iNOS N端融合蛋白在大肠杆菌中的表达及抗体制备

目的表达ｉＮＯＳＮ端片段并制备ｉＮＯＳ特异性抗体。方法将ｉＮＯＳＮ端片段装入原核表达载体ｐＥＴ－２８ａ（＋）,在大肠杆菌ＢＬ２１中表达,Ｈｉｓ．ＢｉｎｄＴＭ柱亲和层析分离纯化及凝胶蛋白回收的两步纯化法纯化目的蛋白,使用纯化蛋白制备ｉＮＯＳ多克隆抗体。结果得到具有较高表达量的融合蛋白,经两步纯化获得ｉＮＯＳＮ端融合蛋白纯品,将此蛋白免疫家兔,得到ｉＮＯＳ多克隆抗体,Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ证实该抗体具有较好的反应性及特异性。结论原核表达ｉＮＯＳＮ端片段制备ｉＮＯＳ抗体具有很好的特异性。     

iNOSN端融合蛋白在大肠菌中的表达及抗体制备

目的 表达ｉＮＯＳＮ端片段并制备ｉＮＯＳ特异性抗体。方法 将ｉＮＯＳＮ端片段装入原核表达载体ｐＥＴ－２８ａ（＋），在大肠杆菌ＢＬ２１中表达，Ｈｉｓ，Ｂｉｎｄ^TM 柱亲和层析分离纯化及凝胶蛋白回收的两步纯化法纯化目的蛋白,使用纯化蛋白制备iＮＯＳ多克隆抗体。结果 得到具有较高表达量的融合蛋白，经两眇纯化获得ｉＮＯＳＮ端融合蛋白纯品，将此蛋白免疫家兔，得到ｉＮＯＳ多克隆抗体，Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ证实该     

动脉粥样斑块中内皮素和一氧化氮合成酶的表达及拮抗作用

目的为探讨动脉硬化斑块的发生机制,对内皮素（ＥＴ）和一氧化氮合成酶（ＮＯＳ）的参与和拮抗作用进行研究。方法用兔主动脉硬化模型和培养的正常兔主动脉平滑肌细胞（ＳＭＣ）进行ＥＴ和ＮＯＳ的原位杂交、反转录ＰＣＲ和ＮＯＳ细胞化学检测。结果粥样斑块中ＥＴｍＲＮＡ转录增多,ＮＯＳｍＲＮＡ转录减少;与正常主动脉相比,斑块中ＥＴ基因表达增加１．２倍,而ＮＯＳ基因表达降低２２．２％;细胞化学图像分析表明,ＥＴ多肽异常增多可抑制ＳＭＣ内ＮＯＳ蛋白合成;ＥＴ－Ａ型受体拮抗剂抑制ＥＴ的作用;从而防止细胞内ＮＯＳ蛋白减少。结论ＥＴ与ＮＯＳ的平衡失调即ＥＴ异常增加和／或ＮＯＳ明显减少,与动脉粥样硬化斑块的形成有一定的关系。     

一氧化氮合酶及其调节

一氧化氮合酶（ＮＯＳ）包括内皮细胞性、神经原性和诱生性三种，其基因分别位于人第７、１２和１７号染色体上。ＮＯＳ是高度保守性蛋白，种属间同一ＮＯＳ的氨基酸同源性大于８０％，但不同ＮＯＳ间仅５０％左右。业已证明ＮＯＳ是非均一性酶，同一酶可存在于不同细胞，而一种细胞可有一种以上的酶。ＮＯＳ的活性受基因转录、翻译、翻译后修饰等多环节调控。对ＮＯＳ的调控研究可指导ＮＯ介导的疾病进行针对性防治     

大鼠腰骶髓内一氧化氮合酶阳性结构与接受膀胱伤害性刺激神经…

本文应用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶组织化学方法和ＦＯＳ免疫组化法相结合的双重反应技术，研究了大鼠腰骶髓内的ＮＯＳ阳性结构的分布及其与膀胱伤害性刺激诱发的ＦＯＳ表达神经元的关系。结果发现ＮＯＳ阳性纤维和终末密集分布于后角Ｉ层和Ⅱ层，其它部位稀少；ＮＯＳ阳性神经元胞体与膀胱伤害性刺激诱发的ｃ－ｆｏｓ原癌基因蛋白表达的阳性神经元在腰骶髓（Ｌ６￣Ｓ１）分布区域较相似，主要分布于与伤害性信号传递过程     

