非霍奇金淋巴瘤中细胞凋亡与细胞增殖的研究

目的了解非霍奇金淋巴瘤(NHL)中细胞凋亡与细胞增殖间的关系,探讨两者在NHL发生与发展中的作用.方法利用TdT介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法和PCNA免疫组化技术原位检测60例NHL中的细胞凋亡和增殖水平,计算凋亡指数(AI)和增殖指数(PI).结果B细胞性NHL中,随着恶性度增高,AI和PI均增高(P＜0.05),T细胞性NHL中高度恶性组PI明显高于低度恶性组(P＜0.05),而AI在两组之间无显著性差异(P＞0.05).AI和PI呈显著正相关(r=0.704,P＜0.01).结论在NHL中细胞凋亡与增殖之间可能存在密切的联系,共同参与了NHL的发生和恶性进展.对细胞凋亡和增殖水平的检测可能有助于NHL恶性度及预后的判断.     

大肠癌组织中PCNA表达和细胞凋亡检测的临床意义

目的：探讨大肠癌组织中细胞凋亡和增殖细胞核抗原（PCNA）表达的临床意义。方法：应用免疫组化S－P法及TUNEL法对10例正常大肠黏膜和62例大肠癌组织中细胞增殖指数（PI）及凋亡指数（AI）进行检测，分析其与临床病理因素的关系。结果：在正常大肠黏膜和大肠癌组织中，PI逐渐增加，AI逐渐下降，两者比较有非常显著性差异（P＜0．01），随着大肠癌Dukes分期升高，PI逐渐增加，AI逐渐下降；与癌组织分化程度和淋巴结转移有关（P＜0．01），对这2种指标进行综合分析显示，PI增高而AI降低组，较其它异常结合模式组更易发生淋巴结转移。结论：细胞增殖与凋亡平衡失调的程度与大肠癌恶性程度密切相关，PI增高同时有AI降低者更易发生淋巴结转移，两者联合检测对大肠癌的临床分析及预后评价有重要意义。     

甲状腺肿瘤增殖与凋亡的关系

 目的 研究甲状腺肿瘤细胞增殖指数PI和凋亡指数AI的关系；探讨甲状腺肿瘤的发病机制及PI和AI在鉴别甲状腺良、恶性肿瘤中的诊断价值。方法 用免疫组化Envision法和TUNEL法分别检测76例甲状腺肿瘤细胞中Ki67和AI表达。结果 ①39例腺瘤和37例腺癌PI和AI表达在腺瘤和腺癌组间比较差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）；②15例滤泡性腺瘤（FTA）和15例滤泡性腺癌（F1C）的PI表达组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）；AI表达组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）；③15例乳头状腺瘤（PTA）和15例乳头状腺癌（PTC）AI表达组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。PI表达组间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。④9例嗜酸细胞腺瘤（OCTA）PI表达和7例嗜酸细胞腺癌（OCTC）PI组间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。9例OCTA AI表达和7例OCTCAI表达组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。⑤AI表达强度和PI表达强度呈正相关（rs=0．595，P〈0．01）。结论 甲状腺癌细胞的增殖与凋亡相关，甲状腺癌细胞的AI表达增高不表示有良好生物学行为。AI表达率和PI表达率可以作为鉴别诊断甲状腺良、恶性肿瘤的参考指标。     

