人参总皂苷多克隆抗体的制备和鉴定

目的进行人参总皂苷(ginseng total saponins,GTS)多克隆抗体的制备,并用不同方法进行验证。方法首先在D101大孔吸附树脂纯化的基础上,采用阴阳离子交换树脂的方法进行人参皂苷高纯提取物的制备,香草醛-硫酸比色法估测人参总皂苷的含量;然后通过过碘酸钠法构建人参总皂苷和牛血清白蛋白(BSA)的偶联物作为抗原制备得到人参总皂苷多抗;使用Protein A/G琼脂糖纯化和抗原柱双纯化抗体;最后用免疫细胞化学和生物膜层干涉(biological membrane layer interference,BLI)技术验证抗体。结果得到高纯度的人参总皂苷;SDS-PAGE表明抗原GTS-BSA偶联物制备成功;ELISA法检测受试组效价为(29.52±4.31),亲和树脂纯化后得到较纯多抗;生物膜层干涉技术表明人参总皂苷多抗与人参总皂苷、人参皂苷Re、Rg1、Rh1、Rh2、原人参二醇、F1、化合物K、原人参三醇的亲和力分别为3.99×10~(-7)、4.69×10~(-9)、2.59×10~(-9)、2.40×10~(-6)、1.62×10~(-4)、2.64×10~(-7)、1.66×10~(-10)、1.08×10~(-7)和1.32×10~(-6);免疫细胞化学(ICC)从细胞学水平上验证了抗体的有效性。结论人参总皂苷多抗的效价和特异性较高,可为下一步研究人参总皂苷在脑中的分布做好铺垫。     

大黄酸人工抗原合成及免疫原性鉴定

大黄药理作用广泛,是临床常用中药材之一.大黄酸是其主要活性成分,大黄酸的含量是大黄质量控制的主要指标之一.目前对大黄酸的检测主要是通过仪器分析手段,如高效液相色谱法,但是仪器分析通常操作繁琐、耗时长、通量小且仪器设备昂贵.与之相比,酶联免疫检测法(ELISA)则具有灵敏度高、操作简单、设备仪器需求少、通量高等优点,是实现中药材快速检测的有效手段之一.该研究制备大黄酸(rhein)人工抗原及血清,为之后大黄酸单克隆抗体制备及建立酶联免疫吸附检测方法提供基础.通过碳二亚胺法活化大黄酸,分别与牛血清白蛋白(BSA)及鸡卵清白蛋白(OVA)偶联制备免疫抗原及包被抗原;通过紫外分光光度法检测人工抗原的半抗原与载体蛋白偶联比,分别为4.0∶1(rhein-BSA)和2.6∶1 (rhein-OVA).用免疫原免疫Bal b/c雌性小鼠,制备抗血清,通过酶联免疫吸附法(ELISA)检测抗血清效价及特异性.结果表明血清效价均高于8 000,特异性强,免疫原性良好.     

大黄酸PEG-PCL-PEI纳米粒的制备及体外评价

合成聚乙二醇-聚己内酯-聚乙烯亚胺(PEG-PCL-PEI)三嵌段聚合物载体材料,制备包载大黄酸(RH)的PEGPCL-PEI纳米粒(PPP-RH-NPS),并评价其理化性质和体外生物学特性。通过开环聚合和麦克尔加成反应合成得到PEG-PCL-PEI聚合物,相对分子质量为9.5×10~3,临界胶束浓度为0.723 nmol·L~(-1)。包载RH制备得到PPP-RH-NPS,外观浅黄、乳光明显,透射电镜观察纳米粒分散均匀圆整无团聚,粒径为(118.3±3.6)nm,PDI为(0.19±0.08),Zeta电位为(6.3±1.5)mV,包封率为(93.64±5.28)%,载药量为(8.57±0.53)%。透析法考察PPP-RH-NPS体外释药特征,48 h内累积释放率为75.92%,释药曲线符合Higuchi模型方程:Q=0.121 6t~(1/2)+0.069 5(R~2=0.887 4),呈缓释特性。选用兔红细胞考察其溶血率,MTT法评价其对HK-2细胞的生物安全性,在0~0.05 mmol·L~(-1)不会引起红细胞溶血和细胞毒性。流式细胞仪考察其摄取效率,PPP-RH-NPS可被细胞迅速内吞,摄取效率高,30 min内摄取完全,经激光共聚焦显微镜观察,PPP-RH-NPS能够从溶酶体进入细胞质,具有溶酶体逃逸特性。因此,该研究成功合成PEG-PCLPEI聚合物和制备得到PPP-RH-NPS,粒径分布均匀,包封率及载药量较高,摄取迅速,具有缓释特征、溶酶体逃逸特性、优良的生物安全性,是一种良好研究前景的新型纳米制剂。     

