患儿为B-ALL组,选取30例正常健康儿童为对照组,分别抽取2组的外周血,采用流式细胞术检测并计算其外周血CD33~+细胞和CD33~+HLA-DR~-、CD14~+CD33~+HLA-DR~-、CD15~+CD33~+HLA-DR~-骨髓源抑制性细胞的比例,分析其在B-ALL患儿经VDLP方案化疗缓解后的变化及其与免疫系统的关系。结果:治疗后B-ALL组和对照组外周血CD33~+细胞比例无明显差异(P0.05);治疗后B-ALL组外周血患儿CD33~+细胞比例显著高于治疗前(P0.05)。治疗后B-ALL组患儿外周血CD33~+HLA-DR~-、CD14~+CD33~+HLA-DR~-、CD15~+CD33~+HLA-DR~-髓系来源抑制性细胞比例均显著低于对照组健康儿童(P=0.02,P=0.02,P=0.04)。治疗后B-ALL组患儿外周血CD33~+HLA-DR~-、CD14~+CD33~+HLA-DR~-、CD15~+CD33~+HLA-DR~-骨髓源抑制性细胞比例均高于治疗前,但差异均无统计学意义(均P0.05)。结论:外周血骨髓源的抑制性细胞在B-ALL患儿行VDLP方案化疗后完全缓解期比例高于治疗前,显著低于正常值,这可能与化疗后患儿免疫系统还未完全恢复有关。     

CXCR4在急性B淋巴细胞白血病的表达及其意义

本研究目的是探讨趋化因子受体CXCR4在急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)细胞不同分化阶段的表达特点及其与髓系抗原的关系.用流式细胞术采用双色荧光标记法检测B-ALL各分化阶段上CXCR4的表达率及平均荧光强度(MFI).结果表明92.9%的B-ALL表达CXCR4.在B-ALL细胞的不同分化阶段,CD10、CD34抗原的表达率不同,由低到高分化阶段的免疫表型依次为①CD10-/CD34+;②CD10+/CD34+;③CD10+/CD34-;④CD10-/CD34-.CXCR4在各免疫表型的表达率分别为(27.60±15.25)%,(30.95±15.50)%,(55.62±18.37)%和(77.25±10.86)%,其MFI分别为46.69±15.06,47.43±12.39,79.28±24.71和132.92±88.09.CXCR4在较早期阶段的CD10-/CD34+和CD10+/CD34+B-ALL细胞上表达无显著性差异,均低于CD10+/CD34-和CD10-/CD34-的B-ALL细胞上的表达,在较成熟的CD10-/CD34-B-ALL细胞上表达最高.CXCR4在伴髓系抗原CD13和(或)CD33表达的B-ALL(my+B-ALL)细胞的表达率为(12.56±3.88)%,MFI为39.82±11.58,不伴髓系抗原表达组(my-B-ALL)的表达率为(37.57±11.58)%,MFI为50.72±13.34,二者比较有显著性差异.结论CXCR4在B-ALL细胞上的表达与细胞的分化程度有关,与髓系抗原共表达时表达下调.     

CD19、CD56在急性髓系白血病RUNX1-RUNX1T1~+突变患者中的表达及其临床意义

目的:探讨急性非M3髓细胞性白血病(AML non-M3)患者骨髓RUNX1-RUNX1T1表达水平的临床意义,了解表达淋系抗原CD19、CD56的RUNX1-RUNX1T1~+的AML的生物学特征及其对初次诱导缓解率和预后的影响。方法:应用实时荧光定量聚合酶链反应(RQ-PCR)检测200例初诊AML(non-M3)患者骨髓RUNX1-RUNX1T1表达水平,用流式细胞术检测AML的淋系抗原表达水平,分析初次诱导缓解率(CR1)和总生存率(OS)的关系;对照分析RUNX1-RUNX1T1~+患者中CD56~+和CD56~-以及CD19~+和CD19~-患者在CR1和OS的区别。结果:在RUNX1-RUNX1T1~+的AML患者中,初诊时CD56~+患者具有较低的CR1(P0.05)。CD19~+患者CR1较CD19~-患者高(P0.05)。CD56~+患者的OS率显著低于CD56~-患者(P0.05)。CD19~+患者的OS与CD19~-患者的OS率无显著差异。结论:RUNX1-RUNX1T1~+的AML患者中骨髓CD56~+提示预后不良,CD19~+仅与CR1相关,与OS无关。     

