早期自然流产过程转化生长因子-β1的异常表达

目的 探讨自然流产患者外周血单个核细胞和胎盘组织转化生长因子-β1(TGF-β1)的异常表达.方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,半定量检测30例早期自然流产患者、25例正常妊娠妇女、25例正常未妊娠妇女外周血单个核细胞内TGF-β1mRNA表达;采用免疫组织化学技术检测绒毛和蜕膜组织内TGF-β1表达强度.结果 早期自然流产患者、正常妊娠妇女、正常未妊娠妇女3组研究对象外周血单个核细胞表达TGF-β1mRNA相对含量分别为21.5±9.4%、95.7±12.9%、87.0±13.8%,组间比较均有显著性差异(P＜0.05);自然流产组合体滋养层细胞表达TGF-β1显著低于人工流产组(P＜0.01).结论 正常早期妊娠妇女外周血单个核细胞TGF-β1mRNA表达水平较正常未妊娠妇女显著升高,提示TGF-β1对妊娠维护起重要作用;早期自然流产患者外周血单个核细胞TGF-β1 mRNA表达水平及绒毛合体滋养细胞层表达TGF-β1强度均较正常妊娠妇女显著下降,其低水平表达可能与自然流产相关.     

TNF-α及TGF-β1 mRNA在子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义

目的探讨肿瘤坏死因子-αmRNA（TNF-α mRNA）及转化生长因子-β1mRNA（TGF-β1mRNA）在在子痫前期患者胎盘组织中的表达及临床意义。方法采用RT-PCR技术检测45例正常晚期妊娠妇女及56例子痫前期患者（其中轻度子痫前期21例,重度子痫前期35例）胎盘组织中TNF-α mRNA及TGF-β mRNA的表达水平。结果1.轻、重度子痫前期胎盘组织中TNF-α mRNA表达水平分别为：0.371±0.12、0.892±0.347均明显高于正常妊娠组0.138±0.092（均P〈0.01）,重度子痫前期组高于轻度子痫前期组（P〈0.01）。2.轻、重度子痫前期胎盘组织中TGF-β1mR-NA表达水平分别为：0.752±0.133、1.016±0.346均明显高于正常妊娠组0.384±0.098（均P〈0.01）,重度子痫前期组高于轻度子痫前期组（P〈0.01）。结沦子痫前期胎盘组织中TNF-α mRNA及TGF-β1mRNA表达水平明显升高,并且与子痫前期病情发展密切相关,可作为评价病情严重程度的指标。     

γ-促分泌酶抑制剂对支气管哮喘模型小鼠肺组织IL-1β和TNF-α表达的影响

目的研究γ-促分泌酶抑制剂阻断Notch信号对支气管哮喘(简称哮喘)模型小鼠肺组织白介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达变化。方法 30只BALB/c小鼠随机分为正常对照组、哮喘组和γ-促分泌酶抑制剂阻断组。制作小鼠哮喘模型,在小鼠激发阶段尾静脉注射γ-促分泌酶抑制剂MWl67。Westernblot和RT-PCR方法检测三组小鼠肺组织内IL-1β和TNF-α蛋白和mRNA的表达变化。结果正常对照组IL-1β和TNF-α蛋白表达的平均光密度值分别为(0.22±0.02)与(0.17±0.01),显著低于哮喘组的小鼠肺组织IL-1β(0.54±0.04)和TNF-α(0.32±0.03)蛋白的表达(P<0.05),而MWl67阻断Notch信号后,MWl67注射组小鼠肺组织IL-1β和TNF-α蛋白表达的平均光密度值分别为(0.38±0.03)与(0.21±0.02),显著低于哮喘组(P<0.05);正常对照组IL-1βmRNA和TNF-αmRNA表达平均光密度值分别为(0.36±0.03)与(0.26±0.02),显著低于哮喘小鼠肺组织IL-1βmRNA(0.82±0.06)和TNF-αmRNA(0.49±0.04)的表达而MWl67注射组分别为(0.58±0.04)与(0.30±0.03),显著低于哮喘组。结论静脉注射γ-促分泌酶抑制剂能抑制哮喘模型小鼠气道炎症反应。     

