高乌头炮制前后毒性部位与镇痛抗炎药效部位筛选研究

目的:筛选高乌头炮制前后毒性及药效部位,探讨毒性与药效的关系,为高乌头减毒存效合理炮制提供科学依据。方法:采用小鼠急性毒性实验比较不同溶剂萃取部分的毒性,筛选生、制高乌头的毒性部位,以热板法、扭体法及二甲苯致鼠耳肿胀实验考察不同剂量生、制高乌头毒性部分对小鼠的镇痛抗炎作用;筛选药效部位,探究毒性部位是否为药效部位。结果:生、制高乌头均为三氯甲烷部分的毒性最强,水提及正丁醇部分次之,生品LD50分别为0.09、1.81、24.41 g/kg,制品LD50分别为0.11、2.42、0.87 g/kg;而石油醚、乙酸乙酯及乙醇部分毒性均最小,生品最大给药量分别为2.69、3.11、28.38 g/kg,制品最大给药量分别为13.12、1.98、20.32 g/kg。给药后120 min、1.5、4.5 mg/kg的生品三氯甲烷部分与4.5 mg/kg的制品三氯甲烷部分均能提高小鼠热板痛阈值,且呈量效关系,镇痛作用优于1.6 mg/kg氢溴酸高乌甲素组。注射冰醋酸15~30 min,1.5、4.5 mg/kg的生、制品三氯甲烷部分均能有效抑制冰醋酸所致小鼠的扭体次数,且呈量效关系,抑制率略低于1.6 mg/kg氢溴酸高乌甲素组。在二甲苯致鼠耳肿胀实验中,1.5、4.5 mg/kg的生、制高乌头三氯甲烷部分均能有效缓解小鼠耳肿胀度,且呈量效关系,肿胀抑制率略低于10.0 mg/kg消炎痛组。结论:三氯甲烷部分既是生、制高乌头的毒性部位,又是其镇痛抗炎的主要药效部位,且呈量效关系,推测其镇痛抗炎活性与毒性存在一定的关联。     

蒙药紫花高乌头不同溶剂萃取部分对慢性支气管炎大鼠的治疗作用

目的研究蒙药紫花高乌头不同溶剂萃取部分对慢性支气管炎(CB)大鼠的治疗作用,并初步阐释其治疗作用机制。方法采用系统溶剂法对蒙药紫花高乌头80%乙醇提取物进行萃取,分别得到石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇及乙醇萃取部分;采用脂多糖(LPS)气管滴入(200μg·200μL-1)联合SO2吸入法建立CB大鼠模型;蒙药紫花高乌头石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇及乙醇萃取部分分别口服灌胃给药,并用ELSA法测定大鼠肺组织匀浆中肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素(IL-4、IL-10)含量变化。结果建立了CB大鼠模型,得到了蒙药紫花高乌头不同溶剂萃取部分;与模型组相比,蒙药紫花高乌头三氯甲烷、乙酸乙酯及正丁醇萃取部分可以改善CB大鼠的反应迟钝、毛色枯槁、进食减少及体质量不增等情况;与空白组相比,模型组大鼠肺组织匀浆中TNF-α含量显著升高(P 0.05或P0.01),IL-4、IL-10含量显著降低(P 0.05或P 0.01);与模型组相比,蒙药紫花高乌头三氯甲烷、乙酸乙酯及正丁醇萃取部分高低剂量组大鼠肺组织匀浆中TNF-α含量显著降低(P 0.05或P 0.01),IL-4、IL-10含量显著增高(P 0.05或P 0.01)与阳性组相比,蒙药紫花高乌头三氯甲烷、乙酸乙酯及正丁醇萃取部分高低剂量组大鼠肺组织匀浆中TNF-α、IL-4及IL-10含量差异无统计学意义(P 0.05)。结论蒙药紫花高乌头对CB大鼠治疗作用的活性部位为三氯甲烷、乙酸乙酯及正丁醇萃取部分,其中三氯甲烷萃取部分活性最强,石油醚与乙醇萃取部分活性最弱。蒙药紫花高乌头可以抑制炎症因子的释放,增强抗炎细胞因子活性,调节细胞因子间失衡状态,从而对CB大鼠产生治疗作用。     