低氧诱导肺血管平滑肌细胞诱生型一氧化氮合酶基因表达

本研究采用原位杂交、免疫组织化学、酶组织化学染色方法从三个层次分别证明低氧诱导大鼠肺血管中膜平滑肌细胞一氧化氮合酶（ＮｉｔｒｉｃＯｘｉｄｅＳｙｎｔｈａｓｅ，ＮＯＳ）的基因和蛋白表达，并使中膜平滑肌细胞具有ＮＯＳ活性；离体培养的肺动脉平滑肌细胞实验也证明低氧使肺动脉平滑肌细胞ＮＯＳ活性增加，ＮＯ生成增多。提示诱生型ＮＯＳ基因可能是一种低氧诱导基因，低氧诱导ＮＯＳ表达可能是细胞感受低氧的一种重要机制。     

细胞性一氧化氮供体的建立及其对肿瘤细胞凋亡的诱导效应

目的一氧化氮（ＮＯ）供体细胞系的建立及其对肿瘤细胞凋亡的诱导效应研究。方法采用３Ｈ－胍氨酸转换法进行ＮＯ合成酶（ＮＯＳ）活性测定；亚硝酸盐检测；ＤＮＡ片段的提取及凝胶电泳分析；凋亡细胞的ＤＡＰＩ染色观察；Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析。结果将ｉＮＯＳ真核表达质粒、ｐＣＭＶ／ｉＮＯＳ转染至Ｓｐ２／０骨髓瘤的变异株中，并获得能稳定表达ｉＮＯＳ和合成ＮＯ的重组细胞系（ＳＰｍｔ／ｉＮＯＳ），表达ｉＮＯＳ的效率为每升培养物含４００μｇ蛋白。利用该细胞作ＮＯ细胞性供体，成功地证实ＮＯ能诱导Ｓｐ２／０骨髓瘤细胞发生凋亡。结论所建细胞性ＮＯ供体应用于ＮＯ的生物学功能研究具有ＮＯ合成稳定；更能模拟体内细胞间ＮＯ的信息传递过程；不需任何外源刺激即可合成ＮＯ等独特优点。所建ＮＯ供体细胞可以用于肿瘤细胞凋亡的研究。     

一氧化氮（NO）在现代生物医学上的意义

一氧化氮（ＮＯ）在现代生物医学上的意义肖岚，蔡文琴第三军医大学６３００３８一、前言：八十年代国际生物医学上最引人瞩目的事是发现ＮＯ在诸多系统中的信使作用。二、ＮＯ的生物合成及ＮＯＳ：ＮＯ的合成途径，ＮＯＳ的种类、结构及特性。三、ＮＯＳ的分布及定位：用...     

hCG-β反义寡脱氧核苷酸抑制正常滋养细胞hCG的分泌

目的：探讨ｈＣＧ－β反义寡脱氧核苷酸（ＡＳ－ＯＤＮ）是否抑制正常早期妊娠滋养细胞ｈＣＧ的分泌、作用效率及对该细胞生长的影响。方法：采用放射免疫分析法检测了与ｈＣＧ－βＡＳ－ＯＤＮ共培养后物正常滋养细胞ｈＣＧ的含量结果：ｈＣＧ－βＡＳ－ＯＤＮ能在ｈＣＧ蛋白水平产生抑制作用。结论：ｈＣＧ－βＡＳ－ＯＤＮ能牧场卉地抑制正常滋养细胞ｈＣＧ蛋白的分泌。     

反义Gαq/11亚基ODNs对平滑肌细胞DNA合成和PC蛋白表达的影响

目的：探讨Ｇｑ蛋白介导血管活性多肽对ｖＳＭＣＤＮＡ合成及增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）蛋白表达的影响。方法：用硫代修饰的Ｇαｑ／１１亚基反义寡聚脱氧核苷酸（Ｇαｑ／１１ＡＳ－ＯＤＮｓ），以６μｍｏｌ／Ｌ的浓度加入含１０－７ｍｏｌ·Ｌ－１ＥＴ－１刺激无血清ＤＭＥＭ培养基中体外培养ｖＳＭＣ。用３Ｈ－ＴｄＲ掺入法测定ｖＳＭＣＤＮＡ合成、免疫细胞化学技术检测ｖＳＭＣＰＣＮＡ蛋白表达。结果：Ｇαｑ／１１ＡＳ－ＯＤＮｓ可明显抑制ｖＳＭＣＤＮＡ的合成，在１２ｈ，２４ｈ时抑制率分别为８４２％和８５３％；Ｇαｑ／１１ＡＳ－ＯＤＮｓ亦明显降低ｖＳＭＣＰＣＮＡ蛋白的表达。而相同浓度的正义Ｇαｑ／１１ＯＤＮｓ只呈现少量抑制作用。结论：本实验提示Ｇαｑ／１１ＡＳ－ＯＤＮｓ有可能进一步应用于由血管活性多肽刺激引起的ｖＳＭＣ增生性疾病如经皮冠脉腔内血管成形术（ＰＴＣＡ）后再狭窄的防治的研究     