蝎毒多肽提取物诱导前列腺癌DU-145细胞凋亡的实验研究

目的探讨蝎毒多肽提取物（PESV）诱导前列腺癌DU-145细胞凋亡的作用及机制。方法用PEsV（40μg／mL）处理DU-145细胞，采用Gimeea染色法观察凋亡细胞形态变化；采用免疫组化S-P法检测核增殖抗原Ki-67及凋亡相关基因bax和bcl-2的表达，并用病理图像分析软件进行半定量分析；TUNEL法检测凋亡细胞，并计算前列腺癌细胞增殖指数（proliferating index，PI）和凋亡指数（apoptosis index，AI）。结果PESV在体外对DU-145细胞有中度增殖抑制效应；在PESV作用下，DU-145细胞出现显著的细胞凋亡征象，凋亡指数明显增高，增殖指数降低．AI／PI明显增高（P〈0．05）。PESV处理DU-145细胞可明显提高凋亡相关基因bax表达水平，降低凋亡抑制蛋白Bcl-2表达水平，使Bel-2／Bax比值明显减小（P〈0．05）。结论PESV（40μg／mL）可以诱导细胞凋亡，而且至少是通过促进Bax、抑制Bel-2基因表达的机制诱导细胞凋亡。     

脑星形细胞肿瘤中Survivin、PTEN蛋白表达与细胞凋亡的相关性

目的探讨脑星形细胞肿瘤中细胞凋亡的变化及其相关基因Survivin、PTEN的表达和二者的相关性。方法应用TUNEL法检测细胞凋亡,免疫组织化学SP法检测Survivin、PTEN、Ki-67蛋白表达。结果在73例脑星形细胞肿瘤中Survivin的阳性表达率为64．4％,加权记分和凋亡指数（AI）之间呈明显负相关（r=-0．85,P〈0．01）,Survivin阳性组AI较Survivin阴性组降低（P=0．035）。PTEN的阳性表达率为72．6％,加权记分和AI之间呈正相关（r=0．303,P=0．026）,PTEN阳性组AI较PTEN阴性组增高（P=0．034）。AI与肿瘤的病理分级呈显著负相关（r=-0．423,P=0．001）,增生指数（PI）则随着肿瘤的级别增高而明显增高（r=0．729,P〈0．01）。结论脑星形细胞肿瘤中,细胞凋亡受多种因素的影响,AI的高低与Survivin、PTEN的表达均有关。Survivin高表达,AI值下降;PTEN高表达,AI值则增高。     

脑膜瘤细胞凋亡及凋亡相关基因bcl—2、p53蛋白的表达

目的 探讨脑膜瘤自发性细胞凋亡相关基因bcl-2、p53蛋白在脑膜瘤中的表达及其意义。方法 采用TUNEL法和免疫组化S－P法检测40例脑膜瘤中细胞凋亡及凋亡相关基因bcl-2,p53蛋白的表达。结果 恶性和非典型脑膜瘤中的细胞凋亡指数（AI）明显高于良性脑膜瘤（P＜0．05）,良性脑膜瘤不同亚型之间bcl-2,p53表达无显著性差异（P＞0．05）;p53蛋白表达随脑膜瘤恶性程度增高而增强,具有显著性差异（P＜0．05）,p53阳性与阴性的脑膜瘤中的细胞凋亡指数无显著性差异;bcl-2蛋白表达与脑膜瘤细胞凋亡呈负相关。结论 恶性及非典型脑膜瘤中自发性细胞凋亡增多;凋亡是脑膜瘤恶性或不典型的1个重要的生物学行为;p53基因在脑膜瘤的恶变过程中发生重要作用,与脑膜瘤的恶性进展密切相关;bcl-2基因在脑膜瘤中可抑制细胞凋亡。     

细胞凋亡和细胞增殖在胃癌形成中的作用

目的：探讨细胞凋亡和细胞增殖在胃癌发生发展中的作用。方法：用原位末端标记法和免疫组织化学染色,检测30例胃癌和20例胃粘膜上皮异型增生中的细胞凋亡和调控基因（Bcl-2,Fas)及增殖细胞核抗原（PCNA）的表达情况。结果：随正常胃粘膜→胃粘膜异型增生→胃癌的梯度,细胞凋亡指数（AI）逐渐降低,差异有显著性（P＜0．05）,Bcl-2的阳性表达率逐渐升高,Fas的阳性表达率逐渐降低,差异均有显著性（P＜0．01）,且二者有相关性（P＜0．05）,PCNA阳性表达率（即增殖指数,PI）逐渐升高（P＜0．01）,结论：胃粘膜异型增生中已存在细胞凋亡和细胞增殖的异常,使增殖／调亡比值加大,是胃粘膜异型增生向胃癌发展的重要机制之一。     