大黄与土大黄的药学鉴定

大黄为蓼科植物掌叶大黄、唐古特大黄或药用大黄的干燥根及根茎[1]。前二种习称＂北大黄＂;后者习称＂南大黄＂。掌叶大黄主产陕西、青海、甘肃、四川,唐古特大黄主产青海、甘肃、、四川、西藏,药用大黄主产四川、云南、湖北。土大黄为同属波叶组植物藏边大黄、河套大黄（波叶大黄）、华北大黄、天山大黄等的根和根型[2]。主产于河北、山东、内蒙古等地。两者来源于同属植物,植物形态又相似,民间常把土大黄当作大黄用,为了确保临床用药安全、有效,现将二者生药学特征描述如下,供大家参考。     

大黄酸药理作用的研究进展

大黄酸为蒽醌衍生物的单体,主要分布于蓼科植物中,具有抗肿瘤、抗炎、抗菌及调节肾功能等作用。鉴于其较广泛的药理作用及低毒性、低成本等特点,大黄酸有望得到进一步开发。本文就近年来大黄酸的研究进展进行了较全面的综述。     

毛脉酸模根中大黄酚,大黄素的分离鉴定

毛脉酸模根中大黄酚、大黄素的分离鉴定黑龙江中医学院王振月，李延冰，匡海学（１５００４０）宝清制药厂宁洪彬穆棱市中医院许少华毛脉酸模ＲｕｍｅｘｇｎｅｌｉｎｉＴｕｒｃｚ．是蓼科酸模属植物，民间药用根，对淋病、上呼吸道感染、癣病和疮毒有确切疗效。该植物广泛...     

重楼皂苷Ⅲ人工抗原的合成、鉴定及抗血清的制备

采用高碘酸钠氧化法分别合成重楼皂苷Ⅲ的免疫抗原(POLⅢ-BSA)和包被抗原(POLⅢ-OVA)。通过薄层色谱法和紫外光谱鉴定人工抗原偶联成功,并用POLⅢ-BSA免疫小鼠,使小鼠体内产生抗重楼皂苷Ⅲ(polyphylinⅢ,POLⅢ)的抗体,效价1∶16 000以上,线性范围为1 ng·L-1~100μg·L-1,并测定了POLⅢ与重楼皂苷Ⅰ(POLⅠ)、重楼皂苷Ⅱ(POLⅡ)、重楼皂苷Ⅶ(POLⅦ)的交叉反应。实验成功合成了POLⅢ的人工抗原,为制备POLⅢ的单克隆抗体以及建立快速、便捷的免疫分析方法奠定基础。     

大黄酸／大黄素抗多药耐药肿瘤细胞研究

肿瘤细胞多药耐药是导致肿瘤化疗失败的主要原因之一，也是白血病、肿瘤缓解后复发的重要根源。如何加强对耐药肿瘤细胞的杀灭是目前肿瘤研究领域的重要课题。大黄酸、大黄素与阿霉素、柔红霉素等抗癌药均属于蒽醌类化合物。我们以对阿霉素、柔红霉素已经产生抗药性的三株...     

