荧光原位杂交技术检测BCR/ABL融合基因的临床应用

本研究探讨应用荧光原位杂交技术( FISH)检测BCR/ABL融合基因在临床中的应用价值.对初诊考虑为慢性骨髓增殖性疾病或骨髓增生异常/骨髓增殖性疾病的患者、急性淋巴细胞白血病患者及异基因造血干细胞移植后的慢性髓系白血病(CML)患者,行骨髓细胞学检查并用FISH法检测BCR/ABL融合基因.结果表明:①46例在初诊时考虑为慢性骨髓增殖性疾病或骨髓增生异常/骨髓增殖性疾病的患者中,有22例患者诊断为CML,应用FISH法检测BCR/ABL融合基因均为阳性(100％),骨髓细胞学检查显示CML者占86.4％ (19/22);另24例患者诊断为非CML的慢性骨髓增殖性疾病及骨髓增生异常/骨髓增殖性疾病,FISH法检测BCR/ABL融合基因均为阴性(100％),而骨髓细胞学检查有3例支持CML诊断、1例支持MDS诊断;②7例急性淋巴细胞白血病患者,有3例FISH法检测BCR/ABL融合基因为阳性;③2例异基因造血干细胞移植后的CML患者,应用HSH法检测BCR/ ABL融合基因可检测到阳性细胞(分别为6.5％及1.2％).结论:FISH法检测BCR/ABL融合基因敏感、可靠,对慢性骨髓增殖性疾病及骨髓增生异常/骨髓增殖性疾病的诊断及鉴别诊断有重要价值;可明确Ph+急性淋巴细胞白血病患者的诊断;在CML患者行异基因造血干细胞移植后监测微小残留病灶方面也有重要意义.     

BCR/ABL双色双融-荧光原位杂交技术的信号模式探讨

目的研究BCR/ABL双色双融合探针荧光原位杂交技术(dual color dual fusion BCR/ABL probe-fluorescence in situ hy-bridization,DCDF-FISH)在白血病遗传学异常检测中的常见信号模式,探讨各种信号模式与染色体异常的关系。方法采用BCR/ABL的DCDF-FISH技术和染色体核型分析技术对初诊的40例慢性粒细胞白血病(chronic myelocytic leukemia,CML)、30例急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)以及10例其它(包括AML和骨髓增生性疾病)患者骨髓标本进行检测,比较DCDF-FISH各种信号模式与染色体关系。结果DCDF-FISH检测见11种信号模式:2R2G为正常细胞信号模式;2R3G、3R2G及3R3G为无BCR/ABL融合基因的异常信号模式;1R1G2F、1R1G1F、1R2G1F和2R1G1F模式的核型都为t(9;22);1R1G3F核型模式为t(9;22)伴有Ph+;2R2G1F为三条以上染色体易位t(9;22;V);1R2G2F为t(9;22)伴多一条22号染色体,这些信号模式的细胞内都存在着BCR/ABL融合基因。结论BCR/ABL DCDF-FISH检测时存在着多种信号模式,明确各种信号模式的意义,对临床疾病的诊断、预后有重要指导意义。     

荧光原位杂交和常规细胞遗传学在慢性粒细胞白血病研究中的应用

目的：应用荧光原位杂交（FISH）和染色体核型分析技术,探讨慢性粒细胞白血病（CML）细胞遗传学特点与临床预后的相关性。方法：采用骨髓细胞直接法和（或）短期培养法制备染色体标本,采用热变性姬姆萨显带技术（RHG）进行染色体核型分析。荧光染色体原位杂交技术检测40例CML患者的BCR／ABL融合基因。回顾分析282例CML的临床及细胞遗传学资料。结果：常规细胞遗传学（CC）分析表明,282例患者中268例Ph染色体阳性,占95．04％;14例Ph染色体阴性,占4．96％。其中250例Ph阳性细胞为100％,占90．32％。12例Ph阳性细胞为30％～99％,占4．48％,核型显示正常与Ph嵌合状态。6例核型为复杂变异异位,占2．24％。41倒除Ph染色体外,还出现额外染色体异常,占15．30％,分别为双Ph,＋8,＋22,-Y,i（17q）等,其中28例为加速或急变患者,占68．29％。应用FISH技术检测,BCR／ABL融合基因阳性34例（舍14例Ph染色体阴性中的8例）,占85％;BCR／ABL阴性6例,占15％。结论：在常规细胞遗传学分析的基础上,选用分子遗传学FISH技术可以明显提高染色体异常的检出率及准确率。细胞遗传学对于CML的正确诊断、指导临床治疗、判断预后具有重要价值。     