高乌头炮制品不同溶剂萃取部分HPLC多波长指纹图谱研究

目的将均谱法用于高乌头炮制品不同溶剂萃取部分HPLC指纹图谱研究,为全面评价高乌头炮制品的质量提供参考。方法采用系统溶剂法对不同产区高乌头炮制品95%乙醇提取物进行萃取,分别得到石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇、乙醇和水6个不同溶剂萃取部分;采用HPLC于波长235、254、280、290、308 nm检测,将5个波长HPLC图谱的信号加和后求平均值作为该萃取部分的均谱;采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》对10批高乌头炮制品不同溶剂萃取部分HPLC均谱进行共有峰确认及相似度评价。结果建立了高乌头炮制品不同溶剂萃取部分的多波长指纹图谱(MWCF),高乌头炮制品石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇、乙醇及水提部分MWCF分别确定了26、35、22、17、15、25个共有峰,指认了2个指纹峰(高乌甲素和冉乌头碱)。不同产区高乌头炮制品同一极性部位MWCF相似度较高,不同极性部位的MWCF有明显差异,充分表征了有效成分在各萃取部分的分布特征。结论本研究建立的MWCF可全面反映高乌头炮制品不同溶剂萃取部分的化学成分分布,可为高乌头炮制品的整体质量评价提供参考。     

高乌头不同溶剂萃取部位HPLC多波长指纹图谱研究

目的建立一种评价多波长色谱指纹图谱的新方法——均谱法(MFM),用于高乌头药材不同极性部位HPLC指纹图谱研究,为全面评价高乌头药材的质量提供参考。方法采用系统溶剂法对不同产地高乌头药材95%乙醇提取物进行萃取,依次得到石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇、乙醇和水6个不同的溶剂萃取部位;采用HPLC法分别于235,254,280,290,308 nm紫外波长下检测,将每个萃取部位5个波长下HPLC图谱的信号加和后求平均值作为该部位的均谱;采用中药指纹图谱相似度评价系统(2012版)对10批高乌头药材不同溶剂萃取部位HPLC均谱进行共有峰确认及相似度评价。结果建立了高乌头药材不同溶剂萃取部位的多波长指纹图谱(MWCF),高乌头石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇、乙醇及水提部位MWCF分别确定了36,26,34,24,16,19个共有峰,均指认了2个指纹峰(高乌甲素和冉乌头碱)。不同产地高乌头药材同一极性部位MWCF相似度较高,说明10批不同产地高乌头药材基源一致,且提示提取和萃取工艺相对稳定;不同极性部位之间化学成分有明显差异,共有峰数目从多到少,高乌甲素和冉乌头碱从有逐渐变到无,充分表征了有效成分在各个萃取部位的分布特征。结论所建的均谱法能够使高乌头药材化学指纹信息最大化,能够最大限度地表征高乌头药材指纹图谱特征,不同溶剂萃取部位MWCF可以全面反映高乌头药材的化学成分分布,为高乌头药材的整体质量评价提供参考。     

松潘乌头总碱半数致死量的实验研究

目的:研究松潘乌头总碱对小鼠的半数致死量(LD50),为药理实验和临床安全合理用药提供依据。方法:将松潘乌头粉碎后,用碳酸钠溶液浸润,经乙醇超声提取,硫酸溶解,氨水调p H,用乙醚:氯仿(3:1)混合溶液萃取,得松潘乌头总碱。根据预实验结果将60只小鼠分为6组,按照200、160、128、102.4、81.9、65.5 mg/kg的剂量一次性灌服小鼠后观察24小时内情况。记录小鼠中毒症状及死亡情况,观察松潘乌头总碱的急性毒性。结果:松潘乌头总碱经口服给药小鼠的LD50为119.78 mg/kg,其95%可信区间为103.86~139.28mg/kg。结论:松潘乌头总碱有中等毒性,其半数致死量为119.78 mg/kg。     