载紫杉醇的羧甲基壳聚糖-大黄酸聚合物胶束制备工艺

目的优化载紫杉醇(PTX)的羧甲基壳聚糖-大黄酸聚合物胶束制备工艺。方法以载药量、包封率、粒径为考察指标,对载药和透析方法进行单因素考察,确定PTX/CR聚合物胶束的最佳制备工艺。结果最佳载药方法为透析法,最佳载药工艺以乙醇(30 mg/m L)作为PTX溶剂,载体CR浓度为7 mg/m L,药载比1∶1.4。结论 CR聚合物通过物理包载PTX形成载药量和包封率较好、粒径小的载药聚合物胶束。     

大黄酸纳米混悬剂的制备及其体内药动学研究

目的制备大黄酸纳米混悬剂,并考察其体内药动学。方法高压均质法制备纳米混悬剂。在单因素试验基础上,以PVP K30用量、均质压力、均质次数为影响因素,粒径为评价指标,正交试验优化制备工艺,检测纳米混悬剂形态、载药量、粒径、Zeta电位、体外释药。大鼠随机分为2组,分别灌胃给予大黄酸及其纳米混悬剂的0.5%CMC-Na混悬液(50 mg/kg),于0.083、0.167、0.25、0.5、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、12.0 h采血,HPLC法测定大黄酸血药浓度,计算主要药动学参数。结果最佳条件为PVP K30用量75 mg,均质压力100 MPa,均质次数15次,所得纳米混悬剂中纳米粒呈球形,分布均匀,无粘连,平均载药量为(32.14±0.92)%,Zeta电位为(-31.90±1.34)mV,粒径为(170.86±3.07)nm,40 min内累积溶出度为95.73%。纳米混悬剂t_1/2、C_max、AUC_0～t、AUC_0～∞高于原料药(P<0.01),相对生物利用度提高至...     

大黄酸的药理作用研究述略

大黄酸 (Rhein ,4.5 -dihydroxyanthraquinone ,简称RH)属单蒽核类 1,8-二羟基蒽醌衍生物 ,是从大黄、何首乌、虎杖等多种传统中药分离提纯出的有效成分。RH的结构式 ,RH含有二个羟基和一个羧基 ,极性较强 ,具有电化学氧化还原性质。大黄酸 (RH)为蒽醌衍生物的单体 ,主要分布于蓼科植物中 ,是大黄、何首乌、虎杖等多种中药的主要有效成份之一。近年来 ,研究发现其具有保肝和抗肝脏纤维化、防治糖尿病肾病 (DN)、抗肿瘤等作用 ,鉴于其较广泛的药理作用 ,具有临床药用价值 ,该文将对RH药理学的研究进行综述     

大黄酸抗肿瘤机制的研究进展

大黄酸是大黄、何首乌、芦荟等多种中药的主要成分之一,除了具有抗菌、抗炎、利尿、降糖调脂等药理活性外,还可通过抑制肿瘤细胞增殖、促进细胞凋亡、抑制细胞侵袭转移、联合放化疗药物减毒增效等多种途径发挥抗肿瘤作用。本文就近年来大黄酸抗肿瘤机制进行综述,以期为该成分相关基础研究及临床用药提供参考。     

鲁斯可皂苷元多克隆抗体的制备

目的：通过人工抗原的构建,制备针对鲁斯可皂苷元（ruscogenin,RUS）的特异性抗体,为建立鲁斯可皂苷元的免疫生物分析方法奠定基础。方法：将鲁斯可皂苷元衍生为带有两个-COOH臂的双丁二酸单酯衍生物（succinylated ruscogenin,RUS-2HS）并采用活泼酯法使其与牛血清白蛋白（BSA）相结合,成为全抗原（RUS-2HS-BSA）免疫新西兰兔,制备抗鲁斯可皂苷元的多克隆抗体,并用酶联免疫吸附测试对抗血清进行鉴定。以同样的蛋白质偶联方法制备鲁斯可皂苷元与卵清蛋白的结合物（RUS-2HS-OVA）作为包被抗原。结果：抗血清的效价为1∶25600,理想的包被抗原浓度为1.563μg·mL^-1,相应抗血清工作浓度为1∶8000。结论：运用活泼酯法可制备鲁斯可皂苷元的人工抗原,进一步免疫可获得抗鲁斯可皂苷元的特异性抗血清。     