BCR/ABL融合基因少见型实时荧光PCR定量检测在慢性髓系白血病中的应用

目的:探讨实时荧光定量聚合酶链反应法(real-time PCR)检测BCR/ABL少见融合型别在BCR/ABL常见型别阴性慢性髓系白血病(CML)中的临床应用价值。方法:收集2012年7月至2015年12月期间FISH检测或染色体核型分析存在Ph染色体的CML病例2 490例,其中BCR/ABL P210,P190和P230定量检测均为阴性的病例12例,对该12例样本采用实时荧光PCR法定量检测b2a3(e13a3)、b3a3(e14a3)、e6a2、e8a2和e1a3等5种罕见BCR/ABL融合型别。结果:12例样本中e1a3、e8a2、b2a3、b3a3和e6a2型别阳性分别为1、2、5、4和0例,阳性率分别为8.33%、16.67%、41.67%、33.33%和0%;总阳性率为100%,以b2a3型和b3a3型为主。结论:实时荧光PCR法定量检测BCR/ABL少见融合型别,可用于临床疑似CML而BCR/ABL常见型别定量检测阴性病例的诊断及微小残留病变监测。     

慢性粒细胞白血病患者外周血BCR/ABL融合基因表达水平及意义

目的观察慢性粒细胞白血病(CML)初发和急变患者外周血BCR/ABL基因的表达变化。方法建立实时定量RT-PCR同时检测b2a2和b3a2两种融合基因亚型,检测25例CML初发和25例CML急变患者的外周血样本中BCR/ABL融合基因的表达。结果BCR/ABL及GAPDH标准曲线的相关系数均为1.0,灵敏度为2pgRNA,根据熔解温度的不同可以区分b2a2和b3a2两种融合基因亚型。CML急变患者外周血BCR/ABL融合基因的表达水平是初发患者的4.72倍。结论本法简便、敏感、特异,可以相对定量BCR/ABL融合基因表达水平,有助于反映白血病细胞负荷,评价疗效及判断预后。     

hOCT1与伊马替尼耐药关系的研究

慢性粒细胞白血病(CML)是一种起源于多能造血干细胞的恶性增殖性疾病。90%以上的CML患者存在Ph1染色体,细胞遗传学上表现为t(9,22)(q34;q11),即9号染色体上的ABL原癌基因易位到22号染色体上的断裂点簇集区BCR上,形成BCR/ABL融合基因。其所编码的P210、P190等蛋白具有超正常的酪     

Ph+急性单核细胞白血病伴复杂核型病例并文献复习

Ph染色体是9号染色体长臂上的ABL基因与22号染色体长臂末端的BCR基因发生融合,形成融合基因BCR/ABL,常发生在慢性粒细胞白血病(chronic myelocytic leukemia,CML)患者中,也可见于2%~5%的儿童急性淋巴细胞白血病和20%~35%的成人急性淋巴细胞白血病[1]。然而在急性髓系白血病(acute myelocytic leukemia,AML)中,出现Ph染色体阳性(Ph+)的非常少见,检出率仅为0.9%~3%[2]。Ph+AML     

荧光原位杂交及染色体核型分析在典型及非典型慢性粒细胞白血病的应用

慢性粒细胞白血病(CML)是一种起源于造血干细胞的恶性克隆性疾病,90%以上的CML可检测到Ph染色体或BCR/ABL融合基因,Ph染色体是其特征性的细胞遗传学改变。非典型慢性粒细胞白血病(aCML)属于骨髓增生异常/骨髓增生性疾病范畴,     

伴特异性染色体髓细胞白血病患者细胞形态学特征与临床表现

目的：分析206例初发髓细胞白血病，急性原始粒细胞白血病部分分化型(M2h)、急性4E0)和慢性粒细胞性白血病(CML)患者细胞形态学特征及临床表现。方法：采用细胞形态学(M)结合细胞遗传学(C)和分子生物学(M)检查方法检测患者骨髓标本。结果：细胞形态学特征：M2h为异常中幼粒细胞增生，M3为异常早幼粒细胞增生。M4E0为异常嗜酸性粒细胞增生，CML为粒系细胞增生。染色体及融合基因检测表明：M2h、M3、M4E0、CML分别与各自特异性染色体及融合基因t(8；21)(q22；q22)，AML1—ETO、t(15；17)(q22；q21)／PML—RARα、inv(16)(p13；q22)／CBFB—MYH11、t(9；22)(q34；q11)／BCR—ABL密：切相关。结论：①M2h、M3、M4E0；CML4种白血病患者不论在临床特点上，还是细胞形态学上都有各自一定的特征。②4种白血病分别与特定的染色体及融合基因具有一定的相关性。③特定的染色体和融合基因可作为白血病的标记物，对白血病的诊断、预后估计、监测治疗和微小残留白血病等都具有一定价值。     