耳草提取物的抑菌作用及急性毒性研究

[目的]研究耳草提取物的抑菌作用及急性毒性。[方法]运用琼脂平板结合试管二倍稀释法观察耳草提取物(石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、甲醇、乙醇、水提取物)对铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、沙门菌等的抑制作用;急性毒性试验采用小鼠灌胃法,测定耳草水提取物、乙醇提取物的最大给药量。[结果]体外抑菌试验表明,耳草水、乙醇提取物对金黄色葡萄球菌、沙门菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌均有不同程度的抑制作用;系统溶剂提取物中,乙酸乙酯、正丁醇、甲醇提取物具有抑制大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、沙门菌的作用,而氯仿、石油醚提取物抑菌作用不明显。急性毒性试验表明耳草水提取物、乙醇提取物的最大给药量为252.4 g/kg、336.6 g/kg。[结论]耳草提取物具有抑菌作用,水提取物及乙醇提取物的急性毒性很小。     

乌头碱经皮给药的急性毒性及相关的镇痛作用研究

目的观察乌头碱经皮给药的急性毒性及累积给药对小鼠镇痛作用。方法采用小鼠对耳涂抹乌头碱乙醇溶液以观察乌头碱单次和累积外用对皮肤的急性毒性;采用小鼠醋酸扭体法试验观察乌头碱累积外用后的镇痛效应。结果乌头碱单次给药半数致死量LD50为21.3 mg/kg,LD50的95%可信限为19.6～23.2 mg/kg,但是随着用药次数的增加,毒性反应出现"反转现象",作用强度随着用药量的增加而加强,并出现"平台期"。结论乌头碱外用有毒性,但累积外用可出现良好的镇痛作用。     

了哥王提取物及其不同提取部位的急性毒性研究

目的观察了哥王提取物及其不同提取部位的急性毒性大小。方法小鼠一次灌胃给予了哥王提取物及其不同提取部位后,观察14 d内各受试样品小鼠的反应情况及死亡情况。记录各样品不同剂量组小鼠死亡只数,用Bliss法计算出该样品的半数致死量(LD50);无小鼠死亡的样品,则测定其最大给药量。结果了哥王提取物的LD50为3.276 g/kg;了哥王石油醚部位的LD50为1.691 g/kg;了哥王醋酸乙酯部位的LD50为1.948 g/kg;了哥王正丁醇部位的最大给药量为24.364 g/kg;了哥王水部位的最大给药量为:32.788 g/kg。结论了哥王提取物的毒性随脂溶性的增大而增大,可以推断其毒性成分主要为脂溶性成分。     

波叶青牛胆提取物对糖尿病肾病小鼠药效及急性毒性

目的研究波叶青牛胆的乙醇提取物和不同极性溶剂萃取部位对Ⅱ型糖尿病肾病小鼠的疗效以及急性毒性。方法 100只采用高脂饮食联合小剂量链脲佐菌素(STZ)复制Ⅱ型糖尿病肾病成功的ICR小鼠分为模型组,乙醇提取物低、中、高剂量组,三氯甲烷部位组,乙酸乙酯部位组,正丁醇部位组,水溶性部位组,以及卡托普利组和消渴丸阳性药组,并设正常对照组。给药6周末测定各组小鼠血清中总胆固醇、尿素氮、肌酐、胱抑素C水平,PAS染色观察肾脏病理变化。结果乙醇提取物的LD50为4 887 mg/kg。与模型组相比,乙醇提取物高剂量组和正丁醇部位组能显著改善糖尿病肾病小鼠各血清生化指标水平,缓解肾小球肥大,肾小球基底膜增厚及系膜扩张等病理改变。结论波叶青牛胆属于低毒类中草药,在其安全剂量范围内可以降低糖尿病肾病小鼠的血糖、总胆固醇,改善肾功能状态。     