124 大黄酸药理作用的研究进展

大黄酸为蒽醌衍生物的单体，主要分布于蓼科植物中，具有抗肿瘤、抗炎、抗菌及调节肾功能等作用。鉴于其较广泛的药理作用及低毒性、低成本等特点，大黄酸有望得到进一步开发。本文就近年来大黄酸的研究进展进行了较全面的综述。     

大黄酸的药理作用研究述略

大黄酸(Rhein，4.5-dihydroxyanthraquinone．简称RH)属单蒽核类1.8-二羟基蒽醌衍生物，是从大黄、何首乌、虎杖等多种传统中药分离提纯出的有效成分。RH的结构式．RH含有二个羟基和一个羧基，极性较强，具有电化学氧化还原性质。大黄酸(RH)为蒽醌衍生物的单体。主要分布于琴科植物中。是大黄、何首乌、虎杖等多种中药的主要有效成份之一。近年来，研究发现其具有保肝和抗肝脏纤维化、防治糖尿病肾病(DN)、抗肿瘤等作用．鉴于其较广泛的药理作用，具有临床药用价值，该文将对RH药理学的研究进行综述。     

大黄游离蒽醌的制备与纯化

从中药大黄中提取总蒽醌（结合和游离２类）,经水解后用水化学试剂或大孔树脂制备总游离蒽醌（含大黄素、大黄酸、芦荟大黄素、大黄酚和大黄素甲醚）,进一步纯化得大黄酸和大黄素。     

甘肃省大黄病害调查与病原鉴定

目的:通过调查甘肃省大黄主产区大黄病害种类及其特性,为病害综合防治提供理论依据.方法:田间调查和室内分离鉴定相结合.结果和讨论:共发现真菌性病害8种,分别为叶黑粉病Thecaphora schwarzmaniana、斑枯病Septoria sp.、锈病Puccinia rhei-palmati、轮纹病Ascochyta rhei、叶点霉灰斑病Phyllostica rhei、白粉病Erysiphe polygoni、灰霉病Botrytis sp.、根腐病Fusarium oxysporiums、1种病毒病(毒源待定).黑粉病发病率为:14%～26%,为害严重,急待解决.白粉病、灰霉病为国内首次报道.     

HPLC测定清火片中大黄酸大黄素大黄酚的含量

目的:建立一种简便的测定清火片中大黄酸、大黄素、大黄酚的含量测定方法.方法:色谱柱为大连依利特C18柱(ODS 25cm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-0,5%磷酸(20:80),检测波长254nm,流速1mL·min-1,大黄素保留时间为14.998,大黄酸保留时间为21.607,大黄酚的保留时间为8.635.结果:大黄素进样量在0.056～0.673μg时呈良好的线形关系(r=0.998);大黄酸进样量为0.032～0.64μg呈良好线性关系(r=0.9993);大黄酚进样量在0.064～0.768μg呈良好线性关系(r=0.9996);加样回收率分别为98.2%(大黄素),98.5%(大黄酸),98.3%(大黄酚).结论:本法操作简便,分离效果理想.     

大黄的真伪鉴定探要

大黄始载于《神农本草经》。历代本草均有记载。素有将军、川军等称。商品分北大黄和南大黄二种：其中以北大黄为主。大黄为家科植物掌叶大黄Rheumpalmatuml,唐古特大黄R．tangutlcumMaxim．exBal．药用大黄R．officinaleBaill．的干燥根茎及根。前两种习称北大黄,后一种习称南大黄。掌叶大黄主产于甘肃、青海、西藏及四Jll等地。野生或栽培。药用大黄主产于四川、贵州、云南、湖北等省。栽培或野生。产虽较少。三性状鉴别呈类圆柱形、圆锥形或块片状,长3～17cm、直径3～10cm。表面黄棕色,可见类白色网状纹理。或有部分拣褐色栓皮残…