自然流产患者蜕膜组织中TNF-α,MMP-9的表达

目的通过检测自然流产患者蜕膜组织中TNF-α,MMP-9表达,探讨二者与自然流产发生的关系。方法采用免疫组化SABC法测定30例自然流产与20例同期正常早孕要求行人工流产患者蜕膜组织中TNF-α,MMP-9的表达。结果流产组蜕膜组织中TNF-α,MMP-9阳性表达率分别为86.7%,83.3%,高于对照组(13.3%,P=0.006;16.7%,P=0.005),两组蜕膜组织中二者的表达有显著性差异,P0.05。结论自然流产患者蜕膜组织中TNF-α,MMP-9的表达增高,提示TNF-α,MMP-9在自然流产的发生中起重要作用。     

阵发性睡眠性血红蛋白尿及再生障碍性贫血造血负调控因子的研究

目的 检测阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)与再生障碍性贫血(AA)患者外周血血浆中造血负性调控因子IFN-γTNF-α和TGF-β1的表达;研究IFN-γ、TNF-α和TGF-β1表达水平与PNH和AA之间的关系.方法 应用ELISA法检测18例成人PNH与20例从患者外周血血浆中IFN-γ、TNF-α和TGF-β1的表达,并与15例健康体检者对比.结果 AA组的IFN-γ和TNF-α均高于对照组,P<0.05;TGF-β1显著高于对照组,P<0.01.PNH组的IFN-γ、TNF-α和TGF-β1均显著高于对照组,P<0.01.PNH组的TNF-α高于AA组,P<0.05;PNH组IFN-γ和TGF-β1均显著高于AA组,P<0.01.结论 IFN-γ、TNF-α和TGF-β1作为造血负性调控因子在PNH与AA患者体内对造血细胞起抑制作用,反映造血调控因子分泌紊乱可能在PNH与AA的发病中起一定作用.     

整合素β1在早期自然流产患者蜕膜组织中的表达及意义

目的本实验通过测定早期自然流产蜕膜组织中整合素β1的表达,了解整合素β1在蜕膜组织中表达的主要部位,探讨其与自然流产的关系。方法应用免疫组织化学法,对41例妇女蜕膜组织中整合素β1的表达进行检测,其中20例为早期自然流产患者(流产组),21例为要求终止妊娠的正常早孕妇女(对照组)。结果整合素β1在早孕蜕膜组织的细胞浆内,在间质细胞、腺上皮细胞及腔上皮细胞浆内均有表达,在早期自然流产组蜕膜组织中整合素β1的表达(12例呈阴性,8例呈弱阳性,0例呈阳性,0例呈强阳性)明显低于对照组(3例阴性,4例弱阳性,11例阳性,3例强阳性),两者比较差异有统计学意义(P=0.000)。结论整合素β1在早期自然流产中呈低表达或不表达,可能是导致自然流产相关因素之一。     

TNF-α在早期自然流产患者血清及蜕膜中的表达

目的研究早期自然流产者血清,蜕膜中TNF-α的表达,探讨其与自然流产的关系。方法取30例自然流产与20例同期正常早孕要求行人工流产者血清及蜕膜,血清及蜕膜分别采用双抗ELISA法,免疫组化SABC法检测TNF-α表达。结果自然流产患者血清,蜕膜中TNF-α的表达高于正常早妊组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论自然流产者血清,蜕膜中TNF-α的表达与自然流产的发生有关。     