miRNA-21抑制剂对骨肉瘤MG63细胞增殖、凋亡和迁移的影响

目的：通过观察miR-21抑制剂对骨肉瘤MG63细胞增殖、凋亡及迁移能力带来的变化,探讨miR-21抑制剂在骨肉瘤细胞生物学行为中的作用。方法：将MG63细胞随机分为实验组、阴性对照组和正常细胞对照组。实验组转染miR-21抑制剂（hsa-miR-21 inhibitors）抑制其细胞内miR-21活性,阴性对照组转染抑制剂阴性对照核苷酸序列（microRNA inhibitor N．C）,正常细胞对照组不做转染。采用MTT比色实验测定三组细胞24h、48h、72h和96h的吸光度（OD）值,并绘制生长曲线。采用流式细胞仪检测细胞凋亡。Tran-swell法检测细胞迁移。结果：两对照组间细胞的增殖速度无明显差异（P＞0．05）,与对照组相比,实验组细胞增殖速度明显减慢（P＜0．05）。实验组细胞凋亡率明显增高（P＜0．05）;阴性对照组、空白对照组之间细胞凋亡无明显差异（P＞0．05）。实验组细胞迁移力受到明显抑制（P＜0．05）。与空白对照组相比,阴性对照组细胞迁移力无明显差异（P＞0．05）。结论：miR-21抑制剂可通过抑制骨肉瘤细胞系MG63细胞内miR-21的活性,显著抑制其增殖能力,促进细胞凋亡和降低迁移。miR-21可能成为骨肉瘤诊治的新靶点。     

肾细胞癌缺氧诱导因子表达与增殖和凋亡的关系

目的 研究缺氧诱导因子-2α（HIF-2α）、微血管密度（MVD）在肾细胞癌中的表达及其与细胞增殖、凋亡的关系,并探讨其可能机制。方法 应用免疫组织化学DAKO Envision System（二步法）和原位缺口末端标记法检测66例肾明透细胞癌中HIF-2α的表达、MVD与细胞增殖、凋亡。结果 66例肾透明细胞癌HIF-2α阳性率为68．2％,其表达随TNM分期的升高而增加（P〈0．01）。肾细胞癌中HIF-2α表达与MVD呈正相关（r=0．786,P〈0．01）;与肿瘤细胞凋亡指数（AI）呈负相关（r=-0．560,P〈0．01）;MVD与AI呈负相关（r=-0．618,P〈0．01）;HIF-2α与AI／增殖指数（PI）负相关（r=-0．352,P〈0．01）。结论 在肾细胞癌发展过程中,HIF-2α对肿瘤的能量代谢和新血管生成有促进作用,微血管的形成可抑制肿瘤细胞的凋亡,促进肿瘤的恶性进展。     

Survivin 在喉癌中的表达及与细胞增殖的相关性研究

目的：探讨凋亡抑制蛋白Survivin在喉癌中的表达及其与细胞增殖的相关性。方法应用免疫组化（ SP）法和流式细胞术对63例喉鳞状细胞癌组织及15例正常喉组织进行Survivin蛋白检测和DNA含量分析。结果 Survivin在正常喉组织中不表达,在喉癌标本中阳性表达为45/63（71．4％）,其阳性表达与分化程度及有无淋巴结转移有关（P＜0．05）,而与患者年龄、性别、临床分期无关（P＞0．05）。喉癌的DNA指数（DI）和增殖指数（PI）均比喉正常组织高（P＜0．05）,且PI值与Survivin阳性表达呈正相关（P＜0．05）。结论在喉癌中Survivin均有表达,其可能导致喉癌细胞过度增殖,影响喉癌的发生和发展,可能成为今后喉癌诊断和治疗的新靶点。     