儿童急性白血病免疫表型及临床研究

【目的】探讨儿童急性白血病（AL）免疫表型抗原分布情况及其与临床表现及疗效的关系。【方法】用流式细胞术对78例初诊AL患儿进行免疫分型。【结果】64例急性淋巴细胞白血病（ALL）患儿中45．3％表达髓系抗原，14例急性髓系白血病（AML）患儿43．8％伴有淋系相关抗原的表达。CD34^＋ALL及CD34～ALL在性别、年龄、初诊时白细胞计数上差异无统计学意义，但在肝脾淋巴结肿大等髓外浸润表现上差异有统计学意义（χ^2=5．24，P=0．025），在诱导治疗4周的缓解率上差异无统计学意义。伴有髓系抗原表达的ALL（My^＋ALL）与My^-ALL在强的松试验反应及4周缓解率上差异无统计学意义（P〉0．05）。B-ALL与T-ALL在诱导治疗四周缓解率并无差异，但T-ALL较B-ALL更易复发，预后更差。【结论】儿童AL的免疫分型有助于指导临床治疗及判断预后。     

t(8;21)急性髓系白血病CD34~-白血病干细胞的确认和特征的体外研究

目的:通过体外实验初步确定t(8;21)急性髓系白血病(AML)中CD34~-白血病干细胞(LSC)的存在。方法:检测初诊t(8;21)AML骨髓样本,在荧光抗体标记后利用流式细胞仪分选出3个细胞群:Lin~-CD34~+CD38~-(简称为CD34~+CD38~-)、Lin~-CD34~+CD38~+(简称为CD34~+CD38~+)及Lin~-CD34~-CD38~-CD45~(dim)SSC~(low)(简称为CD34~-"LSC")。通过Hochest 33342和派洛宁Y(PY)双染色及乙醛脱氢酶(ALDH)活性检测实验比较各细胞群G_0期细胞和ALDH~(br)细胞比例。分选各细胞群后采用实时定量PCR技术检测AML1-ETO和WT1 mRNA水平。结果:检测3例患者的G0期细胞比例均为CD34~-"LSC"CD34~+ CD38~-CD34~+ CD38~+。配对t检验显示,53例检测的患者CD34~-"LSC"及CD34~+CD38~-中ALDH~(br)细胞比例均显著高于CD34~+ CD38~+中(P=0.0004,P0.0001),并且CD34~-"LSC"中ALDH~(br)细胞比例显著高于CD34~+ CD38~-(P=0.003)。3例分选的患者的3群细胞之间AML1-ETO mRNA水平相似,而CD34~-"LSC"的WT1 mRNA水平均明显高于另2个细胞群。结论:t(8;21)AML骨髓CD34~-细胞群可能含有LSC,并且可能比CD34~+ CD38~-更原始。     

CD123和CD66c在儿童B-ALL中的表达及其在MRD监测中的应用

目的探讨CD123和CD66c在儿童急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)中的表达及其在微小残留病(MRD)监测中的应用价值。方法采用多参数流式细胞术(MFC)检测141例初诊B-ALL患儿CD123和CD66c在骨髓中的表达情况。另选取25例急性髓系白血病(AML)患者作为对照组,经治疗症状完全缓解后采集其骨髓标本,所有标本均含比例不等的正常增生B系前体细胞。当初诊患儿抗原表达不同于对照组时,选取CD10/CD34/CD19/CD45做进一步MRD抗体组合检测。结果 CD123和CD66c在正常增生B系前体细胞和成熟B淋巴细胞中均不表达。在141例B-ALL患儿中,分别有88例(62.41%)CD123和70例(49.65%)CD66c表达阳性。分别有45例选择CD123和52例选择CD66c用于MRD监测,选择CD123和CD66c用于监测的病例有35例,选择CD123或CD66c用于监测的病例有62例,覆盖率为43.97%。CD123和CD66c在MRD监测中均具有良好的稳定性,无衰减或变弱。结论 CD123和CD66c均可用于儿童B-ALL MRD监测,但需联合其他筛选指标,以提高MRD监测的覆盖率。     