杂色曲霉素对小鼠小脑Purkinje细胞TNF-α和TGF-β_2 mRNA表达的影响

本研究观察了杂色曲霉素(sterigmatocystin,ST)对小鼠Purkinje细胞TNF-α和TGF-β2 mRNA表达的影响。给予BALB/c小鼠一次灌胃ST(3000μg/kg),分别于灌胃后0.5、1、2、4、8和16h处死动物,用原位杂交方法观察了Purkinje细胞TNF-α和TGF-β2 mRNA的表达。TNF-α和TGF-β2mRNA在对照组和处理组各时间点的Purkinje细胞均有阳性表达。但各处理组与对照组比较,TNF-α和TGF-β2 mRNA表达显著增加(P<0.01)。上述结果说明单次ST灌胃后TNF-α和TGF-β2 mRNA在Purkinje细胞表达明显增加,TNF-α和TGF-β2在ST对脑组织的损伤过程中起着重要的作用。     

原发免疫性血小板减少症患者外周血Th22细胞水平的变化及意义

目的:观察Th22细胞在原发免疫性血小板减少症(ITP)患者外周血中的变化.方法:用流式细胞术分别检测ITP初诊组、治疗后完全反应(CR)组及正常对照组外周血中Th22细胞所占比例.用酶联免疫吸附实验(ELISA)分别检测各组外周血中IL-22、TGF-β、TNF-α、IL-6的表达水平.用半定量RT-PCR分别检测各组外周血中IL-22 mRNA的表达水平.并逐层分析比较.结果:ITP初诊组和治疗后组Th22细胞比例、外周血中IL-22、TNF-α、IL-6的表达水平以及IL-22mRNA的表达水平均明显高于正常对照组(P＜0.01),治疗后组Th22细胞比例、IL-22、TNF-α、IL-6、IL-22 mRNA的表达水平均低于初诊组(P＜0.05);ITP初诊组和治疗后组TGF-β水平分别为(3.27±1.02)ng/L、(5.41±1.69)ng/L明显低于正常对照组(9.65±2.78) ng/L(P＜0.01),且初诊组TGF-β的水平低于治疗后组(P＜0.05).结论:ITP患者体内Th22细胞数量增加、TNF-α、IL-6的表达升高、TGF-β的表达减低.     

早期自然流产患者TNF-α异常表达

目的探讨自然流产患者母胎界面肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的异常表达.方法采用半定量免疫组化技术,检测30例早期自然流产患者(自然流产组)、25例正常妊娠妇女(正常妊娠组)绒毛和蜕膜组织内TNF-α表达强度.结果自然流产组细胞滋养层细胞及合体滋养层细胞表达TNF-α均显著强于正常妊娠组(P＜0.01).结论早期自然流产患者细胞滋养层细胞及合体滋养层细胞表达TNF-α均显著强于正常妊娠组,提示TNF-α可能在母胎界面局部发挥作用并导致流产.     