NK/T细胞淋巴瘤细胞凋亡和增殖的特征及意义

目的 探讨NK/T 细胞淋巴瘤细胞凋亡和增殖的特征及意义。方法 应用TdT 介导的dUTP 缺口末端标记(TUNEL）技术和免疫组织化学链霉素抗生物素-过氧化酶连接法（SP 法）检测25 例NK/T 细胞淋巴瘤组织和10 例反应性增生淋巴组织中的细胞凋亡、增殖细胞核抗原（PCNA）表达水平。结果 25 例NK/T 细胞淋巴瘤组织中细胞凋亡指数（AI）平均为（1.92±0.86) %,细胞增殖指数（PI）平均为（41.48±5.10) % ; 10 例反应性增生淋巴组织AI 平均为（6.70±1.89) % , PI 平均为（20.10±2.77) % ;与反应性增生淋巴组织相比,NK/T 细胞淋巴瘤组织中AI 显著减少（t=10.80,P＜0.01) , PI 显著增大(t= 12.39,P＜0.01）。NK/T 细胞淋巴瘤组织中AI与PI 呈显著性正相关（r= 0.69,P＜0.01）。结论 NK/T 细胞淋巴瘤组织中细胞凋亡减少,细胞增殖活跃,细胞凋亡与增殖的失衡在NK/T 细胞淋巴瘤的发生发展中可能起重要作用。     

口腔鳞癌细胞增殖和细胞凋亡的相关性研究

目的：通过观察口腔鳞癌中细胞增殖和细胞凋亡之间的关系,探讨细胞凋亡在口腔鳞癌发生中的作用。方法：利用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记（TUNEL）技术及增殖细胞核抗原（PC—NA）免疫组织化学染色,对69例（维族36例、汉族33例）口腔鳞癌中的凋亡细胞和增殖细胞进行原位观察和比较。结果：口腔鳞癌不同组织学分级比较,高分化口腔鳞癌与中低分化口腔鳞癌之间增殖指数及凋亡指数均有显著性差异（P〈0．05）,不同部位的口腔鳞癌其增殖指数无显著差异,而舌癌组凋亡指数低于唇癌组和牙龈癌组（P〈0．05）,增殖指数与凋亡指数在口腔鳞癌中呈负相关关系（r=-0．663,P〈0．05）。结论：口腔鳞癌癌变过程不仅存在活跃的细胞增殖,而且存在细胞凋亡之异常,细胞增殖和细胞凋亡平衡失调在舌癌发病中可能起重要作用。     

脑星形细胞瘤 Fas和 FasL的表达及细胞凋亡与肿瘤恶性程度相互关系的初步探讨

目的：对脑星形细胞瘤Fas和FasL的表达水平及细胞凋亡与肿瘤恶性程度之间的关系进行初步探讨。方法：对41例脑星形细胞瘤标本采用免疫组化法（S－P法）检测Fas和FasL的表达率及表达强度,采用TUNEL法检测凋亡指数。结果：本组星形细胞瘤Fas和FasL的表达率分别为65．9％和78．0％;Fas和FasL的表达率与其病理分级有关（X^2分别为17．552和10．749,P均＜0．05）;Fas和FasL的表达强度也与其病理分级呈负相关（r分别为－0．660和－0．506,P均＜0．01）。本组星形细胞瘤的凋亡指数为0．51－1．57,凋亡指数与肿瘤病理分级有关（F＝18．828,P＜0．05）。结论：本组大部分星形细胞瘤均有Fas和FasL的表达,表达率和表达强度均随肿瘤恶性程度增高而明显下降,星形细胞瘤的凋亡指数随肿瘤恶性程度增高而明显增高。     