细辛不同提取部位镇痛作用及毒性的比较研究

目的 探讨细辛不同提取部位的镇痛和急性毒性作用.方法 采用系统溶剂法提取分离得到4个部位,通过冰醋酸化学致痛和热刺激复制小鼠疼痛模型,对细辛的石油醚提取物、醋酸乙酯提取物、正丁醇提取物及水提取物的镇痛作用进行了研究,且采用灌胃法观察其各提取部位急性毒性反应1周,并观察细辛醇提液不同极性部位的小鼠半数致死量(LD50),采用Bliss法测定LD50.结果 细辛醋酸乙酯提取物0.020 7 g/kg剂量能显著抑制冰醋酸所致小鼠扭体反应和热板刺激, 测得石油醚部位LD50为(1.021 5±0.148 5)g/kg, 醋酸乙酯部位LD50为(0.124 5±0.019 5)g/kg,正丁醇和水相部位未能测出LD50,按最大耐受量方法测定,测得0.56 g的正丁醇部位用药量是20 g体重小鼠的最大耐受量, 0.8 g的水相部位用药量是20 g小鼠的最大耐受量.结论 细辛醋酸乙酯提取物具有显著镇痛作用,同时也有较强的急性毒性作用;提示细辛的主要有效成分可能在醋酸乙酯提取物部分,其毒性成分和有效物质可能为同一类物质.     

新型药物载体七元瓜环包合物的安全性实验研究

目的:研究喜树碱-七元瓜环固体包合物的溶血反应、过敏反应和急性毒性反应,为其临床用药的安全性提供科学依据。方法:按照化学药物过敏性、溶血性、急性毒性研究技术指导原则的要求,对喜树碱-七元瓜环固体包合物进行了溶血反应、过敏反应和急性毒性实验研究,并用已知喜树碱LD50(26.9 mg/kg),通过预实验得到该包合物对小鼠的Dm=104.60 mg/kg,Dn=26.9 mg/kg,并按相邻两剂量比值k=0.75,分为5分组,剂量分别为:104.60 mg/kg,78.45mg/kg,58.84 mg/kg,44.13 mg/kg,33.10 mg/kg。每组小鼠16只,从而求出该包合物的LD50及LD50的95%可信限。结果:动物实验表明,喜树碱-七元瓜环固体包合物无溶血作用、无致敏作用,在急性毒性实验的14 d内,给药量104.60mg/kg的小鼠死亡16只,给药量78.45 mg/kg的小鼠死亡12只,给药量58.84 mg/kg的小鼠死亡8只,给药量44.13 mg/kg的小鼠死亡4只,给药量33.10 mg/kg的小鼠死亡4只,死亡率随给药剂量浓度的升高而升高,小鼠的LD50经计算为53.39 mg/kg,LD50的可信限为43.65~52.48 mg/kg。结论:喜树碱-七元瓜环固体包合物在0.3 mg/m L浓度时,无溶血作用、无致敏作用。该包合物的LD50为53.39 mg/kg,大于喜树碱的LD50,说明喜树碱通过瓜环包合以后,降低了毒副作用,致使七元瓜环喜树碱包合物的LD50增大了。     