磷脂酰肌醇3激酶对TNF-α诱导的大鼠气道平滑肌细胞增殖、凋亡和转化生长因子β1表达的影响

目的 探讨磷脂酰肌醇3激酶（PI3-K）对TNF-α诱导的大鼠气道平滑肌细胞（ASMC）增殖、凋亡和转化生长因子β1（TGF-β1）表达的影响.方法 以肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及PI3-K特异性抑制剂wortmannin作为工具药,分别将TNF-α、TNF-α＋wortmannin接种ASMC,置37℃,5%CO2培养箱中培养.逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测PI3-Kp85α、TGF-β1 mRNA表达,免疫细胞化学染色法检测PI3-Kp85α、PCNA、Bcl-2蛋白表达及定位,Sandwich ELISA检测NF-κB活性,四甲基偶氮唑蓝（MTT）微量比色法测定ASMC增殖,AnnexinV/PI双标记流式细胞仪分析法检测细胞凋亡,ELISA测定TGF-β1蛋白质含量.结果 （1）培养的ASMC PI3-K p85α的阳性定位在胞浆.TNF-α组ASMC PI3-Kp85α mRNA及蛋白表达水平均显著高于对照组及TNF-α＋wortmannin组（P＜0.01）;（2）TNF-α组ASMCNF-κB活性与对照组相比显著增高（P＜0.01）,TNF-α＋wortmannin组NF-κB活性与TNF-α组相比显著降低（P＜0.01）;（3）TNF-α组ASMC的增殖反应与对照组及TNF-α＋wortmannin组相比显著增加（P＜0.01）;TNF-α组细胞凋亡率与对照组相比差异无统计学意义（P＞0.05）,TNF-α＋wortmannin组细胞凋亡率显著高于TNF-α组及对照组（P＜0.01）.（4）TNF-α组ASMC的PCNA、Bcl-2蛋白表达量均显著高于对照组及TNF-α＋wortmannin组（P＜0.01）;（5）TNF-α组ASMC的TGF-β1的mRNA表达水平、培养液上清TGF-β1的蛋白质含量均显著高于对照组及TNF-α＋wortmannin组（P＜0.01）.结论 PI3-K可能参与调控TNF-α诱导的大鼠气道平滑肌细胞的增殖、凋亡及TGF-β1的表达和分泌,NF-κB作为PI3-K的下游信号参与此过程.     

TNF-α及TGF-β1mRNA在妊娠期间腹腔巨噬细胞中的表达及其意义

目的探讨TNF-α和TGF-β1 mRNA在正常妊娠腹腔巨噬细胞中的表达及其意义。方法采用RT-PCR 方法研究10例正常足月妊娠病例和10例子宫肌瘤病例腹腔巨噬细胞TNF-α及TGF-β1 mRNA的表达。结果 (1)足月妊娠组腹腔巨噬细胞TNF-α mRNA与子宫肌瘤组相比表达显著增强(P<0．01)。(2)TGF-β1 mRNA在足月妊娠孕妇腹腔巨噬细胞中的表达增强,两者比较有非常显著性差异(P<0．001)。结论妊娠可以刺激机体巨噬细胞活化,妊娠期间非特异性免疫功能增强。TNF-α及TGF-β1参与了妊娠期间免疫平衡的建立和稳定。     

早期自然流产患者TNF-α mRNA的异常表达

目的探讨自然流产患者外周血单个核细胞内肿瘤坏死因子-α mRNA的异常表达.方法采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测30例早期自然流产患者、25例正常妊娠妇女、25例正常未妊娠妇女外周血单个核细胞内TNF-α mRNA.结果早期自然流产患者、正常妊娠妇女、正常未妊娠妇女三组研究对象外周血单个核细胞表达TNF-α mRNA相对含量分别为20.1±9.4%、68.6±14.1%、97.0±11.6%.结论早期自然流产患者外周血单个核细胞TNF-α mRNA表达水平显著下降,提示流产过程中能分泌TNF-α的单个核细胞可能聚集于母胎界面,TNF-α可能在母胎界面局部发挥作用并导致流产.     

树突状细胞C型凝集素在自然流产中的表达研究

目的通过检测早期自然流产患者子宫蜕膜组织中树突状细胞C型凝集素（DC-SIGN）的表达,探讨其在自然流产发生中的可能机制。方法采用免疫荧光染色法及实时荧光定量PCR（RT-PCR）技术检测DC-SIGN在蜕膜组织中的表达,比较两组间表达情况及分布差异。结果 1.通过免疫荧光染色技术检测显示：妊娠期子宫蜕膜组织均表达DC-SIGN,主要分布于细胞膜上,自然流产组中DC-SIGN＋DC表达明显低于对照组（46.20±2.40 vs 78.21±0.28,P〈0.01）。2.RT-PCR结果显示：自然流产组明显低于对照组,患者蜕膜组织中DC-SIGN mRNA相对表达量（0.0032370±0.00124 vs0.0076412±0.0040,P〈0.05）。结论树突状细胞（DC）在母胎免疫耐受机制中起着重要的作用,蜕膜组织DC-SIGN的表达量降低可能导致早期自然流产的发生。     