骨髓中CD4+CD25highFoxp3+调节性T细胞与儿童急性B淋巴细胞白血病的相关性研究

目的通过检测急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)患儿骨髓中叉状头/翅膀状螺旋转录因子(Foxp3)mRNA的表达及CD4+细胞中调节性T细胞(Treg)比例,探讨Treg与儿童B-ALL发生及预后的关系。方法用实时定量聚合酶链反应(PCR)检测10名正常儿童、35例初发B-ALL患儿及68例临床缓解患儿骨髓中Foxp3mRNA水平;用流式细胞术检测上述骨髓标本中CD4+CD25highFoxp3+Treg的比例;利用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测骨髓中细胞因子白细胞介素10(IL-10)的表达情况。结果骨髓中Foxp3 mRNA表达水平在B-ALL初发患儿组是对照组的4.44倍,微小残留病(MRD)阳性组是阴性组的2.39倍;B-ALL初发患儿骨髓中Treg占CD4+T淋巴细胞的比例[中位数(M)=12.77%]较对照组(M=8.09%)增高,差异具有统计学意义(P<0.01);MRD阳性组Treg比例(M=14.74%)与MRD持续阴性组(M=11.30%)比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后MRD阳性组骨髓中IL-10水平[(24.69±11.73)pg/mL]显著高于MRD持续阴性组[(9.19±5.82)pg/mL,P<0.05]。结论 B-ALL初发和MRD阳性患儿骨髓中Foxp3 mRNA水平和Treg比例显著增高,且骨髓中IL-10水平与Treg的比例变化趋势相一致。Treg可作为评价B-ALL患儿预后和复发的指标,Treg可能是通过分泌抑制性细胞因子IL-10而发挥其抑制作用。     

初治与复发B细胞急性淋巴细胞白血病患者白血病相关免疫表型的比较

目的比较初治和复发时B细胞急性淋巴细胞白血病（B-ALL）的白血病相关免疫表型（LAIP）特点,探讨其对微量残留病（MRD）监测的影响.方法标记4～6组四色抗体组合,利用多参数流式细胞术（FCM）以CD45/SSC设门对410例初治和6例复发的B-ALL患者进行免疫分型检测.并采用CD34/CD10/CD45/CD19为主的2种四色荧光标记抗体组合,对98例B-ALL患者进行多参数FCM MRD检测.结果与初治B-ALL患者相比,复发患者中CD45异常表达者明显增多,分别为37.8%和69.2%（P=0.000）.通过对15例初治和复发患者的配对样本分析,9例患者（包括8例骨髓复发,1例中枢神经系统复发）出现免疫标志变化,其中4例患者CD45表达减弱,2例增强;4例患者CD34表达减弱;2例患者CD10表达增强,而CD19较稳定.对7例骨髓复发患者进行了MRD随访检测,均在复发前的2～4个月发现MRD,并且表型与复发后一致.结论较高比例的复发患者出现免疫表型变化,这种改变在复发前的MRD状态时已经出现,但不影响MRD监测的准确性.     