川楝子不同提取部位药效及毒性的比较研究

目的:探讨川楝子不同提取部位的部分药效和急性毒性作用。方法:采用冰乙酸或甲醛致痛复制小鼠疼痛模型,角叉菜胶致足肿胀和二甲苯致耳肿胀等炎症模型,对川楝子的乙酸乙酯提取物、石油醚提取物、80%乙醇提取物及水提取物的镇痛和抗炎等作用进行了研究。结果:川楝子乙酸乙酯提取物40 g/kg剂量能显著抑制冰乙酸所致小鼠扭体反应和甲醛所致鼠足疼痛反应,减轻二甲苯诱导的小鼠耳廓肿胀度,并可显著增加小鼠的睾丸重量,减轻其体重;川楝子乙醇提取物20 g/kg剂量组能显著降低角叉菜所致诱导的小鼠足肿胀程度及二甲苯诱导的耳廓肿胀度;川楝子石油醚提取物对甲醛所致的疼痛反应有明显的抑制作用,同时还可显著增加小鼠睾丸和肾上腺指数;川楝子水提物无明显镇痛和抗炎作用。测得小鼠灌服川楝子乙酸乙酯提取物的LD50为82.85 g/kg。未测出其它溶媒提取物对小鼠的LD50,测得小鼠灌胃川楝子石油醚提取物、酒精提取物及水提物的最大耐受量分别为:133.2 g/kg,122.0 g/kg,52.0 g/kg。在此剂量下各组动物均未出现明显异常。结论:川楝子乙酸乙酯提取物具有显著的抗炎和镇痛作用,同时也有较强的急性毒性作用;提示川楝子的有效成分可能在乙酸乙酯提取物部分,其毒性成分和有效物质可能为同一类物质。     

北细辛、华细辛、汉城细辛的急性毒性评价

目的:考察2010版中国药典中三种细辛散剂、水煎剂、挥发油的小鼠急性毒性,为临床安全合理用药提供急性毒理学依据。方法:采用Bliss法、最大给药量测定法。结果:北细辛:散剂LD50为4.8g/kg、水煎剂最大给药量为240g/kg、挥发油LD50为2.53mL/kg;华细辛:散剂LD50为7.5g/kg、水煎剂LD50为100.8g/kg、挥发油LD50为3.13mL/kg;汉城细辛:散剂最大给药量为31.2g/kg、水煎剂LD50为48.7g/kg、挥发油LD50为1.92mL/kg。结论:药典规定的三种细辛的不同制备方法和药用部位的小鼠急性毒性不同。     

长柱金丝桃对大鼠佐剂性关节炎治疗作用活性部位筛选研究

目的通过佐剂性关节炎大鼠模型,筛选出长柱金丝桃抗类风湿性关节炎的活性部位。方法制备长柱金丝桃石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水部位提取物,参照经典急性毒性实验方法确定长柱金丝桃不同提取部位的急性毒性;将佐剂性关节炎模型大鼠,随机分成7组:正常对照组、模型对照组、阳性对照组(雷公藤多苷)、石油醚部位组、乙酸乙酯部位组、正丁醇部位组、水部位部位组,每组8只。分组给药24 d,观察测定足肿胀度、关节炎评分指数、免疫器官(胸腺、脾脏)指数的变化。结果长柱金丝桃乙酸乙酯部位、正丁醇部位半数致死量(LD_(50))分别为22.13 g·kg~(-1)、31.37 g·kg~(-1);水部位、石油醚部位最大给药量(MLD)分别为58.66 g·kg~(-1)、60.12 g·kg~(-1);与模型组相比,乙酸乙酯部位给药组大鼠足肿胀度及关节肿胀指数显著降低(P0.01);胸腺指数、脾脏指数均显著升高(P0.01)。结论长柱金丝桃对大鼠佐剂性关节炎治疗作用活性部位为乙酸乙酯提取部位。     

了哥王抗肿瘤活性部位筛选

目的:研究了哥王95%、75%、50%乙醇提取物、水提物及95%乙醇提取物的石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取部位对肿瘤细胞的增殖抑制作用,确定了哥王抗肿瘤活性部位。方法:采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法考察了哥王不同提取物及95%乙醇提取物的不同溶剂萃取部位对Hela、SGC-7901、Bel-7402细胞的抗肿瘤活性。结果:了哥王95%乙醇提物对Hela、SGC-7901细胞有良好的抗肿瘤活性,其石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取部位对Hela、SGC-7901细胞均有不同程度的抗肿瘤活性。结论:石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取部位有较强的抗肿瘤活性,初步确定为了哥王抗肿瘤活性部位。     