核转录因子在二氧化硅刺激巨噬细胞产生细胞因子中的作用

目的 探讨二氧化硅(SiO2)刺激巨噬细胞生成肿瘤坏死因子(TNF)-α、转化生长因子(TGF)-β1增多的分子机制及核转录因子Egr-1和NF-κB介导的信号通路在硅肺发生发展中的作用。方法 Egr-1或NF-κB抗体和反义寡核苷酸分别处理巨噬细胞后,用ELISA法检测细胞上清液中TNF-α蛋白的含量;免疫细胞化学链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)法检测细胞中TGF-β1蛋白的表达;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测TNF-α和TGF-β1mRNA的表达。结果 与非抗体处理组比较,SiO2刺激下抗体处理组巨噬细胞生成TNF-α蛋白和TGF-β1蛋白减少,其mRNA表达也相应下降(P<0.05);与未转染和转染正义寡核苷酸的细胞相比,Egr-1或NF-κB反义寡核苷酸转染细胞后,在SiO2刺激下巨噬细胞生成TNF-α蛋白和TGF-β1蛋白减少,二者mRNA表达也相应下降(P<0.05)。结论 SiO2刺激巨噬细胞生成TNF-α和TGF-β1可能主要是经核转录因子Egr-1和NF-κB介导,Egr-1与NF-κB抗体和反义寡核苷酸的应用可能会导致早期肺泡炎的活动性下降,延缓或阻止肺纤维化的形成。     

精神分裂症致炎性细胞因子、酪氨酸羟化酶基因表达水平与临床症状的关系

目的检测精神分裂症患者致炎性细胞因子(白介素-1β、肿瘤坏死因子-α)和酪氨酸羟化酶(TH)的基因表达水平,探讨其与临床症状的关系。方法采用送转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)和半定量技术,分别检测39例精神分裂症患者,25例同胞对照和30例正常对照外周血单个核细胞IL-1β、TNF-α和TH的基因表达水平,同时应用PANSS量表评定精神分裂症患者临床症状。结果IL-1β在病例组、同胞对照组和正常对照组的基因表达水平分别为1.52±1.01、1.18±0.99和0.55±0.33;TNF-α在三组样本的基因表达水平分别为1.52±1.09、1.01±0.87和0.61±0.32;TH在三组样本的基因表达水平分别为0.74±0.38、0.70±0.29和0.28±0.20。其中病例组与同胞对照组IL-1β、TNF-α、TH基因表达水平无显著差异(P>0.05);病例组和同胞对照组的IL-1β、TNF-α、TH基因表达水平均显著高于正常对照组(P<0.05或P<0.01)。同时发现IL-1β(r=0.420)、TNF-α(r=0.430)基因表达水平与PANSS量表的一般病理症状分显著相关(P<0.01)。结论精神分裂症患者存在多巴胺功能亢进和致炎性细胞因子的过度表达,且可能受遗传背景影响。致炎性细胞因子可能参与精神分裂症一般病理症状的形成。     

血清Omentin-1、TGF-β1、TNF-α表达水平对2型糖尿病视网膜病变的影响分析

目的 探讨2型糖尿病视网膜病变(DR)患者血清Omentin-1、TGF-β1、TNF-α表达水平与糖尿病视网膜病变的关系.方法 采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测213例受试者血清中Omentin-1、TGF-β1、TNF-α表达水平,其中2型糖尿病增生性视网膜病变(PDR)患者60例,2型糖尿病非增生性视网膜病变(NPDR)患者53例.另外有57例2型糖尿病无视网膜病变患者作为阳性对照组(PC),43例健康志愿者作为阴性对照组(NC).结果 2型糖尿病患者(PDR组、NPDR组、PC组)血清Omentin-1水平明显低于NC组,PDR组患者血清Omentin-1水平明显低于NPDR组、PC组患者(P ＜0.001);2型糖尿病患者(PDR组、NPDR组、PC组)血清TGF-β1、TNF-α水平明显高于NC组,PDR组患者血清TGF-β1、TNF-α水平明显高于NPDR组、PC组患者(P＜0.001).结论 血清Omentin-1水平降低、TGF-β1、TNF-α表达水平升高与2型糖尿病视网膜病变的发生、发展密切相关.检测血清Omentin-1、TGF-β1、TNF-α水平有助于评价糖尿病视网膜病变程度.     