CD133两种亚型分子在儿童B系急性淋巴细胞白血病中的表达及其临床意义

本研究旨在探讨B系急性淋巴细胞白血病(B-ALL)患儿初诊和治疗33 d时CD133两种亚型分子CD133-1和CD133-2的表达及其与临床预后指标的关系。用流式细胞术检测B-ALL患儿上述两个时间点骨髓单个核细胞的CD133-1、CD133-2表达和治疗33 d时微量残留病(MRD)的变化。结果表明,B-ALL初诊组48例中CD133-1阳性表达18例(37.5%),CD133-2阳性表达30例(62.5%,P<0.05);治疗33 d组25例中CD133-1阳性表达2例(8.0%),CD133-2阳性表达23例(92.0%,P<0.05)。诱导化疗后CD133-1的表达显著减少,但高于正常对照组;而CD133-2的表达下降缓慢。结论:初诊B-ALL患者CD133表达与其性别、年龄、外周血白细胞计数、骨髓幼稚细胞比例、FAB亚型、细胞遗传学异常、融合基因表达、危险等级及完全缓解率等均无相关性。B-ALL患儿CD133-2阳性表达高于CD133-1,CD133表达与CD34表达无相关性。CD133-2的表达与MRD显著相关。     

急性B淋巴细胞白血病患者初发和化疗后微量残留白血病细胞免疫表型的比较

目的研究急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)患者化疗前后白血病细胞免疫表型的改变,为流式细胞术(FCM)检测B-ALL微量残留白血病(MRD)提供理论依据。方法用FCM对比检测226例B-ALL患者初诊时及化疗后CD45、CD19、CD10、CD20、CD34、CD38、CD13、CD33等抗原表达阳性率及强度的改变。结果抗原表达强度改变的发生概率由高到低依次为CD10、CD34、CD38、CD19、CD20、CD45,CD10明显高于CD38、CD19、CD20和CD45(P0.01),CD34明显高于CD19、CD20、CD45(P0.01),CD38明显高于CD20、CD45(P0.01),CD34、CD45在化疗第33天时表达增强的比例显著高于第15天(P0.05)。抗原阳性率改变的发生概率由高到低依次为CD20、CD38、CD34、CD45、CD10、CD19,其中CD20和CD38抗原阳性率改变均显著高于CD34、CD45、CD10和CD19(P0.01)。CD38在化疗第33天时表型消失的比例显著高于第15天(P0.01),CD34在化疗第33天时表型出现的比例显著高于第15天(P0.01),CD10在第15天时表型消失的比例显著低于第33天和第48天(P0.05)。大部分患者化疗后发生1~4个抗原表达的改变。结论化疗后B-ALL患者免疫表型表达阳性率及强度改变的概率较高,进行MRD检测时,既应参考患者初诊时免疫表型的特点,又须关注表型的改变。     

伴有髓系抗原标记的儿童急性B淋巴细胞白血病骨髓细胞形态鉴别

目的探讨儿童急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)伴有髓系抗原(CD33和/或CD13、CD117)表达阳性与表达阴性患儿的骨髓涂片中原始、幼稚细胞形态的异同,以提高ALL形态学诊断的准确率。方法收集经细胞形态学、免疫学、细胞遗传学和分子生物学(MICM)诊断为B-ALL的患儿124例。采用流式细胞术检测B-ALL患儿髓系抗原表达,与髓系抗原表达阳性和阴性患儿的骨髓细胞形态进行回顾性分析。结果 124例B-ALL患儿中,有43例(34.7%)CD33抗原为阳性,2例(1.6%)CD33、CD13抗原阳性,2例(1.6%)CD33、CD117抗原阳性,1例(0.8%)CD117抗原阳性。在48例髓系抗原表达为阳性的患儿中,有29例患儿骨髓涂片中的原始、幼稚细胞形态不易观察、判别,占全部患儿的23.4%,占抗原阳性患儿的60.4%。结论儿童B-ALL伴髓系抗原表达的骨髓细胞涂片中,原始及幼稚细胞形态存在多样性及异质性,多不同于髓系抗原阴性的细胞形态,不易判别。     