胰腺癌组织中细胞凋亡与bcl-2 蛋白表达关系的研究

目的：探讨胰腺癌组织中细胞凋亡与bcl-2基因表达的关系。方法：采用原位末端标记法（ISEL）和免疫组织化学技术检测40例胰腺癌组织及14例慢性胰腺炎组织细胞凋亡指数（AI），凋亡相关基因bcl-2蛋白的表达情况。结果：胰腺癌组织中的AI均值明显高于慢性胰腺炎组织（P＜0．01），随肿瘤进展，AI逐渐降低，在胰腺癌组织中bcl-2蛋白阳性表达率为30．0％（12／40），bcl-2蛋白高表达组与低表达组的AI均值相比较无显著性差异（P＞0．05），结论：细胞凋亡相对减少在胰腺 癌发生发展中起重要作用。bcl-2蛋白参与胰腺癌组织中细胞凋亡的调节。     

PTTG与C—MYC在非霍奇金淋巴瘤中的表达及意义

目的：探讨原癌基因PTTG与C-MYC在非霍奇金淋巴瘤（NHL）中的表达及临床病理意义。方法：应用免疫组织化学S—P法检测PTrG和C—MYC在NHL与对照组织中的表达，分析它们的表达与NHL的组织类型、恶性程度，临床分期及PTTG与C—MYC两者问的相关性。结果：与对照组织相比，NHL中PTTG显著高表达（P〈0．05），且T细胞淋巴瘤比B细胞淋巴瘤表达率高（P〈0．01），两组淋巴瘤中侵袭性强亚型中表达率均高于其对应的惰性亚型组（P均〈0．05）；临床分期晚期组表达率高于早期组（P〈0．05）。NHL中C—MYC表达率仅6．1％，且与PTrG之间无相关性（rs=-0．368，P〉0．05）。结论：PTTG高表达但不通过活化C—MYC来参与NHL的发生、发展。     

宫颈癌细胞凋亡和增殖与预后的探讨

目的 :探讨宫颈癌细胞凋亡、增殖与宫颈癌临床病理参数和预后的关系。方法 :利用TUNEL法和HE染色检测 5 0例宫颈癌组织 (鳞癌、腺癌各 2 5例 )的细胞凋亡指数 (AI)和核分裂指数 (MI)。结果 :腺癌的AI、MI明显高于鳞癌 (P <0 0 5 ) ,但AI MI指数比值两者差异有显著性。随着宫颈癌恶性级别增高、肿瘤体积的增大 ,AI、MI水平增高。AI与MI之间及AI MI的比值与宫颈癌 5年生存率之间有强的正相关性。结论 :宫颈癌细胞凋亡和增殖水平的增高与宫颈癌的恶化进展有关 ,同时检测AI、MI更有助于宫颈癌预后评价     

新辅助化疗对乳腺癌细胞凋亡和增殖的影响

背景与目的：在实验研究中,已证实多种化疗药物都可引起乳腺癌细胞的凋亡。但在人体内进行有关化疗药物引起乳腺癌细胞凋亡的研究,还少有报道。本文研究新辅助化疗能否引起乳腺癌肿瘤细胞的凋亡以及对乳腺癌肿瘤细胞增殖的影响。方法：应用末端转移酶介导的dUTP切口末端标记法（TdT-mediated dUTP nick end labelling,TUNEL)及免疫组化的标记链菌亲和素生物素法（Labelled Streptavidin Biotin,LSAB),分别检测100例乳腺癌组织中肿瘤细胞的凋亡指数（Apoptotic index,AI)和乳腺癌肿瘤组织的增殖细胞核抗原（Proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表达。结果：新辅助化疗组肿瘤细胞凋亡指数（AI）均数为7．47％,与对照组肿瘤细胞凋亡指数（AI）均数4．83％相比明显增高（P＜0．01）。新辅助化疗组肿瘤细胞增殖细胞核抗原（proliferation cell nuclear antigen,PCNA)阳性表达率均数为33．71％,与对照组PCNA阳性率均数51．52％相比明显降低（P＜0．01）。在新辅助化疗组及对照组两组病例中,肿瘤细胞凋亡指数（AI）与增殖细胞核抗原（PCNA）的阳性表达均呈负相关。结论：在人体乳腺癌组织中,新辅助化疗能诱导肿瘤细胞发生凋亡,并能抑制其增殖。     