体外受精-胚胎移植术后早期自然流产蜕膜组织中Livin的表达

目的研究体外受精-胚胎移植（IVF-ET）术后早期自然流产与正常妊娠人工流产蜕膜组织中细胞凋亡与凋亡抑制蛋白Livin的表达,分析并探讨细胞凋亡及Livin与IVF-ET术后自然流产的关系。方法对30例IVF-ET术后早期自然流产患者（研究组）和22例正常妊娠要求人工流产患者（对照组）的蜕膜组织进行研究。应用TdT介导的dUTP缺口原位末端标记技术（TUNEL）检测细胞凋亡情况;应用免疫组化SP法检测Livin的表达。结果研究组蜕膜组织细胞凋亡指数（AI）（42.07±8.26%）明显高于对照组（17.86±7.40%）,差异有统计学意义（P〈0.05）;研究组蜕膜组织中Livin的表达（2.33±1.40分）明显低于对照组（5.64±1.94分）,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 IVF-ET术后早期自然流产患者蜕膜组织中Livin蛋白表达下降导致细胞凋亡过度,可能在自然流产的发生发展中起重要作用。     

Toll样受体4/髓样分化蛋白88在早期自然流产母-胎界面的表达

目的:探讨Toll样受体4(TLR4)/髓样分化蛋白88(MyD88)与早期自然流产的相关性。方法:选择30例正常妊娠妇女作为对照组,采用免疫组织化学显色对30例早期自然流产患者(流产组)母-胎界面的蜕膜和绒毛组织中TLR4、MyD88蛋白表达进行定位观察,采用RT-PCR技术对其TLR4和MyD88mRNA表达进行半定量分析。结果:TLR4和MyD88蛋白在流产组和对照组的绒毛及蜕膜组织中均有表达,定位表达于绒毛滋养层细胞、蜕膜细胞的细胞质内,阳性反应强弱不等。RT-PCR半定量分析结果显示,在绒毛组织中,流产组TLR4 mRNA、MyD88 mRNA的表达显著高于对照组;在蜕膜组织中,流产组TLR4 mRNA、MyD88 mRNA的表达显著高于对照组。流产组绒毛和蜕膜组织中TLR4与MyD88的表达均呈正相关。结论:TLR4和MyD88可能参与早期自然流产的病理过程,且TLR4可能通过MyD88信号途径参与早期自然流产的发生。     

子痫前期患者胎盘组织TGF-β1及MMP-9 mRNA的表达及其意义

目的研究转化生长因子β1(TGF-β1)及基质金属蛋白酶9(MMP-9)mRNA在胎盘组织中的表达情况及其与子痫前期发病的关系。方法用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术对10例正常妊娠组和25例子痫前期组(包括11例轻度和14例重度)胎盘组织中TGF-β1、MMP-9 mRNA的表达水平进行检测。结果与正常妊娠组相比,重度子痫前期组胎盘组织中TGF-β1、mRNA表达量增加(P<0.05),MMP-9 mRNA的表达水平显着下降(P<0.01);轻度子痫前期组胎盘组织中TGF-β1、MMP-9与正常组相比无统计学差异(P>0.05)。结论TGF-β1、MMP-9的表达在基因转录水平就已经发生改变。TGF-β1通过下调MMP-9的表达而抑制滋养层细胞的侵入,这些浸润相关基因可能在子痫前期的发病中发挥着重要的作用。