多发性骨髓瘤流式细胞术免疫表型及微量残留病研究

目的 探讨MM细胞免疫表型特征及MRD检测的临床意义.方法 应用多参数流式细胞术检测16名健康对照者和172例MM患者的免疫表型.32例MM患者缓解后作MRD分析,同时进行跟踪随访,分析MRD阳性和阴性对MM患者的复发率和无病生存时间是否存在影响.结果 流式细胞术检测结果显示,16名健康对照者正常浆细胞CD38、CD 138、CD19、CD45均阳性,172例MM患者骨髓瘤细胞主要免疫表型为CD+38 172例(100.0%)、CD+138172例(100.0%)、CD-19 167例(97.1%)、CD+56 152例(88.4%)、CD-45 166例(96.5%),骨髓瘤细胞具有显著的特征性表型,即CD+38、CD+138、CD+56、CD-19、CD-45.32例MM患者缓解后进行MRD检测,其中14例MRD阴性,18例MRD阳性.随访2～16个月后,MRD阴性组4例复发(28.6%),MRD阳性组13例复发(72.2%),两组复发率比较,差异有统计学意义(χ2=6.03,P＜0.05).MRD阴性组累积无病生存时间中位数16.23(10.37～21.62)个月,明显长于MRD阳性组的10.07(3.79～16.20)个月,两组比较差异有统计学意义(χ2=7.53,P＜0.05).结论 MM患者骨髓瘤细胞主要免疫表型特征是CD+38、CD+138、CD1-19、CD-45、CD+56.多发性骨髓瘤MRD检测可以作为临床预后的参考指标.

Abstract：

Objective To investigate the characteristics of immunophenotyping and clinical significance of MRD analysis in MM patients. Methods Multi-parameter flow cytometry was applied to analyze the immunophenotyping of malignant plasma cells from 172 MM patients, and normal plasma cells from 16 healthy individuals. MRD was analyzed in 32 MM patients with remission. Meanwhile, the effects of MRD status on the disease relapse and patient disease free survival ( DFS ) time was evaluated by following up patients. Results The immunophenotyping of normal plasma cells were CD38, CD138, CD19 and CD45 positive, while the predominant phenotype of MM cells were CD+38( 100.0% ), CD+138( 100.0% ), CD-19 ( 167/172, 97. 1% ), CD+56( 152/172, 88.4% ) and CD-45( 166/172, 96. 5% ). The characteristic markers for MM cells were CD+38, CD-138, CD-19, CD-45 and CD+56. MRD analysis revealed that, among 32 MM patients with remission, 14 patients were MRD negative and 18 patients were MRD positive. During follow-up of 2 to 16 months, the relapse rate in MRD negative patients was significantly lower ( 4/14, 28.6% ) than that of MRD positive patients ( 13/18, 72. 2% ;χ2 =6. 03, P ＜0. 05 ). Furthermore, the DFS time was significantly longer in MRD negative patients[ 16. 23( 10. 37-21.62 )months ] than that of the MRD positive patients [ 10. 07( 3. 79-16. 20 )months,χ2 =7. 53,P ＜0. 05 ]. Conclusions CD+38, CD+138, CD-19, CD-45 and CD+56 are the characteristic markers of MM cells compared to those of the normal plasma cells. MRD analysis is a valuable prognostic factor for MM patients.     

微量残留病在儿童B系急性淋巴细胞白血病危险分层及预后中的临床意义

目的:探讨儿童B系急性淋巴细胞性白血病(B-ALL)治疗过程中不同时间点的微量残留病(minimal residual disease,M RD)水平在B-ALL危险分层及临床预后中的意义。方法:回顾性分析我院2008年8月1日至2013年1月1日以流式细胞术监测3个不同时间点(即诱导化疗第15天、第33天和治疗第12周)的380例BALL患儿骨髓M RD与5年无事件生存(EFS)率和总生存(OS)率的关系。结果:患儿的年龄、初诊白细胞数、染色体、MLL、BCR/ABL、预处理反应、第33天骨髓MRD与患儿的5年EFS率密切相关。多参数流式细胞术检测MRD有标记和MRD无标记与患儿5年EFS率之间差异无统计学意义(P=0.564);且各免疫表型与5年EFS率之间的差异也无统计学意义(P=0.84)。第15天MRD10~(-2)(P=0.004)、第33天MRD10~(-3)(P0.001)、第12周M RD10~(-3)(P0.001)的患儿5年EFS率及总生存率减低与不良预后明显相关。第33天MRD10~(-4)(阴性)、10~(-4)-10~(-3)、10~(-3)-10~(-2)、≥10~(-2)的5年EFS率分别为86.6±2.7%、77.5±4.9%、70.1±8.0%、44.8±9.9%(P0.001);5年OS率分别为89.5±2.7%、80±4.9%、76.0±7.8%、53.2±10.1%(P0.001)。结论:第33天M RD≥10~(-2)是B-ALL患儿5年EFS率和OS率显著减低的高危因素。缓解后动态监测MRD水平有助于预测B-ALL复发。     