BCR/ABL P230阳性的慢性粒细胞白血病特殊外周血检查结果分析

目的分析1例BCR/ABL P230阳性慢性粒细胞白血病(CML)患者临床及实验室检查结果,与慢性中性粒细胞白血病(CNL)相鉴别,以提高对二者认识及诊治水平。方法收集患者临床资料及实验室检查,包括血象、骨髓象、组织化学染色、染色体检查、融合基因检测等进行综合分析。结果血常规:无贫血,白细胞、血小板增多,多次白细胞分类:中性粒细胞均0.86。骨髓象:有核细胞增生极度活跃,粒系增生,以中晚期粒细胞为主,嗜酸粒细胞及嗜碱粒细胞易见;巨核细胞增生,血小板成堆多见。组织化学碱磷酶染色阴性。Ph染色体阳性,t(9;22)(q34;q11),BCR断裂点在μ区,与μ-BCR相应的有e19a2,其编码蛋白为P230。结论这种Ph+BCRμ区基因重排应诊断为CML,而不应诊断为CNL,无Ph染色体和BCR/ABL融合基因才是真正的CNL。     

慢性粒细胞白血病发病机理研究的进展

慢粒白血病(CML)最大的特点是存在特异性的Ph染色体即t(9;22)。该易位产生bcr-abl融合基因,其表达为一个具有高酪氨酸激酶活性的BCR/ABL融合蛋白,后者被认为是CML发病的分子基础。本文就ABL及BCR蛋白的正常结构和生物学活性以及CML细胞中ABL蛋白FTK的激活及其所介导的致癌信号的传导进行综述,以助进一步了解CML的发病机理。     

应用三色双融合探针检测BCR-ABL融合基因及ASS1基因缺失

目的:分析BCR/ABL/ASS1三色双融合探针在CML和B-ALL所出现的各种异常信号模式的意义,并探讨其在检测BCR/ABL融合基因及ASS1基因缺失中的应用价值。方法:分别对50例初诊CML患者和50例初诊B-ALL患者采用BCR/ABL/ASS1三色双融合探针进行荧光原位杂交(FISH)检测,同时对所有病例应用24 h短期培养法R显带后进行染色体核型分析。结果:50例CML患者中,49例Ph~+,余1例可见5个正常中期核型;通过FISH发现,所有患者(100%)均存在BCR/ABL融合基因,阳性信号特征分别为1R1G2B2F 39例(78%)、2R1G2B1F 2例(4%)、1R1G1B1F 6例(12%)、同时伴有1R1G2B2F和1R1G2B3F 2例(4%)、2R2G2B1F 1例(2%)。伴有ASS1基因缺失(1R1G1B1F)的6例患者染色体核型均为单纯t(9;22)易位,无其他异常。50例B-ALL患者中,Ph~+13例,数目畸变及非t(9;22)的结构畸变16例,正常核型20例,无分裂相1例;经FISH检出16例(32%)具有BCR/ABL融合基因,分别为1R1G2B2F 13例(26%)、同时伴有1R1G2B2F和1R1G2B3F 1例(2%)、2R1G1B1F 1例(2%)、1R1G3B3F 1例(2%),FISH额外检出的3例BCR/ABL融合基因阳性包括1例伴有ASS1基因缺失(2R1G1B1F)、1例经典型t(9;22)易位(1R1G2B2F)和1例BCR/ABL融合基因及ASS1基因拷贝数的增加(1R1G3B3F)。结论:应用三色双融合FISH探针检测BCR/ABL融合基因及ASS1基因缺失,具有简单、快速、灵敏、稳定的特点,能够检测多种形式的分子融合,可很好地避免D-FISH探针及ES-FISH探针因信号随机重叠导致的假阳性结果。该检测方法不但可以直接观察有无ASS1基因的缺失,而且还能提高初诊BCR/ABL融合基因阳性结果的可靠性及复诊监测微小残留病结果的准确性。     

一例der（22）缺失而存在der（9）的慢性粒细胞白血病的实验室分析

慢性粒细胞白血病（CML）是一种起源于多能造血干细胞的克隆性恶性血液病。其细胞遗传学特征是9号和22号染色体的相互易位，即Ph染色体。该易位导致BCR／ABL融合基因，后者在CML的发病中起着极其重要的作用。     

费城染色体阳性急性淋巴细胞白血病的靶向治疗

急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)是一种常合并细胞遗传学、分子生物学异常的恶性血液疾病,其中合并费城染色体(Ph)和(或)BCR/ABL(breakpoint cluster region/abelson)融合基因呈阳性的ALL,统称为Ph+ALL,预后极差.对其采用...     