COMPARISON OF BREAST MASS SIZE ON ULTRASONOGRAPHY,CUT-SURFACE OF RESECTED SPECIMEN,AND PALPATION

ＣＯＭＰＡＲＩＳＯＮＯＦＢＲＥＡＳＴＭＡＳＳＳＩＺＥＯＮＵＬＴＲＡＳＯＮＯＧＲＡＰＨＹ，ＣＵＴ－ＳＵＲＦＡＣＥＯＦＲＥＳＥＣＴＥＤＳＰＥＣＩＭＥＮ，ＡＮＤＰＡＬＰＡＴＩＯＮＣＯＭＰＡＲＩＳＯＮＯＦＢＲＥＡＳＴＭＡＳＳＳＩＺＥＯＮＵＬＴＲＡＳＯＮＯＧＲ...     

大鼠主动脉内膜球囊剥脱后再生内皮细胞表型改变的研究

目的 探索大鼠主动脉内膜球囊剥脱后,内皮修复过程中再生内皮细胞结构和功能的改变,方法 大鼠主动脉内膜球囊剥脱２周和６周对内膜进行形态学观察,同时测定血管反应性,亚硝酸盐量和ＮＯＳ的活性,结果：剥脱２周和６周后,再生内皮细胞不仅结构与正常内皮细胞不同,而且血管再生内皮依赖性舒张反应９减弱,ＮＯ的释放减少,血管组织ｉＮＯＳ和ｃＮＯＳ活性均比正常降低,剥脱６周后的ｉＮＯＳ比剥脱２周时有所增加,但ｃＮＯＳ     

一氧化氮合酶（NOS）在成年猫脊髓的分布

采用ＮＡＤＰＨｄ 酶组化方法,观察一氧化氮合酶（ＮＯＳ）阳性产物在猫脊髓的分布。结果显示：ＮＯＳ的阳性反应物主要分布于脊髓Ⅱ板层的神经膨体及少数神经元内。其它部位除中央管附近及腹角见个别ＮＯＳ阳性神经元及纤维外,几乎未见ＮＯＳ阳性染色。表明在本实验条件下所显示的脊髓Ⅱ板层的神经膨体及少数神经元内的ＮＯＳ阳性产物可能主要与三种类型ＮＯＳ（神经活性ＮＯＳ,诱导性ＮＯＳ,内皮源性ＮＯＳ）中的神经活性ＮＯＳ关系密切。本文结果还提示Ⅱ板层神经膨体和神经元内的ＮＯＳ可能与Ⅱ板层的某些生理功能有关。     

ANALYSIS OF AN OPEN-ENDED COAXIAL LINE SENSOR FOR BILAYERED BIOLOGICAL DIELECTRICS MEASUREMENT

ＡＮＡＬＹＳＩＳＯＦＡＮＯＰＥＮ－ＥＮＤＥＤＣＯＡＸＩＡＬＬＩＮＥＳＥＮＳＯＲＦＯＲＢＩＬＡＹＥＲＥＤＢＩＯＬＯＧＩＣＡＬＤＩＥＬＥＣＴＲＩＣＳＭＥＡＳＵＲＥＭＥＮＴＡＮＡＬＹＳＩＳＯＦＡＮＯＰＥＮ－ＥＮＤＥＤＣＯＡＸＩＡＬＬＩＮＥＳＥＮＳＯＲＦＯＲ...     

THE FUNCTION AND THE CLASSIFICATION OF TECHNICAL AIDS FOR DISABLED PERSONS

ＴＨＥＦＵＮＣＴＩＯＮＡＮＤＴＨＥＣＬＡＳＳＩＦＩＣＡＴＩＯＮＯＦＴＥＣＨＮＩＣＡＬＡＩＤＳＦＯＲＤＩＳＡＢＬＥＤＰＥＲＳＯＮＳＴＨＥＦＵＮＣＴＩＯＮＡＮＤＴＨＥＣＬＡＳＳＩＦＩＣＡＴＩＯＮＯＦＴＥＣＨＮＩＣＡＬＡＩＤＳＦＯＲＤＩＳＡＢＬＥＤＰＥＲＳ...     