甘遂炮制前后不同提取部位急性毒理实验

目的考察生甘遂和醋甘遂乙醇提取物不同提取部位的毒性。方法采用急性毒性实验法,测定LD50,并用BLISS法计算。结果与生甘遂醇提物相比,醋甘遂醇提物石油醚部位和氯仿部位毒性均有下降,乙酸乙酯部位下降3倍多。结论甘遂经醋制后毒性显著降低。     

榉树叶不同极性部位对酪氨酸酶活性抑制作用研究

目的:研究榉树叶醇提物不同极性部位对酪氨酸酶活性的抑制作用。方法:采用系统溶剂法将榉树叶的乙醇提取物分成石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇和水5种溶剂提取物,分别检测各极性部位抑制酪氨酸酶活性。结果:在各极性部位中,榉树叶乙酸乙酯部位对酪氨酸酶活性的抑制率最高,当终浓度为1.0mg/mL时,抑制率为59.11%,抑制率随着浓度的增加而升高,其IC_(50)为0.72mg/mL。三氯甲烷、正丁醇部位具有较强的抑制作用,其IC_(50)分别为1.11mg/mL、1.12mg/mL。结论:榉树叶醇提物各极性部位提取物对酪氨酸酶活性具有相应抑制作用。     

新疆软紫草石油醚提取物对小鼠及其靶器官的毒性影响

目的:考察新疆软紫草石油醚提取物对小鼠的急性毒性和蓄积毒性影响,探讨其主要靶器官的毒性作用。方法:急性毒性实验:采用改良寇氏法进行半数致死量(LD50)的测定;蓄积毒性实验:采用剂量递增法给药,对照组给以4%吐温-80水溶液,观察实验期间一般生理情况,以及组织病理学变化,进行血清生化指标检测。结果:新疆软紫草石油醚提取物单次灌胃小鼠的半数致死量(LD50)=3.48g/kg,LD5095%的可信区间为3.46~3.50g/kg。蓄积毒性实验结果表明新疆软紫草石油醚提取物在小鼠体内的蓄积系数K=3.76,为中等蓄积毒性,小鼠17天累积灌胃新疆软紫草石油醚提取物13.08g/kg可引起小鼠摄食量减少,体重下降,小鼠肝脏、脾脏和胃肠道均有不同程度的损伤和病变。结论:新疆软紫草石油醚提取物对小鼠的毒性作用主要表现在肝毒性和胃肠道毒性,表明肝脏和胃肠道可能是其毒性作用的主要靶器官。     

不同处方穿琥宁注射液对小鼠的急性毒性实验研究

目的：观察两种辅料不同的穿琥宁注射液处方静脉给药后动物所产生的急性毒性反应和死亡情况,为临床用药提供依据。方法：将穿琥宁注射液1号处方及2号处方系列浓度采用静脉注射方式一次给药,观察给药后14天小鼠的急性毒性反应和死亡情况,并用改进寇氏法计算半数致死量及95%可信限。结果：穿琥宁注射液1号处方静脉给药LD50值为402.50mg/kg,95%可信限为371.47~433.53mg/kg;穿琥宁注射液2号处方静脉给药LD50值为539.25mg/kg,95%可信限为489.79~588.71mg/kg。其主要中毒症状为药后可致小鼠活动减少,食欲下降,精神萎靡。结论：不同辅料处方穿琥宁注射液的毒性有差别,说明辅料对穿琥宁注射液的安全性有一定影响,应不断改善处方,以提高药物使用的安全性。     

桑叶不同溶剂萃取物抗氧化活性研究

目的:比较桑叶不同溶剂萃取物抗氧化能力。方法:桑叶乙醇提取物依次经石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取得到四相,测定各相浸膏总酮含量、ABTS清除率及细胞内ROS的清除率。结果与结论:乙酸乙酯萃取物的抗氧化活性高于其它几项,石油醚部分抗氧化活性最低。