BCR/ABL融合基因综合检测策略及临床应用注意事项

慢性髓细胞性白血病(chronic myeloid leukemia,CML)细胞有t(9;22)(q34;q11)易位形成的费城染色体(Ph chromosome)和BCR/ABL融合基因,它们在血液病研究中占有重要地位.     

P190-CML与P190-ALL分子生物学和细胞学差异研究

慢性粒细胞白血病(Chronic myelogenous leukemia,CML)主要编译融合蛋白2 10 ,关于P190的CML 分子生物学特点报道较少。本文关于P190 CML和P190 AL L 的分子生物学特点、累及的细胞其相关的血液形态特点、P190 CML 和P190 AL L 转归综述如下。1　分子生物学196 0年Nowell 和Hungerbord 在慢性粒细胞白血病(Chronic myelogenous leukemia,CML )细胞中发现染色体是t(9:2 2 ) (q34;q11)。2 2号染色体BCR基因区有3个不同的断裂点,M- bcr,m - bcr,u- bcr,分别与9号染色体ABL外显子2融合,形成不同的b2 a2 /b3a2 ,e1a2 ,e19a2 BCR-…     

Ph＋的慢性粒细胞白血病中衍生9号染色体部分序列缺失的研究进展

Ph染色体是慢性粒细胞白血病（CML）特有的细胞遗传学标志。该易位所导致的BCR／ABL融合基因在CML的发病中起关键作用。然而，近年来应用荧光原位杂交技术发现10％～15％的CML在衍生9号染色体易位断裂点附近有较大的序列缺失。该种缺失和Ph易位同时发生，并且和CML的不良预后密切相关，是一项有价值的预后指标。本文就此作一综述。     

Ph+的慢性粒细胞白血病中衍生9号染色体部分序列缺失的研究进展

Ph染色体是慢性粒细胞白血病(CML)特有的细胞遗传学标志。该易位所导致的BCR／ABL 融合基因在CML的发病中起关键作用。然而,近年来应用荧光原位杂交技术发现10％～15％的CML在衍生9号染色体易位断裂点附近有较大的序列缺失。该种缺失和Ph易位同时发生,并且和CML的不良预后密切相关,是一项有价值的预后指标。本文就此作一综述。     

荧光原位杂交技术检测BCR/ABL融合基因

目的 建立荧光原位杂交（FISH）技术，直接原位检测间期细胞中BCR／ABL融合基因，辅助临床诊断和治疗慢性粒细胞性白血病（CML）。方法 应用FISH技术检测15例CML患者骨髓培养细胞BCR／ABL融合基因，其中5例CML患者同时取骨髓直接涂片检测，5例CML患者同时取外周血浓缩单个核细胞直接涂片检测。以5例非CML患者骨髓培养细胞为阴性对照。结果 15例患者骨髓标本成功培养10例，染色体分析检测到Ph1染色体8例。15例患者骨髓培养细胞FISH检测BCR／ABL融合基因阳性14例。5例CML患者同时做骨髓直接涂片FISH检测，结果阳性4例。5例CML患者同时做血标本浓缩单个核细胞FISH检测阳性2例。5例非CML患者FISH结果均阴性。结论 FISH技术能直接原位检测间期细胞中BCR／ABL融合基因，且快速、可靠、成功率高，是诊断和监测CML的一项有效新技术。     

荧光原位杂交技术检测BCR/ABL融合基因

目的建立荧光原位杂交(FISH)技术,直接原位检测间期细胞中BCR/ABL融合基因,辅助临床诊断和治疗慢性粒细胞性白血病(CML)。方法应用FISH技术检测15例CML患者骨髓培养细胞BCR/ABL融合基因,其中5例CML患者同时取骨髓直接涂片检测,5例CML患者同时取外周血浓缩单个核细胞直接涂片检测。以5例非CML患者骨髓培养细胞为阴性对照。结果15例患者骨髓标本成功培养10例,染色体分析检测到Ph1染色体8例。15例患者骨髓培养细胞FISH检测BCR/ABL融合基因阳性14例。5例CML患者同时做骨髓直接涂片FISH检测,结果阳性4例。5例CML患者同时做血标本浓缩单个核细胞FISH检测阳性2例。5例非CML患者FISH结果均阴性。结论FISH技术能直接原位检测间期细胞中BCR/ABL融合基因,且快速、可靠、成功率高,是诊断和监测CML的一项有效新技术。