诱导型一氧化氮合酶活性变化对肺纤维化形成的影响

目的 :以前的工作表明 ,在平阳霉素 (ＢＬＭＡ5)诱导大鼠肺纤维化形成的早期 (注ＢＬＭＡ5 后 7ｄ和 1 4ｄ) ,肺内ＮＯ含量一过性升高 ,且与肺间质ｉＮＯＳ蛋白表达增强有关。在此基础上 ,本文应用ｉＮＯＳ特异性抑制剂氨基胍 (ａｍｉｎｏｇｕａｎｉｄｉｎｅ,ＡＧ) ,观察肺内ｉＮＯＳ活性受到抑制后 ,肺内ＮＯ含量的变化以及对肺纤维化形成的影响 ,进一步探讨ｉＮＯＳ合成的ＮＯ在肺纤维化形成中的作用。方法 :ＳＤ大鼠 2 4只 ,分为ＢＬＭＡ5 ＡＧ 1 4ｄ组、ＢＬＭＡ5 ＡＧ 30ｄ组、ＢＬＭＡ5 ＮＳ 1 4ｄ组和ＢＬＭＡ5 ＮＳ 30ｄ组。每组均…     

DESIGN AND CLINICAL ANALYSIS OF BIONIC ELECTRON MASSAGER

ＤＥＳＩＧＮＡＮＤＣＬＩＮＩＣＡＬＡＮＡＬＹＳＩＳＯＦＢＩＯＮＩＣＥＬＥＣＴＲＯＮＭＡＳＳＡＧＥＲＤＥＳＩＧＮＡＮＤＣＬＩＮＩＣＡＬＡＮＡＬＹＳＩＳＯＦＢＩＯＮＩＣＥＬＥＣＴＲＯＮＭＡＳＳＡＧＥＲＸｉｃｈｅｎｇＯｎ；ＸｉａｏｒｏｎｇＹｕｅ；Ｚｈｏｎｇ...     

诱导型一氧化氮合酶(iNOS)与动脉血压的调节

一氧化氮（ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅ,ＮＯ）具有强大的扩血管作用,体内ＮＯ的合成由一氧化氮合酶（ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅｓｙｎｔｈａｓｅ,ＮＯＳ）催化底物精氨酸（Ｌ－ａｒｇｉｎｉｎｅ,Ｌ－Ａｒｇ）的氨基上的Ｎ与分子氧（Ｏ２）结合生成。目前已经证明至少存在三种ＮＯＳ,即内皮型ＮＯＳ（ｅＮＯＳ）、诱导型ＮＯＳ（ｉＮＯＳ）及神经型ＮＯＳ（ｎＮＯＳ）。虽然大量的研究表明ｅＮＯＳ在血液动力学中具有极其重要的调节作用,但有关ｉＮＯＳ在血液动力学中的作用却知之甚少。我们以前的工作表明,高盐能刺激ＳＤ大鼠ＮＯ的生成及…     

SYNTHESIS AND FINE STRUCTURE-PROPERTY RELATIONSHIPS OF ION-CONTAINING BIOMEDICAL POLYETHERURETHANES

ＳＹＮＴＨＥＳＩＳＡＮＤＦＩＮＥＳＴＲＵＣＴＵＲＥ－ＰＲＯＰＥＲＴＹＲＥＬＡＴＩＯＮＳＨＩＰＳＯＦＩＯＮ－ＣＯＮＴＡＩＮＩＮＧＢＩＯＭＥＤＩＣＡＬＰＯＬＹＥＴＨＥＲＵＲＥＴＨＡＮＥＳＳＹＮＴＨＥＳＩＳＡＮＤＦＩＮＥＳＴＲＵＣＴＵＲＥ－ＰＲＯＰＥＲＴＹ...     

USE OF THE DISCRETE PSEUDO—WIGNER DISTRIBUTION FOR FREQUENCY ANALYSIS OF THE FIRST AND THE SECOND HEART SOUNDS IN NORMAL MAN

ＵＳＥＯＦＴＨＥＤＩＳＣＲＥＴＥＰＳＥＵＤＯ—ＷＩＧＮＥＲＤＩＳＴＲＩＢＵＴＩＯＮＦＯＲＦＲＥＱＵＥＮＣＹＡＮＡＬＹＳＩＳＯＦＴＨＥＦＩＲＳＴＡＮＤＴＨＥＳＥＣＯＮＤＨＥＡＲＴＳＯＵＮＤＳＩＮＮＯＲＭＡＬＭＡＮＵＳＥＯＦＴＨＥＤＩＳＣＲＥＴＥＰＳＥＵ...