共刺激信号分子对免疫性血小板减少症患者B淋巴细胞免疫功能的影响

目的:探讨共刺激信号分子(CD80、CD86)的表达对免疫性血小板减少症(ITP)患者外周血B淋巴细胞数量及功能的影响。方法:选取初诊ITP患者30例、完全缓解ITP患者25例为研究对象,健康志愿者25例为正常对照者。采用流式细胞术检测CD19~+CD5~+、CD19~+CD80~+、CD19~+CD86~+、CD41a~+Ig G、CD41a~+Ig M及CD19~+B细胞内Ig G和Ig M的表达,并与ITP患者的临床指标进行相关性分析。结果:初诊ITP患者B1(CD19~+CD5~+)细胞数均显著高于完全缓解组和健康对照组(P0.05)。初诊组ITP患者CD19~+CD80~+细胞数均明显高于完全缓解组和健康对照组(P0.05)。初诊组ITP患者CD19~+B胞内抗体Ig G和Ig M表达水平均明显高于完全缓解组和健康对照组(P0.05)。治疗后完全缓解组ITP患者Ig G和Ig M的表达水平均明显低于治疗前水平(P0.05),难治组ITP患者治疗前后Ig G和Ig M表达水平无统计学差异(P0.05)。CD19~+CD80~+细胞数与Th1的表达水平及Th1/Th2的比例呈正相关(r=0.502,r=0.471,P0.05)。CD19~+CD80~+细胞数与Ig G和Ig M表达水平呈正相关(r=0.552,r=0.467,P0.05),与外周血血小板计数呈负相关(r=~-0.424,P0.05)。Ig G和Ig M表达水平与血小板计数呈负相关(r=~-0.658,r=~-0.526,P0.05)。结论:ITP患者外周血CD19~+B细胞共刺激信号增强,导致B淋巴细胞异常活化,介导免疫系统发生紊乱,参与ITP发病。     

MFC监测MRD在AML形态学缓解患者中的应用价值

目的探讨多参数流式细胞术(MFC)监测微小残留病灶(MRD)在急性髓系白血病(AML)形态学完全缓解(mCR)患者中的应用价值。方法选取2015年5月至2019年5月该院收治的经过1~2个疗程诱导化疗后达到mCR的138例AML患者(排除M3)为研究对象,于每次化疗后3周左右或下次化疗前抽取骨髓,使用MFC检测MRD,比较MRD阳性和阴性患者的复发及生存情况,分析MFC监测MRD在AML mCR患者预后评估中的价值。结果138例患者中,MRD阳性31例,占22.5%。在化疗第1疗程达到mCR的患者中,MRD阴性有89例(83.2%),MRD阳性有16例(51.6%),差异有统计学意义(P<0.05)。MRD阳性患者累计复发率为61.3%,高于MRD阴性患者的48.6%(χ²=4.407,P=0.036);MRD阳性患者总生存率为54.8%,低于MRD阴性患者的70.1%(χ²=4.332,P=0.037);MRD阳性患者的无复发生存率为38.7%,低于MRD阴性患者的49.5%(χ²=4.408,P=0.035)。MRD阳性患者中,巩固化疗患者总生存率为47.4%,低于异基因造血干细胞移植患者的66.7%(χ²=4.190,P=0.041)。结论mCR后的MRD阳性患者复发率高,采用MFC监测MRD对AML患者预后具有重要意义,可以早期发现易复发患者,为个性化地制订缓解后治疗方案提供依据。