神经母细胞瘤增殖凋亡的研究

目的　本实验通过研究神经母细胞瘤的增殖、凋亡的失衡 ,结合神经母细胞瘤的分化 ,以探讨增殖、凋亡的改变与神经母细胞瘤预后的关系。方法　分别取正常对照组、良性肿瘤组、恶性肿瘤组 3组组织制作石蜡切片 ,运用免疫组织化学法检测增殖细胞 ,计算增殖细胞占细胞百分比 ,求得增殖指数 (PI)。运用原位DNA末端标记法 ,检测凋亡细胞 ,计算凋亡细胞占细胞百分比 ,求得凋亡指数 (AI)。结合神经母细胞瘤的组织学分类 ,了解增殖指数、凋亡指数与神经母细胞瘤预后情况。结果　预后好的组织与预后差的组织 2组的PI相比P <0 .0 1。预后好的组织与预后差的组织两组的AI相比P <0 .0 1。Ⅲ期或Ⅳ期死亡与健在分别PI相比较P <0 0 1。Ⅲ期或Ⅳ期死亡与健在分别AI相比较P <0 0 1。结论　PCNA指数越高 ,神经母细胞瘤预后越差。凋亡细胞和凋亡小体越多 ,凋亡指数越高 ,神经母细胞瘤预后越好。联合检测神经母细胞瘤的增殖指数、凋亡指数结合凋亡小体可提高对神经母细胞瘤诊断及预后判断的准确性 ,并对治疗指导有重要价值     

胃粘膜肠化生细胞增值状态分型的研究

应用免疫组织化学方法检测230例胃粘膜病变中增殖细胞核抗原（PCNA）的表达情况，计算细胞增殖指数（PI）、探讨胄粘膜肠化生的增殖状态分型以及肠化生细胞增殖分型与肿瘤相关基因蛋白产物的关系。结果显示正常或慢性浅表性胃炎、伴肠化生慢性萎缩性胃炎、伴异型增生萎缩性胃炎以及胃腺癌的PI逐渐增高，差异非常明显（P＜0．0）。根据胃粘膜肠化生细胞的PI分布，进行畅化生细胞的增殖状态分型：高增殖状态型为PI≥40，中增殖状态型为20≤P＜40，低增殖状态型为PI＜20。此分型与各类胃粘膜病变显示较好的相关性，低增殖状态型为正常或基本正常胃粘膜，中增殖状态型为胃粘膜良性病变，高增殖状态型为胃粘膜癌前病变。高增殖状态型肠化生中肿瘤相关基因蛋白产物rasp21、EGFR、h-met的表达以及叵型肠化生的检出率显著高于中、低增殖状态型肠化生（P＜0．05）。提示高增殖状态型肠化生细胞基因表达的异常率增高，且细胞分化不良，更具胃癌前病变的特征。     

胃癌病变演化中细胞凋亡与增殖及其与HSP70表达关系的临床生物学意义

目的研究胃癌和癌前病变中细胞凋亡与增殖,及其与热休克蛋白70(HSP70)表达的关系及临床生物学意义.方法应用免疫组织化学SP法检测158例胃粘膜病变石蜡标本中HSP70和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达;并用DNA缺口末端标记法(TUNEL法)对其中56例标本进行细胞凋亡的原位观察.结果HSP70在胃癌中过表达,与不典型增生和肠上皮化生组相比有显著性差异(P＜0.05);细胞增殖指数PI在HSP70阳性表达组比阴性表达组显著增高(P＜0.01),但HSP70表达与细胞凋亡指数AI不相关;在慢性浅表性胃炎中AI明显较不典型增生组低(P＜0.01),随着病变的进展,胃癌中的AI逐渐降低,而PI则随病变的恶性进展不断升高.结论细胞凋亡和细胞增殖平衡失调在胃癌发病中起重要作用;HSP70的过度表达是胃癌发生过程中的早期事件,与细胞增殖相关密切,但与胃癌分化、淋巴结转移和浸润深度无关.